脑缺血再灌注时鼠脑纹状体区细胞外液半胱氨酸含量变化及丹参的影响

目的动态观察脑缺血再灌注时鼠脑纹状体区细胞外液半胱氨酸（Ｃｙｓ）含量变化及丹参的影响，探讨Ｃｙｓ对缺血性神经元的损害作用。方法应用脑内微透析技术，采用高灵敏度的高压液相色谱－电化学检测手段，动态观察沙土鼠前脑缺血３０分钟再灌注１２０分钟时，纹状体区细胞外液Ｃｙｓ的变化。结果前脑缺血３０分钟时，细胞外液Ｃｙｓ浓度迅速升高，达缺血前的１８倍。再灌注３０、６０分钟时，分别为缺血前的５倍和２倍，９０分钟时基本恢复到缺血前的水平。丹参治疗组脑缺血时细胞外液Ｃｙｓ的含量较对照组低。结论Ｃｙｓ参与了脑缺血再灌注引起的损伤，而丹参可降低Ｃｙｓ水平，从而对缺血脑组织起到保护作用。     

脑缺血再灌注脑内纹状体区细胞外液浴胱甘肽的动态变化及丹参的…

采用脑内微透析技术，应用高压液相色谱电化学检测方法（ＨＰＬＣ－ＥＤ），活体动态观察沙土鼠全脑缺血３０分钟，再灌注１２０分钟的细胞外液中谷胱甘肽（Ｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅ，ＧＳＨ）的变化及丹参对它的影响，结果显示：全脑缺血后，细胞外液ＧＳＨ水平迅速升高（Ｐ〈０．０１），缺知３０分钟达高峰为缺血前的５。８２倍，再灌注后ＧＳＨ水平明显降低，于３０分钟趋于正常，脑缺血前３０分钟给予丹参注射液不影响细胞外液Ｇ     

脑缺血再灌注脑内纹状体区细胞外液谷胱甘肽的动态变化及丹参的影响

采用脑内微透析技术，应用高压液相色谱电化学检测方法（ＨＰＬＣ－ＥＤ），活体动态观察沙土鼠全脑缺血３０分钟，再灌注１２０分钟的细胞外液中的谷胱甘肽（Ｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅ，ＧＳＨ）的变化及丹参对它的影响。结果显示：全脑缺血后，细胞外液ＧＳＨ水平迅速升高（Ｐ＜０．０１），缺血３０分钟达高峰为缺血前的５。８２倍。再灌注后ＧＳＨ水平明显降低，于３０分钟趋于正常。脑缺血前３０分钟给予丹参注射液不影响细胞外液ＧＳＨ水平。表明脑缺血及再灌注期，ＧＳＨ反应性增高。ＧＳＨ作为内源性抗氧化剂及ＮＭＤＡ受体拮抗剂在脑缺血损伤中起重要作用。     

脑缺血纹状体细胞外液单胺类介质及其代谢物的微透析研究

目的观察脑缺血再灌注时鼠脑纹状体区细胞外液（ＥＣＦ）多巴胺（ＤＡ）、去甲肾上腺素（ＮＥ）、５－羟色胺（５－ＨＴ）及其代谢产物高香草酸（ＨＶＡ）和５－羟吲哚乙酸（５－ＨＩＡＡ）的动态变化。方法采用脑内微透析技术，用高压液相色谱测定了前脑缺血３０ｍｉｎ、再灌注１２０ｍｉｎ时ＥＣＦＤＡ、ＮＥ和５－ＨＴ的变化。结果脑缺血１０ｍｉｎ时ＥＣＦＤＡ、ＮＥ迅速升高为缺血前的２８２和９１４倍，持续整个缺血期，再灌注后迅速下降达缺血前水平。脑缺血期ＨＶＡ、５－ＨＩＡＡ迅速下降，在缺血３０ｍｉｎ时达缺血前的４５％和５２％，再灌注后升高并在再灌注后６０ｍｉｎ，９０ｍｉｎ达缺血前的１５０％、１１３％。结论单胺类介质代谢紊乱参与了缺血性神经元损害     

大鼠局灶性脑缺血时细胞凋亡与c-fos表达

目的：研究凋亡细胞在脑缺血及再灌注后的时空表达方式及原癌基因ｃ－ｆｏｓ的表达，以期探讨脑缺血时ｃ－ｆｏｓ表达与细胞凋亡的关系。方法：用线栓法建立局灶性脑缺血再灌注模型，ＤＮＡ缺口末端标记法原位检测细胞凋亡，免疫组化检测ｃ－ｆｏｓ的表达。结果：缺血侧鼠脑凋亡细胞数随再灌注时间延长而增多，凋亡细胞主要分布于额顶叶皮层与纹状体，以梗死灶边缘区密度最高。正常组、假手术组未见ｃ－ｆｏｓ表达，缺血及再灌注各组     

缺血再灌注时大鼠脑细胞外液中腺苷含量的变化及巴曲酶的影响

动态观察脑缺血及再灌注时鼠脑细胞外液中腺苷及其代谢产物的变化规律以及巴曲酶对此的影响。方法在大鼠四血管结扎缺血再灌注模型上，用微透析及高效液相色谱技术测定在缺血及再灌注时各时间点脑细胞外液中腺苷及其代谢产物的含量。结果对照组的腺苷、肌苷（Ｉｎｏ）、次黄嘌呤（Ｈｙｐ）、黄嘌呤（Ｘａｎ）在缺血和再灌注后的各时间点均显著升高。腺苷出现２个高峰，分别在缺血后２０分钟及再灌注１５分钟时，到再灌注６０分钟又回落到接近基础灌流水平。Ｉｎｏ、Ｈｙｐ及Ｘａｎ只在再灌注３０分钟时出现１个高峰，到再灌注６０分钟仍滞留在较高水平。巴曲酶组腺苷、Ｉｎｏ、Ｈｙｐ及Ｘａｎ的变化规律与对照组相同，但升高的幅度低于对照组。结论脑缺血及再灌注损伤时腺苷的水平明显升高，呈现缺血及再灌注时的２个高峰。腺苷代谢产物的升高时间略滞后，仅在再灌注３０分钟时达峰值。巴曲酶可抑制腺苷及其代谢产物的升高，可能与其减轻损伤程度有关     

鼠脑反复缺血时纹状体单胺类递质的变化

目的研究反复缺血再灌注鼠脑纹状体单胺类递质变化规律。方法用４血管夹闭的方法制成ＳＤ大鼠脑反复缺血模型，利用右侧纹状体活体透析和高压液相电化学方法检测单胺类递质及其代谢产物。结果缺血期间细胞外液多巴胺（ＤＡ）含量增加１００倍，５羟色胺（５ＨＴ）增高３０倍，它们的代谢产物３，４－二羟苯乙酸、高香草酸、５羟吲哚乙酸分别降为基础值的９％、２０％和５％。灌注１２０分钟时，ＤＡ、５ＨＴ及其代谢产物均恢复到基础值水平。灌注２４小时，ＤＡ、５ＨＴ及其酸性代谢产物仍稳定在基础值水平。灌注３５小时，ＤＡ和５ＨＴ再次出现高峰，ＤＡ增加１２０倍，５ＨＴ增加３６倍，而它们的酸性代谢产物却降至最低点。灌注３８小时，ＤＡ、５ＨＴ及其代谢产物都恢复到基础值水平。结论脑缺血再灌注，在缺血即刻和再灌注３５小时ＤＡ和５ＨＴ两次过量释放，引发ｃＡＭＰ瀑布反应，激发自由基产生，与兴奋性氨基酸共同作用，是导致纹状体神经元缺血死亡的重要原因     

大鼠脑缺血再灌注后脑组织C—fos原癌基因表达水平的变化

本文采用核酸分子斑点杂交技术制作脑缺血模型，观察脑缺血１０分钟及再灌注后不同时间脑组织Ｃ－ｇｏｓ原癌基因的变化。结果发现：与对照组比较，脑缺血１０分钟，Ｃ－ｆｏｓ ｍＲ－ＮＡ即增加。缺血后再灌注４５分钟Ｃ－ｆｏｓｍＲＮＡ达到峰值，１５０分钟降至对照组水平，提示脑缺血后再灌注可诱导脑组织Ｃ－ｆｏｓ原部基因－过性增高。     

用逆转录-多聚酶链反应检测局灶脑缺血及再灌注后c-fos和c-jun基因表达

本研究应用逆转录－多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）方法检测大鼠局灶脑缺血模型中即早基因ｃ－ｆｏｓ和ｃ－ｊｕｎ的表达。结果发现缺血１５ｍｉｎ时可见到ｃ－ｆｏｓ和ｃ－ｊｕｎｍＲＮＡ表达缺血３０ｍｉｎ时引起轻微左侧局灶脑缺血改变，可诱导左侧局灶脑缺血区ｃ－ｆｏｓ和ｃ－ｊｕｎｍＲＮＡ广泛的表达；缺血９０ｍｉｎ后，导致大面积局灶脑缺血改变，诱导上述两种基因在同侧缺血区与同侧非大脑中动脉（ＭＣＡ）供血区的海马中表达。后者有相当轻的缺血症状。再灌流６０ｍｉｎ后诱导两种基因的共同表达立即达高峰。我们采用标准化的大鼠局灶脑缺血及再灌注模型，在分子水平上动态观察缺血／再灌注后基因变化特征，为缺血性脑损害的防治提供实验依据。     

鼠脑反复缺血再灌注海马6种氨基酸、单胺递质及其代谢产物变化的研究

目的：研究脑反复缺血后海马细胞外液氨基酸和单胺递质及其代谢产物的变化规律。方法：采用Ｐｕｌｓｉｎｅｌｌｉ和Ｂｒｉｅｒｌｅｙ４血管闭塞的方法,使鼠脑反复缺血,海马微管透极与高压液相电化学检测,观察细胞外谷氨酸（Ｇｌｕ）,天门冬氨酸（Ａｓｐ）,谷氨酰胺,牛磺酸、丙氨酸,丝氨酸,多巴胺（ＤＡ）,５－羟色胺（５－ＨＴ）及其代谢产物浓度的变化。结果：缺血期,Ｇｌｕ和Ａｓｐ骤然增高５０倍和３０倍。缺血期ＤＡ和５－ＨＴ含量分别增加３０倍和５０倍,随后逐渐下降,再灌注１００ｍｉｎ恢复到基线水平,与此同时,其酸性代谢产物３,４－二羟苯乙酸（ＤＯＰＡＣ）,高香草酸（ＨＶＡ）,５－羟吲哚乙酸（５－ＨＩＡＡ）在缺血期明显下降。结论：缺血期海马细胞外液兴奋性氨基酸和单胺递质急剧大量释放并触发膜离子通道改变。Ｃａ＾＋超载,自由基反应,共同     

大鼠脑缺血再灌注后脑组织C－fos原癌基因表达水平的变化

本文采用核酸分子斑点杂交技术制作脑缺血模型，观察脑缺血１０分钟及再灌注后不同时间脑组织Ｃ－ｆｏｓ原癌基因表达的变化，结果发现：与对照组比较，脑缺血１０分钟，Ｃ－ｆｏｓｍＲ－ＮＡ即增加（Ｐ＜０．０５）。缺血后再灌注４５分钟Ｃ－ｆｏｓｍＲＮＡ达到峰值（Ｐ＜０．０１），１５０分钟降至对照组水平，提示脑缺血后再灌注可诱导脑组织Ｃ－ｆｏｓ原癌基因一过性增高     

缺血预处理对沙土鼠脑缺血再灌注后线粒体功能的影响

目的 观察缺血预处理对沙土鼠脑缺血及再灌注后脑组织线粒体功能的影响。方法 用沙土鼠双侧颈总动脉结扎制成全脑缺血模型（缺血２０分钟,再灌注３０分钟）。动物随机分为预缺血组、模型组和假手术组。预缺血组给予两次（各２分钟）缺血预处理（间隔４８小时）。用氧电极法测定呼吸功能和呼吸链的氧化酶（ＮＡＤＨ氧化酶、琥珀酸氧化酶、细胞色素Ｃ氧化酶）活性。结果 缺血模型组动物的呼吸控制率、磷氧比及氧化磷酸化效率均较假     

沙土鼠脑缺血和再灌流期间羟自由基的变化及氯胺酮对其影响

目的 研究脑缺血和再灌注期间的羟自由基变化及氯胺酮对其影响。方法 制作沙土鼠前脑缺血再灌注模型,脑缺血１０分钟,再灌流６０分钟,分为手术组、缺血组、血再灌流组和氯胺酮组。应用高效液相色谱测定纹状体和海马羟自由基（ＯＨ）三磷酸腺苷（ＡＴＰ）和多巴胺（ＤＡ）含量。结果 海马二羟基苯（２,３－ＤＨＢＡ）一缺血组和缺血再灌流组均明显高于假手术组;缺血再灌注组２,３－ＤＨＢＡ的含量高于缺血组;脑缺血和再灌注     

缺血再灌注对鼠脑血管内皮生长因子表达的影响

目的 了解血管内皮生长因子（VEGF）在一过性全脑缺血再灌注鼠脑表达的动态变化。方法 采用Pulisnelli改良法四血管堵塞全脑缺血再灌注模型,用免疫组织化学方法观察了全缺血15min再灌注2－14d时,VEGF表达的动肪变化。结果 全脑缺血15min再灌注6h VEGF即可在大脑皮层,纹状体及丘脑等区域的血管内皮细胞表达,1d达高峰,一直持续到缺血后再灌注3d,结论 脑缺血后再灌注可上调VEGF在大脑皮质,纹状体及丘脑等区域内皮细胞的表达,VEGF可能通过促进血管内皮细胞生长对缺血性神经元损伤起一定的作用。     

神经节苷脂对缺血性大鼠脑保护作用的研究

目的探讨神经节苷脂（ＧＭ１）的脑保护作用及其可能机制。方法用四血管闭塞（４ＶＯ）全脑缺血再灌注模型,用高效液相色谱仪柱前衍生色谱法测定假手术组、缺血３０ｍｉｎ再灌注６０ｍｉｎ生理盐水（ＮＳ）处理组、缺血３０ｍｉｎ再灌注６０ｍｉｎＧＭ１处理组的海马组织兴奋性氨基酸（ＥＡＡ）含量,并观察缺血３０ｍｉｎ再灌注４ｄ海马ＣＡ１区病理变化。结果缺血再灌注ＮＳ处理组海马组织ＥＡＡ含量显著性降低（Ｐ＜０．０１）,海马ＣＡ１区多数神经元坏死,残存神经元呈较严重缺血性改变,ＧＭ１处理组上述生化病理改变明显为轻。结论推测ＧＭ１可调控缺血再灌注早期ＥＡＡ的过度释放和（或）重摄取受阻,减轻其在细胞外堆聚引起的兴奋毒性损伤,具有脑保护作用。     

大鼠局灶性脑缺血再灌注时c-fos、bcl-2蛋白的表达

目的：为探讨细胞凋亡在脑缺血再灌注时脑损伤过程中的作用。方法：采用免疫组化法检测大鼠脑缺血再液注不同时间内ｃ－ｆｏｓ、ｂｃｌ－２蛋白表达的水平。结果：①脑缺血再灌注时在缺血侧皮层和基底节区可见ｃ－ｆｏｓ阳性表达,并于缺血 ３０ｍｉｎ再灌注１ｈ时阳性表达达高峰;②脑缺血再灌注时缺血侧皮层和基底节区均有ｂｃｌ－２阳性表达,于缺血２ｈ再灌注３ｈ时阳性表达达高峰。结论：ｃ－ｆｏｓ和ｂｃｌ－２参与大鼠脑缺血再灌注时缺血性细胞损伤的发生。     

活体溶出伏安法测定鼠脑缺血时纹状体单胺神经递质的含量变化

应用活体溶出伏安法（ＩＶＶ）连续测定沙土鼠脑缺血再灌流模型纹状体单胺类神经递质多巴胺（ＤＡ）５－羟吲哚乙酸（５－ＨＩＡＡ），并同期测定鼠脑皮质灌流量、脑电活动及腐胶含量。结果发现：１、脑缺血期纹状体ＤＡ与５－ＨＩＡＡ显著增高；再灌流期ＤＡ明显下降，５－ＨＩＡＡ仅在１５ｍｉｎ时有一过性降低，但两者均明显高于缺血前水平。２、脑缺血时脑皮质灌流量显著下降（下降９５％），相应时间的脑电活动明显抑制；再灌流期皮质灌流量有所恢复，但仍明显低于缺血前（约为其３０％），脑电活动亦无恢复。３、脑缺血时脑皮质腐胺含量下降，而再灌流３０ｍｉｎ时显著增高，在９０ｍｉｎ时恢复至正常水平。     

光化学诱导鼠大脑中动脉闭塞及再通模型

应用光化冷光源仪（金属卤化物灯）诱导鼠大脑中动脉（ＭＣＡ）闭塞，并于光照血管局部滴注尼莫地平致闭塞血管再通。结果发现：光照３０ｍｉｎ后鼠脑皮质及基底节局部脑组织血流量（ｒＣＢＦ）明显下降，且维持９０ｍｉｎ以上。同时，光照侧脑组织含水量明显增加。尼莫地平局部滴注２０ｍｉｎ后皮质ｒＣＢＦ则有所回升，用药后３０ｍｉｎｒＣＢＦ明显上升，为缺血前ｒＣＢＦ的１３１．１％。组织病理形态观察显示：光照例鼠ＭＣＡ及其周围毛细血管管腔内均有明显血栓形成，缺血１２ｈ梗塞区神经元、线粒体及内质同明显肿胀，神经元坏死。再灌注后病理损害更为明显。实验鼠先照例额、顶叶皮质及新纹状体出现边界清晰、范围较恒定的苍白梗塞灶。该模型的建立为进一步研究脑缺血及脑梗塞提供了新的工具。     

MAP2在沙土鼠短暂性前脑缺血损伤中表达的变化

目的：研究短暂性脑缺血再灌注损伤时微管相关蛋白（MAP2）表达的动态变化及意义。方法：采用沙土鼠一过性前脑缺血再灌模型，以免疫组织化学染色法，观察缺血5min再灌注0h,3h,24h,48h,72h,7d海马区MAP2表达的动态变化以及观察相应时间点海马区神经元病理组织学变化。结果：在正常的沙土鼠脑内，神经元呈MAP2染色阳性反应，在缺血5min再灌注后，海马区出现了MAP2染色减弱或消失区，随再灌注时间的延长，染色减弱或消失区扩大，但主要限经马区，相应神经元的病理组织学变化也随再灌注时间的延长而加重。结论：MAP2免疫组织化学法可显示神经元形态及脑缺血超早期病变；短暂性脑缺血再灌注损伤在脑内并不是均一地发生，而是存在着选择性易损伤区，海马CA1区发生了广泛的迟发性神经元死亡，MAP2的分解破坏或合成障碍，可能参与了脑缺血再灌注的损伤机制。     

神经节苷脂对缺血性大鼠脑损伤作用的研究

目的 探讨神经节苷脂（ＧＭ１）的脑保护作用及其可能机制。方法 用四血管闭塞４ＶＯ）全脑缺血再灌注模型,用高效液相色谱仪柱前衍生色谱法测定假手术组,缺血３０ｍｉｎ再灌注６０ｍｉｎ生理盐水（ＮＳ）处理组、缺血３０ｍｉｎ再灌注６０ｍｉｎＧＭ１处理组的海马组织兴奋性氨基酸（ＥＡＡ）含量,并观察缺血３０ｍｉｎ再灌注４ｄ海马ＣＡ１区病理变化。结果 缺血再灌注ＮＳ处理组海马组ＥＡＡ含量显著性降低,海马ＣＡ１区多