Avastin对胃癌裸鼠原位移植模型血管生成的影响

背景与目的:血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)和肿瘤的生长和转移密切相关,本实验通过VEGF单克隆抗体Avastin联合或不联合氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU),对人类胃癌裸鼠原位种植模型的肿瘤生长和转移进行干预治疗,从而探讨Avastin对胃癌生长、转移和血管生成的抑制作用。方法:应用原位移植方法建立裸鼠胃癌转移模型,术后10天将裸鼠随机分为4组:对照组、5-FU单药组、Avastin单药组和联合用药组。经过6周的治疗,对裸鼠原位肿瘤的瘤重、抑瘤率、肿瘤微血管密度、凋亡指数以及肝脏转移灶进行检测和分析。结果:和对照组相比,5-FU单药组、Avastin单药组和联合用药组原位移植肿瘤重量明显降低,抑瘤率分别为37.52%,58.76%和98.51%。微血管密度Avastin单药组和联合用药组均比对照组明显减少(8.40±1.26和7.20±1.23vs15.30±1.06),而5-FU组与对照组之间没有显著的差别;Avastin单药组和联合用药组的凋亡指数比对照组明显升高[(11.50±1.58)%和(13.60±1.35)%vs(4.70±1.70)%]。联合应用Avastin和5-FU对肝脏转移灶具有明显的抑制作用,而其他3组的抑制肝转移效果没有明显的差别。结论:抗VEGF抗体Avastin通过抑制肿瘤新生血管的生成而诱导胃癌细胞凋亡,进而显著抑制裸鼠原位肿瘤的生长。联合应用Avastin和5-FU不仅对原位肿瘤的生长抑制最为明显,而且对肝脏转移有显著的抑制作用。因此,联合应用Avastin和传统的细胞毒化疗药物对胃癌的治疗效果更显著。     

裸鼠人胃癌原位移植模型的建立

目的：建立裸鼠人胃癌原位移植模型。方法：将ＳＧＣ－７９０１人胃癌细胞株细胞接种至裸鼠皮下，建立皮下模型并反复传代，再以第八代移植瘤组织为材料，通过剖腹手术将其移植到裸鼠胃壁，待动物自然死亡后尸检。结果：该模型原位瘤沿胃壁呈浸润性生长，潜伏期为３￣４周，以后迅速增长并与腹膜粘连，约１２周以后逐渐消瘦，生存期为１６￣２４周，原位成瘤率及局部浸润率均为１００％，部分运动（２／６）出现肝脏转移。结论：裸鼠     

榄香烯在抑制肿瘤血管生成中的作用

榄香烯是一种广谱的非细胞毒性抗肿瘤药物,能通过下调血管内皮生长因子(VEGF)表达、诱导血管内皮细胞凋亡、抑制肿瘤细胞生长等方面来抑制肿瘤血管生成.有望成为理想的抗肿瘤血管生成药物,但其具体机制尚需深入研究.     

豆蔻提取物对人胃癌裸鼠移植瘤生长及血管生成的影响

[目的]观察豆蔻提取物对人胃癌细胞裸鼠移植瘤的生长和对肿瘤血管生成的影响。[方法]建立人胃癌SGC-7901细胞裸鼠皮下移植瘤模型（n=24）,随机分成4组（n=6）,对照组、豆蔻组、5-Fu组、联合组,各组按设计剂量给药。测定移植瘤体积、瘤重及抑瘤率;用免疫组化法检测各组移植瘤瘤体中血管内皮生长因子（VEGF）和微血管密度（MVD）的表达情况。[结果]豆蔻组、5-Fu组、联合组的瘤重和瘤体积明显低于对照组（P〈0.05）,3组抑瘤率分别为45.83%、66.96%和77.28%。联合组中VEGF表达率和MVD计数明显低于对照组（P〈0.05）。[结论]豆蔻提取物可抑制胃癌移植瘤的生长,与5-Fu联合应用具有协同作用,其作用机制可能与下调VEGF的表达、减少MVD有关。     

槲皮素对人乳腺癌裸鼠移植瘤的抑制作用及其对血管生成的影响

目的:观察槲皮素(Quercetin)对人乳腺癌裸鼠移植瘤的抑制作用,并探讨其对血管生成的影响。方法:复制人乳腺癌MCF-7裸鼠移植瘤模型;24只荷瘤鼠随机分为4组:A组(对照组)、B组(Quercetin)、C组(5-FU)、D组(Quercetin+5-FU),用药15日。用药中观察药效及不良反应,15日后收集肿瘤标本行光、电镜观察、免疫组化分析微血管密度(MVD)、VEGF及MMP-9。结果:1)B组、C组、D组瘤重明显低于A组,抑瘤率分别为36.46%、38.01%、48.52%(P<0.05)。2)光镜、电镜观察,使用槲皮素组肿瘤细胞出现坏死,同时肿瘤间质中血管数减少、内皮细胞有形态学改变。3)免疫组化结果:微血管密度值(MVD),B、D组高于A、C组(P<0.05)。VEGF检测显示:B、C、D组VEGF表达明显低于A组(P<0.01)。MMP-9检测显示:各组间差异无统计学意义(P>0.05)。4)单用槲皮素对裸鼠未出现不良反应,联合用药可减轻5-FU的不良反应,C组鼠体重低于A、B、D组(P<0.05)。结论:槲皮素可显著抑制MCF-7乳腺癌细胞在裸鼠体内的生长,对机体无明显不良反应。槲皮素体内抑瘤作用的机制,与其特异性抑制VEGF的表达及抑制肿瘤血管生成有关。     

榄香烯乳氟脲嘧啶众“神阙”方案治疗晚期胃癌疗效观察

研制生产无毒性抗肿瘤药物，是抗肿瘤药物研究发展的方向，中草药提取为之开辟了新的渠道，榄香烯乳酸就是目前在中药温莪术中分离出来的具有抗癌活性新乳剂，而进一步挖掘中医治法，协中草药提取物抗肿瘤最佳效应，亦是抗肿瘤面临的新课题，我们采用中医非药物疗法灸“神阙”协助榄香烯乳抗肿瘤治疗，已取得了可喜局面，３６例晚期胃癌患者随机应用榄香烯乳酸氟脲嘧啶（ＥＦ）配合灸“神阙”组（Ｉ号方案，１２例）同榄香烯乳氟嘧啶     

多烯紫杉醇联合TNF-α对人前列腺癌裸鼠皮下移植瘤的抑制作用

目的：探讨多烯紫杉醇联合TNF-α抑制前列腺癌的作用，并进一步了解其作用机理。方法：建立人前列腺癌细胞的裸鼠皮下移植瘤模型，在多烯紫杉醇和TNF—α的联合作用下观察其对皮下移植瘤生长的抑制作用，并通过RT—PCR、免疫组化方法检测Bax、Bcl-2基因mRNA表达及p53蛋白表达。结果：与多烯紫杉醇组、TNF—α组及对照组相比，多烯紫杉醇和TNF—α联合治疗组可抑制前列腺癌皮下移植瘤生长速度，且肿瘤体积明显减少（P〈0．01）。BaxmRNA表达上调，而Bcl-2mRNA表达水平下降，免疫组化结果表明p53蛋白的表达水平下降。结论：多烯紫杉醇联合TNF—α对前列腺癌有一定的抑制作用，作用机理可能是通过引起促凋亡基因Bax表达增高，从而导致肿瘤细胞加速凋亡而实现的。     

VEGF-C反义寡核苷酸抑制人胃癌裸鼠移植瘤淋巴管生成的实验研究

目的:探讨VEGF-C反义寡核苷酸(VEGF-C-ASODN)对人胃癌裸鼠移植瘤淋巴管生成的影响。方法:构建人胃癌裸鼠移植瘤模型,反义组在接种部位皮下注射VEGF-C-ASODN,正义组和对照组分别注射VEGF-C正义寡核苷酸和生理盐水,观察移植瘤生长变化。半定量RT-PCR检测移植瘤VEGF-CmRNA表达,酶组织化学方法(5'-Nase-ALPase)染色行淋巴管计数。结果:反义组移植瘤生长缓慢,体积和重量分别为(387.57±166.29)mm³、(1.4±0.7)g,较正义组和对照组显著下降(P<0.01)。反义组VEGF-CmRNA表达的相对系数为(0.35±0.12),淋巴管计数为(14.37±4.21),较正义组和对照组均显著降低(P<0.01)。结论:VEGF-C-ASODN可抑制人胃癌裸鼠移植瘤的生长及淋巴管的生成。     

血管生长素在胃癌血管生成中的作用

背景与目的:血管生长素(angiogenin,ANG)是一种有效的促血管生成素,资料显示结肠癌、胰腺癌等肿瘤ANG表达增强,但ANG在肿瘤性血管生成中的作用尚不清楚。本研究探讨ANG在胃癌血管生成中的作用。方法:运用免疫组化方法检测68例胃癌组织中ANG、CD34和Ki-67的表达,根据CD34的染色情况计算出胃癌组织的微血管密度(microvesseldensity,MVD),根据Ki-67的染色情况计算出肿瘤细胞Ki-67标记指数。结果:在胃癌组织中,19例ANG强阳性组织中MVD(308.4±25.6)明显高于3例ANG阴性组(196.0±31.3)(P<0.01)。ANG蛋白阳性组的Ki-67标记指数(579.6±31.4)明显高于ANG蛋白阴性组(341.3±84.0)(P<0.01)。结论:癌组织ANG蛋白表达水平与MVD呈正相关,癌组织ANG表达水平与胃癌细胞标记指数正相关。     

人胃癌裸鼠移植瘤DNA含量异质性的研究

两株人胃癌细胞MKN-28和MKN-45,分别经皮下、腹腔、胃壁和尾静脉接种在无胸腺裸小鼠体内。对不同接种部位形成的胃癌移植瘤,用流式细胞仪分析了瘤细胞的DNA含量。结果证实,胃癌移植瘤细胞的DNA含量存在异质性。由此提示,在人胃癌裸鼠移植瘤的发展过程中,伴有瘤细胞DNA含量的异质性改变。这种变化也受接种部位器官环境的影响。     

Cdx2过表达对裸鼠人胃癌移植瘤生长和转移的影响

目的观察Cdx2基因过表达对裸鼠人胃癌移植瘤生长和转移的影响。方法利用脂质体将pCMV-Cdx2-HA质粒或pCMV-HA质粒分别转染人胃癌MGC-803细胞,命名为MGC-803/Cdx2细胞或MGC-803/EV细胞。将两种细胞分别注射入裸鼠近腋右背侧皮下,待皮下成瘤后将瘤组织接种于胃,建立裸鼠人胃癌移植瘤模型：接种MGC-803/Cdx2皮下瘤的裸鼠为实验组,接种MGC-803/EV皮下瘤的裸鼠为对照组;30 d后处死裸鼠,观察移植瘤生长、转移情况,并应用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR）和Western blot技术检测移植瘤中Cdx2 mRNA和蛋白的表达。结果实验组肿瘤体积为(13.42±2.34）mm3,明显低于对照组的肿瘤体积(17.59±2.80）mm3(P<0.05）;实验组成瘤率(73.3%）低于对照组成瘤率(86.7%）;两组肿瘤转移情况比较,差异无统计学意义(P>0.05）;实验组肿瘤组织Cdx2 mRNA和蛋白表达明显增加(P<0.05）。结论 Cdx2过表达抑制裸鼠人胃癌移植瘤的生长,但对肿瘤转移无明显影响。     

榄香烯乳氟脲嘧啶方案治疗晚期胃癌对照研究

65例晚期胃癌患者随机应用榄香烯乳氟脲嘧啶(EF方案,31例)与丝裂霉素氟脲嘧啶(MF方案,34例)进行同期治疗,有效率分别为32.3%(10/31),41.2%(14/34),两组间无显著差异(X~2＝0.55,P＞0.10)。EF方案毒副反应有恶心,呕吐100%(31/31),静脉炎及白细胞下降均为58.1%(18/31),发热19.4%(6/31),血小板减少仅3.2%(1/31)。研究表明,EF方案对晚期胃癌有较好疗效而血液学毒性较低,更适合于年老体弱及骨髓功能不良者的治疗。     

胃泌素对人结肠癌裸鼠移植瘤细胞内cAMP含量的影响

目的 :探讨胃泌素对人结肠癌裸鼠移植瘤细胞内环磷酸腺苷 (cAMP)含量的影响。方法 :建立人结肠癌SW4 80 裸鼠移植瘤模型 ,实验动物随机分为 5肽胃泌素 (PG)组及对照组 (生理盐水 ) ,观察移植瘤的体积、重量及细胞内cAMP含量的变化。结果 :移植瘤的体积、重量、细胞内cAMP含量 ,PG组均显著高于对照组 (P <0 0 5 ,P <0 0 1)。结论 :胃泌素在体内使人结肠癌移植瘤细胞内cAMP含量增加 ,从而促进移植瘤的生长     

薏苡仁酯对人鼻咽癌细胞裸鼠移植瘤的治疗作用

 目的　探讨薏苡仁酯 ( coixenolide,CXL)对实验性鼻咽癌的治疗作用及机理。方法　采用裸鼠肿瘤移植法观察 CXL的药效 ,MTT法和骨髓粒单系祖细胞 ( CFU- GM)培养法检测该药物对免疫和造血功能的影响。结果　CXL以量效方式抑制移植瘤生长 ,累积 ID50 为 1 0 -3.710 mol/kg,相对效力 ( relative potency,RP)是 5 -氟尿嘧啶的 2 0 .2 3%。CXL对骨髓造血细胞无毒性。相反 ,能促进荷瘤小鼠 NK细胞活性的恢复。结论　 CXL能选择性地杀伤肿瘤细胞 ,其机理与直接作用及提高免疫力密切相关.     

以榄香烯乳为耐药调变剂联合化疗耐药胃癌临床观察

 目的：观察榄香烯乳有无逆转晚期胃癌患者对化疗药物的耐药性。方法：共选择42例晚期胃癌患者,随机分为三组：1单纯化疗组;2单纯榄香烯乳治疗组;３榄香烯乳联合化疗组。结果：单纯榄香烯乳治疗组有效率为9%,单纯化疗组为0%,榄香烯乳联合化疗组为28.6%。结论：榄香烯乳联合化疗可提高肿瘤细胞对化疗药物的敏感性,逆转晚期胃癌患者对化疗药物的耐药性。     

榄香烯乳配合化疗对进展期胃癌患者免疫功能的影响

目的：探讨榄香烯乳对进展期胃癌患者免疫功能的影响。方法：采用榄香烯乳配合化疗药物治疗进展期胃癌98例,观察其白细胞及淋 细胞总数和红细胞免疫功能的改变。结果：对照组治疗前后的白细胞和淋巴细胞总数和红细胞免疫功能均有显著变化（P＜0.05或0.01),而治疗组则无明显变化（P＞0.05),两组差值（d)比较差异显著（P＜０.01或0.001)。结论：榄香烯乳配合化疗药物治疗进展期胃癌,可使患者外周血中的白细胞及淋巴细胞总数和红细胞免疫功能无明显下降,保护了机体的免疫功能,为机体抵抗肿瘤,抑制肿瘤的发生、发展起积极的作用。值得临床进一步研究和推广。     

大豆异黄酮诱导人食管癌裸鼠移植瘤细胞凋亡

[目的]研究大豆异黄酮诱导裸鼠EC-7906移植瘤凋亡的机制.[方法]建立人食管癌EC-7906裸鼠移植瘤模型,采用不同剂量的大豆异黄酮进行瘤旁注射,并设生理盐水和二甲亚砜(DMSO)两个对照组,用透射电镜和TUNEL法检测肿瘤组织细胞凋亡情况,免疫组织化学法和RT-PCR法检测肿瘤组织的凋亡相关基因bcl-2和bax的表达情况.[结果]透射电镜和TUNEL法发现大豆异黄酮导致移植瘤内大量细胞发生凋亡;免疫组织化学法发现大豆异黄酮注射组瘤组织的bcl-2蛋白表达阳性率降低,bax蛋白表达阳性率明显提高;RT-PCR法发现大豆异黄酮注射组的bcl-2 mRNA条带密度随剂量的增大而递减,bax mRNA条带密度递增,[结论]大豆异黄酮对人食管癌EC-7906裸鼠移植瘤具有抑制作用,通过下调bcl2的表达和上调bax的表达而诱导食管癌移植瘤细胞发生凋亡.     

染料木黄酮对人卵巢癌移植瘤的抑制作用

目的:观察染料木黄酮(GEN)对人卵巢癌裸鼠移植瘤内血管生成及肿瘤细胞的抑制作用。方法:建立20只裸鼠人卵巢癌移植模型,随机分成对照组、低剂量GEN组、中剂量GEN组和高剂量GEN组。GEN各组分别灌胃5mg(kg.d)^-1(低剂量)、25mg(kg.d)^-1(中剂量)和50mg(kg.d)^-1(高剂量),共4周。对照组同体积去离子水灌胃。测定三组抑瘤率,用Ⅷ因子抗原多克隆抗体测定肿瘤内微血管密度(MVD),用细胞增殖指数(PI)反映细胞增殖状态,并通过电镜进行形态学观察。结果:GEN低剂量、中剂量和高剂量组移植瘤质量抑瘤率分别为1.90%、18.50%和38.07%。GEN中、高剂量组瘤重与对照组有明显差异(P<0.05)。GEN中、高剂量组的MVD和PI值与对照组比较,差异有显著性(P<0.05)。电镜观察可见GEN组随GEN剂量增加凋亡细胞、凋亡小体及变性坏死增多,而对照组少见。结论:GEN对人卵巢癌HO-8910PM细胞裸鼠移植瘤有明显抑制作用,并呈现剂量-效应关系;GEN对肿瘤细胞的作用,与抑制肿瘤细胞的增殖和肿瘤区新生血管的生长、阻断肿瘤血供有关。     

榄香烯乳对大鼠胃粘膜癌变c-myc基因表达及端粒酶活性的影响

目的：探讨榄香烯乳对大鼠胃粘膜癌变发生发展中c-myc基因表达及端粒酶活性的影响。方法：采用MNNG、10％NaCl混合液加酒精灌胃建立大鼠胃癌模型，设立正常组、模型组及榄香烯组，榄香烯组在造模过程中采用榄香烯乳干预。30周后，分别采用原位杂交、免疫组化及端粒酶微孔板杂交法检测大鼠胃粘膜c-myc基因mRNA、蛋白表达及端粒酶活性。结果：榄香烯组癌变发生率低于模型组。c-myc基因表达与端粒酶活性随着胃粘膜癌变的发展呈递增趋势，并且二者具有高度相关性。结论：下调c-myc基因表达，抑制端粒酶活性，是榄香烯乳重要的抗癌机制之一。