新型内皮素受体拮抗剂ETP-508对实验性大鼠肺纤维化的干预作用

目的：研究新型内皮素受体拮抗剂ETP-508对实验性大鼠肺纤维化的干预作用,并探讨其机制．方法：实验分为4组：博莱霉素组、ETP-508组、地塞米松组和正常对照组．博莱霉素组、ETP-508组和地塞米松组均给以博莱霉素（5mg／kg）气管内注射复制大鼠肺纤维化模型,正常对照组给以气管内注射等量生理盐水替代．ETP-508组和地塞米松组造模开始后次日又分别给以腹腔注射ETP-508（100μg／kg）和地塞米松（1mg／kg）,隔日1次．博莱霉素组和正常对照组以等量生理盐水替代．造模后第28日处死所有大鼠,测定肺组织ET-1和羟脯氨酸含量,并进行组织病理学观察．结果：博莱霉素组肺组织内羟脯氨酸明显高于正常对照组,病理为肺纤维化改变．博莱霉素组的ET-1水平高于正常对照组和地塞米松组,差异有统计学意义（P〈0．01）;ETP-508组ET-1水平均高于上述各组,与博莱霉素组（P〈0．05）,正常对照组和地塞米松组比较（P〈0．01）有统计学意义;地塞米松组与正常对照组比较,无统计学意义（P〉0．05）．结论：ETP-508对肺纤维化的形成有一定的干预作用,其机制可能通过拮抗ET-1与内皮素受体结合的作用有关．     

764—3对大鼠实验性肺纤维化的保护作用

给大鼠气管内一次滴注博莱霉素,观察肺部炎症及其修复形成肺纤维化的过程.滴注后第7、21天,可见肺系数及肺组胺含量显著升高。第21天时还有血清丙二醛含量显著升高,而此时肺羟脯氨酸含量无明显改变。提示为亚急性炎症阶段。第60天时,肺羟脯氨酸含量显著升高,表明有肺纤维化形成。764-3治疗可显著缓解博莱霉素所致的上述指标的变化。提示764-3可防止博莱霉素所致肺炎症及其随后发展成肺纤维化。这一作用除直接与其对抗早期的炎症过程有关外,尚不能排除直接地抗纤维化作用。     

布洛芬对小鼠肺纤维化的保护作用

  目的 研究布洛芬对博莱霉素诱导的肺纤维化的治疗保护作用。方法 通过气管内滴注博莱霉素复制小鼠肺纤维化模型,实验分为正常对照组、模型组、布洛芬5 mg/kg治疗组、布洛芬10 mg/kg治疗组和布洛芬20 mg/kg治疗组。采集血清行一氧化氮（NO）化学法检测小鼠血清中NO含量;收集肺泡灌洗液行ELISA方法测定肿瘤坏死因子（TNF-α）和白细胞介素6（IL-6）含量;留取肺组织行HE染色观察各组小鼠肺组织形态变化,制备肺组织匀浆测定匀浆中丙二醛（MDA）含量;采用RT-PCR和Western blot方法检测肺组织中转化生长因子β1（TGF-β1）、Smad2和p-Smad2的表达水平。结果 与正常对照组比较,肺纤维化模型组肺组织中发生炎性细胞浸润、肺泡间隔增厚情况,同时血清中NO含量和肺泡灌洗液中炎性因子TNF-α和IL-6含量显著增加,小鼠肺组织中MDA含量也有所增加,TGF-β1和p-Smad2的表达显著升高。经布洛芬给药治疗后,各项生化指标有所下降,同时肺纤维化损伤得以缓解。结论 布洛芬可缓解由博莱霉素诱导的肺纤维化,其作用机制可能与下调NO含量、TNF-α和IL-6等炎性因子含量及调控TGF-β信号通路有关。     

干扰素γ对实验大鼠肺纤维化的治疗作用及机制的初步研究

目的观察干扰素γ(IFN-γ)对实验大鼠肺纤维化的治疗作用,初步探讨其抗纤维化的作用机制.方法大鼠分为正常对照组、博莱霉素(BLM)组、IFN-γ治疗组.气管内注入博莱霉素造模后,于当天开始每日给药,分别于第1、3、7、14、28天处死,测量PO2,取肺组织和血清,行电镜观察及HE染色,免疫组化测定肺组织转化生长因子β1(TGF-β1)、纤维连接蛋白(FN)含量,ELISA测定血清IL-4含量及Western Blotting测定表面活性蛋白A(SP-A)含量.结果 IFN-γ组与BLM组比较,前者肺纤维化程度明显减轻,PO2显著升高(P<0.01),TGF-β1、FN表达减少,血清IL-4、SP-A含量显著减低(P<0.01).结论 IFN-γ对博莱霉素所引起的肺纤维化具有明显的治疗作用,可能通过降低TGF-β1、FN等前纤维化因子、调节失衡的T细胞亚群及减轻肺组织损伤发挥作用.     

槲皮素对博莱霉素致鼠肺纤维化的防治作用

目的：观察SD大白鼠腹腔内注射槲皮素对实验性博莱霉素致肺纤维化的防治作用。方法：通过博莱霉素致鼠肺纤维化的动物模型。动态观察各实验组与肺纤维化形成相关的第3、7、14、28天肺组织匀浆羟脯氨酸、脂质过氧化物（LPO）含量,动态观察肺组织病理学变化及形态学定量测量肺组织中炎症细胞数/每高倍视野、肺泡间隔宽度、单位过氧化物（LPO）含量,动态观察肺组织病理学变化及形态学定量测量肺组织中炎症细胞数/每高倍视野、肺泡间隔宽度、单位面积肺纤维化灶所占的分面积。结果：实验组与对照组相比,槲皮素组能显著地降低博莱霉素致肺纤维化程度。结论：槲皮素对博莱霉素致肺纤维化有一定的防治作用。     

乙胺嗪对博莱霉素致鼠肺纤维化影响的实验观察

博莱霉素(Bleomycin,BLM)是多肽类抗肿瘤药,单次气管内注射可复制出与人肺间质性疾病相似的动物模型,但其致病机制尚未完全阐明。我们观察了白三烯(leukotrienes,LTs)生物合成抑制剂乙胺嗪(Diethylcarbamazine,DEC)腹腔注射对BLM所致SD大白鼠肺间质纤维化实验及病理改变的影响,探讨白三烯在肺纤维化发病机理中的作用。1 材料与方法1.1 试剂及配制:博莱霉素A_5(天津河北制药厂)用生理盐水配成.2mg/ml;乙胺嗪(南京制药厂)配     

氨溴索对实验性肺纤维化的干预作用

目的:探讨氨溴索对博莱霉素所致大鼠肺间质纤维化的干预作用及机制。方法:健康雌性 SD大鼠 45只,随机分为3组。治疗组:15只,气管内一次性注入博莱霉素5 mg·kg-1,当日予氨溴索20 mg·kg-1灌胃,每日一次,于第7,14和28 d各处死5只;模型组:15只,以生理盐水代替氨溴索灌胃,余同治疗组;对照组:15 只,大鼠气管内注入生理盐水0.2~0.3 ml,于第7,14和28 d各处死5只。各组动物处死后提取肺组织,作HE染色,进行病理分析,并测定肺匀浆中谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)和羟脯氨酸(HYP)的含量。结果:对照组无明显病理改变;治疗组7 d时肺泡炎较模型组减轻,28 d时纤维化病变较模型组好转。模型组 7 d肺匀浆中 GSH含量和14 d SOD含量低于对照组(P<0.01),治疗组上述指标较模型组升高(P<0.05, P<0.01)。模型组 28 d时肺匀浆HYP含量均明显高于对照组和治疗组(P<0.05)。结论: 氨溴索能通过增强肺局部抗氧化能力,减轻博莱霉素诱导的肺泡炎和肺纤维化程度,是治疗肺纤维化的可能途径之一。     

内皮素在实验性肺纤维化发生发展中的作用

目的　了解内皮素 (ET)在肺纤维化 (PF)发生发展中的作用及意义。方法　采用放射免疫法测定实验组 (博莱霉素— BLM组 )和对照组 (生理盐水组 )大鼠在实验第 1 ,3,7,1 4和 2 8d时血和支气管肺泡灌洗液 (BALF)中 ET含量 ,并采用 SP免疫组织化学方法动态观察肺组织中的 ET表达情况。结果　 (1 )实验组大鼠在实验早期 ,血浆和 BALF中 ET含量均明显高于对照组。BALF以蛋白作为内部标记参考物表示 ng· L-1· g-1 ,则实验组 ET含量亦高于对照组 ,其变化量与标记前的量不成比例。 (2 ) ET与 BALF中细胞总数无相关 ,与 BALF中多形核白细胞 (PMN)及淋巴细胞呈明显正相关。 (3)实验组在 1～ 7d支气管粘膜上皮和炎性细胞 ET表达增强 ,7～ 1 4 d持续表达 ,1 4～ 2 8d高表达 ,而 型肺泡上皮细胞于 7d后出现 ET的表达增强。结论　 BALF中 ET水平能反应肺泡炎的程度及病变活动性 ,可作为早期诊断的参考指标。ET参与 PF的渗出和增生过程 ,与 PF的发生发展有密切的关系。     

喜炎平注射液对博来霉素诱导小鼠肺纤维化的作用及机制研究

目的 观察喜炎平注射液对博莱霉素(bleomycin,BLM)所致小鼠肺纤维化的作用并探讨可能的机制.方法 将昆明小鼠随机分为对照组、喜炎平(XYP)组、博来霉素(BLM)模型组、BLM+XYP组.经气管内1次性灌注BLM复制肺纤维化动物模型,治疗组造模后同时予尾静脉注射喜炎平直至第28天实验结束,药物干预后第7天、28天分别处死动物,第7天测定肺湿干重比(W/D),髓过氧化物酶(MPO)活性,苏木精-伊红(HE)染色观察肺泡炎症,第28天测定羟脯氨酸(HYP)含量及前Ⅰ型胶原蛋白mRNA(procollagenl mRNA)表达水平,Masson染色观察肺纤维化程度.结果 第7天,BLM+ XYP组小鼠较BLM组的肺泡炎程度明显减轻,肺W/D及MPO活性降低(P＜0.05),第28天,BLM+ XYP组小鼠肺组织HPY含量、procollagen I mRNA表达水平较BLM组明显降低(P＜0.05),Massor染色显示胶原沉积减少,肺纤维化程度减轻.结论 喜炎平对博莱霉素所致小鼠肺纤维化具有一定的干预作用,其机制可能与其抗炎作用有关.     

白及提取物对博莱霉素致大鼠肺纤维化的治疗作用

目的：探究白及提取物中抗大鼠肺纤维化（PE）的活性部位,并对活性部位的化学性质进行分析。方法采用95%乙醇提取白及得到白及醇提物,药渣水提醇沉法提取得到白及多糖。雄性SD大鼠气管内一次性注射博莱霉素（5 mg/kg）诱导PF模型,灌胃给予白及醇提物（300 mg/kg）或白及多糖（300 mg/kg）,14 d和28 d观察肺组织病理学及胶原沉积变化,计算肺系数,并检测羟脯氨酸含量。采用苯酚-硫酸法测定白及多糖部分糖含量,高效凝胶色谱法测定其相对分子质量大小,高效液相色谱方法研究其单糖组成。结果与PE模型组比较,白及多糖治疗组的大鼠肺组织病理改变明显改善,且肺系数及羟脯氨酸含量明显降低（P＜0.05,P＜0.01）,而白及醇提物组无显著性改善作用。白及多糖糖含量81.41%,数均分子质量（Mn）约为2.23×105,由甘露糖和葡萄糖组成。结论白及多糖能显著降低肺组织羟脯氨酸的产生及胶原的沉积,并延缓PE的发展进程。     

雷公藤多苷对肺纤维化大鼠的干预作用

目的 观察雷公藤多苷对肺纤维化大鼠肺形态学、凝血酶原时间、趋化因子及细胞凋亡的影响,探讨其作用机制.方法 大鼠气管内注入博来霉素造模,随机分为模型组、雷公藤多苷高剂量组、低剂量组、泼尼松组、空白组,造模次日起每天给药,28d后处死大鼠,观察大鼠肺形态学变化、血浆凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、血...     

酸吸入致大鼠肺纤维化初步探索

目的研究实验性酸吸入与大鼠肺间质纤维化的相关性及其机制并与博来霉素致纤维化比较。方法雄性SD大鼠120只,随机分为正常对照组、博来霉素组、高浓度盐酸组、中浓度盐酸组和低浓度盐酸组,每组24只。博来霉素组气管内一次性注入博来霉素诱导纤维化,盐酸组每周气管内滴注不同浓度盐酸1次,正常对照组每周气管内滴注生理盐水1次。各组分别于造模后第7、14、28及42天随机处死6只,取肺组织行HE、Masson染色评价肺组织病理变化,用RT-PCR方法测定肺组织转化生长因子β1（TGF—β1）的mRNA表达,用免疫组化的方法半定量测定结缔组织生长因子（CTGF）的表达。结果盐酸组肺泡炎程度始终显著高于对照组（P〈0．01）,28d达到或者超过博来霉素组水平。盐酸组纤维化程度随时间逐渐增强,显著高于对照组沪〈0．01或0．05）,但始终未超过博来霉素组（P〉0．05）。盐酸组肺组织的TGFβ1 mRNA在28d时达到博来霉素组水平,至42d时全面超过博来霉素组水平。高、中浓度盐酸组CTGF表达高于正常阴性对照组（P〈0．05）,且随滴注次数增加及时间延长而增强。结论本实验反映经常性胃食管酸反流引起的酸吸入与肺纤维化相关。     

益气化纤汤对博来霉素A5诱导的大鼠肺纤维化的影响

目的：研究益气化纤汤对博莱霉素A5（BLMA5）诱导的大鼠肺间质纤维化的治疗作用。方法：利用博莱霉素气管内注射制作大鼠肺纤维化模型。90只健康雄性SD大鼠被随机分为正常组、模型组、强的松组和小、大剂量益气化纤汤组。在同样条件下，药物灌胃饲养28d后，断颈处死。取双肺标本进行病理切片、测定转化生长因子（TGF-β1）表达和羟脯氨酸（HYP）含量。结果：从病理切片、肺组织中TGF-β1表达和肺组织匀浆中羟脯氨酸的含量方面来看，药物治疗各组的肺纤维化均比模型组轻。结论：益气化纤汤对博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化有一定的治疗作用，其作用机制可能通过抑制TGF-β1生成实现。     

浓当归注射液对博莱霉素致鼠肺纤维化治疗作用的研究

为观察当归对博莱霉素致鼠肺纤维化后的治疗作用,对用博莱霉素气管内灌注30d后的SD大鼠,治疗组给予25%当归注射液每日注射共15d,对照组注射生理盐水,结果显示：治疗组肺组织学检查,纤维化明显轻于对照组;肺间质所占面积百分比显著低于对照组;肺匀浆羟脯氨酸含量显著减少（P＜0.01)。结果表明,当归能延缓博莱霉素诱导的肺纤维化进程,缓解其所致的肺纤维化病变。     

肺炎合剂对肺纤维化大鼠组织形态和胶原纤维的影响

目的观察肺炎合剂对肺纤维化大鼠病理学组织形态、胶原纤维的影响。方法将动物分成假手术组、模型组、氢化可地松组和肺炎合剂低、中、高剂量组6组,采用博莱霉素A5造模,于第7天和第28天行常规病理形态观察和苦味酸天狼猩红-偏光法检测Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维变化。结果肺炎合剂能抑制博莱霉素A5造成的肺泡炎、肺纤维化的病变程度,抑制Ⅰ型胶原的增加,对抗Ⅲ/Ⅰ型胶原比例下降。结论肺炎合剂通过抑制肺泡炎的发展、抑制胶原纤维的沉积,特别是维持胶原沉积与降解动态平衡而抑制纤维化的发展。     

肺纤维化大鼠模型中细胞凋亡及Fas/FasL mRNA的表达

目的探讨细胞凋亡及Fas/FasL mRNA的表达在肺纤维化过程中的作用。方法通过博来霉素复制大鼠肺纤维化模型,同时设立正常对照组,采用TUNEL法、RT-PCR法检测肺组织细胞凋亡以及Fas/FasL mR-NA表达。结果肺纤维化模型复制成功。模型组肺组织细胞凋亡上调可持续至第28d,于第14d前后达高峰。Fas/FasL mRNA表达与细胞凋亡呈同步改变。结论细胞凋亡及Fas/FasL mRNA表达的上调可能是博来霉素致大鼠肺纤维化发生、发展的重要原因。     

溶栓疗法对急性肺栓塞动脉血浆内皮素及肺超微结构的影响

为探讨溶栓疗法对急性肺栓塞内皮素分泌水平的影响及相应的肺小动脉组织病理变化，使用自体血栓注入法建立犬急性肺栓塞实验模型。观察尿激酶溶栓组与对照组犬注栓前、溶栓前即刻、溶栓后１．５ｈ及３．０ｈ的血液动力学改变，并采动脉血测血浆内皮素含量，术毕肺组织行病理及电镜观察。结果：溶栓组犬静注尿激酶３０ｍｉｎ后，肺动脉压力和肺血管阻力显著下降，动脉血浆内皮素水平逐渐升高，溶栓后３．０ｈ为（９９．２５±１２．９０）ｐｇ／Ｌ，与注栓前（５１．６３±１０．０９）ｐｇ／Ｌ比较Ｐ＜０．０５，与对照组同期值（５５．９３±２．１０）ｐｇ／Ｌ比较Ｐ＜０．０１。对照组随时间肺动脉压力、肺血管阻力和动脉内皮素水平无显著性变化。组织病理及超微结构研究显示，对照组犬肺组织明显出血、肺泡壁增厚，肺小动脉内皮细胞及平滑肌细胞痉挛、线粒体变性，溶栓组犬肺组织病变较轻。结果提示：溶栓不仅逆转了肺栓塞引起的血液动力学损害，也可减轻肺组织和肺小动脉病损；溶栓组动脉血浆内皮素水平的增加可能是血管再通的一个指标。     

N-乙酰半胱氨酸对博莱霉素大鼠肺脏氧化-还原状态的影响

目的 :探讨肺脏氧化 -还原状态与肺脏炎症、肺纤维化的关系及N 乙酰半胱氨酸对肺纤维化的影响。方法 :健康雌性Wistar大白鼠经支气管灌注博莱霉素 (BLM )造成肺间质纤维化。部分灌注BLM后每日腹腔注射N 乙酰半胱氨酸 (NAC) 4 0mg/kg。计数支气管肺泡灌洗液 (BALF)中细胞总分数 ,检测血清和BALF中谷胱甘肽(GSH)、丙二醛 (MDA)的含量。肺组织制成石蜡切片行HE染色进行病理和炎症积分分析。左肺匀浆后测羟脯氨酸 (HYP)含量。结果 :BLM组急性炎症期BALF细胞总数显著增高 ,中性粒细胞 (PMN)、淋巴细胞百分比显著增高 ,肺组织炎症积分增加 ,14d时HYP含量较对照组显著增加 (P <0 .0 5 ) ;NAC能够降低急性期BALF中细胞总数、PMN和淋巴细胞百分比 ,但在纤维化期细胞总数有所增加。NAC组肺组织炎症积分下降 ,但HYP含量较BLM组略增加 ;各组血清GSH和MDA水平无显著差异 ;BLM组BALFGSH水平第 17天显著降低 ,NAC能够显著提高BALFGSH水平。结论 :BALFGSH ,MDA水平较血清GSH ,MDA水平能更好的反映肺脏损伤情况和对治疗的反应 ;NAC(40mg/kg)能够减少肺组织炎症细胞的浸润和BALF中中性粒细胞百分比 ,表明小剂量NAC具有一定的抗炎作用 ,但其对肺纤维化大鼠胶原沉积无保护作用。