多聚酶链反应—单链构象多态分析检测骨髓增生异常综合征N—ra…

为探讨Ｎ－ｒａｓ基因突变在骨髓增生异常综合生病变过程的意义，采用多聚酶链反应－单链构象多态分析法检测２０例ＭＤＳ患者Ｎ－ｒａｓ癌基因，其中５例出现Ｎ－ｒａｓ基因突变，占２５％，其中３例随访半年内转变为急性骨髓细胞白血病，且对化疗不敏感。     

聚合酶链反应检测携带N－ras癌基因点突变的急性髓细胞白血病残留细胞的观察

我们建立了用于检测以Ｎ－ｒａｓ癌基因点突变为克隆标志的急性髓细胞白血病（ＡＭＬ）患者骨髓内微量残留白血病细胞（ＭＲＬＣ）的聚合酶链反应和寡核苷酸探针杂交法。它可扩增出１０ｐｇ的微量ＤＮＡ，检测ＭＲＬＣ的敏感性是０．５％～０．１％，特异性强。临床筛选检测了１０例ＡＭＬ患者证实其中３例出现Ｎ－ｒａｓ基因第１３位点突变，随访其中２例，初步表明Ｎ－ｒａｓ点突变可作为白血病克隆标志，可用于检测ＭＲＬＣ。     

PCR基因扩增法结合寡核苷酸探针杂交检测MDS患者N－ras癌基因点突变

ＰＣＲ基因扩增法结合寡核苷酸探针杂交检测ＭＤＳ患者Ｎ－ｒａｓ癌基因点突变王立，陈佩贞，王志学，赵洪，王建祥，郝玉书，张新友ＭＤＳ向ＡＭＬ演变的分子机制研究中，一个重要的进展是在ＭＤＳ中发现了ｒａｓ基因的突变，提示ｒａｓ基因的激活在ＭＤＳ恶性发展中发挥...     

骨髓增生异常综合征中性粒细胞超氧阴离子及中性内肽酶水平的变化

为探索骨髓增生异常综合征（ＭＤＳ）髓系终末细胞功能异常的机制，测定２０例ＭＤＳ患者外周血中性粒细胞超氧阴离子（Ｏ－２）及中性内肽酶（ＮＥＰ）水平，并与同时测定的３７例正常人、１４例阵发性睡眠性血红蛋白尿症（ＰＮＨ）、１０例再生障碍性贫血（ＡＡ）（８例ＣＡＡ，２例ＡＡＡ）及１８例良性增生性贫血作比较。发现：ＭＤＳ患者中性粒细胞Ｏ－２及ＮＥＰ水平明显低于正常人，且与ＰＮＨ、ＡＡ、良性增生性贫血间有显著差别；ＭＤＳ患者的型别与其Ｏ－２和ＮＥＰ水平密切相关。结果提示，ＭＤＳ髓系终末细胞分化不良，有质的缺陷，这可能是其趋化、吞噬及消化功能异常的原因且可作为诊断ＭＤＳ的辅助指标。     

定量不对称PCR－SSCP检测携带N－ras基因点突变的微量残留白血病细胞

定量不对称ＰＣＲ－ＳＳＣＰ检测携带Ｎ－ｒａｓ基因点突变的微量残留白血病细胞蔡辉国，陈佩贞，张立冬，马双，王立，杨天楹我们采用多聚酶链反应－单链ＤＮＡ构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）分析检测携带Ｎ－ｒａｓ基因点突变的微量残留白血病细胞（ＭＲＬＣ），其灵敏...     

N—甲基天冬氨酸受体拮抗剂AP—5在海马对兔P3波电位的 …

目的 推测Ｎ－甲基天冬氨酸受体（Ｎ－ｍｅｔｈｙｌ－Ｄ－ａｓｐａｒａｔｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒ,ＮＭＤＡＲ）的兴奋性突触后电位（ｅｘｃｉｔａｔｏｒｙ ｐｏｓｔｓｙｎａｐｔｉｃ ｐｏｔｅｎｔｉａｌｓ,ＥＰＳＰ）活动对兔Ｐ３波的作用。方法 采用ＮＭＤＡＲ竞争性拮抗剂ＡＰ－５（３．１２５,６．２５,１２．５ｍｍｏｌ／Ｌ）在海马ＣＡ１,ＣＡ３微量注入,观察Ｐ３波电位变化。     

白血病和骨髓增生异常综合征患者红细胞酶及同工酶谱的改变

目的：调查白血病和骨髓增生异常综合征（ＭＤＳ）患者红细胞酶和同工酶谱改变的患病率，并研究其临床意义。方法：采用ＩＣＳＨ介绍的方法及ＰＡＧＥ电泳测定红细胞酶活性及ＰＫ和ＡＤＡ同工酶，采用ＦＰＬＣ系统纯化ＡＤＡ同工酶，分析酶蛋白的生化性质。结果：患病率：在２２９例白血病和ＭＤＳ患者中，Ｇ６ＰＤ缺乏为４３．１％，ＰＫ缺乏为２７．８％。ＭＤＳ患者中的酶缺乏患病率：ＰＫ缺乏为５０．０％，Ｇ６ＰＤ缺乏为４８．０％，ＰＮＰ缺乏为３９．１％；酶过多患病率：ＡＤＡ过多为６９．６％，ＥＮＯＬ过多为４０．０％，ＡＬＤ过多为３０．４％。慢性粒细胞白血病（ＣＭＬ）的ＰＫ活性增高，而ＰＫ同工酶型均正常。急性白血病患者采用抗肿瘤抗生素后Ｇ６ＰＤ和６ＰＧＤ活性减低（Ｐ＜０．０５）。ＭＤＳ红细胞酶缺陷显著多于ＡＤＡ２同工酶表达见于ＡＭＬ（Ｍ４和Ｍ５）的单个核细胞及慢性粒－单核细胞白血病（ＣＭＭＬ）的红细胞，但ＡＬＬ不表达（Ｐ＜０．００１）。ＡＤＡ同工酶纯化分析示正常结构。结论：红细胞酶的检测可作为ＣＭＬ的预后参数，作为急性白血病抗肿瘤药物耐药预示指标，有助于ＭＤＳ－ＲＡ和再障、ＣＭＬ与ＣＭＭＬ的鉴别诊断。     

以急性髓性白血病为终结的严重型先天性中性粒细胞减少症：疾病发展与粒细？

严重型先天性中性粒细胞减少（ＳＣＮ）是一种异质性疾病，家族史不一，有向骨髓增生异常综合症（ＭＤＳ）和急性髓细胞白血病（ＡＭＬ）发展的倾向，在部分病人发现了Ｇ－ＣＳＦ－Ｒ基因突变点，这些无意突变导致了Ｇ－ＣＳＦ诱导成熟关键部位Ｃ末端胞浆部分的中断，Ｇ－ＣＳＦ－Ｒ基因突变的ＳＣＮ病更容易转变成ＡＭＬ，在此，简述Ｇ－ＣＳＦ－Ｒ缺陷是怎样导致中性粒细胞减少和白血病的。     

纤维支气管镜刷检细胞H－ras基因检测对肺癌的诊断价值

为探讨纤维支气管镜直视下毛刷脱落细胞中Ｈ－ｒａｓ基因突变在肺癌中的诊断价值，采用在纤维支气管镜毛刷脱落细胞中应用ＰＣＲ－ＲＦＩＰ方法（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ－ｒｅｓｔｒｉｃｔｉｏｎｆｒａｇｍｅｎｔｌｅｎｇｔｈｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ）检测Ｈ－ｒａｓ基因，人突变。对５０例肺癌及２０例肺部炎症患者支气管上皮脱落细胞进行了检测，结果肺癌中Ｎ－ｒａｓ基因突变为５４％（２７／５０）．鳞癌为５９．１％（１３／２２）．腺癌为５３．８％（７／１３），小细胞肺癌为３３．３％（２／６），肺透明细胞癌１００％（２／２），未能分型的肺癌４２．９％（３／７），肺炎组１０％（２／２０）。肺癌组的Ｈ－ｒａｓ基因突变明显高于肺炎组，二者有明显的差异（Ｐ＜０．０１）。研究肺癌Ｈ－ｒａｓ基因突变有较高的阳性，在肺癌与非肺癌组中有明显的差别，有希望成为肺癌诊断标记物。     

成人T细胞白血病N－ras基因点突变的研究

成人Ｔ细胞白血病（ＡＴＬ）由人类Ⅰ型嗜Ｔ细胞病毒（ＨＴＬＶ－Ⅰ）引起，但其发病机理仍不清楚。我们应用逆转录－多聚酶链反应结合直接序列分析检测１０例ＡＴＬ患者的Ｎ－ｒａｓ基因，结果在一例ＡＴＬ发现Ｎ－ｒａｓ６１位点突变（ＣＡＡ→ＣＴＡ），说明ＨＴＬＶ－Ⅰ感染之后有多种因素参与ＡＴＬ的发病。     

急性T淋巴细胞白血病中SIL－TAL－1融合基因的分子生物学研究

ＴＡＬ－１基因位于１号染色体短臂１ｐ３２。在急性Ｔ淋巴细胞白血病（Ｔ－ＡＬＬ）中，２５％的患者该基因５’端发生丢失（约１００ｋｂ），与ＳＩＬ基因５’端相融合，形成ＳｉＬ－ＴＡＬ－１融合基因。我们用筑巢式逆转录／多聚酶链反应（ｎｅｓｔｅｄＲＴ／ＰＣＲ）方法检测ＳＩＬ－ＴＡＬ－１融合基因转录本。在１７例Ｔ－ＡＬＬ中４例检测到该融合ｍＲＮＡ，并证明该转录本由ＳＩＬ基因第１外显子与ＴＡＬ－１基因第３外显子拼接而成。对该法的敏感度测定显示，可从１０￣６个正常细胞中检测出１个肿瘤细胞，并在２例缓解期标本中检测到微量残留白血病（ＭＲＤ）。此外，对３例有融合转录本患者的ＤＮＡ进行ＰＣＲ检测发现，其ＴＡＬ－１基因５’端丢失的位点相同，均为Ｔａｌ￣（ｄ１）重组。可见，ＴＡＬ－１基因的改变是Ｔ－ＡＬＬ一个有用的克隆标志，为其诊断和残留白血病检测提供了十分重要的依据。     

反义TNF-α寡脱氧核苷酸降低多器官功能不全综合征大鼠死亡率

目的 观察反义肿瘤坏死因子－α（ｔｕｍｏｒ ｎｅｃｒｏｓｉｓ ｆａｃｔｏｒ－ａｌｐｈａ,ＴＮＦ－α）寡脱氧核苷酸酵母多糖Ａ（ｚｙｍｏｓａｎＡ）诱导的多器官功能不全综合征（ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｏｒｇａｎ ｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎ ｓｙｎｄｒｏｍｅ,ＭＯＤＳ）大鼠的影响。探讨ＭＯＤＳ的发病机制。为采用反义技术降低ＭＯＤＳ死亡率的早期临床试验提供实验依据。方法 采用静脉主射方法,使反义ＴＮＦ－α寡脱氧核苷酸（ＯＤＮ）作用于ｚｙｍｏｓａｎＡ诱导的ＭＯＤＳ大鼠：（１）采用ＲＴ－ＰＣＲ,ＥＬＩＡ检测大鼠肝ＴＮＦ－α的ｍＲＮＡ和蛋白质的表达水平;（２）观察大鼠在不同时期的死亡率;（３）在ｚｙｍｏｓａｎＡ放导大鼠ＭＯＤＳ２４小时后采集股动脉血进行血气分析。采集外周血进行血清生化检测。并进行统计学分析。结果 反义ＴＮＦ－αＯＤＮ与对     

骨髓增生异常综合征患者血清sIL－2R的检测及其意义

骨髓增生异常综合征患者血清ｓＩＬ－２Ｒ的检测及其意义常青，谭齐贤，刘希光，乔宏我们对３０例骨髓增生异常综合征（ＭＤＳ）患者血清可溶性白细胞介素２受体（ｓＩＬ－２Ｒ）进行了检测，以期探讨其对ＭＤＳ免疫功能异常的诊断、病情发展、预后判断等方面的意义。材料...     

正常妊娠妇女血中活化的蛋白C抵抗、狼疮样抗凝物质与血栓前状态分子标志物测定

目的研究活化的蛋白 Ｃ抵抗（Ａｃｔｉｖａｔｅｄ ｐｒｏｔｅｉｎ Ｃ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ，ＡＰＧＲ）在正常妊娠中的发生情况，探讨狼疮抗凝物质（Ｌｕ－ｐｕｓ－ｌｉｋｅ ａｎｔｉｃｏａｇｕｌａｎｔ，ＬＡ）对妊娠性 ＡＰＣ－Ｒ的影响及二者与凝血酶生成、继发性纤溶的关系。方法采用 ＡＰＴＴ－ＡＰＣ法检测ＡＰＣ－Ｒ、ｄＲＶＶＴ法测定ＬＡ水平，并用 ＥＬＩＳＡ法测定了凝血酶原片段Ｆ１＋２和Ｄ－二聚体（Ｄ－ｄｉｍｅｒ，Ｄ－Ｄ）的含量。结果检测３０例正常妇女对照（ＮＣ）和５０例正常妊娠妇女，ＮＣ组ＡＰＣ－Ｒ比率为２．８８±０．３７，ＮＰ组为２．０４±０．３１（ＡＰＣ－Ｒ阳性率为４２％）；ＮＣ组 ＬＡ阳性率为 ０， ＮＰ组为 ３６．７％； ＮＣ组 Ｆ１＋２为（０．７３４ ± ０．４２） ｎｍｏｌ／Ｌ， ＮＰ组为（ １．０５ ± ０．６９） ｎｍｏｌ／Ｌ； ＮＣ组Ｄ－Ｄ为（０．４８±０．０５）ｍｇ／Ｌ，ＮＰ组为（０．６３±０．１１）ｍｇ/Ｌ；ＮＰ组的ＡＰＣ比率、Ｆ１＋２和Ｄ－Ｄ的测定结果均较ＮＣ组有显著性差异。结论妊娠可能发生与ＬＡ升高有关的ＡＰＣ－Ｒ，并导致了凝血酶激活物生成增加以及凝血酶、纤溶酶的激活和继发性纤溶的发生。     

自身免疫病患者血清胞间粘附分子检测的意义探讨

目的了解进行性硬皮病（ＰＳＳ）、类风湿性关节炎（ＲＡ）、系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）血清可溶性细胞间粘附分子（ｓＩＣＡＭ）１和３的水平及与病情的关系。方法用进口酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）试剂盒分别检测活动期ＰＳＳ、ＲＡ、ＳＬＥ患者与正常人血清ｓＩＣＡＭ－１以及ＰＳＳ、ＲＡ患者、正常人血清ｓＩＣＡＭ－３的含量，比较其水平的差异。结果正常对照组（２０例）ｓＩＣＡＭ－１和ｓＩＣＡＭ－３水平分别为２０２．３５±７４．１２μｇ／Ｌ和３６．１８±１４．６８μｇ／Ｌ；ＰＳＳ组患者（３０例）分别为４１３．９２±１４４．５３μｇ／Ｌ和４７．５０±２６．６８μｇ／Ｌ；ＲＡ组患者（２５例）分别为４０５．８８±１８１．１６μｇ／Ｌ和２９．２５±１１．６４μｇ／Ｌ；ＳＬＥ组患者（１９例）ｓＩＣＡＭ－１的水平为３８９．０６±２４１．９４μｇ／Ｌ。各患者组的ｓＩＣＡＭ－１水平与正常对照组比较差异有非常显著性（Ｐ＜０．０１）；ＰＳＳ、ＲＡ组患者与正常对照组ｓＩＣＡＭ－３测值相互间差异无显著性，但ＰＳＳ与ＲＡ组患者间差异有显著性（Ｐ＜０．０５）。结论ｓＩＣＡＭ－１与自身免疫病的活动性呈一致性，ｓＩＣＡＭ－３在不同的自身免疫病有不同的表现     

淋巴因子激活的骨髓细胞或脾细胞对小鼠移植物抗宿主病的预…

根据淋巴因子激活的骨髓细胞（ＬＡＢＭＣ）或脾细胞（ＬＡＳＣ）具有介导否决（Ｖｅｔｏ）效应和自然抑制（ＮＳ）效应的特性，实验分别以新生小鼠和亚致死剂量照射的成年小鼠为受鼠，腹腔注射同种脾细胞制备移植物抗宿主病（ＧＶＨＤ）模型，实验组同时注射ＬＡＢＭＣ或ＬＡＳＣ。结果显示：与受鼠带相同Ｈ－２单型的ＬＡＢＭＣ可明显减轻新生小鼠ＧＶＨＤ（Ｐ＜０．００１）；与受鼠带相同Ｈ－２单型的ＬＡＳＣ可有效预防致死性Ｇ     

严重型再生障碍性贫血患者骨髓和外周血 HLA-DR~ T 细胞的变化及其淋巴细胞造血抑制活性的研究

目的：进一步阐明免疫紊乱在严重型再生障碍性贫血（ＳＡＡ）发病中的作用。方法：对１３例初诊ＳＡＡ、７例抗淋巴细胞球蛋白（ＡＬＧ）治疗后恢复期ＳＡＡ（ｒＳＡＡ）患者骨髓和外周血及对照组（包括９名骨髓对照和１１名外周血对照）的ＨＬＡ－ＤＲ＋Ｔ细胞进行检测，并对部分患者和对照组刺激的外周血去单核细胞的单个核细胞培养上清液（ＰＨＡ－ＬＹＣＭｓ）的造血活性进行检测。结果：初诊ＳＡＡ患者骨髓及外周血ＨＬＡ－ＤＲ＋Ｔ细胞显著高于对照组（Ｐ＜０．００１）；ＡＬＧ治疗后ｒＳＡＡ患者骨髓和外周血ＨＬＡ－ＤＲ＋Ｔ细胞较初诊ＳＡＡ下降，但仍高于对照组（Ｐ＜０．００１）；ＳＡＡ患者骨髓内ＨＬＡ－ＤＲ＋Ｔ细胞显著高于外周血（Ｐ＜０．００１）；与对照组比较，初诊的ＳＡＡ患者外周血ＰＨＡ－ＬＹＣＭｓ对正常骨髓ＢＦＵ－Ｅ和ＣＦＵ－ＧＭ具有显著的抑制作用（Ｐ＜０．００１），而ＡＬＧ治疗后ｒＳＡＡ患者ＰＨＡ－ＬＹＣＭｓ对正常骨髓ＢＦＵ－Ｅ和ＣＦＵ－ＧＭ的抑制作用明显减弱。结论：ＨＬＡ－ＤＲ＋Ｔ细胞在ＳＡＡ的发病中可能发挥重要的作用。     

自身免疫病患者血清胞间粘附分子检测的意义探讨

目的 了解进行性硬皮病（ＰＳＳ）、类风湿性关节炎（ＲＡ）、系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）血清可溶性细胞间粘附分子（ｓＩＣＡＭ）１和３的水平及与病情的关系。方法 用进口酶联免吸附法（ＥＬＩＳＡ）试剂盒分别检测活动期ＰＳＳ、ＲＡ、ＳＬＥ患者与正常人血清ｓＩＣＡＭ－１以及ＰＳＳ、ＲＡ患者、正常人血清ｓＩＣＡＭ－３的含量，比较其水平的差异。结果 正常对照组（２０例）ｓＩＣＡＭ－１和ｓＩＣＡＭ－３水平分别为２０２     

反义基因逆转肿瘤细胞多药耐药诱导细胞凋亡的研究

目的：探讨克服肿瘤细胞多药耐药（ＭＤＲ）的方法，提高化疗效果。方法：采用多药耐药反义基因（ｍｄｒ－１－ＡＳＰＳ－ＯＤＮ）逆转Ｋ５６２／ＡＤＭ肿瘤细胞的ＭＤＲ，而诱导肿瘤细胞凋亡。结果：ｍｄｒ－１－ＡＳＰＳ－ＯＤＮ诱导Ｋ５６２／ＡＤＭ细胞产生大量ＤＮＡ断片，流式细胞仪检测发现几乎全部ｍｄｒ－１＋Ｋ５６２／ＡＤＭ细胞发生凋亡。结论：ｍｄｒ－１－ＡＳＰＳ－ＯＤＮ能有效、特异地抑制ｍｄｒ－１基因表达，逆转肿瘤细胞的ＭＤＲ，促进阿霉素诱导Ｋ５６２／ＡＤＭ细胞凋亡，为其临床应用提供理论依据。     

巢式PCR法检测髓系白血病患者外周血人类疱疹病毒—6的NDA

人类疱疹病毒－６型（ｈｕｍａｎ ｈｅｒｐｅｓｖｉｒｕｓ－６,ＨＨＶ－６）是一种常见的病毒,与多种人类疾病有关。由于研究过程所采取方法不同,对于白血病病人感染ＨＨＶ－６情况的报道也不一致。本研究首次运用巢式ＰＣＲ检测了３８例髓系白血病病人外周血单个核细胞中的ＨＨＶ－６ ＤＮＡ,其中急性髓性白血病（ＡＭＬ）３０例和慢性粒细胞白血病（ＣＭＬ）８例。结果显示：与下沉对照ＨＨＶ－６的ＮＤＡ检出率相比,ＡＭＬ