芩丹胶囊对血管外膜成纤维细胞的作用机制

目的  探讨芩丹胶囊（QC）含药血清对动脉血管外膜成纤维细胞（AF）的作用机制。方法  采用组织贴块法体外原代培养大鼠胸主动脉成纤维细胞,MTT法观察大［750mg/（kg·d）］、小［150mg/（kg·d）］剂量的QC含药血清对转化生长因子β1 (TGF-β1)诱导的大鼠胸主动脉成纤维细胞的增殖的影响;实时定量PCR及western blot分别检测α-平滑肌肌动蛋白（α-SM actin）和Smad3的基因及蛋白表达情况。结果  大、小剂量QC含药血清呈剂量依赖性抑制TGF-β1诱导的AF的增殖（P＜0.05）,且用药组α-SM actin和Smad3基因及蛋白的表达较单纯刺激组显著降低（P＜0.05）。结论  QC含药血清通过干扰TGF-β1/Smad信号转导通路抑制AF增殖和分化,从而改善和逆转动脉血管外膜重构。     

金丝桃素光动力通过抑制HUVECs细胞增殖、迁移和管腔形成抑制血管生成

目的 探讨金丝桃素光动力(hypericin-photodynamic therapy,HY-PDT)对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)增殖、迁移及管腔形成的影响,研究抑制血管生成的作用机制.方法 以血卟啉为阳性药,用金丝桃素及血卟啉分别与HUVECs避光孵育24 h后,给予585 nm黄光照射(1.0 J/cm2),24 h后采用MTT法检测不同浓度HY对HUVECs细胞增殖的影响,细胞划痕实验观察HUVECs迁移情况,Matrigel实验观察对HUVECs细胞管腔形成的作用,qRT-PCR检测Smad2基因mRNA的表达,Western blot检测ERK1/2、p-ERK1/2、Smad2表达变化.结果 HY-PDT能够抑制HUVECs细胞增殖、迁移及管腔形成;HY-PDT使HUVECs中ERK1/2磷酸化比率(p-ERK1/2/ERK1/2)显著降低(P＜0.01),并显著下调Smad2mRNA及蛋白表达(P＜0.01).结论 HY-PDT通过抑制ERK1/2蛋白磷酸化活化、降低Smad2 mRNA表达及蛋白水平,使HUVECs细胞增殖、迁移管腔形成受到抑制,抑制血管的生成.     

热致相分离法制备聚苯硫醚多孔膜I．聚苯硫醚和二苯酮体系

目的观察川芎嗪(TMP)含药血清对人肝癌细胞HepG2增殖的影响。方法选用SD雄性大鼠30只,随机分成3组,分别ipTMP143.0、71.5mg/kg、生理盐水0.8mL,制备TMP大、小剂量组及生理盐水组含药血清,采用RP-HPLC法测定含药血清中TMP的质量浓度。将各组含药血清作用于人肝癌细胞HepG248h,MTT法测定不同质量浓度TMP含药血清对人肝癌细胞HepG2增殖的抑制作用。结果TMP大剂量组血清(20%、10%、5%),TMP小剂量组血清(20%、10%)对人肝癌细胞HepG2增殖较生理盐水组有显著抑制作用(P<0.05),最高抑制率可达46.1%。结论TMP含药血清对人肝癌细胞HepG2增殖有一定的抑制作用。     

补阳还五汤含药血清对人脑微血管内皮细胞增殖和迁移的影响

目的观察不同浓度补阳还五汤(BYHWD)含药血清对人脑微血管内皮细胞(HBMECs)增殖和迁移影响。方法补阳还五汤灌胃SD大鼠后腹主动脉取血,制备含药血清;体外培养人脑微血管内皮细胞(HBMECs),随机分为空白组(正常大鼠血清)及补阳还五汤含药血清组,血清浓度分为5%、10%和20%3个浓度,共6组;四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测HBMECs增殖;细胞划痕法检测HBMECs迁移的相对距离。结果与空白组比较,5%、10%和20%含药血清均显著促进HBMECs增殖,差异有统计学意义(0.71±0.03比0.65±0.03、0.84±0.05比0.75±0.03、0.71±0.05比0.67±0.05,P0.05);与10%含药血清组比较,5%含药血清组和20%含药血清组细胞增殖显著减少,差异有统计学意义(0.71±0.03、0.71±0.05比0.84±0.05,P0.05)。与空白组比较,各含药血清组细胞迁移的相对距离均显著增加,差异有统计学意义(0.58±0.03比0.50±0.01、0.63±0.03比0.45±0.05、0.53±0.05比0.45±0.04,P0.05);与10%含药血清组比较,5%含药血清组和20%含药血清组细胞迁移的相对距离显著减小,差异有统计学意义(0.58±0.03、0.53±0.05比0.63±0.03,P0.05)。结论补阳还五汤含药血清可促进HBMECs增殖和迁移,10%含药血清作用最佳。     

南蛇藤提取物含药血清对人肝癌SMMC 7721细胞增殖、迁移和黏附作用的影响

目的?制备南蛇藤（Celastrus Orbiculatus）乙酸乙酯提取物兔含药血清,研究其对人肝癌SMMC 7721细胞株的增殖、迁移和黏附的影响。方法?取新西兰白兔,以20mg/kg·d南蛇藤提取物灌胃,按血清药理学方法制备含药血清。设低、中、高剂量组（分别含有10%,20%,30%的南蛇藤提取物含药血清）,作用人肝癌SMMC 7721细胞,同时设溶媒对照组及5氟尿嘧啶（5Fu）阳性对照组。MTT法检测含药血清对细胞增殖的影响,Borden小室体外迁移实验及细胞黏附实验分别检测含药血清对细胞迁移和黏附能力的影响。结果?MTT结果显示各剂量组含药血清均能抑制肝癌SMMC 7721细胞的增殖,且呈剂量依赖性。迁移实验结果表明,中、高剂量组含药血清能显著抑制细胞的迁移能力（P＜0.05）;黏附实验结果显示在作用1h和2h 时各剂量组均能显著促进细胞的同质黏附;在作用2h 时,中、高剂量组能抑制细胞与基底膜成分Matrigel 的黏附,低、中、高各剂量组均能抑制细胞与人脐静脉内皮细胞的异质黏附,与对照组相比差异显著（P＜0.05或P＜0.01）,并具一定的量效关系。结论?南蛇藤提取物含药血清能有效抑制人肝癌SMMC 7721细胞的增殖和迁移能力,并能促进细胞的同质黏附能力,抑制细胞与基底膜及与人脐静脉内皮细胞的异质黏附能力。      

不同浓度血府逐瘀汤含药血清对大鼠血管平滑肌细胞增殖、迁移及侵袭的影响

目的观察不同浓度血府逐瘀汤含药血清对大鼠主动脉平滑肌细胞(VSMCs)增殖、迁移及侵袭的影响,以及其生成一氧化氮(NO)的情况。方法用MTT法观察VSMCs的增殖,Transwell小室法观察VSMCs的迁移、侵袭,并检测培养上清液一氧化氮(NO)的含量。结果与空白对照组比较,5%血府逐瘀汤组能显著促进VSMCs的增殖(P0.05),20%,30%血府逐瘀汤组能显著抑制VSMCs的增殖(P0.05);与空白对照组比较,培养48 h的培养上清液中,血府逐瘀汤组的NO水平有显著升高(P0.01),且与血府逐瘀汤含药血清的浓度有剂量依赖关系。结论低浓度(10%)血府逐瘀汤含药血清有促进VASMCs增殖和迁移、侵袭的作用,高浓度(10%)血府逐瘀汤含药血清有抑制VASMCs增殖、迁移和侵袭的作用,其作用可能与上清液的NO水平有关。     

通心络治疗缺血再灌注损伤机制的脑片研究

目的通过器官型脑片研究通心络含药血清对缺血再灌注损伤的治疗作用及机制。方法制备生后3d SD的全脑器官型脑片,随机分为缺血再灌注脑片模型组和正常对照组,各组根据干预方式的不同再分为大剂量含药血清组、小剂量含药血清组、对照血清组、空白组,于干预后不同时间通过倒置显微镜及免疫荧光染色观察通心络对脑片上神经干细胞增殖、迁移、分化的影响。结果经含药血清干预后室下区、海马齿状回单位区域新生细胞(nestin )数量增多,正常对照组新生细胞密度高于缺血再灌注脑片模型组(P<0.05);两组1,3,7d时新生细胞数量均按照大剂量含药血清组、小剂量含药血清组、对照血清组、空白组顺序递减(P<0.05);因新生细胞向外迁移,随着培养时间延长上述区域新生细胞密度逐渐减少;1d时各组均有大量nestin 新生细胞,7d时只有大、小剂量含药血清组有少量nestin 新生细胞。结论通心络可能通过促进神经干细胞的增殖迁移和分化来治疗缺血再灌注损伤,其效应随剂量增加而增强。     

miRNA⁃199a⁃5p在热损伤人皮肤成纤维细胞中的表达及其功能研究

目的：观察热损伤人皮肤成纤维细胞中miRNA?199a?5p表达量的变化，以及对皮肤成纤维细胞增殖、迁移、侵袭功能的影响。方法：分别用人皮肤成纤维细胞株（HSF）隔水52 ℃水浴30 s、60 s制造细胞热损伤模型，对比观察细胞热损伤状态；用四甲基偶氮唑盐（MTT）检测热损伤24 h、48 h后细胞的增殖率；用qRT?PCR检测热损伤24 h、48 h后细胞miRNA?199a?5p表达量的变化情况；用划痕和Transwell测试细胞的迁移、侵袭功能；用模拟物提高热损伤细胞中miRNA?199a?5p的表达量，检测热损伤细胞的增殖和侵袭情况。结果：52 ℃ 30 s可以很好地制造人皮肤成纤维热损伤模型；与对照组比较，热损伤后miRNA?199a?5p表达量下调［24 h，（2.67±0.35）%，P＜0.001；48 h，（18.42±0.44）%，P＜0.001］，细胞增殖显著受到抑制［24 h，（17.10±3.21）%，P＜0.002；48 h，（25.93±1.74）%，P＜0.001］，细胞的迁移功能显著下降［（35.35±7.07）%，P＜0.001］，侵袭功能亦被显著抑制［（57.14±9.52）%，P＜0.007］。通过模拟物提高热损伤细胞中miRNA?199a?5p的表达量后，细胞的增殖显著上调［（136.55±6.14）%，P＜0.003］，细胞的侵袭能力增强［（196.88±15.63）%，P＜0.003］。结论：热损伤人皮肤成纤维细胞中miRNA?199a?5p的表达量与细胞增殖、迁移和侵袭正相关，提高热损伤细胞中miRNA?199a?5p的表达量可以帮助热损伤细胞快速转归。     

鳖甲煎改良方含药血清对肝星状细胞增殖、周期及凋亡的影响

目的 探讨鳖甲煎改良方含药血清对大鼠肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)-T6增殖、周期及凋亡的影响.方法 分别用高剂量[28.4 g/(kg·d)]、中剂量[14.2g/(kg·d)]与低剂量[7.1 g/(kg·d)]的鳖甲煎改良方及与鳖甲煎改良方高剂量相同剂量的鳖甲煎丸灌胃大鼠以制备含药血清.将等体积不同剂量的鳖甲煎改良方含药血清分别处理HSC-T6细胞,以等体积鳖甲煎丸含药血清处理的细胞为阳性对照组,生理盐水处理的细胞为空白对照组,正常大鼠血清处理的细胞为正常对照组.CCK-8检测不同处理组HSC-T6细胞的增殖情况,并绘制其增殖曲线;流式细胞仪(flow cytometry,FCM)检测经不同处理的HSC-T6细胞的周期,Annexin V-PI染色法检测其凋亡;在mRNA及蛋白水平分别检测经不同处理的HSC-T6细胞的增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)基因及其编码蛋白的表达变化.结果 CCK-8检测结果显示,鳖甲煎改良方含药血清对HSC-T6细胞增殖具抑制作用,高剂量与中剂量组的增殖速度慢于正常对照组、阳性对照组和空白对照组(P ＜0.05,P＜0.01),且该抑制作用呈剂量-效应关系.FCM检测证实,鳖甲煎改良方含药血清可将HSC-T6细胞阻滞于S期,能诱导HSC-T6细胞的凋亡,与正常对照组比较,其凋亡诱导率差异具有统计学意义(P＜0.01).mRNA与蛋白水平检测结果显示,与空白对照组和阳性对照组比较,高剂量组能在基因与蛋白水平显著下调HSC-T6细胞PCNA的表达.结论 鳖甲煎改良方含药血清能明显抑制HSC-T6细胞的增殖,诱导HSC-T6细胞的凋亡,并能下调其PCNA基因及其编码蛋白的表达.     

脂肪间充质干细胞对博来霉素诱导的硬皮病小鼠模型的治疗作用

目的：研究脂肪间充质干细胞（adipose tissue derived stem cells,ADSCs)对博来霉素（bleomycin,BLM）诱导的硬皮病小鼠的治疗效果及其可能的作用机制。方法： 选取 C57BL/6J 雌性小鼠 24 只,采用皮下注射 BLM ［2 mg/(kg·d)］建立硬皮病小鼠模型,随机分为正常对照组、BLM 组、ADSCs(皮下)组 和 ADSCs（静脉）组,每组6只,正常对照组给予生理盐水2 mL/(kg·d)皮下注射,其余3组分别给予BLM皮下注射,连续3周,然后,ADSCs皮下和尾静脉注射组分别给予皮下和尾静脉注射 ADSCs（2×105个细胞）治疗,每4天1次,共3次。流式细胞术检测小鼠脾细胞中的辅助T细胞17（T-helper 17,TH17）及 调节性T细胞（regulatory T cell ,Treg）,实时荧光定量聚合酶联反应（ polymerase chain reaction,PCR）法检测小鼠肺组织中相关细胞因子的表达水平,酶联免疫吸附法（enzyme-linked immuno sorbent assay,ELISA） 检测小鼠血清中白介素（interleukin,IL)-6、转化生长因子β（transforming growth factor-β,TGF-β） 的含量, 苏木精-伊红染色(hematoxylin eosin staining,HE ）观察小鼠的皮肤和肺组织病理学改变。结果： 流式细胞术结果显示,BLM 组较正常对照组小鼠脾细胞中 TH17 和 Treg所占比例升高(15.30%±1.29 % vs. 4.32%±0.79%;9.90%±1.95% vs. 5.18%±1.35%,P均<0.05),经 ADSCs 治疗后,TH17 所占比例降低(5.02%±0.83%,6.00%±0.82% vs.15.30%±1.29%, P均<0.05),而 Treg所占比例升高(14.32%±1.59%,11.09%±4.31%vs. 9.90%±1.95%, P均<0.05)。与正常对照组相比,BLM 组小鼠肺组织中 IL-17、IL-6、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的 mRNA 表达水平及血清中 IL-6 的含量均升高［3.54±0.30,10.65±0.66, 5.37±0.52 vs. 1.00±0.00; (21.2±1.74) ng/L vs. (16.87±1.09) ng/L, P均<0.05］,ADSCs 治疗后,其表达量下降［1.63±0.45,1.50±0.29 vs.3.54±0.30;3.11±0.85,2.98±0.76 vs.10.65±0.66;1.45±0.47,1.59±0.41 vs. 5.37±0.52; （17.87±1.45） ng/L, (17.61±1.16) ng/L vs. (21.2±1.74) ng/L, P均<0.05］,ADSCs(皮下)组和ADSCs（静脉）组比较差异无统计学意义（P>0.05)。BLM 组小鼠血清中 TGF-β 的含量较正常对照组升高［(33.95±2.49) ng/L vs. (28.8±2.29) ng/L, P<0.05］,但小鼠肺组织中 TGF-β mRNA 的表达水平与正常对照组之间差异无统计学意义( 1.17±0.11 vs.1.00±0.00, P>0.05),经 ADSCs 治疗后 TGF-β基因和蛋白的表达无明显变化［1.25±0.11,1.26±0.12 vs.1.17±0.11; (31.84±2.04) ng/L, (31.25±2.36) ng/L vs. (33.95±2.49) ng/L,P>0.05］。HE 染色结果显示,BLM组与正常对照组相比,肺组织有大量炎性细胞浸润,肺泡间隔断裂或消失;皮肤真皮层增厚,有大量的胶原纤维积聚,经ADSCs治疗后小鼠肺组织炎症有所改善,皮肤的真皮层变薄,胶原纤维积聚减少。结论： ADSCs 可以有效缓解硬皮病小鼠肺的炎症和皮肤的纤维化症状,其抗炎和抗纤维化作用与其免疫调节功能有关。     

高同型半胱氨酸血症孕鼠与其仔鼠发生先天性心脏病的关系

目的:探讨同型半胱氨酸与哺乳动物先天性心脏病发生的关系,观察不同剂量同型半胱氨酸对哺乳动物心脏发育的毒性作用.方法:将30只SD孕鼠随机分为3组:高剂量组、低剂量组、对照组(每组10只).从妊娠第7天起,高剂量组腹腔内注射同型半胱氨酸200 mg/(kg·d),低剂量组腹腔内注射同型半胱氨酸100 mg/(kg·d),...     

低分子肝素对高脂饮食大鼠非酒精性脂肪性肝炎模型的影响

目的 观察低分子量肝素对长期摄入高脂饮食所致大鼠非酒精性脂肪性肝炎的干预作用,探讨其机制。方法 雄性SD大鼠40只,随机分为正常对照组（n=10）及模型组（n=10）,模型组喂以高脂饮食共8周;其余20只在高脂饮食8周后分为低分子肝素低剂量治疗组（n=10）,在继续高脂饲料喂养的基础上,加用低分子量肝素治疗［50IU/(kg·d）］;低分子肝素高剂量治疗组（n=10）,在继续高脂饲料喂养基础上,加用低分子量肝素治疗［200IU/(kg·d）］,共治疗2周。结果 低分子肝素高剂量组［200IU/(kg·d）］在抑制肝脏慢性炎症、防止肝脏脂质堆积方面较模型组有统计学差异,而低剂量组［50IU/(kg·d）］作用不如高剂量组作用明显。结论 低分子量肝素能够抑制肝脏慢性炎症的发生,调节脂质在肝脏中的堆积,有治疗非酒精性脂肪性肝炎的作用,且其作用效果与剂量相关。其作用机制可能是调节血脂,降低血清中TNF-α的水平。     

阿托伐他汀抑制RhoA/Rho激酶活性逆转低氧性肺动脉高压大鼠肺动脉高压和肺血管重构

目的:探讨阿托伐他汀是否通过抑制肺动脉RhoA/Rho激酶通路的激活而逆转低氧所致的大鼠肺动脉高压及肺血管重构.方法:32只成年雄性Westar大鼠随机分成4组:A组为正常对照组;B,C,D组建立常压低氧性肺动脉高压大鼠模型,自低氧干预第1天起C组每日给予1 mg/mL阿托伐他汀溶液10 mg/kg灌胃,D组以生理盐水...     

黄芪甲苷对糖尿病肾脏病变大鼠氧自由基代谢和转化生长因子β1 mRNA表达的影响

目的: 研究黄芪甲苷对链脲佐菌素(STZ)所致糖尿病肾病(DN)大鼠的氧自由基代谢及转化生长因子β1(TGF-β1)mRNA表达水平的影响,并探讨其相关作用机制。 方法: 60只Wistar大鼠分为对照组、模型组、厄贝沙坦(14.37 mg·kg^-1)组和低剂量(0.75 mg·kg^-1)、中剂量(1.50 mg·kg^-1)及高剂量(3.00 mg·kg^-1)黄芪甲苷组,每组10只。除对照组外,其余各组大鼠腹腔注射 60 mg·kg^-1STZ,每日灌胃相应药物并用高脂饲料喂养。8周后,检测各组大鼠血清中肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、空腹血糖(FBG)水平和24h尿蛋白量;检测各组大鼠肾组织中超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及丙二醛(MDA)水平;RT-PCR法检测肾组织中过氧化氢酶(CAT)和TGF-β1 mRNA 表达水平。 结果: 与模型组比较,中、高剂量黄芪甲苷组DN大鼠肾功能明显改善,各剂量黄芪甲苷组大鼠血清Scr水平降低(P<0.05或 P<0.01),中、高剂量黄芪甲苷组大鼠血清中BUN、FBG水平和24h尿蛋白量降低 (P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,中、高剂量黄芪甲苷组大鼠肾组织中MDA水平降低、SOD活性升高(P<0.05或P<0.01),TGF-β1mRNA表达水平降低(P<0.05);各剂量黄芪甲苷组大鼠肾组织中GSH-Px活性均升高(P<0.05或P<0.01), CATmRNA表达水平无明显变化(P>0.05)。 结论: 黄芪甲苷可以改善DN大鼠的肾功能,其作用机制可能与改善肾内氧自由基的氧化损伤及降低肾组织TGF-β1mRNA表达有关。     

二苯乙烯苷对脑缺血再灌注大鼠神经保护的作用机制

目的：探讨二苯乙烯苷（tetrahydroxystilbene glucoside,TSG）对脑缺血再灌注大鼠的神经保护作用机制。方法：雄性SD大鼠96只,随机分为4组：对照组,模型组,小剂量［60 mg/(kg·d)］TSG组,大剂量［120 mg/(kg·d)］TSG组,每组24只。TSG或生理盐水灌胃7 d后应用线栓法制备大鼠大脑中动脉缺血再灌注损伤模型,术后6,24,48 h及7 d观察动物神经行为学变化并评分,免疫组织化学法检测神经生长因子（NGF）、生长相关蛋白(GAP)-43和蛋白激酶A催化亚基(PKAc)蛋白的表达。结果：神经功能评分显示模型组各时间点均有明显的神经功能缺损症状,除6 h时间点外,两个剂量TSG治疗组其余各时间点神经功能评分明显低于模型组,差异有统计学意义（P＜0.05）;与模型组相比,两个剂量TSG组各时间点NGF,GAP-43及PKAc蛋白表达均升高,差异有统计学意义（P＜0.01）。NGF,GAP-43及PKAc蛋白表达两两之间呈正相关。结论：TSG可能通过诱导大鼠脑缺血-再灌注损伤后NGF蛋白表达上调,激活PKA通路,增加轴突再生标志物GAP-43蛋白的表达,从而起到神经保护作用。     

Smad泛素化调节因子2在转化生长因子β1诱导人肺成纤维细胞活化中的作用及其分子机制

目的:观察Smad泛素化调节因子2(Smurf2)在转化生长因子β1(TGF-β1)诱导人肺成纤维细胞活化中的作用,并探讨其可能的分子机制。方法:体外培养人胚肺成纤维细胞MRC-5,10 μg·L^-1 TGF-β1作用1、2和6 h(分别为TGF-β1 1 h组、TGF-β1 2 h组和TGF-β1 6 h组),并设对照组(不加TGF-β1), RT-PCR和Western blotting法分别检测各组细胞中Smurf1和Smurf2 mRNA和蛋白的表达水平。MRC-5细胞随机分为对照组(未加入TGF-β1或siRNA)、TGF-β1组 (10 μg·L^-1 TGF-β1)、Control siRNA转染组(10 μg·L^-1TG F-β1+Control siRNA)和Smurf2 siRNA转染组(10 μg·L^-1 TGF-β1+Smurf2 siRNA)。Western blotting法检测各组细胞中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和Ⅰ型胶原α1(COL1A1)的表达水平;RT-PCR和Western blotting法分别检测各组细胞中Smad7、核转录共抑制因子SnoN、TGF-β Ⅰ型受体(TβRⅠ)、Smad2和Smad3 mRNA和蛋白的表达水平。结果:与对照组比较,各TGF-β1组细胞中Smurf2 mRNA和蛋白表达水平均明显升高(P<0.05),且随着TGF-β1作用时间的延长,其表达水平呈逐渐增加的趋势;与对照组比较,各TGF-β1组细胞中Smurf1表达水平无明显变化(P>0.05)。与TGF-β1组比较,Smurf2 siRNA组细胞中Smurf2蛋白表达水平下降(P<0.05)。与对照组比较,TGF-β1组细胞中α-SMA和COL1A1蛋白表达水平均明显升高(P<0.05);与TGF-β1组比较,Smurf2 siRNA组细胞中α-SMA和COL1A1蛋白表达水平均下降(P<0.05)。与对照组比较,TGF-β1组和Smurf2 siRNA组细胞中Smad7和SnoN mRNA表达水平均升高(P<0.05),而Smurf2 siRNA组和TGF-β1组细胞中Smad7和SnoN mRNA表达水平无明显变化(P>0.05)。与对照组比较,TGF-β1组细胞中Smad7和SnoN蛋白表达水平均明显下降(P<0.05);与TGF-β1组比较,Smurf2 siRNA组细胞中Smad7和SnoN蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。与对照组比较,TGF-β1组和Smurf2 siRNA组细胞中TβRⅠ mRNA和蛋白表达水平均明显升高(P<0.05),而Smurf2 siRNA组和TGF-β1组细胞中TβRⅠ mRNA和蛋白表达水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。各组细胞中Smad2和Smad3 mRNA和蛋白表达水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。 结论: Smurf2可能通过泛素化降解Smad7和SnoN,参与调控TGF-β1/Smads信号通路,从而发挥其促进TGF-β1活化肺成纤维细胞的作用。     

葡萄子原花青素对糖尿病肾病大鼠非酶糖基化终产物和骨形态蛋白7表达的影响

   目的   研究葡萄子原花青素（GSPE）对糖尿病大鼠非酶糖基化终产物（AGEs）、肾组织结缔组织生长因子（CTGF）及骨形态蛋白7（BMP 7）表达的影响。  方法   将45只链脲佐菌素（STZ）诱导的糖尿病大鼠模型随机分为糖尿病组（DM组,n=15只）、GSPE小剂量［250mg/（kg·d）］治疗组（T1组,n=15只）和大剂量［500mg/（kg·d）］治疗组（T2组,n=15只）,另以15只正常大鼠作为对照组（C组）,15只正常大鼠给予GSPE 250mg/（kg·d）作为正常治疗组（CT组）。于24周末检测各组大鼠血糖、血清AGEs、血压、24?h尿蛋白定量、血肌酐（Scr）、尿肌酐（Ucr）、肾重/体重水平。以光镜PAS染色及电镜观察肾脏病理改变。用RT PCR、Western blot方法及免疫组化方法检测肾组织中CTGF、BMP-7mRNA及蛋白表达水平的改变。  结果   与C组相比,DM组血清AGEs、血压、24h尿蛋白定量、内生肌酐清除率（Ccr）、肾重/体重均显著升高（P＜0.01）,肾病理改变加重,肾组织CTGF mRNA及蛋白表达增加（P＜0.01）,而BMP-7mRNA及蛋白降低（P＜0.05）。与DM组相比,T1组和T2组血清AGEs、血压、24h尿蛋白定量、Ccr和肾重/体重显著降低（P＜0.05或P＜0.01）,病理改变减轻, BMP-7mRNA及蛋白表达水平升高(P＜0.05或P＜0.01）,而CTGF mRNA及蛋白显著降低（P＜0.01）。T1组与T2组之间相比,Ccr、肾重/体重水平、CTGF mRNA及蛋白差异有统计学意义（P＜0.05或P＜0.01）。   结论    GSPE可以减轻糖尿病大鼠蛋白尿、改善肾脏病理,对其肾脏有明显保护作用,其机制与降低血清AGEs、抑制肾组织CTGF过高表达、上调BMP-7表达有关。     

福辛普利、氯沙坦对自发性高血压大鼠Klotho表达及氧化应激的影响

目的:观察福辛普利(fosinopril)和氯沙坦(losartan)对自发性高血压大鼠(SHR)肾脏Klotho表达及氧化应激的影响,探讨其对高血压肾损伤的保护作用机制.方法:15只22周龄雄性SHR,随机分为3组(5只/组);模型组(SHR组),福辛普利组[10 mg/(kg·d)],氯沙坦组[50 mg/(kg·...