二氢杨梅素对高脂饮食诱导的肥胖小鼠肝脏氧化应激和炎症因子的影响

目的观察二氢杨梅素(DMY)对高脂饮食诱导的肥胖小鼠肝脏氧化应激(OS)和炎症因子的影响。 方法将雄性C57BL/6J小鼠随机分成正常对照组、正常DMY组、高脂饮食组、高脂DMY组。实验16周末,小鼠空腹过夜后称重,测定空腹血糖和体脂;生化分析仪检测小鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)和低密度脂蛋白(LDL)的含量;比色法测定小鼠肝脏丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活力;qRT-PCR检测小鼠白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA水平。 结果与正常对照组比较,高脂饮食组小鼠体质量、体脂、血清LDL、TC、TG含量和血糖水平显著升高;肝脏MDA含量和IL-6、IL-8、TNF-α mRNA水平显著升高,SOD活力则显著降低。DMY可显著逆转高脂饮食动物以上指标变化。 结论DMY可抑制高脂饮食诱导的肥胖小鼠肝脏OS和炎症因子mRNA的水平。     

n-3多不饱和脂肪酸对大鼠非酒精性脂肪肝的改善作用

目的 探讨n-3多不饱和脂肪酸(n-3 PUFA)对高脂诱导的Wister大鼠非酒精性脂肪性肝(NAFLD)的改善作用.方法 Wister雄性大鼠30只,分为正常组、模型组、n-3 PUFA组.采用高脂喂养建立NAFLD模型,实验20周后,每组抽出7只大鼠检测血清及肝脏总胆固醇(TG)及三酰甘油(TC);其余3只大鼠肝脏苏木精-伊红(HE)染色;应用实时定量PCR(Real timeqPCR)及Western blot检测肝脏组织单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α) mRNA及蛋白水平.结果 模型组大鼠血清及肝脏TG、TC水平明显高于对照组(P＜0.01),加入n-3 PUFA后血清及肝脏的TG、TC水平明显下降(P＜0.05).HE染色能明显观察到模型组大鼠肝细胞脂肪变性,而n-3 PUFA有明显改善效果.模型组大鼠炎症分子MCP-1、iNOS、TNF-α基因表达水平明显高于对照组(P＜0.05),而n-3 PUFA组与模型组比较,MCP-1、iNOS、TNF-α炎症分子的表达水平明显下降(P＜0.05).结论 高脂喂养能引起大鼠肝脏严重的脂肪变性及炎性反应,而n-3 PUFA起明显的改善作用.     

沙利度胺对内毒素刺激大鼠腹腔巨噬细胞分泌TNF-α和IL-6的影响

目的探讨沙利度胺对内毒素刺激大鼠腹腔巨噬细胞分泌TNF-α和IL-6的影响。方法分离、培养Wistar大鼠腹腔巨噬细胞，贴壁后的腹腔巨噬细胞分为空白对照组、内毒素（LPS）组、沙利度胺处理组、沙利度胺对照组。空白对照组不予任何处理；沙利度胺处理组提前2h加入不同浓度的沙利度胺，2h后加入内毒素；LPS组加入LPS，沙利度胺对照组仅加入沙利度胺80μg／mL。细胞培养4h后取上清液测TNF-α和IL-6浓度。结果空白对照组大鼠腹腔巨噬细胞上清TNF-α和IL-6含量均很低，沙利度胺对照组与空白组无显著性差异。大鼠腹腔巨噬细胞经LPS诱导后，细胞上清中TNF-α及IL-6含量显著增高，提前2h沙利度胺预处理后，TNF-α和IL-6的释放明显受到抑制，抑制作用随沙利度胺预处理浓度的增大而增强。结论沙利度胺能抑制大鼠巨噬细胞对TNF-α和IL-6等促炎细胞因子的释放，可能是其对抗脓毒症的机制之一。     

沙利度胺联合VAD方案化疗对多发性骨髓瘤病人

目的 了解多发性骨髓瘤(MM)病人血清白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达情况,并探讨沙利度胺联合化疗对MM病人血清IL-6、TNF-α的影响.方法 用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法测定30例正常人与79例MM病人血清IL-6、TNF-α的水平,并对MM病人不同临床分期,沙利度胺联合化疗前、后检测结果进行比较.结果 MM病人血清IL-6、TNF-α的水平明显高于正常对照组,差异有显著性(t=8.117、11.525,P<0.001).Ⅱ、Ⅲ期病人血清IL-6、TNF-α的表达水平明显高于Ⅰ期病人(F=.233、10.273,q=3.012～6.29,P<0.05).55例治疗有效的MM病人血清IL-6、TNF-α的水平治疗后较治疗前明显下降(t=3.153、.361,P<0.01);治疗无效的22例MM病人治疗前、后血清IL-6、TNF-α水平无明显差异(t=0.850、0.913,P>0.05).结论 血清IL-6、TNF-α的水平在MM病人中呈高表达,且与其临床分期有关;沙利度胺联合化疗可显著降低MM病人血清IL-6、TNF-α的水平;检测血清IL-6、TNF-α的水平可作为判断MM疗效及病情的辅助指标.     

一种快速建立大鼠动脉粥样硬化模型的方法

目的:探讨一种简单有效的大鼠动脉粥样硬化模型。方法:将健康雄性SD大鼠40只按照随机数字表法分为高脂维生素组、高脂组、维生素D组、对照组各10只。4周后检测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)、白介素1(IL-1)、白介素6(IL-6)、白介素17(IL-17)和C反应蛋白(CRP),并分离各组大鼠的主动脉、肝脏和心脏组织做HE染色。结果:对照组和维生素D组的大鼠体重一直处于增加状态,对照组的体重增加幅度明显高于其他各组(P0.05或P0.0001)。4周末与对照组比较,高脂维生素D组和高脂组的心脏重量均有所降低(P0.0001),维生素D组的心脏重量虽然比对照组有所降低,但两组无明显差异(P0.05)。各组间大鼠心脏与体重比有明显差异(P0.05),但两两比较,高脂维生素组与高脂组和维生素D组的大鼠心脏与体重比均有统计学意义(P0.0001)。高脂维生素组的TC、TG、LDL、HDL、IL-1、IL-6、IL-17和CRP均明显高于维生素D组和对照组(P0.05)。HE染色高脂维生素组有典型的动脉粥样硬化斑块;而高脂组有斑块但是没有高脂维生素组典型,维生素D组没有斑块但是可见平滑肌紊乱。结论:给予大鼠高脂饮食联合腹腔注射大剂量维生素D可以简单有效的建立动脉粥样硬化模型。     

甘草素调节LKB1/AMPK信号通路对冠心病大鼠的心脏保护作用研究

目的 探讨甘草素(Liq)调节肝激酶B1(LKB1)/腺苷酸激活蛋白激酶(AMPK)信号通路对冠心病大鼠的心脏保护作用。方法 Wistar大鼠随机分为对照组及造模组，造模组通过高脂饲料喂养以及腹腔注射垂体后叶素建立冠心病大鼠模型，将造模成功的冠心病大鼠随机分为冠心病组、Liq低剂量(Liq-L)组(100 mg/kg Liq)、Liq高剂量(Liq-H)组(300 mg/kg Liq)、Liq-H+Radicicol组(300 mg/kg Liq+40 mg/kg Radicicol)。干预结束后，检测心功能[左心室收缩末期直径(LVSD)、射血分数(EF)、左心室舒张末期直径(LVDD)和左心室缩短分数(FS)]及血脂水平[总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)和低密度脂蛋白(LDL)];ELISA检测血清中炎性因子[白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α]及氧化应激因子[谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)]水平；分离心脏组织，HE染色观察组织病理变化；Western Blot检测p-AMPK/AMPK、LKB1表达水平。结果 与对照组相比，冠心病组大鼠心脏组织排列紊乱，有大量炎性细胞浸润，大鼠IL-1β、IL-6、TNF-α水平、TC、TG、LDL、LVSD、LVDD、MDA显著增加，p-AMPK/AMPK、LKB1表达、HDL、EF、FS、SOD、GSH显著降低(P<0.05);与冠心病组相比，Liq-L组、Liq-H组病理损伤得到缓解，IL-1β、IL-6、TNF-α水平、TC、TG、LDL、LVSD、LVDD、MDA显著降低，p-AMPK/AMPK、LKB1表达、HDL、EF、FS、SOD、GSH显著增加(P<0.05);与Liq-H组相比，Liq-H+Radicicol组病理损伤加重，IL-1β、IL-6、TNF-α水平、TC、TG、LDL、LVSD、LVDD、MDA显著增加，p-AMPK/AMPK、LKB1表达、HDL、EF、FS、SOD、GSH显著降低(P<0.05)。结论 Liq可能通过激活LKB1/AMPK信号通路发挥对冠心病大鼠心脏的保护作用。     

苦瓜蛋白对新西兰兔动脉粥样硬化形成及其单核细胞迁移的影响

目的 探讨苦瓜蛋白对新西兰兔动物模型动脉粥样硬化(Atherosclerosis,As)形成的影响及其对单核细胞趋化迁移的影响,从而进一步证实苦瓜蛋白是否有抗动脉粥样硬化作用及其部分作用机制.方法 新西兰兔分为3组,即正常对照组(正常兔饲料),高脂组(正常兔饲料中含2%的胆固醇),苦瓜蛋白组(正常兔饲料中含2%的胆固醇和1.5%的苦瓜蛋白).各组按其饲养方法饲养,90天后处死动物,分离血清测定各组血脂变化,苏丹IV染色和NIH软件观察分析主动脉As病变,免疫化学检测血管壁上趋化因子-基质细胞衍生因子(Stromal cellderived factor-1,SDF-1)的表达,Transwell测定苦瓜蛋白对单核细胞THP-1趋化迁移的影响.结果 苦瓜蛋白组血浆总胆固醇(TC,271.4±73.1 mg/L)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C,235.7±65.3 mg/L)均显著低于高脂组(TC,836.3±213.2 mg,/L;LDL-C,636.1±176.8 mg,/L),苦瓜蛋白组血清甘油三酯(TG,114.3±97.6 mg/L)与高脂组(TG,120.8±23.4 mg,/L)比较差异无显著性,但高于对照组TG(68.2±10.3 mg/L);高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平三组比较差异无显著性;苦瓜蛋白组As病变面积(27.6%±4.4%)低于高脂组(71.3%±5.1%);管壁上趋化因子SDF-1的表达有所上调,但明显低于高脂组;Transwell实验显示苦瓜蛋白可以抑制SDF-1趋化单核细胞THP-1的迁移.结论 苦瓜蛋白具有抗As作用,并部分通过抑制单核细胞向血管壁的趋化迁移来实现的.     

脂肝清冲剂对实验大鼠非酒精性肝炎影响的实验研究

目的:探讨脂肝清冲剂对饮食诱导的大鼠非酒精性肝炎模型的影响。方法:60只雌雄各半Wistar大鼠随机分为4组:正常对照组、模型对照组、中药治疗组(1g/kg),还原型谷胱甘肽治疗组。实验组给予改良的高脂饲料喂养,正常组以全价营养颗粒饲料喂养,各治疗组从喂养8周后灌服药物,模型对照组灌服生理盐水1ml/100g,正常对照组灌服等量生理盐水。8周末处死实验动物。测定丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆固醇(TC)及甘油三酯(TG),各组大鼠肝组织HE染色肝细胞脂肪变性分级比较,各组大鼠肝组织苏丹红染色脂滴半定量分析比较。结果:实验组大鼠肝组织TC、TG浓度和血清TC、TG含量,血清ALT、AST活性均比正常组明显增高,同时伴典型的脂肪性肝炎的组织改变。脂肝清冲剂治疗后大鼠肝组织TC、TG浓度和血清TC、TG含量以及反映肝脏炎症的血清ALT、AST活性均明显下降,大鼠的体重和肝重均有所下降,明显低于正常组,中药治疗组的肝细胞变性分级程度轻于模型组,虽然中药组肝组织HE染色肝细胞脂肪变性分级较西药组无显著性差异,但经过苏丹红染色的图像半定量分析结果显示,中药治疗组大鼠肝脏油红染色面积明显小于模型组,差异显著。结论:脂肝清冲剂能通过减少体重和肝重、调节脂质代谢,改善肝功能,降低肝脏的脂质沉积有效地治疗大鼠非酒精性肝炎。     

高脂诱导非酒精性脂肪性肝病小鼠肝脏Chemerin及其受体的表达

目的研究高脂饮食诱导非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)小鼠肝脏Chemerin及Chemerin受体(CMKLR1)的表达情况。方法22只C57BL/6小鼠随机分为对照组(n=10)和高脂组(n=12),对照组给予基础饲料喂养,高脂组给予高脂饲料喂养,连续喂养18周后进行腹腔注射葡萄糖耐量试验(IPGTT)和胰岛素耐量试验(ITT),检测血清游离脂肪酸(FFA)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)、谷丙转氨酶(ALT);ITT结束后第3天处死小鼠,测肝脏TG含量,并做HE染色观察肝脏形态变化;采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞因子Chemerin、CMKLR1及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA水平的表达。结果高脂组与对照组相比,胰岛素的敏感性下降(P<0.05),肝脏HE染色存在明显的炎症及肝细胞脂肪变,肝脏的TG含量升高(P<0.05),血脂紊乱及肝功能损伤,肝脏Chemerin的mRNA水平下降(P<0.05),CMKLR1及TNF-α的mRNA水平表达上升(P<0.05)。结论经高脂喂养18周后小鼠NAFLD造模成功并伴有胰岛素抵抗,在这种模型中肝脏Chemerin及CMKLR1的表达改变可能与NAFLD的发病有关。     

基于Notch1信号通路研究通心络胶囊对糖尿病小鼠主动脉的保护作用

目的 观察通心络胶囊对糖尿病(DM)小鼠胸主动脉血管内皮细胞损伤的保护作用。方法构建DM小鼠模型并检测空腹血糖、血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL-C)、高密度脂蛋白(HDL-C)水平;ELISA法检测血清白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-18(IL-18)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)等炎症因子的水平;HE染色和TUNEL法观察胸主动脉病理学特征及细胞凋亡情况;real-time PCR法及Western-Blot法检测胸主动脉Notch1、Bcl-2、Bax、Caspase-3 mRNA表达或蛋白表达。结果 与对照组比较,模型组血糖、TG、TC、HDL及LDL均显著升高(P<0.01);且通心络组LDL较模型组显著降低(P<0.05)。与模型组比较通心络组血清IL-1β、IL-18和TNF-α显著降低(P<0.05)。TUNEL染色可见通心络组内皮细胞凋亡水平相比模型组有明显改善(P<0.05)。通心络组Bax、Caspase-3 mRNA及蛋白表达较模型组显著降低(P<0.05),Notch1、Bcl-2蛋白表达...