鲨鱼软骨制剂对人骨癌细胞增殖抑制作用的研究

目的 研究ＳＣＰ对人胃癌细胞生长、抑制和损伤效应，探讨其抗癌作用机制。方法用不同浓度的ＳＣＰ加入体外培养的入胃癌细胞（ＭＧＣ８０－３）中，观察加药后细胞生长和有丝分裂指数（ＭＩ）的变化，用ＭＴＴ法检测其细胞增殖抑制作用，用吖啶橙荧光染色方法观察细胞ＤＮＡ和ＲＮＡ含量的变化，用透射电镜观察细胞的损伤效应。结果 ＳＣＰ明显抑制ＭＧＣ８０－３细胞生长，ＩＣ５０值为１ｍｇ／ｍｌ，ＭＩ于加药后１２ｈ较对照组     

人肺腺癌细胞经化疗药物作用后对LAK细胞的敏感性

在体外实验中研究了８种化疗药物作用后的个旧人肺腺癌细胞（ＧＬＣ－８２）对ＬＡＫ细胞的敏感性。ＧＬＣ－８２细胞本身对化疗药物不敏感，经药物作用２４小时后用３Ｈ－ＴｄＲ释放法检测ＬＡＫ细胞对其杀伤率。结果表明：顺铂（ＣＤＤＰ）、卡铂（Ｃａｒｂｏ）、阿霉素（ＡＤＭ）、丝裂霉素（ＭＭＣ）及长春新硷（ＶＣＲ）处理后的ＧＬＣ－８２细胞对ＬＡＫ细胞的敏感性增强；环磷酰胺（ＣＴＸ）、足叶乙甙（ＶＰ１６）及５－氟脲嘧啶（５－Ｆｕ）则无明显影响。实验提示：对化疗不敏感的肺腺癌用ＣＤＤＰ、Ｃａｒｂｏ、ＡＤＭ、ＭＭＣ及ＶＣＲ后加用ＬＡＫ细胞可提高肺癌治疗的有效率。     

ＶＥＧＦ与肿瘤血管生成拟态关系的研究

【摘　要】　目的：了解ＶＥＧＦ与肿瘤形成血管生成拟态之间的关系。方法：在三维细胞培养模型中观察细胞株ＬＯ２、ＨｅｐＧ２、ＳＭＭＣ-７７２１和Ａ５４９细胞形成血管生成拟态现象的能力;ＲＴ-ＰＣＲ半定量检测以上４种细胞株中ＶＥＧＦ表达情况。结果：在三维细胞培养模型中,ＨｅｐＧ２和Ａ５４９细胞可以出现血管生成拟态现象,而ＬＯ２和ＳＭＭＣ-７７２１细胞不能出现血管生成拟态现象;ＲＴ-ＰＣＲ结果显示,ＬＯ２、ＨｅｐＧ２、ＳＭＭＣ-７７２１和Ａ５４９细胞中ＶＥＧＦ１６５／ＧＡＰＤＨ分别为０.２１２±０.０１１、０.２０８±０.０１３、０.１１７±０.００９、０.２１４±０.０１２;ＶＥＧＦ１２１／ＧＡＰＤＨ分别为０.１８６±０.０１８、０.１９２±０.０１４、０.０５０±０.０１０、０.１９６±０.０１７。ＬＯ２、ＨｅｐＧ２和Ａ５４９细胞中ＶＥＧＦ１６５、ＶＥＧＦ１２１表达明显较ＳＭＭＣ-７７２１细胞高（Ｐ＜００５）。结论：ＶＥＧＦ低表达的细胞株不出现血管生成拟态现象,ＶＥＧＦ高表达的细胞株不一定出现血管生成拟态现象,而有血管生成拟态现象的细胞株ＶＥＧＦ表达高,说明ＶＥＧＦ与血管生成拟态形成有一定关系,只有ＶＥＧＦ表达高的细胞才有形成血管生成拟态的潜能,但是,其不一定为独立的关键影响因素。     

更昔洛韦对慢性粒细胞白血病细胞生长和分化影响及其机制研究

目的：探讨更昔洛韦（ＧＣＶ）对人白血病细胞的抗增殖和诱导分化作用。方法：ＧＣＶ加入Ｋ５６２细胞培养４ｄ,测定其活细胞数目、克隆形成率、联苯胺染色阳性率,观察光镜形态、组织化学染色,并地行流式细胞分析、端粒酶检测。结果：在ＧＣＶ的作用下,Ｋ５６２细胞地增殖受抑,生长分数降低,并且向具有合成血红蛋白能力的细胞分化。结论：ＧＣＶ对Ｋ５６２细胞具有抑制增殖和诱导分化作用,该结果为慢性粒细胞白血病（ＣＭＬ）的治疗探索新的途径。     

白细胞介素—12基因与HSV—TK基因联合治疗小鼠肝癌的研究

目的　观察白介素１２（ＩＬ１２） 基因与单纯疱疹病毒胸苷激酶（ＨＳＶＴＫ） 基因联合治疗小鼠肝癌的疗效。方法　将ＩＬ１２ 基因和ＨＳＶＴＫ 基因分别转导入小鼠肝癌ＭＭ４５Ｔ－Ｌｉ 细胞,获稳定表达的ＭＭ４５Ｔ－ＬｉＩＬ１２ 和ＭＭ４５Ｔ－ＬｉＴＫ。于Ｂａｌｂｃ 小鼠皮下接种ＭＭ４５Ｔ－Ｌｉ 细胞２ ×１０５ ,待肿瘤长至０－５～１－０ ｃｍ 时,将ＭＭ４５Ｔ．ＬｉＴＫ细胞与经６０ Ｃｏ 照射的ＭＭ４５Ｔ．ＬｉＩＬ１２ 细胞混合,行瘤内注射治疗,于治疗次日,腹腔注射Ｇａｎｃｉｃｌｏｖｉｒ（ＧＣＶ４０ ｍｇ·ｋｇ－ １·ｄ－ １） ,连续注射１０ 天。按同样方法观察对远侧接种的肿瘤的治疗作用,并通过细胞毒Ｔ淋巴细胞（ＣＴＬ） 活性检测及免疫组化染色,探讨其抗肿瘤机制。结果　ＭＭ４５Ｔ．ＬｉＩＬ１２ 与ＨＳＶＴＫＧＣＶ 联合治疗,肿瘤体积显著缩小,生长受到抑制,疗效显著优于单独治疗组（ Ｐ＜ ０．０１） 。有６０％ 小鼠的肿瘤完全消退,且观察２ 个月无肿瘤生长。两者联合治疗,对远侧肿瘤也具有明显的抗肿瘤作用（ Ｐ＜０．０５） 。ＭＭ４５Ｔ．ＬｉＩＬ１２ 与ＨＳＶＴＫＧＣＶ系统联合诱导的小鼠ＣＴＬ明显高于单     

高转移人肺癌表型去恶化研究—细胞通讯,细胞骨架和癌基因…

高转移人肺巨细胞癌ＰＧ细胞恶性表型明显。以人胚肺细胞为对照，荧光染料标记示踪法表明，ＰＧ的间隙连接通讯功能缺陷；免疫荧光染色显示微管解聚；荧光鬼笔环肽染色显示微丝网架破坏。分子杂交结果表明，ＰＧ细胞有ｃ－ｍｙｃＤＮＡ扩增和ｃ－Ｈａ－ｒａｓ、ｃ－ｍｙｃ基因高表达，抑癌基因Ｐ＾５３ｍＲＮＡ水平低于正常。用钙调蛋白拮抗剂ＣＤＺ（１００～２００ｎｍｏｌ／Ｌ）和中药Ｌ２（３～１３ｍｇ／ｍｌ）分别处理ＰＧ，细     

三氧化二砷对人食管癌细胞株凋亡的诱导作用

目的研究三氧化二砷对人食管癌细胞株凋亡的诱导作用。方法癌细胞株Ｅ８７１２和ＥＣ１７１贴壁生长,在电镜观察的基础上,用碘化丙啶（ＰＩ）染色和ＴＵＮＥＬ将凋亡细胞反映在流式细胞仪（ＦＣＭ）上。结果经三氧化二砷２μｍｏｌ／Ｌ作用后,电镜下见部分细胞核染色质凝聚,呈半月形;ＦＣＭ细胞ＤＮＡ检得亚Ｇ１细胞峰;部分Ｇ１期细胞ＴＵＮＥＬ标记呈阳性。结论结果表明,三氧化二砷能诱人食管癌细胞株的凋亡,此药对食管癌等实体瘤的治疗有诱入的应用前景。同时表明,ＦＣＭ具有敏感、特异性强及定量等优点     

神经生长因子（NGF）对H2O2诱导胶质瘤A—172细胞凋亡的抑制效应及其机制

目的：研究神经生长因子（ＮＧＦ）对氧化氢（Ｈ２Ｏ２）诱导神经胶质瘤细胞凋亡的抑制作用及其机制。方法：抑制细胞增殖的检测采用ＭＴＴ法,吖啶橙（ＡＯ）染色荧光显微观察细胞的形态学变化,ＤＮＡ琼脂糖电泳检测ＤＮＡ断裂,二硫硝基苯甲酸（ＤＴＮＢ）法检测细胞内不原型谷胱甘肽（ＧＳＨ）水平的变化。结果：１００～８００μｍｏｌ／Ｌ的Ｈ２Ｏ２明显抑制Ａ－１７２细胞增殖,２００μｍｏｌ／Ｌ Ｈ２Ｏ２作用１２小时后形     

阿糖胞苷及VM26体外诱导原代培养急性非淋巴细胞白血病细胞凋亡

目的　探讨Ａｒａ－Ｃ及ＶＭ２６治疗白血病的机制。方法　应用细胞形态学检查、二苯胺法ＤＮＡ片段化定量及ＤＮＡ 凝胶电泳方法研究阿糖胞苷（Ａｒａ－Ｃ）、ＶＭ２６诱导原代培养的急性非淋巴细胞白血病（ＡＮＬＬ）细胞凋亡结果　原代培养的ＡＮＬＬ细胞体外孵育２４ ｈ,空白组细胞ＤＮＡ 片段率仅为（１５．１±３．３）％ ,加Ａｒａ－Ｃ５０ μｇ／Ｌ组和ＶＭ２６ １０ ｍ ｇ／Ｌ,ＤＮＡ片段率均显著增高,分别达（４１．８±１９．１）％ 和（４６．８±１８．７）％ （Ｐ＜ ０．０１,ｎ＝ １１）。两种药物诱导ＤＮＡ片段化均呈剂量和时间依赖性。光镜下见两种药物均诱导ＡＮＬＬ细胞出现典型的细胞凋亡形态改变。ＤＮＡ 电泳显示典型的ＤＮＡ Ｌａｄｄｅｒ。结论　Ａｒａ－Ｃ及ＶＭ２６ 能诱导ＡＮＬＬ细胞出现凋亡,诱导白血病细胞凋亡可能是其抗白血病作用的主要机制之一。     

三氧化二砷对人肺癌细胞株增殖和凋亡的影响

目的 探讨三氧化二砷（Ａｓ２Ｏ３）对人肺癌的潜在性治疗作用及可能的机制。方法 选用人肺癌细胞株ＧＬＣ－８３,运用细胞培养法、ＭＴＴ法、流式细胞术（ＦＣＭ）检测细胞生长曲线、细胞增殖、细胞周期和细胞凋亡。结果 三氧化二砷可明显抑制ＧＬＣ－８２细胞的增殖,其抑制作用具有时－效和量－效关系。当４．０μｍｏｌ／Ｌ三氧化二砷处理ＧＬＣ－８２细胞９６小时,增殖抑制率达８１．０５％,ＦＣＭ检测肿瘤细胞ＤＮＡ含量,观察到三氧化二砷ＧＬＣ－８２细胞周期阻滞于Ｇ２／Ｍ期,细胞周期进程变慢,同时出现剂量依赖性Ｇ１峰。结论 三氧化二砷能有效地抑制人肺癌细胞株ＧＬＣ－８２的增殖,其可能的机制与三氧化二砷使细胞阻滞于Ｇ２／Ｍ期并诱导其调亡有关。     

阿拉伯—甘露聚糖制剂对人LAK细胞活性增强作用的研究

本文作者观察了阿拉伯一甘露聚糖制剂对人LAK活性等免疫功能的影响。该制剂对人外周血来源的LAK细胞杀伤力有明显的增强作用。对来自人扁桃体的单个核细胞产生IL—2也有明显的增强作用。但该制剂对人外周血单个核细胞产生IFNγ无增强作用,提示该制剂对免疫系统的选择性作用。 根据本研究结果,阿拉伯一甘露聚糖可望作为肿瘤免疫治疗的新型免疫调节剂。     

增殖细胞核抗原在食管鳞癌的表达

为检测增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）在食管鳞癌的表达及其临床病理关系，对４９例手术切除的食管鳞癌标本，行免疫组化法检测单克隆抗体ｐｃ１０的表达。结果显示ＰＣＮＡ的表达强度与食管鳞癌的分化程度成反比，与有无淋巴结转移成正比，差异有显著性意义（Ｐ＜０．０５）；与肿瘤浸润深度无明显相关。提示ＰＣＮＡ的表达强度可反映食管鳞癌细胞增殖活力和转移能力     

人乳腺癌细胞株增殖细胞核抗原表达及溴脱氧尿核苷参入的研究

目的研究人乳腺癌细胞株（MCF－7）中增殖细胞核抗原（PCNA）的表达与细胞增殖的关系。方法对人乳腺癌细胞株MCF－7传代后培养，每天收获部分细胞，连续8天，分别作增殖细胞核抗原（PCNA）检测及溴脱氧尿核苷（BrdU）参入测定，比较PCNA阳性细胞标记指数（PCNALI）与BrdU标记指数（BrdULI）的动态变化的相关性。结果在MCF－7细胞传代培养中，PCNALI与BrdULI两个指标之间存在着显著的相关性（γ=0．92，P＜0．01）。结论PCNALI作为细胞增殖指标，为细胞增殖动力学变化提供了可靠信息。     

非霍奇金淋巴瘤的细胞凋亡与细胞增殖的原位观察

目的观察非霍奇金淋巴瘤（ＮＨＬ）患者细胞凋亡与细胞增殖间的关系,探讨细胞凋亡在肿瘤发生发展中的作用。方法利用原位末端标记技术和增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）的免疫组化技术原位检测６２例ＮＨＬ中的凋亡细胞及增殖细胞的密度。结果随着ＮＨＬ恶性程度的增高,凋亡细胞数量逐渐减少,与此相反,中度恶性组及高度恶性组的增殖细胞数量明显高于低度恶性组（Ｐ＜０．０１）。结论ＮＨＬ患者不仅存在活跃的细胞增殖,而且还出现较多的凋亡细胞,随着恶性程度的增高,细胞增殖占优势,而凋亡受抑较严重,由此导致肿瘤的发生与发展。     

鼻咽癌组织放疗前后细胞增殖凋亡的变化

目的 研究鼻咽癌组织放疗前后细胞增殖凋亡的变化。方法 采用TdT酶介导的生物素化dutp制品末端标记技术（terminal oxynucleotidyl transferase mediated dUTP biotion mick end labeling,TUNEL）和免疫组化S－P法,分别检测60例鼻咽癌患者在放疗前、放疗第2周、第4周时细胞凋亡率（apoptosis rate,AR）和增殖细胞核抗原（proliferation cell nuclear antigen,PCNA）的表达。结果 鼻咽癌组织放疗后的AR明显高于放疗前;常规分割放疗组放疗第4周后的AR较放疗第2周时下降,而PCNA增殖指数升高（P＜0．01;加速超分割放疗组放疗第2周和放疗第4周的AR、PCNA增殖指数均无显著差异（P＞0．05）。结论 放射治疗鼻咽癌可以加速癌细胞的凋亡,鼻咽癌自发性细胞凋亡与放疗诱发的凋亡呈正相关。常规分割放疗过程中存在肿瘤细胞加速再增殖和细胞凋亡率下降,而采用超分割放疗可以减少鼻咽癌细胞加速再增殖,提高凋亡率。     

白血病细胞产生的免疫抑制因子对IL2作用的影响

人白血病细胞产生的免疫抑制因子（ＴＤＳＦ）作用于人外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）６小时，即可抑制白细胞介素２（ＩＬ２）产生，与对照组相比Ｐ＜０．０１。当ＴＤＳＦ存在时，经驯化的ＰＢＭＣ效应细胞对外源性ＩＬ２反应显著减弱，表明ＴＤＳＦ能抑制ＩＬ２的利用。ＰＨＡ－Ｐ刺激ＰＢＭＣ增殖，但ＴＤＳＦ使其增殖抑制。表明：ＴＤＳＦ能抑制ＩＬ２产生及其作用；抗癌药对ＴＤＳＦ的分泌有部分阻抑作用。     

超分割放射治疗非小细胞肺癌临床疗效观察

目的：探讨超分割放射治疗非小细胞肺癌治疗效果及毒副作用。方法：对1995年6月--1998年8月将92例NSCLC随机分成超分割放疗(HF)组和常规分割放疗(CF)组。结果：HF组完全缓解率(CR)和总有效率(CR PR)分别为23．9％和89．1％，显著高于CF组的15．2％和60．9％(P＜0．05)。两组1年生存率和局部控制率无显著性差异(P＞0．05)。HF组2、3年生存率和局部控制率分别为52．2％、28．3％和47．8％、37．0％，也显著高于CF组的23．9％、13．0％和26．1％、8．7％(P＜0．05)。HF组急性放射性食管炎发生率较CF组为高(P＜0．05)，放射性气管炎、放射性肺炎和骨髓抑制均无显著性差异(P＞0．05)，全组患者均能耐受治疗，无需特殊处理。结论：超分割放射治疗方案治疗NCSLC明显优于CF方案，毒副作用较轻，患者均可耐受，可提高局部控制率和降低复发率，进一步提高生存率。     

豚鼠耳蜗外毛细胞的一氧化氮定量分析

目的:为了观察一氧化氮底物左旋精氨酸(L-arginie)和一氧化氮合酶抑制剂左旋硝基精氨酸甲酯(L-NAME)对豚鼠耳蜗外毛细胞一氧化氮的影响。方法:应用新的荧光染料4,5二氨基乙酰乙酸荧光素(4,5-diaminofluorescein diacetate,DAF-2DA)测定豚鼠耳蜗外毛细胞内一氧化氮的含量。结果:发现加左旋精氨酸后外毛细胞的荧光灰度值比正常外毛细胞的灰度值升高。而加左旋硝基精氨酸甲酯后,外毛细胞的荧光灰度值比正常外毛细胞的灰度值降低。结论:进一步证明豚鼠耳蜗外毛细胞内存在一氧化氮。     

白血病细胞多药耐药与细胞凋亡的关系

目的 :探讨白血病细胞多药耐药 (MDR)与细胞凋亡的关系。方法 :在体外用化疗药物阿霉素 (ADM)诱导白血病细胞株 K5 6 2 MDR的产生 ,用 As2 O3诱导细胞的凋亡 ,采用流式细胞仪检测细胞表面 P糖蛋白 (P- gp)的表达 ;荧光定量 PCR检测 MDR1 m RNA;通过流式细胞仪检测Anexin- V判断凋亡细胞数量的多少 ;观察 MDR与细胞凋亡的关系。结果 :5 μm ol/ L 的 ADM能诱导 K5 6 2细胞 MDR的产生 ,随着作用时间的延长 ,P- gp/ MDR1 m RNA的表达逐渐升高 ;P- gp/MDR1 m RNA的表达与细胞凋亡呈负相关 (r=0 .6 8,P<0 .0 1 ) ;在 As2 O3作用下 ,细胞凋亡增加的同时 ,P- gp的表达下调。结论 :抗癌药物能诱导白血病细胞 MDR的产生 ,细胞的耐药性与凋亡抑制相关 ,诱导细胞的凋亡能减低白血病细胞的 MDR。     

鳞癌与基底细胞癌的Fas/FasL表达及其与细胞凋亡的关系

目的：探讨鳞癌与基底细胞癌的Fas/FasL表达及其与细胞凋亡的关系。方法： 用免疫组化及TUNEL方法检测45例鳞癌与基底细胞癌的Fas/FasL表达及其与细胞凋亡的关系。结果： 鳞癌Fas/FasL表达高于基底细胞癌;Fas/FasL阳性细胞凋亡率高于阴性细胞。　结论： Fas/FasL系统与细胞凋亡密切相关,并在肿瘤侵袭中可能起重要作用。