扇贝裙边糖胺聚糖对过氧化氢损伤的内皮细胞释放血管活性物质的影响

目的:观察扇贝裙边糖胺聚糖(SS-GAG)对过氧化氢(H2O2)损伤的血管内皮细胞产生血管活性物质的影响。方法:用体外培养的人脐静脉内皮细胞株ECV304建立H2O2诱导的内皮细胞损伤模型组、不同浓度的SS-GAG组以及正常对照组,用放射免疫法测定培养液中6-酮-前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)、血栓素B2(TXB2)、内皮素(ET)的含量;用硝酸还原酶法测定一氧化氮(NO)的含量。结果:与模型组比较,不同浓度的SS-GAG组均可使血管舒张因子6-keto-PGF1a、NO含量明显增加;缩血管因子TXB2、ET含量明显减少(P<0.05,P<0.01)。结论:SS-GAG可能通过增加舒血管因子、降低缩血管因子的分泌来减轻H2O2对内皮细胞的氧化损伤。     

淫羊藿苷对过氧化氢诱导的血管内皮细胞损伤的保护作用

目的研究淫羊藿苷对过氧化氢所致血管内皮细胞损伤的影响。方法体外培养血管内皮细胞,淫羊藿苷预处理24h后,采用过氧化氢诱导氧化损伤模型,MTT法测定细胞活性,测定细胞培养液中乳酸脱氢酶（LDH）的释放、细胞中丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）的活力。结果淫羊藿苷能明显提高细胞存活率,增加细胞内SOD活性,降低培养液中LDH释放和细胞内MDA含量。结论淫羊藿苷对过氧化氢诱导的血管内皮细胞损伤有明显的保护作用,可能与其抗氧化有关。     

降糖复方含药血清对氧化损伤内皮细胞的保护作用

目的：研究降糖复方含药血清对H2O2诱导的血管内皮细胞氧化损伤的保护作用。方法：采用H2O2诱导人脐静脉血管内皮细胞（ECV304）氧化损伤模型,观察细胞形态学变化并测定细胞活力、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）的含量,NO含量以及内皮素（ET-1）含量。结果：降糖复方含药血清可明显改善氧化损伤的ECV304细胞形态学变化,提高细胞存活率,降低MDA含量、提高SOD活力、增加NO释放、减少ET-1释放。结论：降糖复方含药血清能对抗H2O2对血管内皮细胞的氧化损伤,起到保护血管内皮细胞的作用。     

辛伐他汀对过氧化氢损伤的心肌细胞的保护作用

目的观察辛伐他汀对过氧化氢（H2O2）损伤的心肌细胞的保护作用，阐明此作用与其诱导心肌抗氧化酶活性、减少氧活性物质的生成间的关系。 方法用培养的新生SD大鼠心肌细胞做实验。用H2O2建立细胞损伤模型，细胞培养前用不同浓度辛伐他汀和甲羟戊酸进行预处理。测定心肌细胞活力、乳酸脱氢酶(LDH )浓度及丙二醛(MDA)水平，用荧光探针DCF-DA测定细胞内活性氧(ROS)水平，反映心肌损伤及氧活性物质的生成情况。测定心肌细胞内超氧化物歧化酶（SOD）活性，反映抗氧化酶活性。 结果辛伐他汀预可剂量依赖性地提高H2O2损伤心肌细胞的细胞活力(P＜0.01)，并减少损伤时LDH的漏出(P＜0.01)，MDA的生成量也明显减少(P＜0.01)，心肌ROS明显下降；而心肌细胞SOD活性较H2O2损伤组增高(P＜0.01)。甲羟戊酸(100 μmol·L^-1)能完全阻断辛伐他汀预处理的保护作用。 结论辛伐他汀可能通过MVA通路，使SOD等有抗氧化作用的酶合成增加，对H2O2引起的心肌细胞损伤起心肌保护作用。     

布南色林对H2O2引起PC12细胞损伤的神经保护作用研究

目的 探讨布南色林对H2O2引起的PC12细胞损伤的保护作用。方法 用H2O2损伤PC12细胞建立神经元损伤模型,实验分空白细胞对照组（C组）,H2O2处理组（H组）,布南色林-过氧化氢处理组（B组）,阳性对照组（维生素E-过氧化氢处理组,E组）。MTT法检测细胞存活率;Hoechst33258以及TUNEL检测其对细胞凋亡影响;生化法测定超氧化物歧化酶（SOD）活性以及丙二醛（MDA）的含量。结果 与C组比较,H组的细胞存活率明显下降（P＜0.05）,凋亡指数增加,细胞内的SOD活性减低,MDA水平增高（P＜0.05）;与H组比较,B组的细胞活性增强,凋亡指数下降,细胞内的SOD活性加强,MDA水平减低（P＜0.05）。结论 合适浓度的布南色林对H2O2引起的神经损伤有保护作用。     

尼莫地平对过氧化氢诱导猪脑基底动脉氧化应激损伤的保护作用

目的：探讨尼莫地平对过氧化氢（H2O2）诱导猪脑基底动脉损伤的保护作用。方法：采用去内皮离体血管环灌流的方法，建立H2O2损伤模型。比较正常对照组，H2O2（2×10^-4mol／L）损伤组，维生素C（10^-4mol／L）组，尼莫地平高、中、低剂量（5×10^-6、5×10^-7、5×10^-8mol／L）组血管环对KCl、苯肾上腺素的张力；检测各组血管组织匀浆中的超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH—PX）活性及丙二醛（MDA）含量。结果：（1）H2O2损伤组与正常对照组比较，血管环对KCl、苯肾上腺素的收缩反应明显增加；尼莫地平高、中、低剂量组呈剂量依赖性抑制KCl、苯肾上腺素对血管环的收缩反应。（2）H2O2损伤组MDA含量升高，SOD、CAT、GSH—PX活性降低，与正常对照组比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。尼莫地平高、中、低剂量均能降低组织中MDA含量，增强SOD、CAT、GSH-PX，的活性，与H2O2损伤组比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：钙通道阻断剂尼莫地平具有抗氧化应激作用，能预防H2O2对脑基底动脉血管的氧化损伤。     

依达拉奉对过氧化氢致血管内皮细胞氧化损伤的保护作用

目的探讨依达拉奉对过氧化氢(H2O2)致内皮细胞氧化损伤的影响。方法体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC),采用H2O2作为外源性自由基生成系统,模拟血管内皮细胞氧化应激损伤模型,观察不同剂量依达拉奉对H2O2所致内皮细胞的影响。通过检测各组丙二醛(MDA)的含量反应细胞的损伤程度,检测超氧化物歧化酶(SOD)的活性及总抗氧化能力(T-AOC)反应细胞的抗氧化能力。结果依达拉奉各浓度组均明显降低MDA的含量,提高SOD的活性及总T-AOC,上述作用随药物浓度增加呈增强趋势。结论依达拉奉能降低内皮细胞的氧化损伤程度,提高内皮细胞抗氧化能力。     

冠心平片保护血管内皮细胞作用研究

目的观察冠心平片对内皮细胞损伤过程中丙二醛（MDA）与超氧化物歧化酶（SOD）活性的影响,探讨冠心平片治疗冠心病的可能机制。方法体外培养内皮细胞ECV304,随机分成正常对照组,模型对照组,阳性药对照组和冠心平大、中、小剂量组。除正常对照组外,其他组用100 μmol&#8226;L 1过氧化氢（H2O2）制作内皮细胞损伤模型。血清药理学方法给药,继续培养后显微镜下观察各组细胞生长情况,检测MDA与SOD。结果100 μmol&#8226;L 1 H2O2对ECV304有损伤作用。冠心平能显著增加细胞SOD分泌,显著抑制H2O2诱导的MDA的产生。结论冠心平片可减轻H2O2对ECV304的损伤程度,机制可能与其抗氧化作用有关。     

灯盏乙素对过氧化氢致PC12细胞损伤的抗氧化作用

目的研究灯盏乙素对过氧化氢(H2O2)诱导PC12细胞损伤的保护作用。方法建立H2O2致PC12细胞损伤模型,倒置相差显微镜下进行一般形态学观察,化学比色法测定乳酸脱氢酶(LDH)释放量及细胞培养液和细胞内丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果100μmol/L H2O2诱导PC12细胞4 h,细胞呈现明显损伤形态,LDH释放量增加,细胞培养液和细胞内MDA含量升高,SOD活性降低。灯盏乙素可明显改善形态学损伤,显著降低LDH释放量、细胞培养液及细胞内MDA含量,提高SOD活性。结论灯盏乙素对H2O2诱导PC12细胞损伤具有保护作用,其作用机制可能与提高PC12细胞的抗氧化能力有关。     

栀子苷对氧化应激损伤血管内皮细胞的保护作用

目的研究栀子苷对体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)氧化损伤的保护作用。方法采用过氧化氢(Hy-drogen peroxide,H2O2)建立体外培养的HUVEC细胞氧化应激损伤模型。将细胞分为正常对照组、H2O2氧化损伤组、H2O2加栀子苷低、中、高剂量组,其中后3组给予栀子苷预培养24h后加入400μmol.L-1H2O2,然后继续培养12h。MTT法检测细胞存活率;检测各组细胞内超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、一氧化氮合酶(NOS)水平和培养液中一氧化氮(NO)水平;检测细胞内活性氧簇(ROS)水平;用流式细胞仪检测细胞凋亡及周期改变。结果栀子苷能明显提高H2O2损伤的内皮细胞的存活率,提高细胞内SOD、GSH-Px、NOS活性,使培养液中NO含量增加,降低细胞内ROS水平,减少H2O2诱导的细胞凋亡率,恢复血管内皮细胞增殖。结论栀子苷具有较强的抗氧化能力及内皮细胞保护作用,可减轻血管内皮细胞的氧化损伤。     

β-榄香烯抗氧化损伤作用的实验研究

目的:利用内皮细胞氧化损伤模型和鹌鹑饵食性高脂血症模型,研究β-榄香烯的抗氧化损伤作用.方法:采用过氧化氢(H2O2)建立体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)氧化损伤模型,观察不同浓度(0.1、1、10 mg/L)β-榄香烯对细胞内活性氧水平、丙二醛(MDA)含量和超氧化物岐化酶(SOD)活性的影响;采用高脂饲料喂养法建立鹌鹑高脂血症模型,观察β－榄香烯对鹌鹑血清SOD活性、MDA和一氧化氮(NO)含量的影响.结果:β-榄香烯可降低内皮细胞内活性氧水平,升高SOD活力,降低MDA含量;β-榄香烯升高鹌鹑血清中SOD活性和NO含量,降低MDA水平.结论:β－榄香烯具有较强的抗氧化、清除氧自由基及保护血管肉皮细胞作用.     

甲基莲心碱对光化学诱导大鼠脑缺血损害的保护作用

目的：探讨甲基莲心碱对脑缺血的保护作用。方法：应用光化学诱导大鼠大脑中动脉栓塞（MCAO）模型，观察预防性使用甲基莲心碱对脑梗死患者，梗死区脑组织H2O，Ca^2 ，NO，丙二醛（MDA）含量以及超氧化物歧化酶（SOD）活力的影响。结果：光化学反应6h后，脑梗死范围占同侧半球体积的（20.9＋4.3）％，梗死区脑组织Ca^2 ,H2O,MDA含量增高而NO水平和SOD活力下降。预防性给予甲基莲心碱可缩小脑梗死面积，同时增加梗死区脑组织NO水平和SOD活力，降低Ca^2 ,H2O,DMA含量。结论：甲基莲心碱具有减轻大鼠脑缺血的作用，其机制可能与对抗脑缺血时NO，Ca^2 的病理性改变有关。     

丹酚酸A对过氧化氢诱导的人脐静脉内皮细胞损伤的保护作用

目的研究丹酚酸A对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)氧化损伤的保护作用。方法采用过氧化氢(H2O2)诱导的HUVECs氧化损伤模型,观察丹酚酸A(10,20和40μg·mL-1)对血管内皮细胞损伤的保护作用,MTT法检测细胞存活率,试剂盒检测细胞上清液中的超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、乳酸脱氢酶(LDH)、一氧化氮(NO),比色法测定Caspase-3的活性。结果丹酚酸A可抑制H2O2诱导的血管内皮细胞的凋亡,同时增加SOD的活性,降低MDA的水平,减少LDH的漏出量,增加NO的释放,降低Caspase-3的活性。且丹酚酸A的上述作用均呈质量浓度依赖性。结论丹酚酸A可以有效保护内皮细胞免受氧化损伤。     

扇贝裙边糖胺聚糖对OX-LDL致血管内皮细胞损伤的保护作用

目的　研究扇贝裙边提取物糖胺聚糖 (SS GAG)对血管内皮细胞的保护作用 ,进而探讨其抗动脉粥样硬化 (AS)作用机制。方法　本研究采用氧化低密度脂蛋白 (OX LDL)建立体外培养的人脐静脉血管内皮细胞株 (HUVEC ,CRL 2 4 80 )损伤模型 ,用MTT法和化学方法分别从细胞和分子水平观察SS GAG对血管内皮细胞增殖活性及细胞内一氧化氮 (NO)水平和内皮型一氧化氮合酶 (eNOS)活性的影响。结果　OX LDL能明显抑制血管内皮细胞的增殖活性 (P <0 0 1) ,降低血管内皮细胞内NO水平及eNOS的活性 (P <0 0 1) ;用SS GAG(终浓度为 5 0 ,10 0 ,2 0 0mg·L-1)预处理后 ,能逆转上述效应 (P <0 0 1)。结论　OX LDL抑制血管内皮细胞的增殖 ,降低内皮型eNOS的活性 ,减少细胞内NO的生成 ;SS GAG对血管内皮细胞的脂质过氧化物损伤有保护作用。     

H2O2对大鼠神经细胞的氧化损伤及硒的保护作用

目的 研究过氧化氢（Ｈ２Ｏ２）对体外培养的分化期大鼠胚胎神经细胞的氧化损伤以及硒的保护作用。方法 ＭＴＴ法检测细胞存活率,硫代巴比妥酸法测定丙二醛（ＭＤＡ）含量,黄嘌呤氧化酶法测定超氧化岐化酶（ＳＯＤ）活性,扫描电镜观察细胞膜完整性。结果Ｈ２Ｏ２抑制分化期神经细胞分裂增殖,经过氧化氢作用２４ｈ的神经细胞,其胞液中ＳＯＤ活力下降,ＭＤＡ含量升高,并表现为浓度－效应关系;扫描电镜观察可见细胞膜损伤。     

Rb1 protects endothelial cells from hydrogen peroxide-induced cell senescence by modulating redox status

Senescence of endothelial cells has been proposed to play an important role in endothelial dysfunction and atherogenesis. In the present study we aimed to investigate whether ginsenoside Rb1, a major constituent of ginseng, protects endothelial cells from H(2)O(2)-induced endothelial senescence. While H(2)O(2) induced premature senescent-like phenotype of human umbilical vein endothelial cells (HUVECs), as judged by increased senescence-associated β-galactosidase (SA-β-gal) activity, enlarged, flattened cell morphology and sustained growth arrest, our results demonstrated that Rb1 protected endothelial cells from oxidative stress induced senescence. Mechanistically, we found that Rb1 could markedly increase intracellular superoxide dismutase (Cu/Zn SOD/SOD1) activity and decrease the malondialdehyde (MDA) level in H(2)O(2)-treated HUVECs, and suppress the generation of intracellular reactive oxygen species (ROS). Consistent with these findings, Rb1 could effectively restore the protein expression of Cu/Zn SOD, which was down-regulated in H(2)O(2) treated cells. Taken together, our data demonstrate that Rb1 exhibits antioxidant effects and antagonizes H(2)O(2)-induced cellular senescence.     

BMAL1对H2O2诱导的H9C2心肌细胞损伤的影响及机制探讨

目的 探讨节律基因BMAL1对过氧化氢（H2O2）诱导的H9C2心肌细胞损伤的影响及机制。方法 构建 BMAL1稳定过表达的H9C2细胞系后,实验分为2个部分。（1）实验1。对照组、H2O2组（0.2 mmol/L的H2O2处理24 h）、 BMAL1 过表达（BMAL1-OE）组（BMAL1 稳定过表达 H9C2 细胞）、BMAL1 过表达+H2O2（BMAL1-OE+H2O2）组 （0.2 mmol/L的H2O2处理BMAL1稳定过表达H9C2细胞24 h）。（2）实验2。H2O2组、BMAL1-OE+H2O2组、BMAL1过表 达+抑制 NRF2+H2O2（BMAL1-OE+ML385+H2O2）组（NRF2 抑制剂 2 μmol/L 的 ML385 预处理 BMAL1 稳定过表达 H9C2 细胞 24 h,再用 0.2 mmol/L 的 H2O2处理 24 h）、BMAL1 过表达+抑制 HO-1+H2O2（BMAL1-OE+Znpp+H2O2）组 （HO-1抑制剂5 μmol/L的Znpp预处理BMAL1稳定过表达H9C2细胞24 h,再用0.2 mmol/L的H2O2处理24 h）。CCK-8 法检测细胞活力,羟胺法检测超氧化物歧化酶（SOD）活性、TBA 法检测丙二醛（MDA）含量,Western blot 法检测 BMAL1、核因子 E2 相关因子 2（NRF2）和血红素加氧酶-1（HO-1）蛋白表达水平。结果 （1）与 Control 组相比, BMAL1-OE组BMAL1 mRNA表达水平升高,H2O2组细胞活力和细胞上清液SOD活性下降、MDA含量增加,BMAL1、 NRF2和HO-1蛋白相对表达水平降低（P＜0.05）;与H2O2组相比,BMAL1-OE+H2O2组细胞活力和细胞上清液SOD活 性增加,MDA 含量减少,而 BMAL1、NRF2 和 HO-1 蛋白相对表达水平升高（P＜0.05）;（2）与 BMAL1-OE+H2O2组相 比,BMAL1-OE+ML385+H2O2组和BMAL1-OE+Znpp+H2O2组细胞活力和细胞上清液SOD活性降低,MDA含量增加 （P＜0.05）。结论 BMAL1可能通过上调NRF2/HO-1信号轴,减轻H2O2诱导的大鼠心肌细胞氧化应激损伤。     

葛根素对外周血内皮祖细胞缺氧/复氧损伤的保护作用

目的：研究葛根素对外周血内皮祖细胞（EPCs）缺氧/复氧损伤的保护作用。方法：采用密度梯度离心法和贴壁培养法相结合,使用专用培养基EGM-2,成功分离纯化EPCs,通过形态学、细胞表面分子标志物检测、内皮祖细胞吞噬功能对其鉴定;采用Krebs液建立缺氧/复氧损伤模型,用葛根素干预后,采用MTT法测定细胞活力、2,4-二硝基苯肼显色法测定细胞外乳酸脱氢酶（LDH）释放量、黄嘌呤氧化酶法测定细胞内超氧化物歧化酶（SOD）活性、硫代巴比妥酸法测定丙二醛（MDA）含量、硝酸还原酶法测定一氧化氮（NO）含量;Western blot法考察胞核、胞质Nrf2和全细胞HO-1蛋白表达。结果：与模型组相比,葛根素20.8 mg·L^-1及41.6 mg·L^-1组显著提高细胞活力（P<0.05,P<0.01）;葛根素20.8 mg·L^-1及41.6 mg·L^-1能显著降低NO、MDA含量和LDH释放量（P<0.01）;葛根素20.8 mg·L^-1,41.6 mg·L^-1,83.2 mg·L^-1均显著提高缺氧/复氧后细胞SOD活性（P<0.01）,并上调细胞HO-1、胞核Nrf2蛋白表达（P<0.01）,显著降低胞浆Nrf2蛋白表达（P<0.01）。结论：葛根素可显著拮抗缺氧/复氧对EPCs的损伤,可能与其抑制细胞过氧化损伤,增强细胞抗氧化能力有关。