肺癌患者P53基因突变的检测

应用多聚酶链反应单链构象多态性（ＰＣＲＳＳＣＰ）研究技术，从分子生物学角度探讨Ｐ５３肿瘤抑制基因在肺癌中的突变情况。结果：①３６例肺癌中有１７例出现Ｐ５３基因突变，占４７％；其中鳞癌突变发生率为２９％（４／１４），腺癌为５０％（５／１０），小细胞肺癌为７３％（８／１１）；１例肺泡癌未发现突变。②突变集中在Ｐ５３基因的第５、６和７个外显子，分别有６、３和３例肺癌在相应的外显子部位发生突变。③突变类型均为插入型突变，分别插入３～６个碱基对。结论：细胞分化程度低的肺癌Ｐ５３基因突变发生率高，预后差     

P53基因突变对浆膜浸润胃癌的预后影响

为了评价Ｐ５３基因突变与进展期胃癌预后的关系。我们选择１６１例浆膜浸润胃癌病理标本。用免疫组化法（ＩｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａｌｓｔａｉｎｉｎｇＩＨＣ）检测Ｐ５３蛋白。９５例（５９％）显示Ｐ５３基因突变（＞１０％细胞核染色阳性），Ｐ５３基因突变与已知的预后因子之间无明显相关性。Ｐ５３染色阴性病人５年生存率为６８．１％，这一数值高于Ｐ５３阳性病人（４３．３％，Ｐ＝０．０２４）此外，Ｐ５３基因突变对各亚群组的预后也有影响，在肿瘤直径大于５ｃｍ组（Ｐ＝０．０３）、在低分化型肿瘤组（Ｐ＝０，００２）、以及在淋巴结转移组（Ｐ＝０．０３５）。多因素分析时，Ｐ５３基因突变仍与胃癌病人的不良预后有显著相关性（Ｐ＝０．０１６）。这些结果提示：Ｐ５３基因突变可能浆膜浸润胃癌病人预后的一个重要的非依赖性因子。     

肺癌患者P53基因突变的检测

应用多聚酶链反应单链构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）研究技术，从分子生物学角度探讨Ｐ５３肿瘤抑制基因在肺癌中的突变情况。结果：①３６例肺癌中有１７例出现Ｐ５３基因突变，占４７％；其中鳞癌突变发生率为２９％（４／１４），腺癌为５０％（５／１０），小细胞肺癌为７３％（８／１１）；１例肺泡癌未发现突变。②突变集中在Ｐ５３基因的５第５、６和７个外显子，分别有６、３和３例肺癌在相应的外显子部位发生突变。③突变     

应用PCR—SSCP技术检测妊娠滋养细胞肿瘤p53基因突变

应用聚合酶链式反应－单链构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）溴乙锭染色技术检测２０例葡萄胎及４例绒毛膜癌组织石腊标本Ｐ５３基因经５和８外显子基因突变。结果显示：正常绒毛０／０，葡萄胎６－２０（３０％），绒毛膜癌３／４发生Ｐ５３基因突变。提示Ｐ５３基因突变是滋养细胞肿瘤形成和演进过程听一个重要事件，葡萄胎应属于生滋养细胞肿瘤 。     

滋养细胞肿瘤P53基因蛋白的检测

本文通过免疫组织化学技术对３８例滋养细胞肿瘤组织Ｐ５３基因蛋白进行了检测，试图探讨Ｐ５３基因与滋养细胞肿瘤的关系。结果３８例滋养细胞肿瘤中（葡萄胎１０例、恶性葡萄胎１０例、绒癌１８例），恶葡阳性表达２０％（２／１０），绒癌阳性表达２２．２％（４／１８），有３例为高表达，１０例良性葡萄胎均为阴性。结果提示：Ｐ５３基因与滋养细胞肿瘤的生物学行为有密切关系。随着临床的进展，高表达增加。Ｐ５３的检测可望成     

卵巢恶性肿瘤P53基因表达产物及相关生物学行为的初步分析

目的：探讨Ｐ５３基因突变表达产物与卵巢肿瘤临床生物学行为之间的关系。方法：采用单克隆抗体免疫组化染色方法对５０例卵巢恶性肿瘤，１０例良性肿瘤的石蜡切片标本进行Ｐ５３基因突变蛋白表达检测。结果：卵巢恶性肿瘤Ｐ５３阳性表达率２４％（１２／５０），卵巢良性肿瘤均为阴性卵巢上皮癌阳性结果为２９％（８／２８），生殖细胞瘤１０％（１／１０），间质瘤２５％（２／８），转移瘤２５％（１／４）；不同临床分期阳性表达     

应用PCR-SSCP技术检测妊娠滋养细胞肿瘤p53基因突变

应用聚合酶链式反应－单链构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）溴乙锭染色技术检测２０例葡萄胎及４例绒毛膜癌组织石腊标本ｐ５３基因第５和８外显子基因突变。结果显示：正常绒毛０／９，葡萄胎６／２０（３０％），绒毛膜癌３／４发生ｐ５３基因突变。提示ｐ５３基因突变是滋养细胞肿瘤形成和演进过程中的一个重要事件，葡萄胎应属于良性滋养细胞肿瘤。     

喉癌中P53基因突变与突变型P53基因蛋白表达的相互关系及意义

目的：探讨喉癌Ｐ５３基因突变与突变性Ｐ５３基因蛋白表达之间的相互关系及意义。方法：对４０例喉癌新鲜手术标本采用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ检测Ｐ５３基因突变,免疫组化方法（ＬＳＡＢ）检测突变型Ｐ５３基因蛋白表达,并比较其相互间的关系。结果：４０例喉癌中有２６例基因突变阳性（６５％）,Ｐ５３基因蛋白表达阳性者２３例（５７．５％）;Ｐ５３基因突变与其突变型蛋白表达比较,两者皆阳性为４５％,两者均阴性为２２．５％,     

P21、P185、P53蛋白表达及P53基因突变与膀胱癌移行细胞生物学行为关系的研究

目的：探讨癌基因及抑癌基因改变与膀胱癌生物学行为产关系。方法：采用免疫组织化学方法及分子生物学技术,检测了８２例膀胱移行细胞癌Ｐ２１、Ｐ１８５、Ｐ５３蛋白表达及３８例Ｐ５３基因突变。结果：Ｐ２１、Ｐ１８５、Ｐ５３蛋白表达阳性率分别为６２．２％（５１例）、５８．５％（４８例）、３１．７％（２６例）。１２例（３１．６％）有Ｐ５３抑癌基因突变,其中全部有第２８０位密码子Ｇ－Ｃ突变;３例合并有２４８密码子     

贲门腺癌组织肿瘤抑制基因P53突变分析

采用ＰＣＲＤＮＡ序列分析方法，对来自河南林州市３６例贲门癌组织进行肿瘤抑制基因Ｐ５３第４到９外显子突变分析。结果：３６例贲门癌组织中３例发生Ｐ５３基因突变（８％，３／３６）；突变分别发生在第５，６和８外显子上。对３例已知有Ｐ５３基因突变的癌组织大体标本，分别在４个不同部位（１２点、６点、９点和３点钟处）进行取材，进一步进行Ｐ５３突变结果分析，发现３例中第１例４个位点均发生Ｐ５３基因突变，且突变部位相同，第２例只有３个位点出现一致性改变，第３例仅在一个位点发现Ｐ５３基因突变，而其他３个部位未检测出Ｐ５３基因突变。提示：尽管这一地区食管癌和贲门癌发病率均较高，但两者发病的分子学基础及机理可能存在不同的途径。同一肿瘤不同部位Ｐ５３基因突变情况不一致，贲门癌变可能还有其它癌基因或肿瘤抑制基因参与。     

结肠癌组织中P53基因及其产物变化的研究

目的 探索P53基因突变在结肠癌发生过程中的作用。方法 应用多聚酶链反应－单纯构象多态分析及免疫组化ABC法研究结肠癌组织中的P53基因及其产物蛋白质的变化。结果 结肠癌中有45％发生P53基因突变,52．50％,P53蛋白阳性;所获数据经x^2检验。结论 对P53基因突变和P53蛋白的检测可作为判断结肠癌生物学行为的重要标志。     

天花粉蛋白诱导胃癌细胞MKN—45凋亡中P53，Bcl—2,c—myc蛋白表达变化

目的：选用对天花粉蛋白敏感的胃癌细胞株MKN－45,研究天花粉蛋白抗肿瘤机制。方法：免疫组化法测定凋亡相关基因（p93,Bcl-2,c-myc)的表达变化。结果;胃癌细胞MKN－45经天花粉蛋白（1ug/ml,24,48h)处理后,凋亡相关基因P53,Bcl-2,c-myc表达未出现显著性改变,经5ug/ml的天花粉蛋白处理24h后,得到相同结论。但当MKN－45细胞经5ug/ml的天花粉蛋白处理48h后,发现野生型P53蛋白表达增加,而Bcl-2,c-myc蛋白表达未出现显著性改变。结论：天花粉蛋白可诱导MKN－45细胞凋 ,可能与上调野生型P53基因的表达有关。     

P53蛋白过表达和P53基因突变与胶质母细胞瘤预后关系的Meta分析

目的胶质母细胞瘤(glioblastoma,GBM)是常见的颅内恶性肿瘤,预后不良。寻找与胶质母细胞瘤预后的相关因素对提高患者生存率有重大意义。P53异常是与肿瘤发生发展有关的重要因素。文中探讨P53蛋白过表达和P53基因突变对GBM预后的影响。方法应用Meta分析对有关P53蛋白过表达和P53基因突变与GBM预后相关的文献进行综合分析。结果纳入的文献中研究P53蛋白过表达与GBM预后关系的文献6篇,累计病例539例,阳性率53.4%;P53基因突变与GBM预后关系的文献7篇,累计病例514例,阳性(与预后不良有关)率25.3%。P53过表达和P53突变与GBM预后的合并相对危险度(relative hazard,RH)分别为0.95和0.61,95%可信区间分别为0.85~1.08和0.51~0.73,P值分别为0.829和0.000。结论根据所纳入的文献进行Meta分析结果提示P53蛋白过表达与GBM预后无关,而P53基因突变是GBM预后良好的生物学标志物。     

上皮性卵巢肿瘤中抑癌基因P53的表达及第8外显子突变的检测

目的：探索抑癌基因Ｐ５３基因的表达水平与卵巢肿瘤的临床和生物不行为之间是否存在一定的关系。方法：应用免疫组化ＳＰ法检测Ｐ５３在７１例乳巢上皮性肿瘤中的表达情况,并应用显微切割获得ＤＮＡ和聚全酶链式反应（ＰＣＲ）－单链构象多态性分析（ＳＳＣＰ）检测Ｐ５３第８外显子（ｅｘｏｎ８）突变的情况。结果：卵巢癌中Ｐ５３蛋白阳性率为５１．６％,正常及交界性肿瘤均为阴性,差异有极显著性意义（Ｐ〈０．００１）。Ｐ５     

生精细胞凋亡与P53

精子发生始于精原细胞的克隆扩增,经细胞的分化、有丝分裂、减数分裂、变态,最终形成精子.精子发生受到许多因素的调节,其中最主要受激素控制,促性腺激素释放激素(gonadotropin releasing hormone,GnRH)、卵泡刺激素(follicle stimulating hormone,FSH)、黄体生成素(luteinising hormone,LH)、雄激素等是生精细胞的存活因子[1].细胞内分子对精子发生的调节也不容忽视,如cAMP反应元素调节子(cyclin AMP-responsive element modulator,CREM)在减数分裂后精子细胞中高表达,是一种转录因子,CREM基因突变致精子缺失可引起不育;c-myc基因可促进生精细胞的凋亡.生精细胞的存亡还与周围的支持细胞以及间质细胞所形成的微环境有关[2].各种生长因子对精子发生也有直接或间接的调节作用,如表皮生长因子(epidermalgrowth factor,EGF)、转化生长因子(transforming growth factor,TGF),胰岛素样生长因子( insulin-like growth factor,IGF)等.在精子发生过程中,各级生精细胞都会发生凋亡.在生理条件下,凋亡是机体清除过量或异常生精细胞的一种方式.     

p53蛋白在鼻咽癌中的表达

Ｐ５３基因突变是人类恶性肿瘤中最常发生的基因改变。Ｐ５３基因产物是一种核磷酸蛋白（Ｐ５３蛋白），该蛋白在肿瘤细胞中常有高表达。我们应用免疫组织化学ＳＰ法和Ｐ５３单克隆抗体（ＮＣＬ－ｐ５３－Ｄ０７）对有３年以上跟踪资料、用甲醛固定、石蜡包埋的５０例鼻咽癌（ＮＰＣ）组织切片进行Ｐ５３蛋白检测。结果显示：（１）Ｐ５３蛋白在ＮＰＣ细胞中为核染色阳性，正常上皮细胞的细胞核不着色；（２）４２例（８４％）阳性，其中强阳性１例，阳性８例，弱阳性３３例；阴性８例（１６％）；（３）Ｐ５３蛋白表达与否与ＮＰＣ的组织学类型、生物学行为无明显关系。     

人胰腺腺癌中抗癌基因P53的突变

用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ分析及ＤＮＡ直接测序法检测了１６例胰腺腺癌的Ｐ５３基因５－８外显子，结果发现３７．５％有Ｐ５３基因点突变，突变分布于外显子５－８，无特殊突变倾向点。６例有Ｐ５３突变者，５例为１个等位基因突变，另１个等位基因丢失；１例同时含有突变型和隆型等位基因。     

生精细胞凋亡与P53

精子发生始于精原细胞的克隆扩增,经细胞的分化、有丝分裂、减数分裂、变态,最终形成精子。精子发生受到许多因素的调节,其中最主要受激素控制,促性腺激素释放激素(gonadotropin releasing hor-mone,GnRH)、卵泡刺激素(follicle stimulating hor-mone,FSH)、黄体生成素(luteinising hormone,LH)、雄激素等是生精细胞的存活因子。细胞内分子对精子发生的调节也不容忽视,如cAMP反应元素调节子(cyclin AMP-responsive element modulator,CREM)     

P53 Gene Mutation and Expression of MDM2, P53, P16 Protein and their Relationship in Human Glioma

To investigate the effect of P53 protein accumulation and p53 gene mutation in the pathogenesis of glioma and to study the role of MDM2, P53 and P16 protein in glioma formation and progression and their relationship with each other, LSAB immunohistochemical staining method and non-isotopic PCR-SSCP techniques were used to detect the expression of MDM2, P53 and P16 protein and p53 gene mutation in 48 cases of gliomas. The results showed that the positive expression rate of MDM2, P53 and the negative rate of P16 was 22.9 %, 41.7 % and 60.4 %, respectively. The latter two in high grade （grade Ⅲ , Ⅳ） gliomas had a significantly higher rate than in the low grade （grade Ⅱ ） gliomas. Moreover, the co-expression of MDM2 and P53 protein was confirmed in only 1 of 48 cases. No significant difference was found in the rate of the expression of MDM2 between high grade and low grade gliomas （P〉0.1） . PCR-SSCP results showed that mutation of 5 --8 exons of p53 gene was detected in 17 out of 48 cases （35.42 %） . Mutation was detected in 16 of 20 cases of positive p53 expression, and another one was detected in 28 cases of negative expression cases. The correlation between p53 mutation and p53 immunopositivity was observed in 89.6 % of the cases. P53 gene mutation and the level of MDM2, P53 and PI6 protein were not related to age, gender of the patients, tumor location and size. It is concluded that the mutation of p53 and deletion of p16 might play important roles in the tumorigenesis of gliomas and it was significantly associated with the grade of tumor differentiation. P53 protein accumulation can indirectly reflect p53 mutation. MDM2 amplification and overexpression might be an early event in the growth of human gliomas.     

家兔动脉粥样硬化病变内p53基因的实验研究

对家兔行高脂、高胆固醇膳食和内皮细胞剥脱，对斑块组织泡沫细胞进行了ｐ５３免疫组化和分子杂交研究。结果显示，泡沫细胞有ｐ５３基因的突变和低表达。这些变化可能与动脉粥样硬化的细胞异常增殖有关。