为毒素诱导大鼠心肌损伤时EPO及EPOR表达的实验研究

目的观察内毒素诱导大鼠心肌损伤时EPO及EPO受体表达。方法20只雄性SD大鼠随机分为LPS组和对照组,LPS组腹腔注射生理盐水,连续处理3d后腹腔注射LPS10mg／kg,建立内毒素心肌损伤模型。对照组与LPS组腹腔注射等量生理盐水。腹腔注射6h后于鼠尾部放血测定心肌损伤标志物,断颈活杀取出心脏组织测定EPO及EPO受体浓度。结果LPS组血清心肌损伤标志物（cTnⅠ、CK、CK-MB）水平均显著高于对照组（t=6．751、5．346、3．432,P〈0．05）。LPS组心脏组织EPO及EPO受体水平均显著高于对照组（t=2．587、4．306,P〈0．05）。结论内毒素诱导大鼠心肌损伤时存在EPO及EPO受体高表达,为外原性EPO在脓毒症的心脏保护中的廊用提供了可行性．     

益赛普对脓毒症大鼠心肌损伤与炎症因子表达的影响

目的研究早期应用益赛普对脓毒症大鼠心肌损伤及炎症因子表达的影响,并就其对心肌损伤机制的影响进行初步探讨。方法108只雌性清洁级SD大鼠随机分为假手术组、脓毒症组与治疗组,假手术组行盲肠探查术,脓毒症组和治疗组两组行盲肠结扎穿孔术制作脓毒症模型,治疗组加用益赛普以干预,均在3、9、24、36、48、72 h时相点留取标本,每时相点6只大鼠。 ELISA法检测大鼠血清心肌肌钙蛋白(cTnI)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1(IL-1)浓度,Western blot法检测心肌核转录因子-κB p65(NF-κB p65)的表达,数据结果采用析因设计方差分析。结果①脓毒症组与治疗组血清cTnI、TNF-α、IL-1、NF-κB p65水平均高于假手术组(P<0．05),两组浓度均于3 h达峰值,而后逐渐下降。治疗组每个时相点均低于脓毒症组;②血清 TNF-α、
　　IL-1浓度均与血清CTnI表达呈显著正相关性。结论脓毒症大鼠心肌早期发生损伤,应用益赛普能够降低血清TNF-α、IL-1的释放及心肌组织NF-κB p65的表达,减少机体炎症反应,起到保护心脏的作用。     

盲肠结扎穿孔脓毒症大鼠心肌损伤的相关研究

【摘要】目的 通过盲肠结扎穿孔脓毒症大鼠心肌细胞凋亡率的变化,探讨心肌细胞凋亡与心肌损伤的关系。方法 将40只健康雄性Wistar大鼠随机分为假手术组（SH组,n=20）及脓毒症组（CLP组,n=20）,采用盲肠结扎穿孔法(CLP)制备脓毒症动物模型,24小时后,检测各组的血清脑钠肽(BNP)、肌钙蛋白I(cTnI)水平。观察心肌组织病理变化、心肌组织TNF-α的表达水平及心肌细胞凋亡率。结果 CLP组出现明显的心肌损伤,CLP组血清BNP、cTnI高于SH组（P＜0.01）,心肌组织TNF α、心肌细胞凋亡率高于SH组（P＜0.01）。结论 心肌细胞凋亡在脓毒症心肌损伤发病机制中可能起着重要的作用。     

硫化氢对脓毒症大鼠心肌损伤的作用及其机制探讨

目的 研究硫化氢（hydrogen sulfide,H₂S）对脓毒症大鼠心肌损伤的作用,并探讨其作用的可能机制。 方法 采用盲肠结扎穿孔法制备大鼠脓毒症（cecal ligation and puncture,CLP）模型,将SD大鼠随机分为6组:假手术组、假手术+外源性H₂S供体硫氢化钠（NaHS）组、假手术+H₂S合成酶胱硫醚-γ-裂解酶（cystathionine-γ-lyase,CSE）抑制剂炔丙基甘氨酸（propargylglycine,PAG）组、CLP组、CLP+NaHS组、CLP+PAG组,每组各24只大鼠。分别于术后6 h、12 h、24 h处死各组大鼠（即各组分6 h、12 h、24 h亚组）取血和心肌标本,检测血清肌钙蛋白I（cTnI）水平,大鼠心肌组织HE染色观察病理变化,测定心肌组织肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-10（IL-10）含量,采用RT-PCR方法检测心肌组织CSE mRNA表达,Western blot检测大鼠心肌组织核转录因子NF-κB表达。 结果 假手术各组及不同时点各指标差异均无统计学意义。与假手术12 h及24 h组相比,CLP 12 h及24 h组血清cTnI质量浓度以及心肌组织病理评分、心肌组织CSE mRNA、NF-κB表达、TNF-α及IL-10含量均升高（P均<0.05）;与CLP 12 h及24 h组相比,CLP+NaHS 12 h及24 h组血清cTnI质量浓度以及心肌组织病理评分、NF-κB表达和TNF-α含量降低（P均<0.05）,CSE mRNA表达和IL-10含量升高（P均<0.05）;而CLP+PAG 12 h及24 h组血清cTnI质量浓度及心肌组织病理评分、NF-κB表达和TNF-α含量升高（P均<0.05）,CSE mRNA表达和IL-10含量降低（P均<0.05）。 结论 H₂S在脓毒症所致的心肌损伤中起保护作用,这种保护作用的机制可能是通过抑制心肌组织中NF-κB表达、降低心肌组织TNF-α含量和提高心肌组织CSE mRNA表达、IL-10含量而保护心肌组织。     

不同海拔脓毒症大鼠细胞因子表达和肺损伤的实验研究

目的分析海拔因素对脓毒症大鼠血清中细胞因子表达和肺损伤的影响,探讨细胞因子网络与脓毒症及某些高原疾病的相关性。方法将果洛州玛多组（4268m）、西宁组（2276m）和郑州组（112m）各54只雄性SD大鼠随机分为正常对照组（n=6）、假手术组（n=24）和模型组（n=24）。采用盲肠结扎穿孔术（CLP）制备脓毒症模型,于造模后2、6、12、24h处死大鼠,假手术组在相同时间点处死大鼠,采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）测定血清TNF-α、IL-6、IL-10水平;留取各时间点完整左肺组织做病理切片,右肺组织测定湿干（W/D）比重;记录模型组各时间点脓毒症大鼠死亡例数,统计其死亡率。结果模型组各时间点TNF-α、IL-6、IL-10水平均高于假手术组（P〈0.01）;各组间相比较,随着海拔升高,炎症细胞因子各时间点表达水平均明显升高（P〈0.01）;肺组织损伤情况呈递进性加重;模型组于造模6h以后肺湿干比重差异显著（P〈0.01）;模型组脓毒症大鼠死亡率明显增加（P〈0.05）。结论模型组各时间点细胞因子表达水平均高于假手术组;海拔越高,炎症细胞因子表达水平越高,肺组织损伤越严重,脓毒症症状较低海拔者越重,脓毒症大鼠死亡率越高。     

老年脓毒症合并心肌损伤患者心肌损伤 标志物、炎症因子与预后的相关性分析

目的 探讨老年脓毒症合并心肌损伤患者心肌损伤标志物、炎症因子变化及其与急性生理学和慢性健康状况评价Ⅱ（acute physiology and chronic health evaluationⅡ,APACHEⅡ）、序贯器官衰竭评估（sequential organ faiure assessment,SOFA）评分的相关性。方法 选取浙江省立同德医院2018年2月至2021年2月收治的66例老年脓毒症患者纳入研究,将合并心肌损伤者纳入观察组（n=33）,无心肌损伤者纳入对照组（n=33）。比较两组患者的心肌肌钙蛋白I（cardiac troponin I,cTnI）、肌酸激酶同工酶（creatine kinase isoenzymes,CK-MB）、肌红蛋白（myoglobin,Mb）、白细胞介素-6（interleukin-6,IL-6）、C反应蛋白（C-reactive protein,CRP）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）、APACHEⅡ评分、SOFA评分情况,采用Pearson相关分析法分析血清cTnI、CK-MB、Mb、IL-6、CRP、TNF-α水平与APACHEⅡ评分、SOFA评分的相关性。结果 观察组患者的血清cTnI、CK-MB、Mb、IL-6、CRP、TNF-α水平、APACHEⅡ评分、SOFA评分均明显高于对照组（P<0.05）。Pearson相关分析结果显示,血清cTnI、CK-MB、Mb、IL-6、CRP、TNF-α水平与APACHEⅡ评分、SOFA评分均呈正相关（P<0.05）。结论 老年脓毒症合并心肌损伤患者的血清cTnI、CK-MB、Mb、IL-6、CRP、TNF-α水平升高,可直接反映患者的病情和预后。     

旋毛虫肌幼虫排泄分泌蛋白对脓毒症诱发的小鼠心肌损伤有保护作用

目的 观察旋毛虫肌幼虫排泄分泌蛋白（Ts-MES）对脓毒症诱发的小鼠心肌损伤的保护作用。方法 80只雄性BALB/c小鼠随机分为4组,各组20只,分别为假手术组（A组）、心肌损伤模型组（B组）、Ts-MES治疗组（C组）和地塞米松对照组（D组）。B、C、D组采取盲肠结扎穿孔术构建脓毒症诱发的心肌损伤小鼠模型,A组只行开腹探寻,不结扎和穿刺盲肠。术后40 min,A、 B组腹腔注射150 μL PBS,C组腹腔注射含20 μg Ts-MES的等量PBS,D组腹腔注射含地塞米松（0.3 mg/kg）的等量PBS。术后12 h,每组随机抽取6只小鼠进行超声心动图检测,另抽取8只用于观察72 h生存率。剩余的6只小鼠通过HE染色评价心肌病理变化,ELISA法检测血清中NTPro-BNP和cTnI水平,ELISA法和qRT-PCR法分别检测血清和心肌组织中TNF-α、IL-6、IL-10、TGF-β的表达。结果 B组小鼠的心功能指标（LVEF、LVFS、E/A）及72 h生存率较A组显著下降（P<0.001）,心肌病理损伤评分及血清中NTPro-BNP和cTnI水平明显升高（P<0.01）;与B组相比,C、D两组小鼠的心功能指标和72 h生存率明显回升（P<0.05）,心肌病理损伤评分及血清中NTPro-BNP和cTnI水平明显降低（P<0.05）。小鼠血清和心肌组织中TNF-α和IL-6水平比较：B组小鼠血清和心肌组织中TNF-α和IL-6水平较A组显著升高（P<0.001）,C、D两组较B组显著下降（P<0.05）;IL-10和TGF-β水平：C组较B组显著升高（P<0.05）,D组较B组虽有增高但无统计学差异。结论 Ts-MES可抑制促炎细胞因子的表达并促进调节性细胞因子的表达,进而保护脓毒症诱发的小鼠心肌损伤。     

脓毒症早期炎症因子变化与心肌损伤的相关性研究

目的研究脓毒症大鼠早期血清中炎性因子与心肌损伤之间的相关性。方法 72只雌性清洁级SD大鼠随机分为假手术组(n=36)和脓毒症组(n=36),分别行盲肠探查术、盲肠结扎穿孔术,均于术后3、9、24、36、48和72 h采腹主动脉血检测肌钙蛋白I(c Tn I)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1(IL-1)水平。结果 TNF-α、IL-1于3 h达峰值,后逐渐降低,均高于假手术组(P<0.05);c Tn I于3 h达峰值,后逐渐降低,均高于假手术组(P<0.05);血清TNF-α、IL-1均与c Tn I呈显著正相关。结论脓毒症早期炎症因子的升高与心肌损伤具有正相关性,可作为检测和诊断早期脓毒症心肌损伤的重要指标。     

p38丝裂原激活蛋白激酶抑制剂对脓毒症早期大鼠心肌中炎性因子和细胞凋亡蛋白表达的影响

 目的 探讨脓毒症时心肌损害的原因及p38丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)抑制剂的保护作用。方法 将84只雄性SD大鼠随机分为对照组、实验组和治疗组（n=28）。实验组和治疗组采用腹腔注射内毒素（10 mg/kg）制作脓毒症模型,治疗组同时加p38MAPK抑制剂SB203580予以干预,对照组腹腔注射生理盐水。在不同时间点观察大鼠血清脑钠素（BNP）、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6（IL-6）的浓度及心肌组织中TNF-α、IL-6、凋亡蛋白caspase-9的表达情况。 结果 实验组大鼠血清TNF-α、IL-6进行性升高。对照组心肌组织中仅有微量TNF-α、IL-6及caspase-9表达,而实验组心肌组织中则大量表达。血清TNF-α、IL-6浓度及心肌中caspase-9的表达与心肌损害程度呈显著正相关。应用SB203580后,治疗组血清TNF-α、IL-6浓度显著降低,心肌中caspase-9的表达也减少。但各组血清BNP浓度之间差异无统计学意义,均在正常范围之内。结论 TNF-α、IL-6的大量释放及其在心肌中的表达是脓毒症心肌损害的原因之一,p38MAPK抑制剂SB203580可对脓毒症大鼠心肌损害起保护作用。     

升降散对脓毒症大鼠肾功能的影响

目的：探讨升降散对脓毒症大鼠肾功能的影响。方法：采用盲肠结扎穿孔术（CLP）制备脓毒症模型。健康SD大鼠80只按随机数字表法分为正常组、假手术组、脓毒症组和升降散治疗组,后三组又分为术后6 h、12 h和24 h 3个时间点亚组,每组8只。在造模前72 h开始灌胃给药或生理盐水,连续3 d。术后按各时间点观察存活率,检测各组血清肌酐（Cr）,采用放射免疫分析法测定血清胱抑素C（Cys-C）、白介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平,通过HE染色后光镜观察各组大鼠肾组织形态学变化。结果：与脓毒症组比较,CLP 24 h升降散治疗组大鼠存活率较高,差异有统计学意义（P〈0.05）;CLP 6 h时血清Cys-C、TNF-α和CLP 12 h、24 h时血清Cys-C、TNF-α、IL-6水平明显下降,差异均具有统计学意义（P〈0.05）;升降散可减轻肾组织形态学损伤,阻止损伤范围进一步扩大。结论：升降散对脓毒症大鼠肾功能具有保护作用,其作用环节可能与抑制TNF-α、IL-6等炎症因子的释放有关。     

脓毒症大鼠DAO与TNF-α变化研究

目的研究TNF-α在脓毒症大鼠肠道损伤中的作用。方法 60只SD大鼠随机分成假手术组(n=30),脓毒症组(n=30)。假手术组仅行盲肠探查术,脓毒症组采用CLP制作大鼠脓毒症模型。各组均于术后3、6、12、24与48 h时相点,经腹主动脉采血检测血清DAO、TNF-α水平。结果血清DAO水平逐渐升高,于48 h时达到最高值,高于假手术组(P0.05);血清TNF-α水平在CLP术后即明显高于假手术组(P0.05),在24 h达峰值,随后虽有下降,但仍显著高于假手术组(P0.05)。TNF-α与DAO具有正相关(r=0.897,P0.05)。结论 TNF-α的异常升高,可能在脓毒症大鼠肠道损伤中具重要作用。     

雷公藤内酯醇在脓毒症中抗炎及免疫调节作用研究

目的：探讨在脓毒症模型中雷公藤内酯醇的抗炎及免疫调节的双重作用效应。方法：60只SD大鼠以盲肠结扎手术制作脓毒症模型,分为假手术组、模型组及雷公藤内酯醇组。采用ELISA检测各组血IL-6、IL-1及TNF-α水平,RT—PCR定量检测各组肺组织中rrLR-4mRNA及NF-κBp65mRNA的表达,比较各组中肺的湿／干比值。流式细胞仪检测CD4＋／CD8＋比值变化。结果：与假手术组比,模型组中IL-6、IL-1及TNF-α含量增高,肺组织中TLR-4mRNA、NF-κBp65mRNA的表达均增高,CD4＋／CD8＋的含量降低,湿／干肺比值升高,各组差异有统计学意义（P〈0．05）。与模型组相比,雷公藤内酯醇组中IL-1、IL-6及TNF-α水平,肺组织中TLR-4mRNA及NF-κBp65mRNA的表达,湿／干肺比值均明显降低,CD4＋／CD8＋的含量增高,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：在脓毒症中雷公藤内酯醇能抑制炎症级联反应和调节T淋巴细胞亚群CIM＋／CD8＋比值发挥抗炎及调节免疫平衡状态的治疗作用。     

厄贝沙坦预处理对心肌缺血再灌注损伤的影响

目的探讨厄贝沙坦预处理对大鼠心肌缺血再灌注后的作用及其可能的机制。方法健康雄性SD大鼠38只随机分为3组：假手术组（A组）、缺血/再灌注组（B组）、厄贝沙坦预处理组（C组）;建立大鼠心肌缺血/再灌注（I/R）模型;TTC染色观察并测定心肌梗死面积、心肌结构,比色法检测血清丙二醛（malondialdehyde,MDA）浓度,生化检测肌钙蛋白（troponinI,TNI）含量,ELISA法检测血清肿瘤坏死因子（TNF-α）和白细胞介素-6（IL-6）的浓度。结果与缺血/再灌注组相比,厄贝沙坦组能明显减少心肌梗死面积（P〈0.05）,减轻炎细胞浸润,改善心肌细胞结构,并且能使血清丙二醛（MDA）肌钙蛋白（TNI）和炎性介质（IL-6、TNF-α）的浓度减少（P〈0.01）。结论厄贝沙坦具有抗大鼠心肌缺血再灌注损伤的作用,可能通过减少炎症因子的合成或释放有关。     

miR-208a通过调控QKI5表达对大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响

  目的   研究miR-208a调控QKI5表达对大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响及作用机制。  方法  将雄性SD大鼠32只随机选择分为假手术组（Sham组）、缺血再灌注组（I/R组）、I/R+antagomir阴性对照组（I/R+anta-miR-NC组）和I/R+miR-208a antagomir 组 （I/R+anta-miR-208a组）,构建大鼠心肌I/R模型后检测各组大鼠心脏左室射血分数（LVEF）、左室短轴缩短率（LVFS）和左室每搏量（SV）;ELISA法检测血清肌酐激酶同工酶（CK-MB）和心肌肌钙蛋白（cTnI）以及IL-1β、IL-6和肿瘤坏死因子（TNF-α）水平;采用HE染色观察各组心肌组织病理变化,采用TUNEL染色检测心肌组织细胞凋亡;RT-PCR检测心肌组织miR-208a和QKI5 mRNA表达,Western blot检测心肌组织QKI5蛋白和凋亡蛋白Caspase-3的相对表达水平。  结果  与Sham组比较,I/R组中LVEF、LVFS、SV值降低,心肌细胞凋亡率升高,血清中CK-MB、cTnI和IL-1β、IL-6、TNF-α水平及心肌组织中miR-208a和Caspase-3表达升高,而QKI5表达水平降低（P < 0.05）;与I/R+anta-miR-NC组比较,I/R+anta-miR-208a组中LVEF、LVFS、SV值升高,心肌细胞凋亡率降低,血清中CK-MB、cTnI和IL-1β、IL-6、TNF-α及心肌组织中miR-208a和Caspase-3表达水平降低,而QKI5表达升高（P < 0.05）。相关性分析发现miR-208a与QKI5表达呈负相关。  结论  抑制miR-208a可能通过调控QKI5表达减轻心肌缺血再灌注损伤中炎症反应,发挥心肌保护作用。     

三七总皂苷对重症急性胰腺炎大鼠血清中炎症因子的影响

目的：探讨三七总皂苷（PNS）对重症急性胰腺炎（SAP）大鼠血清肿瘤坏死因子（TNF）α、白细胞介素（IL）6、IL-10水平的影响,为其治疗SAP提供理论基础。方法：SD大鼠随机分为假手术组、SAP组、PNS治疗组,每组30只。各组在术后6、12、24h检测血清淀粉酶、TNF-α、IL-6和IL-10水平,观察胰腺病理改变及各组术后48h死亡率。结果：SAP组各时间点血清淀粉酶、TNF-α、IL-6和IL-10水平均显著高于假手术组（P〈0.01）;PNS治疗组各时间点血清淀粉酶、TNF-α和IL-6显著低于SAP组（P〈0.05）,而IL-10水平显著高于SAP组（P〈0.05）;PNS治疗组胰腺组织损害较SAP组减轻（P〈0.01）;假手术组和治疗组48h死亡率显著低于SAP组（P〈0.05）。结论：PNS可减少促炎细胞因子TNF-α、IL-6产生,上调抗炎细胞因子IL-10,从而达到治疗SAP的目的。     

卡托普利对脓毒症小鼠心肌损伤的保护作用及机制研究

目的:研究卡托普利对脓毒症小鼠心肌损伤的保护作用并探讨其作用机制。方法:按随机数字表法将48只雄性C57BL/6J小鼠（6～8周龄）分为4组:对照组（Control组）、卡托普利组（Captopril组）、脂多糖组（LPS组）、卡托普利+脂多糖组（Captopril+LPS组）,每组12只。实验前30 min,Captopril组和Captopril+LPS组预先经腹腔给予卡托普利（50 mg/kg）处理,Control组和LPS组给予等量生理盐水对照。采用腹腔注射脂多糖（LPS,15 mg/kg）的方法制备脓毒症模型（LPS组和Captopril+LPS组）,Control组和Captopril组给予等量生理盐水。各组于制模后12 h采集标本,采用无创尾套测压法测量小鼠平均动脉压（MAP）,酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测血清炎性因子白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平,HE染色观察心肌组织病理形态改变,高分辨小动物超声成像系统检测心功能,Western印迹检测心肌组织磷酸化核因子-κB p65（p-NF-κB p65）蛋白表达。结果:造模后12 h,Captopril组各项指标与Control组比较差异均无统计学意义（均P＞0.05）。与Control组相比,LPS组MAP下降（q=4.377,P＜0.05）;血清IL-6 、TNF-α水平明显升高（q=4.966、10.440,均P＜0.05）; 左室射血分数（LVEF%）、左室短轴缩短率（LVFS%）水平明显降低（q=6.104、6.390,均P＜0.01）;心肌纤维断裂,间质水肿,炎性细胞浸润加重;心肌组织p-NF-κB p65蛋白表达水平明显升高（q=12.430,P＜0.001）。和LPS组比较,Captopril+LPS组MAP差异无统计学意义（q=2.617,P＞0.05）;血清IL-6、TNF-α水平下降（q=4.085、5.721,均P＜0.05）; LVEF%、LVFS%水平升高（q=4.366、4.297,均P＜0.05）;心肌损伤病理改变减轻;心肌组织p-NF-κB p65蛋白表达水平下降（q=5.124,P＜0.01）。结论:卡托普利可能通过抑制核因子-κB的活化,减少炎性细胞因子（IL-6和TNF-α）产生,抑制脓毒症引起的心肌炎症,从而减轻脓毒症心肌损伤。