肺癌患者Th1/Th2细胞因子检测的临床意义

目的 研究肺癌患者Th1/Th2 细胞因子检测的临床意义.方法 对150例肺癌患者及50例健康体检者的Th1/Th2 细胞因子水平进行检测.结果 肺癌组患者的IL-4、IL-6及IL-10的表达水平明显高于对照组,IL-2及IFN-γ的水平明显低于对照组,比较有统计学意义（P〈0.05）.不同的病理组织类型IL-2和IFN-γ均明显低于对照组,TNF-α、IL-4和IL-10均明显高于对照组,IL-12均明显低于对照组,不同分期的肺癌患者的血清中Th1/Th2细胞因子表达水平明显高于对照组（P〈0.05）.结论 对肺癌患者Th1/Th2 细胞因子检测有重要的临床意义.     

乙型肝炎病毒感染者外周血单个核细胞内IL-2、IL-4和IFN-γ检测及意义

目的研究辅助性T淋巴细胞Th1/Th2细胞与乙型肝炎病毒（HBV）感染状态的关系。方法 25例慢性乙型肝炎患者（CHB组）、5例健康志愿者（健康对照组）、5例HBV感染后自然痊愈者（既往感染组）及5例CHB抗病毒治疗后完全应答者（完全应答组）的外周血单个核细胞（PBMC）经PMA诱导后,用流式细胞术检测其Th1和Th2细胞分泌IL-2、IL-4和IFN-γ的水平。结果慢性乙型肝炎患者Th1细胞分泌的细胞因子IFN-γ（0.1602±0.0657）、IL-2（0.1616±0.0639）,明显低于健康对照IFN-γ（0.4680±0.0377）、IL-2（0.5000±0.0625）和既往感染者IFN-γ（0.336±0.2908）、IL-2（0.256±0.17799）（P〈0.001）。CHB抗病毒治疗完全应答患者Th1细胞分泌的细胞因子IFN-γ（0.1620±0.0396）、IL-2（0.1940±0.0416）,亦明显低于健康对照（P〈0.001）,Th2细胞分泌的细胞因子IL-4（0.5096±0.1329）,明显高于健康对照IL-4（0.2820±0.0622）（P〈0.001）。既往感染者Th1细胞分泌的细胞因子IFN-γ（0.336±0.29082）、IL-2（0.256±0.17799）低于健康对照（P〈0.001）,Th2细胞分泌的细胞因子IL-4（1.29±0.16778）明显高于健康对照组、CHB患者组和HBV感染完全应答患者组（0.2820±0.0622、0.5096±0.1329、0.5740±0.06693）（P〈0.001）。结论 Th1/Th2细胞的功能与HBV感染的发展过程相关。     

肠易激综合征患者的免疫学机制探讨

目的 用ELISA法对IBS患者的外周血Th1型细胞因子IFN-γ、IL-12和Th2型细胞因子ID-4、IL-10的含量进行检测分析，以探讨IBS患者体内免疫应答的变化规律。方法 采用ELISA法检测IBS患者外周血PBMC体外培养上清液中Th1型细胞因子IL-12、IFN-γ及Th2型细胞因子IL-4、IL-10水平。结果 1．同正常组比较，腹泻型IBS患者外周血Th1型细胞因子IFN-γ、IL-12的水平有升高趋势，但差异无显著性（P〉0．05）；Th2型细胞因子IL-4、IL-10的水平较正常对照显著降低（P〈0．05）；Th1／Th2的比值较正常对照显著升高（P〈0．05）。2．同正常组比较，便秘型IBS患者外周血Th1型细胞因子IFN-γ、IL-12和Th2型细胞因子IL-4、IL-10的含量均无显著性差异；Th1／Th2的比值较正常对照差异亦无显著性（P〉0．05）。结论 腹泻型IBS患者PBMC体外培养时Th1、Th2细胞因子产生了失衡，Th1／Th2较正常对照显著升高，呈Th1优势反应。便秘型IBS患者Th1型细胞因子和Th2型细胞因子较正常对照无显著差异，表明便秘型IBS患者Th1／Th2反应仍趋于平衡状态，Th1／Th2反应可能对其发病并无重要影响，亦进一步说明不同分型的IBS其病理生理学机制存在差异。     

不同临床类型的HBV感染者外周血T淋巴细胞STAT信号表达的研究

目的研究不同临床类型HBV感染者外周血T细胞表达细胞因子水平与细胞因子受体信号蛋白（STATs）活性间的关系。方法检测慢性乙肝（CHB）、慢性重型肝炎（CSH）、健康携带者（AsC）以及健康者T细胞表达IFN-γ、IL-12、IL-10、IL-4含量及细胞内STAT-1、3、4、5、6活性。结果 CHB、CSH及AsC细胞因子水平普遍上升（P〈0.001或0.01）。IL-10、IL-12受体信号STAT3和STAT4活性与细胞因子水平一致;IFN-γ、IL-4受体信号STAT1、STAT6活性与细胞因子水平不一致,不同个体间差异较大。结论不同临床类型的HBV感染者T细胞表达Th1型和Th2型细胞因子普遍增强,细胞内STATs活性与细胞因子含量不完全一致,细胞内STATs活性存在个体差距。     

重组质粒pZeoSV2（＋）／CpG—HBcAg（ISS）对BALB／c小鼠的免疫作用

目的：探讨重组质粒pZeoSV2（＋）／CpG-HBcAg（ISS）对BALB／c小鼠免疫的作用。方法：构建真核表达质粒pZeoSV2（＋）／CpG-HBcAg（ISSb,c）,将其免疫BALB／c小鼠,ELISA法检测免疫后小鼠血清中IFN-γ、IL-2、IL-12、IL-4和IL-10的含量。结果：pZeoSV2（＋）／CpG-HBcAg（ISSb）组较pZeoSV2（＋）／CpG-HBcAg（ISSc）组免疫BALB／c小鼠后能使Th1型细胞因子IFN-γ、IL-2和IL-12的表达增强,抑制Th2型细胞因子IL-4和IL-10的产生。结论：含CpG-HBcAg（ISSb）的重组质粒能够明显诱导小鼠血清Th1型细胞因子的表达,抑制Th2型细胞因子的表达。     

自身免疫性甲状腺疾病Th1/Th2相关细胞因子不同极化方向漂移的研究

目的探讨自身免疫性甲状腺疾病（AITD）发病的始动原因,明确AITDTh,／Th：相关细胞因子群谱的特征。方法用逆转录酶链聚合反应方法检测IFN-γ、TNF—α、IL-2、IL-4、IL-6、IL-10等6种细胞因子的mRNA表达。结果与正常对照组相比,Graves病（GD）和桥本甲状腺炎（HT）细胞因子表达率明显增加;GDTh2类细胞因子IL-4和IL-6总表达频率明显高于Th1类细胞因子IFN-γ、TNF-α和IL-2表达频率,他巴唑治疗前后GD细胞因子Th2强势的表达特征没有明显变化,但总的细胞因子的表达频率下降;HT Th1类细胞因子IFN-γ、TNF—α和IL-2表达频率高于Th2类细胞因子IL-2、IL-4、IL-6、IL-10的表达频率。结论GD细胞因子表达向Th2方向漂移,以体液免疫为主;他巴唑治疗后的GD细胞因子谱没有明显改变,而HT细胞因子表达则呈现Th1强势,以细胞免疫为主。     

干扰素治疗对慢性乙型肝炎患者细胞免疫应答的影响

目的探讨Th1／Th2类细胞因子在CHB患者PBMC表达,及干扰素治疗慢性乙型肝炎（CHB）对患者Thl／Th2类细胞因子的影响。方法30例CHB患者给予干扰素治疗,治疗前后采用双抗体夹心法检测外周血单个核细胞IL-4、IL-10和IFN-γ的水平,同时选择15例健康人群作对照组。结果CHB组PBMC培养上清分泌IL-4水平显著高于健康对照组（P〈0．05）,而IFN-1水平则显著低于健康对照组（P〈0．01）;HBVDNA水平与IL-4水平呈正相关,与IFN-γ水平呈负相关。治疗结束后IL-4、IL-10水平较治疗前显著降低（P〈0．01,P〈0．05）,IFN-γ水平较治疗前显著升高（P〈0．01）。结论CHB存在异常细胞免疫应答,干扰素治疗CHB可提高患者Th1型细胞因子水平、降低Th2型细胞因子的水平。     

弓形虫感染对大鼠脑组织神经丝mRNA表达的影响

目的探讨弓形虫感染对大鼠脑组织神经丝（NF）mRNA表达和细胞免疫水平的影响。方法将4周龄雄性SD大鼠随机分成2组：弓形虫感染组（A组）腹腔感染弓形虫速殖子2×10^2／ml悬液2ml;正常对照组（B组）腹腔注射灭菌生理盐水2ml。感染弓形虫速殖子9周后,应用逆转录聚合酶链反应检测大鼠大脑组织中高分子量NF（NF—H）、中分子量NF（NF—M）和低分子量NF（NF—L）mRNA表达水平;流式细胞术检测大鼠外周血CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋T淋巴细胞;ELISA测定其血清IFN-γ、TNF-α、IL-4等细胞因子。结果大鼠弓形虫感染9周后,大脑组织NF．LmRNA下降为正常对照组的64％（P〈0．01）;NF—M为96％（P〉0．05）;NF—H为89％（P〈0．05）。感染组大鼠的CD4^＋和CD8^＋T淋巴细胞与正常对照组相比,差异均无统计学意义（P均〉0．05）;感染组大鼠血清中IFN-γ、TNF-α、IL-4等细胞因子的水平均高于正常对照组大鼠水平（P〈0．05）。结论弓形虫感染可导致大鼠脑组织中NF亚单位mRNA表达水平的下降,血清IFN-γ、TNF-α、IL-4水平的升高。     

扩张型心肌病与Th1／Th2细胞因子失衡的研究

目的探讨Th1／Th2细胞因子失衡与扩张型心肌病（DCM）之间的关系。方法用RT—PCR方法检测DCM患者与健康对照者外周血单个核细胞中IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-10mRNA的表达水平,比较DCM患者与健康对照者之间IFN-γ、IL-2、IL-4及IL-10mRNA的表达变化之间的关系。结果DCM组Th1／Th2比值明显低于对照组（P均〈0．05）,IL-4和IL-10表达较对照组明显增高,而IFN-γ和IL-2较对照组表达明显降低。结论DCM组存在Th1细胞向Th2细胞漂移现象,Th2细胞介导的体液免疫应答在DCM发病机理中起优势作用。     

阿德福韦酯对CHB患者血清细胞因子水平的影响及临床意义

目的探讨阿德福韦酯（ADV）对慢性乙型肝炎（chmnichepatitisB,CHB）$者外周血辅助性T（T-helper,Th）l／Th2型细胞因子表达的调节作用及治疗CHB的作用机制。方法采用酶联免疫吸附法分别检测32例CHB患者服用ADV治疗前、后48周的血清中白介素（interleukin,IL）-2、IL-6、IL-10、干扰素（interferon,IFN）-γ的水平,并选取21位献血者作对照。结果ADV治疗后n1型细胞因子IL-2、IFN-γ水平明显升高（P〈0．05）,Th2型细胞因子IL-6、IL—10水平明显下降（P〈0．05）。结论ADV有可能通过改善Th1／Th2型细胞因子的表达失衡,恢复特异性细胞免疫功能,有助于慢性HBV感染的恢复。     

弓形虫NT株猪体人工发病实验研究

目的 探讨猪弓形虫病人工发病条件。方法将8头30日龄断奶仔猪分为A1组：腹腔注射1000万个弓形虫速殖子;A2组：腹腔注射5000万个弓形虫速殖子;A3组：腹腔注射1亿个弓形虫速殖子;A4组：空白对照。将8头5月龄育肥猪分为B1组：腹腔注射1000万个弓形虫速殖子;B2组：腹腔注射5000万个弓形虫速殖子;B3组：腹腔注射1亿个弓形虫速殖子;B4组：空白对照。以猪源刚地弓形虫强毒虫株南京汤山株（NT株）F275代攻毒观察临床症状及剖检变化。结果A组实验猪3～7d后三种感染方式均出现典型的弓形虫病症状：持续高温、精神倦怠、呼吸困难、食欲不振等临床症状,A2、A3组感染猪弓形虫病症状明显且出现实验猪死亡,肺脏、肝脏、脾脏、淋巴结肿大、出血,并从血液和淋巴结中分离到了弓形虫。B组实验猪则没出现典型的临床症状。结论30日龄断奶仔猪腹腔注射5000万个～1亿个弓形虫速殖子可出现典型的猪弓形虫病症状。     

重组人IL-2及IFN—γ对感染弓形虫妊娠鼠T细胞亚群的影响

目的研究重组人IL-2及IFN-γ对感染弓形虫孕鼠T细胞亚群CD4＋、CD8＋水平的影响。方法取BALB／c孕鼠80只，随机分为空白对照组、感染对照组、IL-2组及IFN-γ组。于妊娠第8天空白对照组腹腔注射0．2ml生理盐水，其余各组腹腔注射200个弓形虫速殖子，并于妊娠第7、8、9天IL-2组每只孕鼠腹腔注射1000UIL-2，IFN-γ组每只孕鼠腹腔注射1000UIFN-γ。其余两组腹腔注射0．2ml生理盐水。妊娠第10、12、14、16、18天取妊娠鼠尾静脉抗凝血100μl，流式细胞仪检测CD4＋及CD8＋水平。结果与空白对照组相比，其他各组小鼠CD4＋T细胞水平在妊娠第10、12、14、16、18天均显著降低，而CD8＋T细胞在妊娠第10、12天显著升高，CD4＋／CD8＋T细胞比值倒置。但与感染对照组比较，其他各组CD4＋T细胞在妊娠第10、12、14天显著升高，CD8＋T细胞在妊娠第10、12天显著降低，CD4＋／CD8＋T细胞比值在妊娠第10、12、14天明显升高。而在妊娠第16、18天，CD4＋、CD8＋及CD4＋／CD8＋T细胞水平与感染对照组比较无明显差异。结论弓形虫攻击孕鼠后，免疫调节失衡，机体抗抵力下降，而重组人IL-2及IFN-γ可以改善机体细胞免疫功能，提高母体免疫力。     

低剂量辐射对小鼠骨髓移植后血清Th1/Th2相关细胞因子和aGVHD的影响

目的探讨低剂量辐射（LDR）预处理对小鼠异基因骨髓移植（allo-BMT）后急性移植物抗宿主病（aGVHD）和血清Th1/Th2相关细胞因子的影响。方法建立小鼠allo-BMT模型,根据LDR干预与否将30只BALB/c小鼠随机分为A组[6MV-X全身照射（TBI）]、B组（LDR＋TBI）、C组（空白对照组）。移植后观察A、B两组的aGVHD症状和肝、小肠、皮肤的病理学变化;移植后第8天取血检测IFN-γ和IL-4的水平。结果与A组比较,B组的aGVHD症状积分高,aGVHD的发生程度较轻,且生存期长（P〈0.05）;与C组比较,A、B两组的IFN-γ水平均高、IL-4水平均低（P〈0.05）、但以B组为著（P〈0.05）。结论 LDR预处理可减轻aGVHD的严重程度,与LDR预处理可以减少肠道损伤,调节Th1/Th2相关细胞因子趋于平衡的作用有关。     

新诊断2型糖尿病与柯萨奇病毒、巨细胞病毒感染及白介素-18、干扰素-γ、干扰素-γ诱导蛋白-10的相关性

目的 探讨新诊断T2DM与柯萨奇病毒（COX）、巨细胞病毒（CMV）、单纯疱疹病毒（HSV）及EB病毒（EBV）感染的关系,分析T2DM病毒感染患者血清IL-18、干扰素-γ（IFN-γ）及IFN-γ诱导蛋白-10（IP-10）的水平及意义. 方法 选取新诊断T2DM患者（T2DM组）208例和健康对照（NC组）者240名,检测血清COX、CMV、HSV、EBV IgG抗体阳性率和炎症因子IL-18、IFN-γ及IP-10水平,比较两组病毒抗体阳性率与炎症因子水平的差异,分析T2DM病毒感染与炎症因子的关系. 结果 T2DM组COX、CMV抗体阳性率高于NC组（19.23％vs0.83％,94.71％vs83.33％,P＜0.01）,两组HSV和EBV抗体均为阴性.T2DM组IL-18、IFN-γ及IP-10水平均高于NC组[IL-18：（130.30±118.44） vs（41.69±40.39） pg/ml; IFN-γ：（103.93±110.10）vs（34.50±24.89） pg/ml;IP-10：（2215.50±3395.47）vs （234.55±64.40） pg/ml,P＜0.05或P＜0.01].T2DM COX感染者IL-18高于无COX感染者[（142.84±150.63）vs（122.04±92.59） pg/ml,P＜0.05]. 结论 COX感染与新诊断T2DM的发生发展存在一定的相关性,可能与IL-18等的作用有关.     

IL-2对COPD患者CD8~＋ T细胞频率及功能的影响

目的探讨IL-2在慢性阻塞性肺疾病（COPD）中的免疫调节作用。方法采集45例COPD急性发作期患者、33例COPD缓解期患者以及25例健康人外周血,采用ELISA检测血清中IFN-γI、L-2浓度。提取PBMC后分别设置IL-2刺激组和未刺激组,多色流式分析技术检测CD8＋T细胞频率,胞内细胞因子染色技术检测CD8＋IFN-γ＋T细胞的频率。结果 COPD患者急性发作期IL-2I、FN-γ浓度较临床缓解期和对照组显著增高（P均〈0.01）;与未刺激组相比I,L-2刺激组CD8＋T细胞频率及分泌IFN-γ显著增加（P〈0.05）。结论 IL-2可通过对CD8＋T细胞的免疫调节效应参与COPD的发生发展过程。     

牛带绦虫不同亚种感染家猪后血清IL-2和INF-γ含量的比较

目的通过观察比较牛带绦虫两亚种感染家猪后血清IL-2和INF-γ含量的变化,探讨牛带绦虫不同亚种所致家猪Th1细胞应答机制。方法用亚洲牛带绦虫虫卵和传统牛带绦虫虫卵分别灌胃20d龄健康乳猪各5头,以健康乳猪5头作对照,于感染后第7、15、45和75d抽取猪耳缘静脉血,常规分离血清。用ELISA试剂盒检测血清IL-2和INF-γ含量。结果正常组血清IL-2和INF-γ含量在不同时期基本处于稳定水平;亚洲牛带绦虫组血清IL-2和INF-γ在第7d含量最高,远高于传统牛带绦虫组(P<0.01),15d含量降低,远低于传统牛带绦虫组,两个实验组在第45d和75d无显著差异;与正常组相比,两个实验组血清IL-2和INF-γ含量在第7、15和75d均明显高于正常组(P<0.01)。结论牛带绦虫两个亚种感染家猪后,早期Th1细胞应答较强,中期Th1细胞应答较低,晚期Th1细胞应答增强,但亚洲牛带绦虫所致家猪Th1细胞应答在第7d最强,传统牛带绦虫所致家猪Th1细胞应答在第15d最强。     

FK506对弓形虫感染后小鼠IFN-γ、IL-2和肝虫负荷的影响

目的探讨免疫抑制剂FK506(他克莫司,Tacrolimus)对弓形虫急性感染后小鼠干扰素γ(IFN-γ)和白介素2(IL-2)的活性以及对肝虫负荷的影响。方法用102个RH株弓形虫速殖子腹腔接种昆明小鼠120只,然后随机分为FK506组〔A组,每d用FK506 1mg/(kg.d)灌胃〕和对照组(B组,每d用等量生理盐水灌胃),每组60只,雌雄各半;分别于感染后第2、4、6、7、9 d随机取8只小鼠外周血,用ELISA法测定血清IFN-γ和IL-2的活性,同时取肝脏用荧光定量PCR法检测肝脏的虫荷。另外检测8只健康小鼠的IFN-γ和IL-2数值,作为正常值。结果A组小鼠于感染后第8d全部死亡,B组小鼠于感染后第10d全部死亡。感染后第2、4、6、7 d A组小鼠血清IFN-γ活性明显低于B组(P<0.05或P<0.01)。IL-2活性除感染后第2d两组在统计学上无显著性差异外,从感染后第4 d开始,A组的IL-2水平显著低于B组,而且差别越来越显著(P<0.05或P<0.01)。在感染后第4和第7 d A组的肝平均虫荷显著高于B组(P<0.01)。结论FK506对T淋巴细胞免疫有显著的抑制作用,导致机体的免疫力下降,加剧弓形虫的感染。     

地塞米松对大鼠腹腔巨噬细胞抗弓形虫作用的影响

目的研究地塞米松(Dexamethasone,DXM)对大鼠腹腔巨噬细胞抗弓形虫感染的影响。方法采用瑞-姬染色观察弓形虫在与DXM共孵育大鼠腹腔巨噬细胞内的增殖;以半定量RT-PCR法检测与DXM共孵育大鼠腹腔巨噬细胞IFN-γ、TNF-α和IL-2mRNA的表达,以ELISA法检测细胞培养上清中IFN-γ、TNF-α和IL-2的含量。结果弓形虫在DXM孵育的腹腔巨噬细胞内大量增殖,其弓形虫密度0h为(37±7)个/100个细胞,而24h时为(173±32)个/100个细胞(P<0.01);与DXM共孵育大鼠腹腔巨噬细胞24h时的IL-2、IFN-γ和TNF-αmRNA及其蛋白的表达与对照组相比均明显降低(P<0.01),如:DXM孵育组的TNF-α(187.52±39.41pg/ml)与对照组(115.43±22.46pg/ml)相比差异显著(P<0.01)。结论 DXM可诱发腹腔巨噬细胞易感弓形虫,其机制可能与细胞因子IFN-γ、TNF-α和IL-2表达下调有关。     

结核性脑膜炎ADA、ADA2、IL-12和IFN-γ的诊断价值探讨

目的探讨腺苷脱氨酶(ADA)、腺苷脱氨酶同工酶2(ADA2)、白介素12(IL-12)和γ干扰素(IFN-γ)在结核性脑膜炎的诊断意义。方法选取92例结核性脑膜炎患者(结脑组)和68例非结核性脑膜炎患者(对照组),分别检测其治疗前脑脊液中ADA、ADA2I、L-12I、FN-γ含量,进行统计分析;检测结脑组患者抗结核治疗12、个月后ADA、ADA2I、L-12I、FN-γ含量,与治疗前含量相比较,观察其动态变化。结果 (1)与对照组比较,治疗前结脑组脑脊液中ADA、ADA2和IL-12水平均显著高于对照组(P<0.01),IFN-γ含量亦增高,但差异无统计学意义(P>0.05);(2)和治疗前相比较,治疗1个月后结脑组脑脊液中ADA、ADA2含量明显下降(P<0.05),IL-12、IFN-γ含量亦下降,但差异无统计学意义(P>0.05);治疗2个月后结脑组脑脊液中IL-12、IFN-γ含量亦明显下降(P<0.05)。结论结核性脑膜炎脑脊液中ADA,ADA2,IL-12含量明显增高,有助于结核性脑膜炎的诊断;ADA、ADA2I、L-12、IFN-γ含量因有效的抗结核治疗而下降,有助于对结核性脑膜炎治疗效果的评...     

弓形虫ROP11核酸疫苗免疫保护作用的研究

目的观察ROP11核酸疫苗对BALB/c小鼠的免疫保护作用。方法 40只BALB/c小鼠随机分为实验组、空质粒对照组、PBS对照组和空白对照组,每组10只,均通过股四头肌注射免疫小鼠。其中实验组每鼠注射pcDNA3.1（＋）-ROP11重组质粒100μg（1μg/μl）,空质粒对照组注射pcDNA3.1（＋）质粒100μg（1μg/μl）,PBS对照组注射无菌PBS缓冲液100μl,空白对照组不注射。共免疫3次,每次间隔2周,末次接种量均加倍。分别于每次注射前和末次注射后第2周检测小鼠血清特异性IgG和细胞因子IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-10。末次注射后2周各组小鼠腹腔攻击感染RH株弓形虫速殖子1×10^3个/只,观察其存活时间,评价免疫效果。结果 ROP11核酸疫苗能诱发小鼠产生细胞免疫和体液免疫反应,实验组小鼠血清特异IgG随着免疫次数的增加而显著增高（P〈0.05）。血清IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-10均不同程度升高（P〈0.05）。重组质粒免疫组、空质粒免疫组、PBS和空白对照组小鼠经RH株弓形虫攻击感染后的平均存活时间为236.3、97.8、96.3和96.2h,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 ROP11核酸疫苗对BALB/c小鼠弓形虫感染有一定的免疫保护性,为进一步研究ROP11核酸疫苗的生物学功能提供了实验基础。