RT-PCR分析nm23基因在乳腺肿瘤中的转录表达

【目的】探讨nm2 3基因mRNA在乳腺癌组织、乳腺良性肿瘤组织、癌旁组织中的表达及其与临床的关系。【方法】采用半定量RT PCR方法 ,检测 30例乳腺癌组织、8例配对癌旁组织、9例慢性纤维囊性乳腺病和 6例乳腺纤维腺瘤组织nm2 3H1和nm2 3H2 mRNA的表达。【结果】①淋巴结阳性的原发灶组织nm2 3H1mRNA表达明显低于淋巴结阴性的原发灶组织 ,Ⅲ期乳腺癌组织nm2 3H1mRNA水平较Ⅰ、Ⅱ期明显低。②多因素分析发现淋巴结转移与nm2 3H1mRNA表达有显著性相关。③nm2 3H2 mRNA与乳腺癌患者肿瘤大小、淋巴结状况、绝经状况、激素受体状况、TNM分期之间无显著性相关。④nm2 3基因的两个亚型H1和H2 的mRNA在 4种不同乳腺组织中均有表达。【结论】nm2 3H1基因mRNA表达强度与淋巴结转移呈负相关。在乳腺癌转移过程中 ,nm2 3H1mRNA较nm2 3H2 mRNA起更重要的作用。nm2 3H1和nm2 3H2 基因mRNA在乳腺纤维腺瘤、慢性纤维囊性乳腺病和癌旁组织均有表达     

bcl-2、nm23基因异常表达与乳腺癌病理组织学分级及转移的相关性研究

目的：乳腺癌手术标本及淋巴结转移组织中bcl-2、nm23基因异常表达与乳腺癌的临床分期、组织学分级及淋巴结转移的相关性研究。方法：用免疫组化S-P法检测乳腺手术标本、淋巴结转移组织中bcl-2、nm23基因的表达。结果：86例乳腺癌原发灶中bcl-2、nm23基因高表达阳性率，在临床病理分期中为51．2％，组织学分级为53．5％，与肿瘤分化程度呈正相关(P＜0．01)。48例淋巴结转移组织中nm23基因高表达阳性率为52．1％，而阴性淋巴组织中表达率为73．7％，组间差异显(P＜0．05)。结论：检测bcl-2、nm23基因的表达状况可作为判断乳腺癌临床病理组织学分级和恶性程度及有无转移的良好评判指标。     

乳腺浸润性导管癌中 SATB1和 BRMS1的表达及与淋巴转移的相关性

目的：探讨核基质结合区结合蛋白－1（SATB1）及乳腺癌转移抑制基因1（BRMS1）在乳腺浸润性导管癌（ IDC）原发灶、腋窝淋巴结转移灶中的表达,分析SATB1与临床病理参数的关系及两者表达的相关性。方法采用免疫组化SP法及qRT－PCR检测51例乳腺IDC组织、17例对应腋窝淋巴结转移灶组织、32例配对癌旁乳腺组织中SATB1、BRMS1蛋白及mRNA的表达情况。结果在原发灶组织、腋窝淋巴结转移灶组织SATB1阳性表达率分别是76.47％、82.35％,均高于癌旁组织的28.12％（ P ＜0.05）;BRMS1蛋白的表达率分别是25.49％、23.53％,均低于于癌旁组织的87.50％（ P＜0.05）;在原发灶组织、腋窝淋巴结转移灶组织SATB1 mRNA表达量分别是癌旁组织的3.88、6.06倍;BRMS1 mRNA表达量分别是癌旁组织的0.36、0.35倍,差异均有统计学意义（ P＜0.05）;SATB1蛋白及mRNA、BRMS1 mRNA在腋窝淋巴结有转移的乳癌原发灶中的表达与腋窝淋巴结无转移乳癌原发灶间存在明显差异（P＜0.05）;在原发灶和淋巴结转移灶中的表达差异无统计学意义（P＞0.05）。 SATB1蛋白和mRNA表达与腋窝淋巴结转移数目、临床分期有关（P＜0.05）,与患者的年龄、肿瘤大小、肿瘤病理学分级、雌激素受体、孕激素受体、人表皮生长因子受体2、增殖细胞核抗原（ Ki－67）及绝经状态无关（ P＞0.05）。相关分析结果显示在原发灶组织、腋窝淋巴结转移组织中SATB1、BRMS1蛋白及mRNA表达均无相关性（P＞0.05）。结论 SATB1、BRMS1异常表达与IDC发生、发展、淋巴转移有密切关系,SATB1有望成为评估乳腺IDC淋巴结转移潜能的分子标记物。     

乳腺癌中RIZ1的表达及其临床意义初探

目的研究RIZ1基因mRNA表达的改变与乳腺癌发生及与患者相关临床和病理特征之间的关系。方法采用半定量RT-PCR方法检测34例乳腺癌标本及相应癌旁组织、15例乳腺良性肿瘤RIZ1基因mRNA的表达状况，并结合相关指标进行分析。结果RIZ1基因mRNA在乳腺癌中的表达明显低于癌旁乳腺组织与乳腺良性肿瘤组织，差异均有显著性（均P〈0．05）。RIZ1基因mRNA在乳腺癌中的表达与年龄、肿瘤TNM分期、淋巴结转移、激素受体（ER）状况无相关关系（均P〉0．05）。结论：RIZ1基因mRNA表达降低可能与乳腺癌的发生相关。     

IGF-1在乳腺癌中的表达与临床意义

目的:探讨胰岛素样生长因子-1(IGF-1)在乳腺癌中的表达及临床意义.方法:采用免疫组织化学MaxVision法和逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测80例乳腺癌组织、60例乳腺纤维腺瘤、50例癌旁正常乳腺组织中IGF-1蛋白和基因的表达情况,并分析IGF-1表达与乳腺癌临床病理特征的关系.结果:乳腺癌组织IGF-1蛋白和mRNA的表达均明显高于乳腺纤维腺瘤和癌旁正常乳腺组织(P<0.05).乳腺癌组织中IGF-1的表达与年龄无关(P>0.05),与肿瘤大小、淋巴结转移及组织学分级有关(P<0.05).结论:IGF-1高表达在乳腺癌的发生发展过程中可能具有重要作用.     

HMGA1在乳腺癌中的表达及临床意义

目的 探讨高迁移率族蛋白A1(HMGA1)在乳腺癌组织中的表达及临床意义.方法 应用实时定量荧光聚合酶链反应检测65例乳腺癌组织及配对的癌旁正常乳腺组织和40例乳腺纤维腺瘤组织中HMGA1 mRNA的表达情况;应用免疫组织化学法检测石蜡包埋的120例乳腺癌组织、46例乳腺纤维腺瘤组织和43例乳腺腺病组织中HMGA1的蛋白表达水平.结果 乳腺癌组织中HMGA1 mRNA的表达显著高于癌旁正常乳腺组织及乳腺纤维腺瘤组织(P＜0.01);乳腺癌组织中HMGA1蛋白的阳性表达率显著高于乳腺纤维腺瘤组织(P＜0.01)和乳腺腺病组织(P＜0.05),乳腺癌组织中HMGA1蛋白的表达与患者的年龄、淋巴结是否转移及TNM分期有关(P＜0.01,P＜0.05),三阴性乳腺癌HMGA1蛋白的阳性表达率明显更高(P＜0.05).结论 HMGA1在乳腺癌组织中表达较癌旁正常组织和良性疾病组织明显升高,并与临床分期有关,有望成为乳腺癌诊治中的一个新的靶点.     

乳腺癌组织nm23-H1和c-erbB-2基因表达与淋巴结转移的关系

目的：研究nm23-H1，c-erbB-2基因表达与乳腺癌淋巴结转移的关系，方法：应用原位杂交技术检测正常乳腺组织30例，乳腺癌原发灶48例及转移淋巴结组织30例中nm23-H1mRNA和c-erbB-2mRNA,结果，nm23-H1mRNA失表达在有无淋巴结转移的原发肿瘤之间，组织学Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ分级之间，以及淋巴结转移灶与原发肿瘤之间的差异具有显著性，（46．7％vs16．7％；20．0％，30．4％vs53.3%,63.3%vs35.4%,P＜0．05），c-erbB-2mRNA阳性表达在有无淋巴结转移的原发肿瘤之间， ER阳性与阴性的乳腺癌之间，以及组织学Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ分级之间的差异具有显著性（70．0％vs33．3％；44．8％vs73．7％；30．0％，56．5％vs73．3％，P＜0．05），c-erbB-2mRNA在淋巴结转移灶与原发肿瘤组织之间的差异具有显著性（86．7％vs56．2％，P＜0．01）。结论：肿瘤抑制基因nm23-H1和c-erbB-2癌基因在预测乳腺癌淋巴转移有着重要价值。     

MMP-9、ERK2及nm23与乳腺癌发生发展的关系

目的探讨MMP-9、ERK2及nm23与乳腺癌发生发展的联系。方法采用免疫组化法检测乳腺腺病、乳腺纤维腺瘤和乳腺癌组织MMP-9、ERK2及nm23基因蛋白的表达。结果 MMP-9和ERK2表达在乳腺癌组织明显高于乳腺纤维腺瘤和乳腺腺病组织,且三组比较有统计学意义（P〈0.05）,MMP-9、nm23表达与乳腺癌患者TNM分期、肿瘤直径、术后生存时间、淋巴结转移个数均呈显著正相关（P〈0.05）,ERK2表达与TNM分期成正相关（P〈0.05）。乳腺癌组织nm23基因蛋白的表达明显低于乳腺纤维腺瘤和乳腺腺病组织,且三组比较有统计学意义（P〈0.05）;乳腺癌组织中,ERK2与MMP-9表达呈显著正相关,nm23与MMP-9、ERK2表达呈显著负相关。结论 MMP-9可能通过降解细胞外基质促进乳腺癌的浸润转移,影响患者临床分期;nm23参与抑制乳腺癌的浸润转移,通过抑制ERK信号转导系统的活性减少乳腺癌细胞增殖能力,可能是抑制乳腺癌转移的机制之一。     

青年乳腺癌中同源异型盒基因A5表达的研究

目的：探讨青年乳腺癌组织中同源异型盒基因（HOX）A5mRNA及其蛋白表达,研究乳腺癌肿瘤组织临床病理参数与其关联性.方法：运用TaqMan实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（Real-time RT-PCR）技术检测120例青年乳腺癌（其中96例浸润性导管癌,原位癌16例、腺癌4例、硬癌4例）和96例青年乳腺良性病变中HOXA5mRNA表达,分析HOXA5基因表达强度与乳腺癌肿瘤原发灶组织临床病理参数间的相关性.结果：HOXA5 mRNA在乳腺癌肿瘤组织中相对表达量0.82 ～ 189.06,平均为20.69±29.15,乳腺良性病变中相对表达量5.84～80.72,平均为31.05±17.06;乳腺癌HOXA5mRNA表达显著低于乳腺良性病变（P＜0.01）.乳腺癌伴腋窝淋巴结转移阳性患者HOXA5mRNA表达强度较淋巴结未转移者显著降低（P＜0.01）.HOXA5mRNA表达与乳腺癌肿瘤原发灶大小、临床分期、组织学分型未见相关性（均P＞0.05）.结论：青年乳腺癌肿瘤原发灶组织细胞中HOXA5mRNA表达强度较乳腺良性病变组织显著下降.HOXA5mRNA表达明显降低与乳腺癌腋窝淋巴结癌转移关联性较大.     

环氧化酶-2mRNA在乳腺癌组织中的表达及临床意义

目的探讨乳腺癌组织中COX-2mRNA的表达与乳腺癌发生、发展及预后的关系.方法以β-action基因为内参照,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,检测35例乳腺癌组织、相应癌旁组织、正常乳腺组织中COX-2mRNA的表达,应用Gene Tools from SynGene软件,对RT-PCR产物电泳带进行半定量分析.结果35例癌组织中,29例COX-2表达明显增高(0.83),相应6例癌旁组织COX-2有不同程度的表达(0.17),正常乳腺组织表达很弱或无表达,后二者与癌组织中COX-2表达差异均有显著意义(P<0.05).COX-2表达同年龄、原发肿瘤大小、TNM分期及术前化疗与否无关(P>0.05),而与淋巴结转移状况有关(P<0.05).结论乳腺癌组织中COX-2的表达明显高于相应癌旁组织、正常乳腺组织,且其表达与淋巴结转移状况有关.     

乳腺癌组织中平滑肌22α的表达与淋巴结转移的关系

目的 分析平滑肌(SM)22α在乳腺癌组织中的表达与淋巴结转移的关系,探讨SM22α参与乳腺癌淋巴结转移的分子机制.方法 应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测了27例乳腺癌组织及癌旁正常乳腺组织中SM22α表达水平;同时用Western印迹分析检测了12例乳腺纤维腺瘤组织、15例乳腺癌未转移组织、12例乳腺癌淋巴结转移组织中SM22α mRNA和蛋白表达水平;利用RT-PCR和明胶酶图检测乳腺纤维腺瘤、乳腺癌未转移、乳腺癌淋巴结转移组织中基质金属蛋白酶(MMP)2、MMP9表达和活性及组织金属蛋白酶抑制剂(TIMP)1表达水平.结果 RT-PCR检测结果显示,乳腺癌组织中SM22α mRNA表达水平(5.1%±2.4%)显著低于癌旁正常乳腺组织(30.1%±5.1%)(P＜0.01),淋巴结转移组乳腺癌组织中SM22α表达水平(6.2%±3.1%)显著低于无淋巴结转移组(10.1%±4.1%)及乳腺纤维腺瘤组织(15.1%±5.3%)(均P＜0.01).Western印迹分析结果表明,SM22α蛋白在无淋巴结转移组(14.5%±2.1%)及伴淋巴结转移组乳腺癌组织中(6.2%±3.1%)表达水平均显著低于乳腺纤维腺瘤组(26.8%±5.5%)(均P＜0.01).MMP2、MMP9表达水平及活性均显著高于未转移组(P＜0.01),乳腺癌组织中SM22α表达水平与MMP2(r=-0.848;n=27;P＜0.01)、MMP9(r=-0.916;n=27;P＜0.01)活性呈负相关.结论 SM22α在乳腺癌组织中表达下调与淋巴结转移有关,SM22α可能通过负性调节MMP2、MMP9表达抑制乳腺癌淋巴结转移.     

凋亡抑制蛋白survivin在乳腺癌中的表达及意义

目的：检测凋亡抑制蛋白survivin在人乳腺癌中的表达,进一步探讨其在乳腺癌发生发展中的作用。 方法：采用免疫组织化学和蛋白印迹技术,研究54例乳腺癌组织(其中有腋窝淋巴结转移的33例)及15例乳腺纤维腺瘤组织中survivin蛋白的表达。 结果：54例乳腺癌组织中survivin蛋白的阳性表达率为72.5%,明显高于癌旁正常组织及乳腺纤腺瘤组织,（P<0.05）;有腋窝淋巴结转移组的乳腺癌中其表达率明显高于无腋窝淋巴结转移组（P<0.05）;乳腺癌组织中survivin蛋白的表达与组织学分级、临床病理分期及淋巴结转移密切相关（P<0.05）。在癌旁组织及乳腺纤维腺瘤中未检测到survivin蛋白。 结论：乳腺癌组织中survivin表达上调,并参与乳腺癌的发生发展,是诊断乳腺癌和判断其预后的重要参考指标。     

MTA1及nm23H1基因在新疆哈萨克族食管癌组织中的表达及临床意义

目的:研究肿瘤转移相关基因(MTA1)及nm23H1基因在哈萨克族食管癌组织中的表达及临床意义。方法:应用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)技术检测MTA1及nm23H1基因在20例食管癌组织及其相应癌旁组织中的表达。结果:癌组织中nm23H1阳性表达占50.00%(10/20),有淋巴结转移的癌组织中nm23H1mRNA的阳性表达率为40.00%(4/10),无淋巴结转移的为60.00%(6/10);浸润至外膜层的肿瘤中阳性表达率为71.43%(10/14)。MTA1基因在癌组织中有5例(25.00%)表达,且均为T3期肿瘤,癌旁组织仅1例表达。结论:nm23H1及MTA1基因的表达可能与哈萨克族食管癌的发生及浸润深度有关,二者协同作用,共同促进食管癌的发生及发展。     

趋化因子受体5及其基因多态性△32与乳腺癌相关性的研究

目的研究乳腺癌组织及腋窝淋巴结中趋化因子受体5（CCR5）的表达和基因多态性CCR5一A32的发生频率,探讨其在乳腺癌转移中的作用。方法收集2008年8月至2009年6月聊城市人民医院乳腺甲状腺外科手术切除的组织标本35例,采用实时荧光定量RT—PCR法检测乳腺癌原发癌灶及其腋窝淋巴结、癌旁组织和乳腺纤维腺瘤组织中CCR5mRNA相对表达量,及CCR5一A32等位基因发生频率。数据采用单因素方差分析及独立样本t检验。结果①乳腺癌组织CCR5mRNA的相对表达量显著高于癌旁正常组织（P〈0．01）及良性肿瘤组织（P〈0．05）,Ⅱ期与Ⅲ期乳腺癌组织CCR5mRNA相对表达量差异有统计学意义（P〈0．05）,癌旁正常组织与纤维腺瘤组织CCR5mRNA的相对表达量差异无统计学意义（P〉0．05）;②转移淋巴结组织CCR5mRNA的相对表达量明显高于非转移淋巴结（P〈0．05）;（奶5例均未发现等位基因CCR5一A32的变异;④乳腺癌组织CCR5mRNA的相对表达量与ER、PR等临床免疫指标无相关性,但与有无腋窝淋巴结转移及C—erbB一2表达相关。结论CCR5在乳腺癌组织及转移淋巴结中的表达明显升高,CCR5与其配体结合促进了乳腺癌的发生发展及腋窝淋巴结的转移,可作为预测引障瘸腑蜜激p结弦稳砖而后的舌算锌千粽士物柏I瞻市治疗焊枇了拓苗Ⅲ占     

乳癌组织中nm23、MMP-2、TIMP-2蛋白的表达

目的:探讨乳癌组织中nm23、MMP-2和TIMP-2蛋白的表达情况.方法:采用免疫组织化学SP法,对20例乳腺纤维腺瘤、24例乳腺导管内原位癌、58例乳腺浸润性导管癌(26例无淋巴结转移,32例有淋巴结转移)组织中上述3个指标进行检测.结果:乳腺浸润癌组织中nm23和TIMP-2蛋白阳性率低于乳腺纤维腺瘤和导管内原位癌组织(P＜0.05);乳癌组织中MMP-2蛋白阳性率高于乳腺纤维腺瘤组织(P＜0.05).伴有淋巴结转移的浸润性导管癌组织nm23阳性率低于无淋巴结转移者.结论:联合检测上述3种指标将有助于乳癌的早期诊断和预后判断.     

乳腺癌CD44和nm23基因表达与侵袭转移的关系

目的：探讨粘附分子CD44和抑癌基因nm23与乳腺癌侵袭转移的关系。方法：采用逆转录聚合酶链反应（RT－PCR）方法对30例乳腺癌及10例乳腺良性肿瘤组织中CD44V6和nm23-H1基因的表达进行检测,结果：乳腺癌组织中CD44V6及nm23-H1的表达明显高于乳腺良性肿瘤;CD44V6和nm23-H1的阳性表达与乳腺癌的临床分期和是否有淋巴结转移密切相关,而与乳腺癌的病理类型无关。结论：CD44V6和nm23-H1异常表达是乳腺癌发生发展,浸润转移的重要分子学改变。同时检测两者可更好地预测其进展程度和对淋巴结转移的判断。     

The significance of mRNA expression and methylation of SFRP1 promoter in invasive breast cancer

目的 探讨浸润性乳腺癌及相应癌旁乳腺组织中分泌型卷曲相关蛋白1(the secreted frizzled-related protein 1,SFRP1)基因的表达及其启动子CpG岛的异常甲基化状态,并分析其临床意义.方法 采用实时荧光定量PCR技术及甲基化聚合酶链反应(MSP)技术检测58例浸润性乳腺癌组织和相应癌旁乳腺组织中SFRP1基因的mRNA表达及其启动子CpG岛的异常甲基化情况,并分析其与临床病理参数之间的关系.结果 浸润性乳腺癌组SFRP1基因的甲基化显著高于癌旁乳腺组织组(P<0.05);腋窝淋巴结有转移的浸润性乳腺癌组SFRP1基因的甲基化显著高于腋窝淋巴结无转移组(P<0.05),而与其他临床病理参数无关.SFRP1在浸润性乳腺癌组的mRNA表达量与乳腺癌旁组比较,差异有统计学意义(P<0.05);在23例SFRP1基因启动子CpG岛发生异常甲基化的浸润性乳腺癌组,均未检测到SFRP1的mRNA表达.结论 SFRP1基因异常甲基化可能影响其 mRNA的转录水平;SFRP1基因启动子的甲基化与浸润性乳腺癌的发生发展有关,对其进行检测有可能为浸润性乳腺癌的早期诊断和判断预后提供帮助.     

Ezrin在乳腺癌中的表达及其临床意义

目的 探讨膜细胞骨架连接蛋白Ezrin在乳腺癌中的表达及其与临床病理参数之间的关系.方法 采用免疫组化方法检测54例乳腺浸润性导管癌组织中Ezrin蛋白的表达,选择非典型增生5例,纤维囊性乳腺病9例和男性乳腺发育症2例作为对照.结果 在乳腺浸润性导管癌中,有淋巴结转移组Ezrin的表达高于无淋巴结转移组.结论 Ezrin与乳腺浸润性导管癌的浸润和转移密切相关,可以作为预测乳腺浸润性导管癌淋巴结转移的重要肿瘤标志物.     

浸润性乳腺癌SFRP1基因的表达及其启动子甲基化的意义

目的探讨浸润性乳腺癌及相应癌旁乳腺组织中分泌型卷曲相关蛋白1(the secreted frizzled-relat-ed protein 1,SFRP1)基因的表达及其启动子CpG岛的异常甲基化状态,并分析其临床意义。方法采用实时荧光定量PCR技术及甲基化聚合酶链反应(MSP)技术检测58例浸润性乳腺癌组织和相应癌旁乳腺组织中SFRP1基因的mRNA表达及其启动子CpG岛的异常甲基化情况,并分析其与临床病理参数之间的关系。结果浸润性乳腺癌组SFRP1基因的甲基化显著高于癌旁乳腺组织组(P<0.05);腋窝淋巴结有转移的浸润性乳腺癌组SFRP1基因的甲基化显著高于腋窝淋巴结无转移组(P<0.05),而与其他临床病理参数无关。SFRP1在浸润性乳腺癌组的mRNA表达量与乳腺癌旁组比较,差异有统计学意义(P<0.05);在23例SFRP1基因启动子CpG岛发生异常甲基化的浸润性乳腺癌组,均未检测到SFRP1的mRNA表达。结论 SFRP1基因异常甲基化可能影响其mRNA的转录水平;SFRP1基因启动子的甲基化与浸润性乳腺癌的发生发展有关,对其进行检测有可能为浸润性乳腺癌的早期诊断和判断预后提供帮助。     

几种肿瘤转移基因变化与卵巢癌转移的相关性

目的：研究MTA1，nm23H1及E－Cadherin (E-cad)的表达及突变与卵巢癌转移的相关性。方法：应用RT－PCR，RT－PCR－SSCP和免疫组化技术，对正常卵巢，卵巢癌及其配对淋巴结组织进行MTA1，nm23H1,mRNA表达和突变及E－cad蛋白表达的检测，。结果：有转移的卵巢癌原发灶MTA1 mRNA高表达率为100％（7／7），无转移为38．5％（5／13），P＝0．0103，有癌转移淋巴结高表达率为87．5％（6／7），而无癌转移为23％（4／13），P＝0．0043，有癌转移淋巴结低表达率为100％（7／7），无癌转移为38．5％（5／13），P＝0．0102，无转移卵巢癌原发灶E－cad蛋白表达阳性率为46．2％（6／13），而有转移者7例均无阳性表达，表达率为0，P＝0．044。三基因表达相关性分析表明，MTA1与nm23H1,C-cad呈负相关（r=-0.903,-0.802),nm23H1与E－-cad呈正相关（r=0.724),SSCP分析未发现MTA1和nm23H1基因突变，结论：MTA1及nm23H1,E-cad的表达与卵巢癌转移呈正，负相关关系，起着正，负调控的重要作用，这三个基因的异常表达是卵巢癌转移中的频发事件而与基因突变无关。