蛋白激酶C抑制剂CJ9111对小鼠B16黑色素瘤细胞肺转移的影响

肿瘤转移是个多步骤的连续过程。瘤细胞从原发部位扩散，浸润细胞外基质，穿透血管壁，在血管内聚积，附着于血管内皮等一系列过程形成转移灶。所有这些过程都与肿瘤细胞的粘附特性有关。自从发现佛波酯有促进肿瘤转移的作用后，表明了蛋白激酶C(PKC)在调控肿瘤转移的过程中发挥重要作用．PKC的活性与肿瘤转移呈正相关，且某些PKC抑制剂能抑制肿瘤的转移。     

蛋白激酶C抑制剂Calphostin C抑制人高转移大细胞肺癌细胞株侵袭和转移的实验研究

[目的]探讨以蛋白激酶C（PKC）为靶点应用其特异性抑制剂开发抗肿瘤侵袭与转移靶向药物的可行性。[方法]应用MTT法和改良Boyden小室法分别检测三株肺癌细胞株细胞（L9981、L9981-pLXSN和L9981-nm23-H1）的侵袭力、增殖力;以及加入Calphostin C作用后,三株细胞株细胞侵袭力、增殖力的变化。[结果]L9981和L9981-pLXSN体外侵袭力和增殖活性明显高于转染nm23-H1基因的L9981-nm23-H1肺癌细胞株（P〈0．001）;L9981和L9981-pLXSN细胞间体外侵袭力和增殖活性则无显著性差异（P〉0．05）。用Calphostin C处理三株肺癌细胞株后,细胞体外侵袭力和增殖活性显著下降（P〈0．001）,但L9981-nm23-H1细胞体外侵袭力和增殖活性仍低于L9981和L9981-pLXSN（P〈0．001）,而后两者细胞间则无显著性差异（P〉0．05）。[结论]PKC抑制剂Calphostin C可明显抑制L9981肺癌细胞株的细胞增殖力和侵袭力;Calphostin C和nm23-H1在影响人高转移大细胞肺癌细胞株细胞体外增殖活性和侵袭力的过程中具有协同和相加作用。     

C57BL/6小鼠B16黑色素瘤细胞脾转移机制

 目的　研究C57BL／6小鼠B16黑色素瘤细胞脾转移与血行转移的相关性。方法　细胞悬液接种法制备C57BL／6小鼠B16黑色素瘤细胞的荷瘤模型，HE染色法观察各组织器官中转移瘤细胞的有无及其生长状态，伊文思蓝尾静脉注射法观察蓝染部位与肿瘤转移阳性部位间的相关性。结果　接种成瘤率100 ％。12只小鼠中有9只出现脾转移，均同时伴有不同程度的局部淋巴结转移， 其中3只尚伴有肺转移。脾转移较肺转移出现早、概率高。大体观脾转移阳性部位位于脾背侧段约全长1／4区域。镜下观脾内转移瘤细胞呈散在分布，生长受抑并向成熟分化。伊文思蓝蓝染部位位于脾背侧段约全长1／4区域，与肿瘤转移阳性部位一致。结论　C57BL／6小鼠的B16黑色素瘤细胞脾转移先于其他脏器转移，其转移途径为血行转移。     

用胸腺肽处理的淋巴细胞抑制小鼠B16黑色素瘤的肺转移

目前参与肿瘤免疫的各种细胞及有关调节因子在肿瘤发生发展中的确切作用仍然不清,尤其是T淋巴细胞对于肿瘤的影响比较复杂。一些实验表明,T淋巴细胞具有抑制和促进肿瘤生长的双重作用,如果把具有促进肿瘤生长作用的T淋巴细胞用胸腺激素处理后,可抑制肿瘤生长。本文将胸腺肽和淋巴细胞共育1h再静脉注射给经B_(16)黑色素瘤静脉     

保尔佳对黑色素瘤细胞转移能力及相关细胞行为的影响

考察保尔佳对恶性肿瘤转移的影响及其相关机制。采用细胞微管吸吮实验技术单细胞定量观察不同浓度的保尔佳处理小鼠黑色素瘤细胞不同时间后，瘤细胞对培养牛肺动脉内皮细胞粘附性的改变，同时采用Ｂｏｙｄｅｎ小室法检测经同样处理的瘤细胞的侵袭穿膜能力。采用瘤细胞注射法制作肺转移荷瘤小鼠模型，观察经处理瘤细胞肺转移结节形成数目的改变。保尔佳处理可明显降低瘤细胞与内皮细胞的粘附性，同时抑制其侵袭穿膜能力，这种作用在１０－２～１０μｇ／ｍｌ浓度范围呈剂量依赖性，在１２～４８ｈ范围呈时间依赖性，短时间（３０ｍｉｎ）处理无明显作用。经保尔佳处理的癌细胞，其在肺组织中形成转移结节的数目明显减少。保尔佳通过抑制瘤细胞转移相关性细胞行为—粘附、侵袭，从而起抑制肿瘤转移的作用     

β-榄香烯对小鼠B16黑色素瘤细胞粘附、运动和间隙连接通讯功能的影响

目的：探讨β揽香烯对小鼠Ｂ１６黑色素瘤细胞粘附和运动能力的影响。方法：采用细胞培养、电镜及划痕染料示踪技术,研究了β榄香烯对小鼠Ｂ１６黑色素瘤细胞粘附与运动能力、间隙连接结构及其间隙连接通讯功能的影响。结果：２０～４０μｇ／ｍｌ的β榄香烯可显著抑制Ｂ１６细胞对纤维结合蛋白和层粘连蛋白两种基质的粘附,抑制Ｂ１６细胞的运动,延迟吸管尖部所致细胞单层损伤的愈合。结论：提示β榄香烯对Ｂ１６细胞粘附和运动能力的抑制可能是其抗肿瘤转移作用的机制之一。     

TNF-α诱导小鼠B16黑色素瘤细胞凋亡及其对小鼠B16细胞移植瘤生长的抑制作用

目的:探讨TNF-α对小鼠B16黑色素瘤(MM)细胞凋亡的诱导及其对小鼠B16移植瘤生长的抑制作用.方法:用不同浓度的TNF-α直接作用于培养的小鼠B16黑色素瘤细胞,36h后,采用流式细胞仪(FCM)及原位末端标记法(TUNEL法)检测B16细胞的凋亡率.动物实验观察TNF-α小量瘤体内注射对小鼠B16移植瘤生长的抑制作用.结果:在1000、3000、5000及10000U/mL TNF-α作用下,B16细胞的凋亡指数均明显高于空白对照组(P＜0.01),随着TNF-α浓度增加,B16凋亡细胞数呈增加趋势.动物实验结果显示,TNF-α治疗3周后,治疗组荷瘤小鼠MM移植瘤的体积和重量明显低于对照组(P＜0.01).结论:TNF-α能够诱导小鼠B16黑色素瘤细胞发生凋亡,且小剂量TNF-α瘤体内注射能显著抑制小鼠移植性MM的生长.     

β-榄香烯对小鼠B16黑色素瘤细胞粘附、运动和间隙连接通讯功能的影响

 目的：探讨β揽香烯对小鼠B₁₆黑色素瘤细胞粘附和运动能力的影响。方法：采用细胞培养、电镜及划痕染料示踪技术,研究了β榄香烯对小鼠B₁₆黑色素瘤细胞粘附与运动能力、间隙连接结构及其间隙连接通讯功能的影响。结果：20~40ug/ml的β榄香烯可显著抑制B₁₆细胞对纤维结合蛋白和层粘连蛋白两种基质的粘附,抑制B₁₆细胞的运动,延迟吸管尖部所致细胞单层损伤的愈合。结论：提示β榄香烯对B₁₆细胞粘附和运动能力的抑制可能是其抗肿瘤转移作用的机制之一。     

细胞粘附分子、粘附蛋白与肿瘤转移

近年来随着细胞与细胞，细胞与细胞外基质粘附机制逐渐被阐明，参与、介导这一粘附机制的一类细胞粘附分子以及粘附蛋白正引起人们极大关注。已证明这些成分参与多细胞体包括生长发育、成形以及免疫应答、炎症反应、血液凝周等各种生命活动，也是肿瘤浸润转移的分子基础。已知肿瘤浸润转移是肿瘤致死眭的关键因素，而有选择性调节或阻断细胞粘附分子及粘附蛋白的粘附活性，可能会随着肿瘤转移机制不断被阐明而成为有效防治肿瘤转移的手段之一。本文就有关这方面研究工作进展作一探讨。     

蛋白激酶C调控大肠癌HT-29细胞粘附、侵袭能力的研究

目的探讨蛋白激酶C(ProteinKinaseC,PKC)对大肠癌HT-29细胞体外粘附、侵袭能力的调控作用。方法采用体外细胞培养的方法,通过PKC激动剂佛波酯PMA和抑制剂Staurosporine(SP)对大肠癌HT-29细胞粘附人脐带静脉内皮细胞(HUVECs)能力、侵袭血管小块的形态学和侵袭人羊膜能力影响的研究,探讨PKC对HT-29细胞体外粘附、侵袭能力的调控作用。结果采用3H-TdR标记的同位素液闪测定发现,PMA不同浓度处理HT-29细胞可使其粘附HUVECs的能力增强,在一定浓度范围内,随着PMA浓度的增加,粘附作用也逐渐增强,SP可拮抗HT-29细胞粘附HUVECs的作用。侵袭血管小块的扫描电镜观察发现,PMA处理细胞后,细胞侵袭血管的能力增强,细胞伸出伪足,向血管内侵袭,而SP可拮抗PMA作用,细胞侵袭性下降。PMA可显著增强HT-29细胞侵袭人羊膜的能力,100nmol/LPMA诱导4h,可使HT-29细胞在体外获得最大的侵袭羊膜的能力,而SP则可拮抗PMA的这种诱导作用。结论PKC对HT-29细胞体外粘附、侵袭能力存在调控作用,PKC的激活使HT-29细胞粘附性、侵袭性增强,而PKC的抑制使HT-29细胞粘附性、侵袭性下降。     

蛇毒半胱氨酸蛋白酶抑制剂基因转染对小鼠黑色素瘤B16F1细胞基因表达谱的影响

背景与目的:本实验室已证明蛇毒半胱氨酸蛋白酶抑制剂(snake venom cystatin, sv-cystatin)具有抗肿瘤侵袭转移作用.为了进一步阐明其分子机制,本研究利用高通量的基因芯片技术探讨sv-cystatin基因转染对小鼠黑色素瘤细胞(B16F1)基因表达谱的影响.方法:分别将pcrDNA3.1/sv-cystatin及空载体pcDNA3.1转染B16Fl细胞,建立稳定转染的B16Fl/sv-cystatin及B16F1/pcDNA3.1细胞株,提取总mRNA.应用高通量的基因芯片技术检测差异表达基因,半定量RT-PCR法分别验证5个上调和5个下调的差异表达基因.结果:B16F1细胞经转染sv-cystatin后.共检测了1218个基因,其中有45个差异表达基因,21个基因表达上调(Ratio>3),24个基因表达下调(Ratio<0.5),这些基因的功能涉及细胞粘附迁移、细胞免疫调节、增殖分化与凋亡、基因转录和细胞内信号转导等方面.10个差异表达基因的RT-PCR验证结果与基因芯片分析结果相符.结论:Sv-cystatin不仅具有抑制细胞外基质的作用,而且还具有细胞免疫调节、增殖分化与凋亡、基因转录和细胞内信号转导等多种生物学功能.     

细胞粘附机制与癌细胞侵袭和转移

早在50年前Coman就提出恶性肿瘤细胞具有比正常组织细胞为低的粘附性。关于粘附的机制已有大量不同的实验研究，如与细胞表面电荷含量，细胞问连接结构改变及粘附分子作用等。目前细胞粘附机制已成为癌细胞侵袭和转移研究的热点之一。     

腺病毒介导p16基因转移及诱导黑色素瘤细胞凋亡

目的 进一步了解Ｐ１６基因对肿瘤细胞的作用。方法 通过腺病毒介导外源性Ｐ１６基因转移到Ｐ１６基因突变的人黑色素瘤细胞秒ＷＭ－９８３Ａ,对Ｐ１６基因的表达,细胞生长的抑制与机制和对肿瘤模型的治疗效果进行分析。结果 外源性Ｐ１６基因在靶细胞高水平的表达显著地抑制了ＷＭ９８３Ａ的生长和集落形成,流式细胞仪检测显示细胞Ｇ１的期阻滞并发生了凋亡,瘤内注Ａｄ－ｐ１６对裸鼠体内移植瘤有一定抑瘤作用。结论 Ｐ１６     

蛋白激酶C抑制剂对人非小细胞肺癌细胞株药物敏感性的影响

背景与目的 蛋白激酶C(PKC)在癌变过程中的作用使其成为肿瘤治疗的潜在重要靶点.非小细胞肺癌(NSCLC)中存在PKC-α的异常表达和活性增高,PKC抑制剂能通过诱导肿瘤细胞凋亡、增强细胞毒作用及下调多药耐药基因的表达而发挥其抗肿瘤作用.通过观察PKC抑制剂白屈菜红碱(CH)对四种人NSCLC细胞株药物敏感性的影响,初步探讨其作用机制.方法 以PKC抑制剂CH分别处理四种NSCLC细胞株H1299、H460、A549及耐顺铂A549细胞株,逆转录聚合酶链式反应法(RT-PCR)及蛋白印迹法(Western blot)检测PKC-α的mRNA及蛋白表达水平,流式细胞仪检测细胞凋亡率,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞株对顺铂药物敏感性.结果 用药前A549/DDP细胞株中PKC-α mRNA及蛋白的表达水平高于NSCLC细胞株H1299、H460及亲本A549细胞株(P＜0.05),CH处理后四种NSCLC细胞株中PKC-αmRNA及蛋白的表达水平均有不同程度的下降,CH处理4 h及24 h后H1299、H460、A549细胞株的凋亡率无明显增加,仅A549/DDP细胞株的凋亡率明显增加,用药后NSCLC细胞株对顺铂的药物敏感性即IC50值有不同程度的下降,以A549/DDP细胞株降低更为明显(P＜0.05).结论 四种NSCLC细胞株中存在PKC-αmRNA及蛋白的高表达.通过抑制NSCLC细胞株中PKC-α mRNA及蛋白的表达,PKC抑制剂CH能增加其对顺铂的药物敏感性.与亲本A549细胞株相比,PKC抑制剂CH能通过抑制耐顺铂A549细胞株中PKC-α蛋白的表达及增加细胞凋亡率,而更有效地增加其对顺铂的药物敏感性.     

组胺对C57BL/6小鼠B16黑色素瘤转移行为的影响

背景与目的:肿瘤生物治疗中微血管壁通透性是大分子抗体偶联药物进入瘤体的主要屏障.组胺可通过增加微血管壁通透性和组织液的生成促进抗体偶联物在肿瘤局部的富集.本研究观察组胺所致微血管壁通透性的增加和组织液的生成增多是否会增加肿瘤血行及/或淋巴的转移.方法:采用瘤细胞悬液接种法将小鼠黑色素瘤细胞B16注入小鼠左上肢腋部皮下,建立C57BL/6小鼠荷瘤模型.实验组接种第6天起,背部皮下注射300 mg/kg组胺,隔日一次,共5次,对照组注射等体积生理盐水.组织化学方法检测肿瘤细胞在各脏器的转移情况.分别用Student t-test和四格表资料确切概率法分析组胺对肿瘤细胞增殖和转移的作用.结果:接种成瘤率100%.300 mg/kg组胺隔日一次皮下注射能明显抑制肿瘤的生长,实验组与对照组瘤重分别为(5.26 1.55)g和(6.96±1.31)g,二者间差异有统计学意义(P＜0.01).实验组与对照组淋巴结转移率分别为33.3%和75.0%,血行转移率分别为25.0%和75.0%,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论:组胺能够抑制C57BL/6小鼠B16黑色素瘤的血行和淋巴转移,该抑制作用部分与其抑制瘤细胞的增殖有关.     

肿瘤浸润和转移的抑制分子E—钙粘附素

细胞与细胞之间、细胞与基质之间相互连接 ,形成特定的组织结构。这种相互连接的分子基础就是细胞间粘附分子。目前已知的细胞间粘附分子有几十种 ,钙粘附素 (ｃａｄｈｅｒｉｎ)即为其中1类。近年来研究表明 ,主要分布于上皮细胞的Ｅ 钙粘附素(ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ ｃａｄｈｅ     

抗粘附治疗在肿瘤转移中的研究与应用

细胞粘附与抗粘附治疗的研究越来越被人们重视,现综述粘附分子的种类与作用及抗粘附治疗在抗肿瘤侵袭转移中的研究进展.     

抗粘附治疗在肿瘤转移中的研究与应用

细胞粘附与抗粘附治疗的研究越来越被人们重视 ,现综述粘附分子的种类与作用及抗粘附治疗在抗肿瘤侵袭转移中的研究进展