同种和异种丝虫成虫抗原间接荧光抗体试验及免疫酶染色试验诊断丝虫病的研究

应用马来丝虫成虫及牛丝虫成虫冰冻切片作荧光抗体试验(IFAT)及免疫酶染色试验(IEST),以检测对丝虫病人及健康人的敏感性、特异性和交叉反应性。两种抗原IFAT的敏感性和特异性分别为84.9～97.1％和90.3～97.1％;对钩虫、蛔虫感染者均无交叉反应。两种抗原IEST的敏感性和特异性分别为94.3～94.9％和97.1～100％;用牛丝虫成虫冰冻切片抗原更具有实用价值:IEST适用于现场。     

马来丝虫成虫冰冻切片抗原间接荧光抗体试验诊断丝虫病的研究

实验取人工感染长爪沙鼠腹腔里的马来丝虫雌性成虫,用香糊包埋切制4μm冰冻切片作抗原。用羊抗人IgG荧光抗体作常规间接染色,检测班氏丝虫微丝蚴血症者167例,阳性反应155例(92.3％);无微丝蚴血症100例中,阳性反应69例(69％);晚期患者19     

马来丝虫不同发育期虫体抗原检测班氏丝虫病血清抗体

以马来丝虫不同发育期虫体为抗原,用间接荧光抗体试验检测班氏丝虫微丝蚴血症者的血清抗体.结果表明,木瓜蛋白酶处理的微丝蚴整体抗原和成虫冷冻切片抗原的敏感性和特异性无显著差异,检出率分别为95.3％和93.7％。假阳性率分别为3.9％和0.感染期幼虫抗原的敏感性和特异性较差,检出率为76.2％,非流行区对照组假阳性率和交叉反应率分别为11.5％和18.8％。     

啮齿类丝虫抗原和牛丝虫抗原酶联免疫吸附试验检测人体班氏丝虫病抗体

作者从印度勒克瑙附近一个班氏丝虫病流行村庄,选择18例丝虫病临床患者(淋巴液肿、淋巴管炎、象皮肿)、10例无症状微丝蚴血症及10例健康者作为检测对象。受试者年龄在15～45岁,无其它蠕虫感染,血清贮于-20℃备用。棉鼠丝虫抗原系成虫可溶性提取物;从刚屠宰的水牛腹腔收集鹿丝状丝虫,洗涤除去附着的宿主物质,置冷蒸馏水匀浆器中磨成10%匀浆,超声捣碎(20kc/s)5分钟,2,500rpm离心,上清液即为抗原。按Engvall等法进行酶联免疫吸附试验,以     

马来丝虫成虫抗原间接荧光试验在丝虫病防治监测中的应用

Ambroise-Thomas等(1974)曾用丝虫成虫冰冻切片抗原的免疫荧光抗体试验(IFAT)进行丝虫病流行病学监测,国内用于诊断丝虫病也取得较好效果。我们于1985年4～11月在海南岛琼山县和广西田阳县等不同防治阶段的丝虫病地区进行了防治监测的观察。 一、材料和方法 (一)抗原制备 从感染马来丝虫的长爪沙鼠取出雌性成虫,洗净,在-20℃条件下作冰冻切片(4～5μm厚),固定,待干后,于-30℃冷藏备用。(二)试验血清 在班氏丝虫病区的海南岛琼山县十字路乡的4个村,采集微丝蚴血症者耳垂血166例(未治疗者),在广西田阳县凤马村采集居民耳垂血149人(占全村人口80％,防治后8年).每人取耳垂血3大滴约60μl,滴于滤纸上、晾     

单克隆抗体ELISA检测班氏丝虫病人血清循环抗原

应用抗马来微丝蚴抗原4B_1株单克隆抗体(McAb)和抗马来成虫代谢抗原4B_7株McAb酶联免疫吸附试验(ELISA)检测班氏微丝蚴血症者血清中循环抗原,阳性率分别为78.46％(102/130)和87.13％(88/101);检测51例晚期丝虫病人血清,阳性率分别为3.92％和1.96％;36例经治疗后微丝蚴血症阴转者血清,阳性率分别为13.89％和8.33％。丝虫病非流行区99例肠道蠕虫感染者阳性率分别为16.16％和5.05％。结果表明抗马来成虫代谢抗原4B_7株McAb应用于诊断班氏丝虫感染的效果优于抗马来微丝螺4B_1株McAb。     

间接血凝试验、间接荧光抗体试验和酶联免疫吸附试验测定班氏丝虫病抗体的效果比较

本文报告用班氏微丝蚴作抗原比较间接血凝(IHAT)、间接荧光抗体(IFAT)和酶联免疫吸附试验(ELISA)测定抗体的效果。抗原:微丝蚴的分离是从人血标本中通过10%右旋糖酐沉降血细胞和微丝蚴,用冷水溶血,对剩下的微丝蚴于4℃超声粉碎3次,每次30秒钟,间隔1分钟。IFAT用超声粉碎的微丝蚴抗原,IHAT和ELISA用经玻璃匀浆器制成匀浆后在4℃超声粉碎10次,每次10分钟,然后以1,3000×g离心30分钟制备的可溶性抗原。血清:人血清取自正常人(包括流行区     

用丝虫病人血清IgG及ELISA双抗体法检测班氏丝虫病的循环抗原

用检测抗原的方法诊断寄生虫感染比检测抗体更有前途。作者以丝虫病人血清的免疫球蛋白(FSI),提取IgG,用酶联免疫吸附试验双抗体法,检测丝虫病人血清内的循环抗原。血清:113份血清分成2组,即正常健康人(流行区和非流行区的健康人,无寄生虫感染)和丝虫病人(血检微丝蚴阳性以及有临床表现的病人如象皮病等)     

螨成虫抗原间接荧光抗体试验检测肺螨病

肺螨病是某些螨类经呼吸道侵入人体寄生于肺部而引起的一种疾病 ,并在特定的人群中有较高的感染率和发病率 [1 ] ,因该病无特殊的临床表现 ,加之痰检较为繁杂 ,技术要求高 ,故而诊断困难。为了寻找一种简便可靠的免疫学诊断方法 ,作者以粉尘螨成螨作抗原 ,应用间接荧光抗体试验 ,对 5 8例肺螨病患者的血清进行了检测 ,现将结果报道如下。1　材料与方法1.1　抗原片的制备　将培养的粉尘螨面粉用 70孔目筛滤过 ,除去粗大的面粉颗粒和麸皮 ,再用 12 0孔目铜筛滤过 ,除去细小的面粉颗粒 ,剩余的螨粉混合物用饱和盐水漂浮离心法纯化。纯化后的螨…     

单克隆抗体检测班氏丝虫病循环抗原

本文报道以抗盘尾丝虫Onchocerca gibsoni的单克隆抗体Gib 13株,双面免疫放射计量试验(IRMA)检测斯里兰卡和巴布亚-新几内亚的班氏丝虫病人血清循环抗原。取BALB/c小鼠,按10~4/鼠接种O.gibsoni胚卵及等量的微丝蚴,16天后再用同样数量的上述抗原静注强化免疫,然后以BALB/c小鼠脾细胞与NS-1骨髓瘤细胞融合。间接免疫荧光抗体法(IFAT)筛选分泌抗牛丝虫微丝蚴表面抗原的杂交瘤株。经两次克隆后,注入BALB/c小鼠,收集腹水。5%硫酸铵沉淀腹水中的单克隆抗体并透析,IFAT测定所获的各单克隆抗体对班氏丝虫微丝蚴表     

应用几种抗原进行马来丝虫病间接荧光抗体试验的比较观察

近年来,国内外丝虫病间接荧光抗体(IFA)试验的研究有较大进展,为了探索容易获得和制备简便的IFA试验抗原,我们曾于1978年进行了以下试验。 材料和方法 一、抗原制备 (一)牛丝虫成虫抗原 从武汉市牛羊加工厂屠宰的牛腹腔收集鹿丝状线虫(Setaria cervi),置-50℃保存,在1～9个月内使用,用前按Ambroi-     

间接免疫荧光试验检测感染丝虫的猫血清抗体

本文报道用二种方法(木瓜蛋白酶和超声粉碎)制备的马来丝虫微丝蚴抗原,用间接免疫荧光抗体试验(IFAT)检测不同丝虫感染的猫血清抗体水平,并比较两种抗原的敏感性。从感染马来丝虫的阳性猫体,采静脉血用生理盐水稀释,经5μm核孔薄膜过滤,再用pH7.6 PBS离心洗涤3次,收集微丝蚴,置-20℃保存。木瓜蛋白酶处理的整条微丝蚴抗原片(简称木瓜抗原片),按Santes等(1976)的方法进行,将经木瓜蛋白酶处理的微丝蚴悬液吸滴于聚氟乙烯玻片凹孔中,室温干燥、丙酮固定。超声粉碎处理的微丝蚴碎片抗原玻片(简称粉碎抗原片)制备方法:微丝蚴经超声粉碎后,将其悬液吸滴于上述玻片的凹孔中,用同法干燥固定。血清采自47只猫的静脉血,其中30只感染马来丝     

人体丝虫病对异种丝虫抗原的免疫反应

作者用犬丝虫(Diro)、棉鼠丝虫(Lito)及血管国线虫Angiostrongylus cantonensis(Ac)等3种抗原对冲绳地区98份血清,其中15份系班氏丝虫微丝蚴阳性者,83份系微丝蚴阴性者;又对塔希提岛18例班氏丝虫患者进行了间接红细胞凝集(HA)试验、补体结合(CF)试验和琼脂扩散(ID)试验。此外对实验感染棉鼠丝虫的棉鼠血清与异种丝     

圈形盘尾丝虫成虫抗原间接红细胞凝集试验诊断丝虫病的观察

应用圈形盘尾丝虫成虫和马来丝虫成虫抗原致敏绵羊红细胞作间接红细胞凝集试验,以诊断丝虫病。对84例马来微丝蚴阳性血清标本检测,结果圈形盘尾丝虫成虫抗原阳性率为90.5％(76/84);马来丝虫成虫抗原阳性率为93.8％(78/84),经统计学处理,两者无显著性差异(x~2=0.312,P>0.05)。两种抗原对52例正常人血清检测的假阳性率均为7.7％(4/52),结果说明圈形盘尾丝虫成虫可作为异种抗原用于丝虫病诊断。     

同种和异种丝虫成虫抗原免疫动物后血清特异性抗体动态的研究

应用马来丝虫和牛丝虫成虫冰冻切片抗原作间接免疫荧光抗体试验(IFAT)和免疫酶染色试验(IEST)检测家兔经3种抗原免疫后不同时期血清抗体IgG水平,均能显示免疫动物特异性抗体水平的动态变化。IgG水平高峰(GMRT为76.11～861.08)均在动物免疫后第4wk,在第8wk时,均下降至低水平(GMRT为4.00～32.00);加强免疫后1wk时,又上升至高水平(GMRT为20.11～181.02)。     

对流免疫电泳检测班氏丝虫病循环抗原

作者用兔抗犬恶丝虫和马来丝虫抗体对流免疫电泳检测印度南部班氏丝虫病流行区病人血和尿中的可溶性丝虫抗原。用常规方法收集人血清标本,15ml尿中加入35ml冰冻乙醇以浓缩虫抗原,置3 000转离心10分钟,将沉渣混悬于1ml pH7.4 0.01M PBS,置入液氮。将乙醇沉淀物冻干,用时与1ml水混合。分别从感染的犬和沙鼠获取犬恶丝虫(DiA)和马来丝虫(BmA)制备可溶性成虫抗原。以含有0.75mg BmA或DiA的完全福氏佐剂双月注射免疫新西兰白兔,用硫酸铵沉淀法纯化抗体,PBS透析,蛋白浓度为20mg/ml。采用改良对流免疫电泳法(CIEP),以含有1%琼脂糖、4%葡聚糖的TT缓冲液(每升包括9.8g三羟甲基氨基甲     

酶免疫染色试验检测丝虫病人血清抗体

我们以冰冻切片的马来丝虫成虫为抗原,对114例丝虫病人和113名健康者用EIST和间接免疫荧光抗体试验(IFAT)检测血清抗体。 马来丝虫成虫取自长爪沙鼠腹腔,虫体洗净后用5％甲基纤维素包埋,用KRYOMAT1700型自动切片机(西德产)切片,制成5μm厚的横切面贴于载玻片上,     

马来微丝蚴断片抗原间接荧光抗体试验诊断丝虫病的研究

采用超声粉碎马来微丝蚴断片为抗原,进行间接荧光抗体试验用以诊断丝虫病。用血清和耳垂滤纸干血滴浸出液进行对比,结果两者检出率相似,认为后者可以代替前者。对微丝蚴血症114例和正常人血清191例同时作IFA试验,当血清滴度为1:10时,本法的敏感性和特异性分别为36.8及98.4％。在两种丝虫病不同流行程度地区人群作IFA试验,能检出其高低不同的微丝蚴阳性率,表明本法可应用于班氏丝虫病和马来丝虫病流行病学调查和监测。