人脊神经节生前发育的光镜、电镜研究

用光镜、电镜方法研究4～10个月胎儿第一腰脊神经节神经元发育。Nissl 染色发现,脊神经节神经元密度随胎儿月龄增加而下降;神经元平均直径随胎龄增加逐步增大,但10个月胎龄神经元的直径还远不如成年神经元的直径。电镜研究揭示,在胎龄4个月时髓鞘已经形成,7个月以后发育良好,9、 10月胎龄时还可见到开始髓化的纤维,每个视野无髓纤维均占所见神经维纤的多数。     

离体脊神经节的细胞内记录技术

<正> 曾被 Sherrington 称为“侧位脊髓”的脊神经节,由于其结构特殊并易于观察,人们曾以很大兴趣对之进行广泛的研究,但收效甚微。人们一直认为,脊神经节细胞只对其纤维具有营养作用,而对神经冲动的产生和传导无特殊作用。但是近年来,我们在在体脊神经节上观察到,该节自发活动甚是活跃,对诱发活动具有明显的频     

鸡胚背根节神经细胞微团悬滴培养法的建立及应用

采用神经细胞微团悬滴培养法培养Ｈａｍｂｕｒｇｅｒ３５期鸡胚背根节神经元。结果,神经元于培养２４ｈ后开始生长５－８ｄ神经突起联多状,说明本法可行。该法为今后进一步探讨神经营养因子对培养神经元存活,生长的影响奠定了基础。     

脊神经节损伤动物模型建立与神经行为的观测

建立一组与临床相关联的动物实验模型和测定装置，探讨不同损伤方式（机械性压迫和炎性损伤）和不同损伤时间（伤后１，２，４，８周）引起动物神经行为改变的规律及特点。方法健康家兔６１只，实验分为：手术对照组、机械性压迫组、炎性损伤组。结果在脊神经节损伤的不同阶段，实验动物出现了明显热辐射性和机械性刺激的痛觉过敏表现。结论我们自行研制的神经行为测定装置，通过微机自动记录，贮存和打印，可提高研究的准确性和可靠性。     

微重力对鸡胚前庭神经节神经元形态发育的影响

目的探讨太空微重力对鸡胚前庭神经元形态发育的影响.方法随机选取太空发育鸡胚和地面发育鸡胚各2只,利用计算机显微测量技术测量前庭神经元切面的面积、周长、形态系数,每只鸡胚测量200个神经元.结果2只太空发育鸡胚的前庭神经元切面面积的中位数分别是230.551μm2和202.819μm2,均高于2只地面发育鸡胚的162.659 μm2和123.138μm2;周长的中位数分别是58.836 μm和55.365 μm,高于地面鸡胚的49.357μm和43.481 μm;形态系数的中位数分别是0.862和0.864,与地面鸡胚的0.854和0.861比较,差异无统计学意义(P＞0.1).结论太空发育鸡胚的前庭神经元体积大于地面发育鸡胚前庭神经元体积,而形状无差异,提示微重力对前庭神经元的形态发育可能有影响.     

太空和地面环境发育鸡胚的耳蜗神经节神经元形态比较

目的:探讨太空微重力对鸡胚耳蜗神经元的形态发育有无影响。方法:随机选取太空发育鸡胚和地面发育鸡胚各2只,利用计算机显微测量技术测量耳蜗神经节神经元截面的面积、周长、形态系数,每只鸡胚测量200个神经元。结果:2只太空发育鸡胚的耳蜗神经元截面的面积分别为(109.62±22.56)μm2和(123.63±26.73)μm2,周长分别为(39.71±4.28)μm和(42.00±4.87)μm,形状系数分别为0.865 2±0.048 7和0.872 4±0.058 7。2只地面发育鸡胚的前庭神经元截面的面积分别为(118.22±26.82)μm2和(114.08±27.83)μm2,周长分别为(41.23±4.88)μm和(40.25±5.08)μm,形状系数分别为0.864 7±0.061 4和0.872 2±0.048 2。结论:本研究结果提示微重力对耳蜗神经元的形态发育可能无影响。     

改良鸡胚培养法

鸡胚培养法是常用的病毒培养法之一,一般选用白色壳薄的受精卵,以便在检卵灯下画出气室界限,于胚胎附近大血管处作好标记,避开大血管接人病毒。现以尿囊腔接种法为例,采用一种改良法,可不受上述限制。     

鸡胚颅面部整胚原位杂交的实验

目的：：探讨并优化鸡胚整胚原位杂交的实验,以利于研究鸡胚颅面部发育相关基因的表达。方法：体外转录制备地高辛标记的 RNA反义探针,进而采用整胚原位杂交方法检测鸡胚颅面部发育相关基因的表达。结果：地高辛标记的 RNA反义探针与体内 mRNA特异性结合,在显微镜下观察到 mRNA表达部位呈现深蓝色,背景颜色较浅为浅紫色,可在保持胚胎结构完整的情况下,清楚观察到相关基因的表达。结论：利用优化的整胚原位杂交技术,可保持鸡胚结构完整,染色清晰,直观清楚地看到基因的时空表达,为进一步研究颅面部发育相关基因的表达奠定了基础。     

鸡胚电转染-RNA干扰技术在体模型的建立

目的 建立在体鸡胚电转染-RNA干扰技术(RNAi)模型.方法 通过SOE-PCR方法,利用shRNA 中的Loop环作为交叠区序列成功的建立了一种方便的shRNA表达序列构建方法,将Isl-1特异性的shRNA序列插入到pEGFP-H1-shRNA质粒中,通过注射后电转染,利用免疫组织化学方法检测Isl-1在鸡胚神经管和背根神经节(dorsal root ganglia,DRG)中的表达.结果 鸡胚神经管和DRG中Isl-1的表达受到明显抑制.结论 成功建立了在体鸡胚电转染-RNAi模型,为以鸡胚为模式动物研究神经管和DRG发育相关基因的功能提供了有力的工具.     

鸡胚材料体外培养的方法

可供培养的细胞种类极其广泛，由于胚体与成体所处生存环境的不同，开展胚胎组织细胞的培养有着广泛的意义。本文结合自己在胚胎组织细胞培养方面的实践经验，简述鸡胚整胚、器官、组织和细胞体外培养的方法及其应用。     

脊神经节损伤与脊髓背角C-fos原癌基因表达

目的探讨脊神经节(DRG)不同损伤方式后,不同损伤时间的脊髓背角C-fos原癌基因蛋白表达情况,并探讨该蛋白表达程度与神经行为异常改变之间的关系.方法健康家兔42只随机分为手术对照组、机械性压迫组、炎性损伤组和正常对照组,制备相应的脊神经节损伤模型.术后检测动物神经行为改变,并对中枢神经伤害性刺激反应物C-fos原癌基因蛋白进行免疫组化检测分析.结果DRG损伤后1周,伤侧脊髓背角C-fos癌基因蛋白的阳性细胞数分别为手术对照组(47±17)、机械性压迫组(58±22)、炎性损伤组(55±20),均较正常对照组(28±18)显著增强(P＜0.05);术后2,4,8周3个实验组结果也比对照组显著增强(P＜0.05).结论 DRG损伤所导致动物脊髓背角伤害感受性神经元的过度兴奋,可能介导了神经细胞的兴奋性毒性损伤和伤肢的痛觉过敏.     

脊神经节损伤与脊髓背角C-fos原癌基因表达

目的探讨脊神经节(DRG)不同损伤方式后,不同损伤时间的脊髓背角C-fos原癌基因蛋白表达情况,并探讨该蛋白表达程度与神经行为异常改变之间的关系。方法健康家兔42只随机分为手术对照组、机械性压迫组、炎性损伤组和正常对照组,制备相应的脊神经节损伤模型。术后检测动物神经行为改变,并对中枢神经伤害性刺激反应物C-fos原癌基因蛋白进行免疫组化检测分析。结果DRG损伤后1周,伤侧脊髓背角C-fos癌基因蛋白的阳性细胞数分别为手术对照组(47±17)、机械性压迫组(58±22)、炎性损伤组(55±20),均较正常对照组(28±18)显著增强(P<0.05);术后2,4,8周3个实验组结果也比对照组显著增强(P<0.05)。结论DRG损伤所导致动物脊髓背角伤害感受性神经元的过度兴奋,可能介导了神经细胞的兴奋性毒性损伤和伤肢的痛觉过敏。     

鸡胚鳃器官的扫描电镜观察

用显微解剖术和扫描电镜方法观察第11～21期鸡胚鳃器官的形态结构．鸡胚鳃器官由4对鳃弓、鳃沟、鳃膜和咽囊组成。第11期第1对鳃弓出现于心隆起颅侧。此后，第2—4对鳃弓分别出现在心隆起两侧。相邻鳃弓之间隔以相应的鳃沟，鳃沟与咽囊之间的薄层组织为鳃膜。在原始咽内部，咽囊最初呈圆弧形小坑状，继而加深变窄呈沟缝状。第17期第1、2对咽囊借鳃裂与鳃沟相通。     

鸡胚脑电波个体发生的研究

实验观察了66只10-20天京白三系鸡胚的脑电活动。结果发现在孵化的第14天开始出现脑电活动。鸡胚脑电起初表现为低幅慢波,偶有高幅慢波。随着胚令增加,低幅慢波频率增加,演变为低幅快波;高幅慢波逐渐增多。整个脑电振幅随胚令增加而普遍增高。在19天、20天鸡胚,快眼动的出现与脑电波型无明显关系,箭毒对鸡胚脑电无明显影响。