SELDI-TOF-MS在结直肠癌血清蛋白质组学中的应用

蛋白质组学为结直肠癌的许多研究领域开拓了新的视野,表面增强激光解析电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术推动了其在结直肠癌血清蛋白质组学研究中的应用.在针对结直肠癌早期诊断、判断分期、监测治疗效果等方面进行了积极的探索.随着这一技术的成熟,它对结直肠癌的诊断、治疗具有广阔的应用前景.     

蛋白质组学在结直肠癌生物标志物研究中的应用

蛋白质组学是以蛋白质组为研究对象的一门崭新的生命科学,其技术主要包括样品的制备技术、双向凝胶电泳、差异凝胶电泳、多维蛋白质鉴定技术和表面增强激光解析电离飞行时间质谱等。结直肠癌是人类最常见的恶性肿瘤之一,近几年蛋白质组学在结直肠癌生物标志物的研究中取得了很大进展。本文对此作一综述。     

血清蛋白质组学在乳腺癌研究中的应用进展

随着肿瘤生物学的研究进展,乳腺癌的治疗和预后判断研究进入了一个新的阶段。血清蛋白质组学为肿瘤的研究提供了新的技术平台和研究思路,应用蛋白质组学技术可以发现不同细胞间蛋白质的变化,寻找肿瘤相关蛋白,进而分析肿瘤发生、发展的可能机制,还可以通过特异性的差异蛋白作为疾病诊断治疗     

结直肠癌化疗敏感性相关蛋白的蛋白质组学初步研究

目的:本研究应用蛋白质组学技术建立化疗敏感性不同的结直肠癌组织总蛋白双向凝胶电泳(two-dimensional gel electrophoresis,2-DE)图谱,并鉴定部分差异表达蛋白,以发现与结直肠癌化疗敏感性有关的蛋白.方法:收集临床诊断为晚期结直肠癌的病例,肠镜活检获取新鲜结直肠癌标本后液氮保存备用,根据肿瘤药物敏感实验分为化疗高敏感组和化疗低敏感组.提取组织总蛋白,采用双向凝胶电泳技术得到各组凝胶图谱;采用PD-quest 7.3软件进行图像的合成、对比和差异分析,识别化疗高敏感组和化疗低敏感组之间差异表达的蛋白斑点;选取差异蛋白质点,胶内酶解后行肽指纹图分析及网上数据库检索,鉴定差异蛋白质;应用Western印迹法检测部分差异蛋白的表达情况.结果: 建立了化疗高敏感组和化疗低敏感组的双向凝胶电泳图谱,多数蛋白质点集中于pH 4～8、相对分子质量为(20～100)×10~3.高敏感组和低敏感组的电泳图谱中平均蛋白质点数分别为(842±23)个和(793±19)个,2组平均匹配率为90.7%,2组间差异表达蛋白质点数为(79.00±13.56)个;选择30个差异蛋白质点进行质谱分析,经数据库查询鉴定出9个差异表达蛋白.结论:在化疗敏感性不同的结直肠癌中存在蛋白质表达的差异,这些差异表达蛋白可能与化疗敏感性有关,并可能用于化疗敏感性的预测.     

结直肠癌患者手术前后血清唾液酸浓度的变化

为探讨结直肠癌患者手术前后血清唾液酸（Ｓｉａｌｉｃａｃｉｄ，ＳＡ）浓度的变化及临床意义，作者采用单一试剂比色法检测了４５例正常人和５３例结直肠癌患者的血清ＳＡ浓度。结果显示，结直肠癌组血清ＳＡ浓度显著高于正常对照组（Ｐ＜０．０１），且Ｄｕｋｅｓ′Ｃ组显著高于Ｄｕｋｅｓ′Ｂ组（Ｐ＜０．０５），Ｄｕｋｅｓ′Ｂ组显著高于Ｄｕｋｅｓ′Ａ组（Ｐ＜０．０５），根治性切除术后各组的血清ＳＡ均显著下降（Ｐ＜０．０５）。表明血清ＳＡ浓度可作为结直肠癌辅助诊断和评估疗效的指标之一。     

血清蛋白质组学在肿瘤研究中的现状及展望

随着人类基因组计划（Human genomic project，HGP）的完成，生命科学的研究进入了一个崭新的后基因组时代。分子医学的研究重点已从结构基因组学转向功能基因组学，而蛋白质组学（proteomics）正是功能基因组学研究的重要支柱之一，在20世纪90年代逐渐兴起。使用蛋白质组学技术，鉴定血清中与肿瘤相关蛋白质表达情况，对揭示肿瘤发生发展机制、肿瘤早期诊断及分型、抗肿瘤药靶寻找、     

腹腔镜在结直肠癌手术中的应用

随着腹腔镜技术的日臻成熟,医生经验的不断积累,以及各种新器械的应用,腹腔镜结直肠癌手术进入一个新的发展阶段。该文分别对腹腔镜结直肠癌手术的术式、优点、学习曲线、适应证和禁忌证进行论述,并对手术安全性、肿瘤根治性、长期疗效以及注意事项进行了评价,认为只要正确掌握适应证,严格遵循肿瘤根治原则,腹腔镜结直肠癌手术是微创、安全、有效的。     

血清miR-194在结直肠癌诊断和预后判断中的价值研究

摘 要：［目的］ 探讨血清miR-194在结直肠癌诊断和预后判断中的价值。［方法］ 采用实时荧光定量PCR法检测60例结直肠癌患者和60例健康志愿者血清miR-194的相对表达水平,并分析miR-194表达与结直肠癌患者预后的关系。［结果］ 结直肠癌患者的血清miR-194水平显著低于健康对照者（P<0.05）。按照血清miR-194相对定量值(临界值为1.015)进行结直肠癌诊断时的敏感性为70.0％,特异性为78.3％,阳性预测值为76.3％,阴性预测值为72.3％。血清miR-194可产生最大受试者工作特征曲线的曲线下面积(AUC)为0.86（95%CI：0.79～0.92）。N分期、cTNM分期、血清miR-194表达水平是结直肠癌患者预后的独立危险因素（P<0.05）。［结论］ 血清miR-194可能是一种新的非侵入性指标用于结直肠癌患者的诊断及预后判断。     

血清CD44v6表达在结直肠癌中的临床应用价值

目的 探讨血清可溶性细胞表面黏附分子sCD44v6在结、直肠癌中的临床应用价值.方法 96例不同Duke分期结、直肠癌患者和24例健康者,分别采用酶联免疫吸附法(ELISA)定量检测其血清sCD44v浓度,化学发光免疫法检测血清CEA浓度;并结合临床资料进行分析.结果 结、直肠癌患者sCD44v6浓度为275.3±115.8 ng/ml,明显高于健康对照组(61.3±7.8 ng/ml)(P＜0.05),若以健康对照组的(-x)+2s(76.9 ng/ml)作为正常上限值,其阳性率为73.96%;sCD44v6水平随癌肿Duke分期的升级和肿瘤细胞的转移而呈现递增趋势,各组之间比较差异有统计学意义(P＜0.05).与CEA相比,sCD44v6水平在反映癌组织浸润和转移程度上更直接、敏感.结论 结、直肠癌患者sCD44v6水平和阳性率均显著增高,并与肿瘤的分期和扩散转移程度密切相关;术前sCD44v6水平检测可作为结、直肠癌患者病程和转移预测的一个重要指标.     

应用SELDI蛋白质芯片技术筛选肺腺癌血清标志物的研究

目的 通过SELDI蛋白质芯片技术筛选肺腺癌特异血清标志物。方法 采用表面增强激光解析离子化一飞行时间质谱技术（SELDI-TOF-MS），选用弱阳离子加疏水膜芯片对15例肺腺癌患者，30例健康人血清进行检测，筛选在肺腺癌患者血清中差异表达的蛋白质。结果 在质荷比0—20000范围内，共检测到180个蛋白峰，建立了由8个差异表达蛋白质组成的肺腺癌诊断模型。这8个蛋白质中有6个在肺腺癌中表达上调，2个表达下调。软件分析结果显示在预测组中诊断肺腺癌的敏感性为93．33％（14／15）、特异性为100．00％（30／30）；对检测组进行双盲检测，敏感性为73．33％（11／15）、特异性为86．67％（26／30）。结论 由8个差异表达蛋白及其特定组合构成的诊断模型可以区分肺腺癌和健康人。SELDI蛋白质芯片技术能直接筛选出肺腺癌患者血清中相对特异的潜在标志物，具有较好的临床应用价值。     

血清中miR-29a和miR-92a在结直肠癌诊断和预后判断中的价值

目的探讨血清微小RNA（miR-29a和miR-92a）在结直肠癌（CRC）诊断和预后判断中的价值。方法选取无转移的结直肠癌患者50例和存在肝转移的患者48例,同时募集50名健康志愿者为对照组,按类似的年龄和性别相匹配的队列组合。应用实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）法检测微小RNA（miR-29a和miR-92a）水平,判断该血清微小RNA在结直肠癌早期诊断和预后判断中的价值。结果结直肠癌患者血清中miR-29a和miR-92a水平均显著高于健康对照者（P〈0.01）;血清miR-29a和miR-92a分别进行结直肠癌诊断时的灵敏度为71.4%和75.3%,特异度为84.0%和88.3%;结直肠癌肝转移患者血清中miR-29a和miR-92a水平均显著高于未转移的CRC患者（P〈0.05）;miR-29a和miR-92a分别鉴别转移性与非转移性CRC患者的敏感性为79.4%和78.6%,特异性为85.3%和86.6%。结论 miR-29a和miR-92a可能是新的非侵入性指标用于结直肠癌患者的早期诊断,血清中miR-29a和miR-92a水平升高与结直肠癌患者预后有关,miR-29a和miR-92a有望成为结直肠癌筛查和早期诊断和预后判断的指标。     

血清微小RNA(miR-129-3p、miR-767-3p和miR-877)在结直肠癌诊断中的价值

目的:探讨血清微小RNA (microRNA,mi RNA)在结直肠癌诊断中的价值.方法:通过miRNA表达谱芯片检测7例结直肠癌患者血清和10例健康志愿者血清中差异表达的miRNA.应用实时荧光定量PCR法在40例结直肠癌患者血清和18例健康志愿者血清中验证芯片结果,并分析血清特异性miRNA在结直肠癌诊断中的价值.结果:筛选获得10个在结直肠癌中特异性表达的血清miRNA,实时荧光定量PCR验证后获得一组结直肠癌特异性血清miRNA(miR-129-3p、miR-767-3p及miR-877*)生物标志物,这组生物标志物组合检测结直肠癌的灵敏度为77.78％、特异度为100％,并可产生最大受试者工作特征曲线(receiver operator characteristic curve,ROC)的曲线下面积(area under the curve,AUC)为0.914.结论:miR-129-3p、miR-767-3p和miR-877*生物标志物组合有望成为结直肠癌筛查和早期诊断的指标.     

结直肠癌根治术后胃瘫的临床分析

目的探讨结直肠癌术后胃瘫综合征(PGS)发生的病因、治疗方法和疗效。方法结直肠癌根治性切除术患者193例,术后出现PGS 9例,分析其临床表现、发生时间、恢复时间和诱发因素。结果年龄≥65岁、术后低蛋白血症和术后使用镇痛泵是PGS的高危因素。经非手术治疗,PGS在术后6周内一般可以恢复。结论对老年患者需慎用术后镇痛。胃瘫治疗需综合处理,胃镜刺激有助于PGS的治疗,应尽量避免再次手术。     

大肠癌新生淋巴管研究进展

大量的研究发现恶性肿瘤和瘤周组织内存在新生的淋巴管,新生的淋巴管密度和淋巴管标记物的表达强度均与淋巴结转移密切相关,这为揭示恶性肿瘤淋巴道转移机制和开发淋巴管靶向治疗提供了重要的研究途径。目前,肿瘤新生淋巴管的研究尚处于初始阶段,本文对其在大肠癌淋巴转移研究中的进展和存在的问题作一综述。     

血清层粘连蛋白在大肠癌中的检测及临床应用

目的探讨检测血清层粘连蛋白(LN)含量对大肠癌的诊断价值及术前术后含量的变化,了解其对大肠癌预后的判断、监测肿瘤有无复发和转移的意义,并通过与血清癌胚抗原(CEA)、糖类抗原242(CA242)比较,评价血清LN对大肠癌的临床意义.方法应用放射免疫技术测定大肠癌患者血清LN、CEA、CA242含量.结果血清LN检测对44例大肠癌诊断的特异性为84.1%,敏感性为92.7%,各Dukes分期大肠癌患者血清LN含量均高于良性病变组和对照组(P<0.05),且良性病变组与对照组之间血清LN含量差异无显著性(P>0.05);Dukes C、D期组血清LN含量高于Dukes A、B期组(P<0.05);血清LN含量术后较术前降低(P<0.05).大肠癌患者术前血清LN阳性率高于CEA和CA242(P<0.05).结论大肠癌患者血清LN含量的检测对诊断、判断预后、指导临床治疗和与良性病变鉴别有一定参考价值.     

大肠癌患者血清中TGF-β1表达的意义

 目的研究大肠癌患者血清中转化生长因子β１（ＴＧＦ β１）表达意义及其与癌胚抗原（ＣＥＡ）、肿瘤分期的关系。方法以酶联免疫法检测血清中ＴＧＦ β１的含量。结果患者组血清ＴＧＦ β１（４０．３６±１７．６０ｎｇ／ｍｌ）高于对照组（１９．２±７．９８ｎｇ／ｍｌ）（Ｐ＜０．０１），ＴＧＦ β１的含量随着肿瘤分期增加而升高（Ｐ＜０．０５）且与血清中ＣＥＡ含量有关（ｒ＝０．３９２，Ｐ＜０．０１）。结论大肠癌患者血清ＴＧＦ β１含量与肿瘤的发生、发展有关。     

大肠癌对铂类药物的耐药机制

铂类药物是大肠癌化疗常用的药物之一,但仍存在耐药问题而影响疗效,因此研究肿瘤细胞的铂类耐药机制是大肠癌治疗研究的热点,包括药物蓄积降低、DNA修复机制、形态学变化等.