WAR-5、Fasudil治疗EAE的疗效比较及作用机制研究

目的比较WAR-5与盐酸法舒地尔(Fasudil)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)的治疗效果,并探究其作用机制。方法采用小鼠髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35-55多肽(MOG35-55)免疫雌性C57BL/6小鼠建立慢性EAE模型,并随机分为EAE对照组、WAR-5治疗组和Fasudil治疗组。于免疫后第3天开始,分别腹腔注射WAR-5、Fasudil及生理盐水,比较各组小鼠体质量变化和临床评分。于免疫后第28天处死各组动物,制作脊髓冰冻切片进行CD4+T细胞、CD68+巨噬细胞及核转录因子-κB(p-NF-κB/p65)染色,观察其在脊髓中的表达。提取脑组织的蛋白用Western blot法检测Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶(ROCK)Ⅱ和p-NF-κB/p65蛋白表达,并采用Griess法检测脾细胞培养上清液的一氧化氮(NO)释放水平。结果与EAE对照组(108.70±20.26、399.00±25.94)比较,WAR-5治疗组(13.67±4.041、52.67±13.43)及Fasudil治疗组(15.33±5.033、31.00±13.45)脊髓内CD4+T细胞和CD68+巨噬细胞数目均减少(均P0.01),WAR-5与Fasudil两治疗组相比,差异无统计学意义。与EAE对照组(1.9500±0.3976、0.5885±0.05982)比较,WAR-5组(0.6137±0.1778、0.0096±0.0015)及Fasudil组(1.1960±0.2225、0.3574±0.1496)脑内ROCKⅡ、p-NF-κB/p65表达均降低,WAR-5治疗组脑内ROCKⅡ、p-NF-κB/p65表达亦均低于Fasudil治疗组(均P0.05)。WAR-5和Fasudil治疗组上清液NO含量分别为(16.40±0.5247)μmol/L、(17.69±0.2833)μmol/L,均低于EAE对照组〔(20.07±0.6116)μmol/L;均P0.001〕,且WAR-5治疗组低于Fasudil治疗组(P0.01)。与Fasudil治疗组比较,800μg及1600μg药物注射后,WAR-5治疗组小鼠的存活状态明显较好;800μg药物注射后,WAR-5治疗组小鼠的脚趾无明显血管扩张反应。结论 WAR-5对EAE的治疗效果与Fasudil相近,且其治疗安全性较好,扩张血管作用较小,其作用机制可能与WAR-5抑制小鼠ROCKⅡ的表达及抑制炎性反应相关。     

缺氧预处理对颅脑损伤大鼠脑组织HIF-1α及其HO-1表达的影响

目的探讨缺氧预处理对颅脑损伤大鼠脑组织缺氧诱导因子（HIF-1α）及血红素氧合酶-1（HO-1）表达的影响。方法 Sprague-Dawley大鼠102只,随机分为对照组（n=6）、创伤组（n=48）和预处理组（n=48）。创伤组按照改进的Feeney自由落体撞击法建立大鼠颅脑损伤模型,预处理组给予缺氧预处理后,同法造模。采用RT-PCR和Western blotting观察伤后1 h、4 h、8 h、12 h和1 d、3 d、7 d、14 d挫伤周围脑组织HIF-1α、HO-1表达变化。结果创伤组与对照组比较,HIF-1α和HO-1在伤后4 h、8 h、12 h和1、3 d表达上调（P〈0.05）。预处理组与创伤组比较,HIF-1α和HO-1在伤后1 h逐渐上调,伤后4 h、8 h、12 h和1、3 d表达显著上调,直至伤后7 d（P〈0.05）。结论缺氧预处理可增加颅脑损伤后挫伤区周围脑组织HIF-1α的表达,进而促进HO-1 m RNA及蛋白表达。其机制可能是缺氧预处理提高颅脑损伤对缺氧的适应性,减轻挫伤周围脑组织氧自由基对神经细胞伤害。     

兔蛛网膜下腔出血后基底动脉NF-κB、ICAM-1表达的研究

目的探讨兔蛛网膜下腔出血(SAH)后核转录因子-κB(NF-κB)及细胞间粘附分子-1(ICAM-1)在脑血管痉挛(CVS)发病机制中的作用及其相互间内在关系。方法新西兰纯种大白兔160只,枕大池二次注血,制作兔SAH后CVS模型。实验动物随机分为对照组、生理盐水(NS)组和SAH后3个亚组(3d、7d、11d组)。分离基底动脉,应用形态学观察、免疫组化和原位杂交等方法,观察基底动脉(BA)管径、血管壁上NF-κB及ICAM-1表达的动态变化。结果对照组及NS组脑血管造影BA光滑、平直,无串珠样改变;SAH后第3d,DSA显示在椎基底动脉交接处可见狭窄;第7d,BA管腔狭窄明显。伴随着血管腔管径的变化,血管壁上NF-κB及ICAM-1的表达也出现相应的变化。NF-κB与ICAM-1在蛋白质和mRNA水平上的表达强弱有时间上的先后性,在CVS发生的早期即出现NF-κB的表达升高,继而出现ICAM-1的高表达,而ICAM-1的表达强弱恰好与CVS的发生、发展过程相一致。对照组和NS组在BA的内皮细胞上仅在局部有微弱的表达。结论NF-κB、ICAM-1参与了痉挛血管壁的炎症反应,且其表达的变化可能与CVS的发生和发展有关。     

银杏叶提取物对脑动脉粥样硬化大鼠血清TG、TC和HO-1水平的影响

目的 探讨银杏叶提取物对脑动脉粥样硬化大鼠血清甘油三酯(Triglyceride,TG)、总胆固醇(Total cholesterol,TC)和血红素氧合酶-1(Heme oxygenase-1,HO-1)水平的影响。方法 30只SD健康雄性大鼠,20只大鼠建立老龄脑动脉粥样硬化模型,分为假手术组、模型组和银杏叶组; 检测血清TG、TC、高密度脂蛋白胆固醇(High density lipoprotein cholesterol,HDL-C)、HO-1水平、动脉硬化指数(Arteriosclerosis index,AI); 采用MTT检测细胞增殖能力,流式细胞仪检测脑动脉平滑肌细胞凋亡,Western blot法检测Caspase-3、Bcl-2、Bax蛋白水平。结果 与模型组比较,银杏叶组脑动脉斑块面积、新生内膜面积、内膜厚度降低,管腔面积升高(P<0.05); 与模型组比较,银杏叶组TG、HDL-C水平、AI降低,TC、HO-1水平升高(P<0.05); 与模型组比较,银杏叶组24、48、72 h细胞凋亡率降低(P<0.05),银杏叶组24 h细胞凋亡率低于48和72 h细胞凋亡率(P<0.05); 与模型组比较,银杏叶组48、72 h细胞增殖率升高(P<0.05),银杏叶组24h细胞增殖率低于48和72 h细胞增殖率(P<0.05); 与模型组比较,银杏叶组Caspase-3、Bax水平降低,Bcl-2水平升高(P<0.05)。结论 银杏叶提取物能够改善脑动脉粥样硬化大鼠血清TG、TC、HO-1水平,并通过下调Caspase-3、Bax蛋白表达,上调Bcl-2表达来促进脑动脉平滑肌细胞增殖,抑制脑动脉平滑肌细胞凋亡。     

核转录因子-κB在糖尿病大鼠穹窿下器细胞的表达

目的观察核转录因子-κB(NF-κB)在不同时期糖尿病大鼠穹窿下器(SFO)中的表达并探讨其表达的意义。方法雄性Wistar大鼠,模型组每只大鼠给予链脲佐菌素60mg·kg-1,腹腔一次性注射,建立1型糖尿病大鼠模型。用免疫组织化学染色方法观察NF-κB在正常大鼠及2、4、8 w糖尿病大鼠SFO细胞内的表达。结果对照组NF-κB免疫阳性细胞稀少,胞核呈浅棕黄色,平均吸光度为156.42±7.25。2w组NF-κB免疫强阳性细胞SFO内均匀分布,核呈棕褐色,高度表达,为强阳性,平均吸光度为183.72±8.35。4w组SFO NF-κB的表达水平有所下降但仍高于正常对照组,平均吸光度为169.55±5.84。8w组NF-κB免疫强阳性细胞的表达与正常对照组无明显区别,平均吸光度为158.32±8.72。平均吸光度测定:2w组>4w组>8w组,P﹤0.05,8w组与对照组比较P﹥0.05。结论 NF-κB在糖尿病大鼠SFO细胞内呈短暂一过性的表达增强,NF-κB途经可能在糖尿病大鼠SFO细胞损伤中起着重要的作用。     

异氟烷预处理对偏头痛大鼠行为学症状及三叉神经节相关蛋白表达的影响

目的探讨异氟烷(ISO)对硝酸甘油所致偏头痛大鼠行为学症状及三叉神经节内相关蛋白表达的影响。方法采用随机数字表法将SD大鼠分为对照组(S组)、模型组(M组)、ISO预处理组(包括低剂量和高剂量组,即L组和H组),每组10只,并采用皮下注射硝酸甘油法制备偏头痛模型。L组和H组于造模前30 min分别给予1%和2%ISO吸入麻醉30 min。观察并比较各组大鼠造模后耳红出现和消失的时间及每30 min时间(T_(1-7))段内的挠头、爬笼次数。采用Western blot测定三叉神经节内白介素-1β(IL-1β)、环氧合酶-2(COX2)、降钙素基因相关肽(CGRP)及核转录因子-κB p65(NF-κB p65)的蛋白表达水平。结果与S组相比,M组和ISO预处理组大鼠造模后均出现双耳发红及挠头、爬笼次数均增多等现象,三叉神经节内IL-1β、COX-2、CGRP及胞核NF-κB p65蛋白表达水平明显升高,胞浆NF-κB p65蛋白表达水平明显降低(P 0. 05);与M组相比,ISO预处理组大鼠耳红消失的时间明显缩短,T_(2-7)时挠头次数均明显减少,T_(2-6)时爬笼次数均明显减少,三叉神经节内IL-1β、COX-2、CGRP及胞核NF-κB p65蛋白表达水平明显降低,胞浆NF-κB p65蛋白表达水平明显升高(P 0. 05),且H组较L组更明显(除胞浆NF-κB p65蛋白外)。结论异氟烷能改善偏头痛大鼠的行为学症状,其机制可能与下调三叉神经节内IL-1β、COX-2、CGRP蛋白的表达水平及抑制NF-κB的激活有关。     

米诺环素对脑缺血再灌注大鼠海马CA1区IκB-α、NF-κB p65表达的影响

目的观察米诺环素对脑缺血再灌注大鼠脑组织IκB-α、NF-κB表达的影响,探索米诺环素脑保护作用机制。方法 72只S-D大鼠,随机分为假手术组(NS组)、脑缺血再灌注模型组(IR组)、米诺环素治疗组(MT组),线栓法建立大脑中动脉缺血再灌注模型,采用免疫组织化学法检测大鼠脑组织IκB-α、NF-κB p65的表达。结果相应时间点MT组较IR组IκB-α阳性细胞区灰度值明显增高,NF-κB p65胞核内阳性数明显降低,差别均有统计学意义(P<0.05)。结论米诺环素可以增加大鼠脑缺血再灌注后脑组织IκB-α表达,减少NF-κB的阳性表达,达到脑保护作用。     

血管性痴呆大鼠海马区核因子-κB、环氧合酶-2的表达变化

目的通过检测血管性痴呆(vascular dementia,VD)大鼠海马CA1区核因子-κBp65(nuclear factor-κB p65,NF-κBp65)与环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)的表达,探讨NF-κB、COX-2对VD大鼠的损伤作用。方法28只大鼠随机分为两组,假手术(SOG)组(n=13)和模型(VD)组(n=15),采用HE染色,光镜下观察海马CA1区锥体细胞的改变,免疫组化方法检测海马CA1区NF-κBp65、COX-2蛋白的表达。结果与假手术组相比,模型组组海马CA1区锥体细胞损伤、丧失明显,NF-κBp65、COX-2蛋白表达高于假手术组,与假手术组相比有统计学意义(P(0.01)。结论血管性痴呆大鼠海马CA1区NF-κBp65、COX-2蛋白的表达增加,NF-κBp65、COX-2蛋白的高表达可能是学习记忆障碍的原因之一。     

兔蛛网膜下腔出血后NF-κB在基底动脉的表达

目的探讨兔蛛网膜下腔出血(SAH)后核转录因子-κB(NF-κB)的表达与脑血管痉挛(CVS)的关系。方法新西兰纯种大白兔160只,枕大池二次注血,制作兔SAH后CVS的模型。分离基底动脉,应用形态学观察、免疫组化、原位杂交等方法,观察兔基底动脉管径变化、血管壁上NF-κB的表达及其与CVS的关系。结果在SAH后第7天,DSA证实基底动脉痉挛明显;痉挛血管壁上NF-κB的表达在SAH后第5天出现强烈表达,两者的表达有时项上的差别。抑制NF-κB的表达可以有效缓解CVS的发生。结论NF-κB的表达与CVS的发生有一定的相关性,在CVS的发生和发展过程中起了重要的作用。     

银杏内酯、银杏黄酮对脑淋巴阻滞后SAH大鼠脑组织HO-1表达的影响

目的 探讨银杏内酯、银杏黄酮对脑淋巴引流阻滞(CLB)后蛛网膜下腔出血(SAH)大鼠脑组织血红素氧合酶-1(HO-1)表达的影响.方法 将48只Wistar大鼠分为正常对照组、SAH组、SAH+CLB组、SAH+CLB+生理盐水(NS)组、SAH+CLB+银杏内酯干预组(又分为低剂量、高剂量组)、SAH+CLB+银杏黄酮干预组(又分为低剂量、高剂量组).用结扎颈部淋巴管、摘除淋巴结及注入自体动脉血法制作CLB和SAH大鼠模型.制作CLB模型后24h诱导SAH模型.用RT-PCR法检测大鼠脑组织HO-1mRNA的表达.结果 各模型组大鼠脑组织HO-1mRNA表达明显高于正常对照组(均P＜0.01),其中以SAH+CLB组、NS组表达进一步增强.银杏内酯和银杏黄酮组HO-1mRNA的表达水平明显高于SAH+CLB组、NS组(均P＜0.01),其中两高剂量组表达又明显高于低剂量组(均P＜0.01),两低剂量组大鼠脑组织HO-1mRNA的表达与SAH+CLB组及NS组差异无统计学意义(P＞0.05).结论 CLB可诱导SAH鼠脑组织HO-1表达水平明显增高,银杏内酯和银杏黄酮对之有促进作用,尤以高剂量组效果更明显.     

血红素氧合酶-1及血红素氧合酶-2在大鼠局灶性脑缺血中的意义

目的　研究血红素氧合酶 1(HO 1)及血红素氧合酶 2 (HO 2 )在局灶性脑缺血中的作用。方法　采用大鼠大脑中动脉栓塞脑缺血模型 ,对 6 6只大鼠脑缺血后不同时间点进行HO 1、HO 2免疫组化染色及病理学研究 ,并用计算机图像分析技术计算两者表达水平。结果　栓塞后 30min大鼠皮质及海马即有HO 1阳性神经元及胶质细胞的表达 ,且随着时间推移HO 1的表达逐渐增强 ,到栓塞后 12h达峰值 (P <0 0 1) ,以后逐渐下降 ,栓塞后 1周仍有HO 1表达。HO 2在正常大鼠及梗死大鼠脑组织内均有表达。栓塞后不同时间段 ,HO 2阳性神经元的数量无明显变化 (P >0 0 5 ) ,但HO 2表达呈动态变化 ,2 4h时最高 (P <0 0 1) ,以后逐渐下降。结论　脑缺血时脑内HO 1、HO 2表达的不同变化 ,是脑组织对损伤恢复重要的机制之一。HO 1修复受损的神经元和胶质细胞 ,而HO 2在于维护正常细胞的稳定     

乌司他丁对实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠神经的保护作用

目的 研究乌司他丁(UTI)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)髓鞘再生及脑源性神经营养因子(BDNF)表达的影响.方法 24只C57BIZ6雌性小鼠随机分成UTI组(U组)、对照组(S组)和正常组(N组),每组8只,以髓鞘染色观察腰髓髓鞘脱失情况,采用Western blot技术检测并比较各组脑组织BDNF、髓鞘碱性蛋白(MBP)、2',3'-环核甘酸-3'-磷酸水解酶(CNPase)表达浓度.结果 U组小鼠神经功能评分(第12、13、14、22、23、31、33、34、35天时分别为0、0.25、0.38、0.63、0.63、0.40、0.40、0.40和0.40分)明显低于S组(相同时点分别为0.55、0.88、1.00、1.75、2.25、1.00、1.00、1.00和1.00,U=16.00、15.00、14.50、7.50、0.00、14.0、14.50、12.00和14.50,均P＜0.05).U组小鼠髓鞘脱失程度较S组轻.Western blot结果显示U组脑组织BDNF、MBP、CNP(1.96±0.29、2.67±0.48和1.75±0.20)较S组(0.80±0.15、1.36±0.38和1.06±0.18)表达增高,差异具有统计学意义(LSD法,P＜0.05).结论 UTI对EAE具有神经保护作用,其机制可能是通过促进脑组织BDNF表达,保护少突胶质细胞、神经元及促进髓鞘再生.

Abstract：

Objective To investigate the effect of ulinastatin (UTI) on the expression of brainderived neurotrophic factor ( BDNF ) and remyelination in mice with experimental autoimmune encephalomyelitis ( EAE).Methods Twenty-four C57BL/6 mice were randomly divided into UTI group (U),normal saline treated group (S) and normal control group (N,n = 8,respectively).Demyelinations in the spinal cord were observed by solochrome cyanin staining.The expression of BDNF,myelin basic protein (MBP),and 2',3 '-cyclic nucleotide 3'-phosphodiesterase (CNP) in brain tissue of each group were evaluated by Western blot.Results Average clinical scores in group U at the 12,13,14,22,23,31,33,34 and 35 days were 0,0.25,0.38,0.63,0.63,0.40,0.40,0.40 and 0.40 respectively.They were significantly lower than group S at the same time ( U= 16.00,15.00,14.50,7.50,0.00,14.50,14.50,12.00 and 14.50,all P ＜0.05).Solochrome cyanin staining showed that demyelination of spinal cord in group U was also significantly improved than group S.Expressions of BDNF ( 1.96 ± 0.29),MBP (2.67 ± 0.48 ) and CNP ( 1.75 ± 0.20) in group U were all significantly higher than group S ( There were 0.80 ± 0.15,1.36 ± 0.38 and 1.06 ± 0.18 respectively,all P ＜ 0.05).Conclusions UTI has protective effect on EAE.The possible mechanism is that it could promote remyelination,and protect oligodendrocytes and neurons in EAE model by increasing BDNF expression in brain.     

Long-term expression of heme oxygenase-1 (HO-1, HSP-32) following focal cerebral infarctions and traumatic brain injury in humans

Extracellular heme derived from hemoglobin following hemorrhage or released from dying cells induces the expression of heme oxygenase-1 (HO-1, HSP-32) which metabolizes heme to the gaseous mediator carbon monoxide (CO), iron (Fe) and biliverdin. Biliverdin and its product bilirubin are powerful antioxidants. Thus, expression of HO-1 is considered to be a protective mechanism against oxidative stress and has been described in microglia, astrocytes and neurons following distinct experimental models of pathological alterations to the brain such as subarachnoidal hemorrhage, ischemia and traumatic brain injury (TBI) and in human neurodegenerative diseases. We have now analyzed the expression of HO-1 in human brains following TBI (n = 28; survival times: few minutes up to 6 months) and focal cerebral infarctions (FCI; n = 17; survival time: < 1 day up to months) by immunohistochemistry. Follwing TBI, accumulation of HO-1+ microglia/macrophages at the hemorrhagic lesion was detected as early as 6 h post trauma and was still pronounced after 6 months. In contrast, after FCI HO-1+ microglia/macrophages accumulated within focal hemorrhages only and were absent in non-hemorrhagic regions. Further, HO-1 was weakly expressed in astrocytes in the perifocal penumbra. In contrast to experimental data derived from rat focal ischemia, these results indicate a prolonged HO-1 expression in humans after brain injury.     

重组人促红细胞生成素对急性脑缺血大鼠Nrf2及HO-1表达的影响

目的 研究重组人促红细胞生成素(rhEPO)对急性脑缺血大鼠脑组织中核因子E2相关性因子2(Nrf2)及血红素加氧酶1(HO-1)表达的影响,探讨rhEPO的抗氧化作用机制. 方法 将36只雄性SD大鼠按随机数字表法分为假手术组、模型组、rhEPO组,后两组采用线栓法制备大鼠永久性局灶性脑缺血模型.rhEPO组在造模成功2h后腹腔注射rhEPO 5000 IU/kg,假手术组和模型组给予等量生理盐水.缺血24 h后处死大鼠取脑,采用免疫组化染色和Western blotting检测脑组织中Nrt2及HO-1的表达. 结果 免疫组化染色结果显示,假手术组Nrf2及HO-1均只有少量阳性表达,模型组和rhEPO组Nrf2及HO-1阳性表达细胞数均较假手术组明显增多,且rhEPO组阳性表达细胞数亦明显多于模型组,差异均有统计学意义(P＜0.05);阳性表达细胞主要为缺血区的神经元和星形胶质细胞.Western blotting结果也显示Nrt2及HO-1表达按假手术组、模型组、rhEPO组顺序依次增强,组间两两比较差异均有统计学意义(P＜0.05). 结论 急性脑缺血后脑组织中Keap1 -Nrf2/ARE抗氧化系统可被激活,rhEPO通过激活该抗氧化系统从而发挥脑保护作用.     

NF-κB在继发性脑外伤中的作用

近年来,国内外研究结果表明,脑外伤所激发的局部炎症反应在伤情的发展和预后方面起着重要的作用.局部神经组织的变性坏死、脑血流自身调节功能的改变、血脑屏障通透性改变及血管性和细胞毒性脑水肿的发生、损伤区神经组织生化代谢的紊乱和神经递质的变化以及脑组织的修复等都与炎症反应有着密切的联系.     

氯化锂预处理对脑出血后血肿周围神经细胞凋亡及核因子κB表达的抑制作用

目的 观察氯化锂预处理对大鼠脑出血后血肿周围神经细胞凋亡、炎症反应及核因子κB(NF-κB)表达的影响.方法 54只SD大鼠按随机数字表法分为假手术组、脑出血组和氯化锂预处理脑出血组,每组各18只.氯化锂预处理脑出血组手术前7 d起每天腹腔注射氯化锂(1mmol/kg).利用立体定向技术,将Ⅳ型胶原酶用微量进样器精确注入大鼠内囊诱导成脑出血模型.跟据术后处死动物的时间不同,各组再分别分为1、3、7 d三个亚组.分别采用TUNEL法、苏木素-伊红染色和免疫组织化学染色观察血肿周围神经细胞凋亡、炎症反应及NF-κB表达的情况.结果 在脑出血后1、3、7 d,与脑出血组(TUNEL阳性细胞数:18.32±3.75,33.24±6.37,20.49±4.87;NF-κB阳性细胞数:55.34±5.83,30.63±3.27,9.53±2.37)比较,氯化锂预处理脑出血组血肿周围区TUNEL阳性细胞数(15.84±3.12,10.88±4.75,5.83±4.39)明显减少,NF-κB阳性细胞数(29.27±3.37,16.36±3.64,7.64±2.31)明显降低,比较差异有统计学意义(P<0.05),炎症反应也明显减轻.结论 氯化锂预处理可能通过降低NF-κB的表达来减轻脑出血后的炎症反应,减少脑出血后血肿周围神经细胞凋亡,其对脑出血后脑损伤有神经保护作用.     

热休克预处理对实验性自身免疫性脑脊髓炎神经细胞凋亡的影响及其机制研究

目的观察热休克预处理（HSP）后实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）大鼠热休克蛋白70（HSP70）和核因子-KB（NF-KB）的表达及对神经细胞凋亡的影响，探讨其对EAE模型的神经保护作用。方法36只Wistar大鼠随机分为对照组（CON），EAE组和HSP组。EAE组制作成EAE模型；HSP组先给予HSP，24h后再制作成EAE模型；CON组不行特殊处理。观察大鼠神经症状．进行神经功能评分。于免疫后14-17d处死动物，取脊髓行HE染色，检测HSP70、NFKB免疫组化表达及神经细胞的凋亡。结果CON组大鼠没有发病。与EAE组大鼠比较，HSP组大鼠发病率显著降低，起病时间显著延迟，神经功能评分显著降低（均P〈0．05）。EAE组体重增加值较CON组明显减低，HSP后大鼠体重增加值较EAE组显著增加（p〈0．05）。脊髓病理显示HSP组炎性病灶数较EAE组显著减少（p〈0．05）。HSP组与EAE组相比，脊髓内HSP70阳性细胞数显著增加，NF-KB阳性细胞数显著减少，神经细胞凋亡显著抑制（均P〈0．01）。结论HSP对EAE大鼠具有一定的神经保护作用，其机理可能与HSP70表达增加，NF—KB表达受抑制从而导致神经细胞凋亡减少有关。     

脑梗死患者急性期血清血红素氧合酶-1、非结合胆红素含量变化及临床意义

目的探讨脑梗死患者急性期血清血红素氧合酶-1(HO-1)和非结合胆红素(UCB)含量的变化及临床意义。方法用酶联免疫吸附(ELISA)法及钒酸盐氧化法测定急性脑梗死(ACI)患者发病第1d、3d、6d及正常对照组的空腹血清HO-1及UCB浓度,并进行比较分析。结果ACI组发病第1d、3d、6d血清HO-1及UCB浓度依序下降。发病第1d ACI患者血清HO-1浓度和同期血清UCB浓度呈正相关(r=0·645,P<0·05);脑梗死体积和发病第1d血清HO-1浓度呈正相关(r=0·358,P<0·05),脑梗死体积和发病第3d、第6d血清UCB浓度呈负相关(r=-0·335,r=-0·267,均P<0·05)。结论HO-1的升高可能是机体对脑缺血损伤的防御反应,UCB可能在脑梗死的发病过程中具有一定的保护作用。     

Tumor necrosis factor modulates transcription of myelin basic protein gene through nuclear factor kappa B in a human oligodendroglioma cell line

Tumor necrosis factor-alpha (TNF-alpha) is a major mediator of inflammation and it is involved in many neurological disorders such as multiple sclerosis. Levels of TNF-alpha and lymphotoxin-alpha have been found elevated in plaques, bloods, and cerebral spinal fluids from multiple sclerosis patients. The expression of myelin basic protein (MBP), a major protein of the myelin sheath, is affected by cytokines secreted by activated immune cells. To determine the signal transduction pathway involving tumor necrosis factor's action in myelination and demyelination, we have cloned and analyzed cis-elements on promoters of the human and mouse MBP genes. There are two putative nuclear factors kappa-B (NF-kappaB) cis-elements on the human and one on the mouse gene promoter. In an electrophoretic mobility shift assay, all three NF-kappaB cis-elements showed binding to a protein, which was recognized by an antibody against NF-kappaB P65 component. The specificity of the binding was demonstrated in a competitive assay using NF-kappaB consensus oligonucleotides. A two base pair site-directed mutation on the mouse NF-kappaB cis-element abolished its binding activity. We created a DNA construct by linking the mouse MBP gene promoter containing the NF-kappaB cis-element to luciferase gene. Transfection of this construct into a human oligodendroglioma cell line showed TNF-alpha increased the transgene expression. Furthermore the mutation of NF-kappaB site abolished TNF-alpha -induction of the transgene. The data demonstrate that NF-kappaB is the mediator between tumor necrosis factor's action and MBP gene expression. Elucidating the molecular mechanisms underlying TNF-alpha regulation of MBP gene expression provides new scientific bases for the development of therapy against oligodendrocyte-specific and myelin-related disorders such as multiple sclerosis.