四种试验方法检测早期梅毒患者的结果分析

目的了解镀银染色法、聚合酶链式反应(PCR)、梅毒甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)和梅毒明胶颗粒凝集试验(TPPA)等4种方法,对检测早期梅毒患者的临床价值。方法 2012年1月至2016年7月,在广西部分地区的性病门诊收集疑似早期梅毒患者300例,分别采集组织液与血清标本。组织液标本采用镀银染色法检测梅毒螺旋体,PCR方法检测TP polA基因;血清标本用于TRUST检测非梅毒螺旋体抗体,TPPA检测梅毒螺旋体抗体。统计学资料采用SPSS 13.0软件进行分析。结果在215例确诊的早期梅毒患者中,梅毒PCR检测阳性标本210例,敏感性为97.7%;镀银染色法检测出105例,敏感性为48.8%;TRUST检测出196例,敏感性为91.2%;TPPA检测出208例,敏感性为96.7%。结论不同试验检测方法对早期梅毒患者的诊断有不同的临床应用价值,一期梅毒应当做病原学检查及梅毒血清学试验,二期梅毒应当以梅毒血清学试验为主,当出现结果异常时,应要求患者进行随访再检测以明确诊断。     

应用全自动微孔板法改进TRUST试验检测梅毒抗体

目的:用全自动微孔法代替传统方法检测梅毒抗体,并对改进法进行对比分析和评价.方法:用全自动酶免分析仪法与传统甲苯胺红卡片试验(TRUST)法对比检测了75例梅毒患者和1 061份献血员的血清,不符合者用螺旋体血球凝集试验(TPHA)法验证.对18 000份献血员标本用改进的方法检测,并与传统方法对比,用TPHA法验证.结果:改进方法与传统方法相比,75例梅毒患者血清均呈阳性结果,但改进方法比传统法的凝集颗粒大而均匀,更易判读.在1 061份献血员血清中,用改进的方法检出2份阳性血清,并经TPHA证实,用传统方法则判为可疑血清.用改进方法在18 000份献血员的血清中的7份标本呈阳性,TPHA方法亦为阳性,而传统方法3例呈阳性;2例可疑,2例阴性.结论:改进的全自动微孔板法比传统方法具有敏感性高、特异性好、自动化程度高、易于标准化等优点,适合献血员筛查和临床大批量梅毒患者标本的检验.     

TPPA和TRUST两种检查方法在梅毒血清学检查中的应用

目的探讨分别采用明胶颗粒凝集试验(TPPA)和甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)两种检查方法在梅毒血清学检查中的应用。方法选择我院2005年1月—2009年12月26例梅毒血清标本作为研究对象,根据梅毒的诊断标准[2]:其中Ⅰ期梅毒10例,Ⅱ期梅毒9例,Ⅲ期梅毒4例,潜伏梅毒3例;另选10例经临床确定为类风湿性关节炎、乙型肝炎、SLE、肺结核的作为对照组;以及10例健康体检者作为研究对象。46例标本采用明胶颗粒凝集试验(TPPA)和甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)两种检查方法同时进行检测,操作严格按照各厂家要求进行。观察比较两种检查方法的检测阳性率及敏感性和特异性。结果 TRUST法对梅毒的检测阳性率为80.77%(21/26),TPPA法对梅毒的检测阳性率为96.15%(25/26),TPPA检测法对梅毒检测的阳性率明显高于TRUST检测法(P0.05)。TPPA检测梅毒的敏感性和特异性明显高于TRUST检查法(P0.05)。且检测Ⅲ期梅毒及潜伏梅毒的阳性率分别均高TRUST检测的阳性率,两组比较差异具有显著性。结论 TPPA的敏感性和特异性优于TRUST检测法是临床常用的梅毒确诊试验,但其不适合大量标本的筛查,更适合用于TRUST测定阳性后的确诊试验,建议临床检验医师应予以注意。     

ELISA和TRUST检测梅毒螺旋体方法比较分析

目的 比较ELISA(酶联免疫吸附试验)、TRUST(甲苯胺红不加热血清试验)法诊断梅毒螺旋体感染的方法学差异.方法 用目前国内最常用的诊断梅毒螺旋体感染的TRUST试剂及ELISA试剂检测722例标本,同时与TPPA(梅毒螺旋体明胶凝集试验)的检测结果进行比较,从而得到各试验的假阴性率和假阳性率.结果 对722份样本的检测中,ELISA和TPPA的阳性符合率为98.26％,假阴性率和假阳性率分别为0.46％和1.91％,2种方法差异无统计学意义(P ＞0.05); TRUST和TPPA的阳性符合率为84.39％,假阴性率和假阳性率分别为21.08％和5.10％;ELISA和TURST检出率差异有统计学意义(P＜0.01).结论 ELISA测定梅毒螺旋体的方法在日常大量标本检验时优于TRUST.     

CLIA法联合TPPA法在临床梅毒血清学筛查中的应用评价

目的探讨化学发光免疫分析(CLIA)法联合梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA),在临床梅毒血清学筛查中的应用价值。方法用CLIA进行特异性梅毒螺旋体抗体初筛试验,阳性标本再经TPPA和梅毒甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)复检。CLIA与TPPA结果不一致者用蛋白印迹法(WB)验证。结果 599例CLIA初筛阳性标本用TPPA法复检阳性568例、阴性31例;TRUST法复检阳性189例、阴性410例。31例TPPA阴性标本经WB试验验证结果为18例阴性、13例阳性。结论 CLIA法联合TPPA法初筛梅毒作为梅毒筛查的流程是可行的,值得推广。     

基于重组优势多表位抗原的梅毒间接酶联免疫吸附试验与梅毒螺旋体血凝试验和甲苯胺红不加热血清试验检测梅毒螺旋体抗体的比较研究

目的 建立操作简便、特异性好、敏感性高的血清梅毒抗体的间接酶联免疫吸附试验(ELISA)。方法 通过计算机分析选择梅毒螺旋体优势抗原表位,构建了梅毒螺旋体多表位优势嵌合抗原(rTpN15-TpN17-TpN42-TpN47)表达载体,转化宿主菌HB101进行表达,纯化获得高纯度融合抗原。在此基础上,以纯化抗原包被酶联板,建立检测血清中梅毒抗体的间接ELISA法。利用该方法与梅毒螺旋体血凝试验(TPHA)和甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)同时检测了126例梅毒可疑血清样本,对检测结果进行了比较研究。结果 梅毒螺旋体多表位优势嵌合抗原(rTpN15-TpN17-TpN42-TpN47)在大肠杆菌中获得了高效表达,并成功建立了检测血清中梅毒抗体的间接ELISA法及试剂。对126例梅毒可疑血清样本的检测结果,ELISA、TRUST、TPHA的检出阳性率分别为75.40％(95/126)、72.22％(91/126)、70.63％(89/126),其中TRUST有29例,TPHA有6例为可疑阳性。TPHA检测的6例可疑阳性中,有5例ELISA、TRUST均为阳性;而TRUST测出的29例可疑样品中,仅7例ELISA、TPHA阳性。结论 多表位嵌合抗原ELISA试剂在特异性、敏感性与TPHA法相近,但明显优于TRUST法。     

基于重组优势多表位抗原的梅毒间接酶联免疫吸附试验与梅毒螺旋体血凝试验和甲苯胺红不加热血清试验检测梅毒螺旋体抗体的比较研究

目的：建立操作简便、特异性好、敏感性高的血清梅毒抗体的间接酶联免疫吸附试验（ELISA）。方法：通过计算机分析选择梅毒螺旋体优势抗原表位，构建了梅毒螺旋体多表位优势嵌合抗原(rTpN15-TpN17-TpN42-TpN47)表达载体，转化宿主菌HB101进行表达，纯化获得高纯度融合抗原。在此基础上，以纯化抗原包被酶联板，建立检测血清中梅毒抗体的间接ELISA法。利用该方法与梅毒螺旋体血凝试验（TPHA）和甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）同时检测了126例梅毒可疑血清样本，对检测结果进行了比较研究。结果：梅毒螺旋体多表位优势嵌合抗原（rTpN15-TpN17-TpN42-TpN47)在大肠杆菌中获得了高效表达，并成功建立了检测血清中梅毒抗体的间接ELISA法及试剂。对126例梅毒可疑血清样本的检测结果，ELISA、TRUST、TPHA的检出阳性率分别为75．40％（95／126）、72．22％（91／126）、70．63％（89／126）， 其中TRUST有29例，TPHA有6例为可疑阳性。TPHA检测的6例可疑阳性中，有5例ELISA、TURST均为阳性；而TRUST测出的29例可疑样品中，仅7例ELISA、TPHA阳性。结论：多表位嵌合抗原ELISA试剂在特异性、敏感性与TPHA法相近，但明显优于TRUST法。     

螺旋体传染病

梅毒螺旋体检测方法的临床评价——李振荣等（北京北京大学第三医院检验科100083）；《北京医学》2007，29（8）：497—498[目的：探讨三种血清梅毒螺旋体检测方法的应用价值。方法：应用快速血浆反应素试验（RPR）、酶联免疫吸附试验（ELISA）、梅毒螺旋体明胶凝集试验（TPPA）分别检测602份标本，其中6l例确诊为梅毒感染。荧光定量PCR（FQ-PCR）方法对RPR阳性标本进行检测。     

1152例梅毒孕妇及所产新生儿的梅毒血清学试验结果分析

目的探讨梅毒孕妇及所产新生儿的梅毒血清学试验在先天梅毒早期诊断的价值。方法收集2013—2017年海南省预防与控制梅毒母婴传播项目中的1 152例梅毒孕妇及其所产的1 152例新生儿标本,进行梅毒甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)和梅毒螺旋体明胶凝聚试验(TPPA)及梅毒螺旋体免疫球蛋白M(IgM)抗体试验(TP-IgM)检测。结果 1 152例孕妇中TRUST和TPPA的阳性率分别为78.82%(908例)和100.00%;1 152例新生儿中TRUST和TPPA的阳性率分别为47.14%(543例)和97.14%(1 119例);新生儿确诊先天梅毒37例(3.21%),TP-IgM阳性有34例,新生儿TRUST滴度大于或等于母亲TRUST滴度的4倍有10例(7例TP-IgM阳性,3例TP-IgM阴性)。结论 TP-IgM检测为先天梅毒诊断的必要的梅毒血清学检查,再联合TRUST和TPPA检测可提高诊断先天梅毒的准确率,新生儿梅毒TRUST滴度≥1∶64,可作为先天梅毒诊断的重要依据。     

6种非梅毒螺旋体抗原血清学试验试剂对梅毒患者随访的影响

目的探讨几种非梅毒螺旋体抗原血清学试验试剂对梅毒患者随访的影响。方法按照非梅毒螺旋体抗原血清学定量试验稀释样本的原则,充分稀释11份梅毒患者血清,每份连续稀释成12个浓度,用1种梅毒快速血浆反应素环状卡片试验(RPR)和5种梅毒甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)试剂检测稀释好的血清,观察不同试剂对样本的反应性。结果 6种试剂对同一份样本的检测能力不尽相同,RPR试剂与5种TRUST试剂的检测结果基本不相同,两者无可比性。TRUST试剂之间只有2种试剂的结果相似,其他的差异较大,甚至同一份样本的最高滴度是最低滴度的16倍。对所有样本来说,某些试剂检测的滴度有总体偏低或偏高的趋势。结论不同方法或不同厂家的同一方法对梅毒患者个体的治疗随访有影响,相互间检测结果不能互认,因此临床实验室在梅毒的诊断、治疗和随访中,要注意使用相同的非梅毒螺旋体抗原血清学试验试剂。     

梅毒血清学检测的适宜方法探讨

目的探讨梅毒甲苯胺红不加热血清反应素试验（TRUST）和梅毒螺旋体明胶凝集试验（TPPA）在梅毒检测中的应用价值，建立实验室梅毒检测和报告系统。方法用TRUST作为被检测标本的梅毒筛查试验，对筛查阳性标本进一步作TPPA确认试验。对TRUST阴性的高危人群，作TPPA复检。结果8637份被检血清，TRUST阳性者428例，阳性率为4．96％（428／8637）。对TRUST检出的428例阳性标本，TPPA确证阳性325例，阳性符合率为75．93％（325／428）。共有22例TRUST阴性的高危人群，进行了TPPA复检，结果均为阴性。结论TRUST筛查存在一定的假阳性，可用TRUST进行梅毒筛查，对筛查阳性标本进一步作TPPA确认试验。对TRUST阴性的高危人群，应进一步作TPPA复检，两试验均阴性者，告知其可四周后复查，以减少梅毒的误诊和漏诊。     

三种梅毒螺旋体血清学检测方法应用

目的:对三种梅毒螺旋体血清学试验方法进行总结比较,为临床提供合理的检验方案。方法:用甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)、梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)和酶联免疫吸附试验(TP-ELISA)三种方法对274例标本进行检测,其中梅毒患者101例,对照组(非梅毒患者)173例,并对结果分析。结果:在梅毒患者中,TRUST法检出73例,阳性率72.28%,TP-ELISA法检出98例,阳性率97%,TPPA法检出100例,阳性率99%。TPPA法与TP-ELISA法结果比较,差异无统计学意义(P﹥0.05);TRUST法与TPPA法、TP-ELISA法比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:初诊患者应用TRUST和TPPA联合检验,复诊患者用TRUST方法检测以观察治疗效果;而TP-ELISA和TPPA临床意义相当,两者可选其一作为确证实验。     

螺旋体传染病

斑点金免疫渗滤试验同步检测抗梅毒螺旋体IgM和IgG抗体的研究；钩端螺旋体LAg42膜蛋白基因的克隆及原核表达；甲苯胺红不加热血清试验和梅毒螺旋体抗体明胶颗粒凝集试验在梅毒诊治中的应用；伯氏疏螺旋体与嗜吞噬细胞无浆体感染抑制Th1型细胞因子产生。     

螺旋体传染病

基于重组优势多表位抗原的梅毒间接酶联免疫吸附试验与梅毒螺旋体血凝试验和甲苯胺红不加热血清试验检测梅毒螺旋体抗体的比较研究——张贺秋等(北京中国人民解放军军事医学科学院基础医学研究所100850)；《中国性病艾滋病防治&;gt;，2002，8(5)：266—268[目的：建立操     

梅毒螺旋体重组抗原TmpA的表达及其在梅毒诊断中的应用

目的：用基因工程方法表达梅毒螺旋体的TmpA重组抗原,建立检测梅毒螺旋体抗体酶联免疫试验（EIA）。方法：用聚合酶链反应（PCR）扩增梅毒螺旋体TmpA基因,克隆到原核表达载体pQE-30中表达,用亲和层析柱法纯化该重组抗原,并用其建立检测梅毒螺旋体抗体的EIA。结果：表达的重组抗原相对分子质量构为39000,具有良好的抗原性。用其建立的EIA检测10份阳性参比血清,均为阳性,灵敏度为100%;检测20份阴性参比血清,均为阴性,特异性为100%。检测12份I期梅毒（早期感染）和24份Ⅱ期和晚期梅毒患者血清,阳性率分别为91.67%（11/12）和100%（24/24）。结论：用该重组抗原建立的EIA可检出97.2%（35/36）以上梅毒患者,仅2.8%（1/36）漏检。为进一步提高该试剂的灵敏度,可能需增加梅毒螺旋体的其它重组抗原。     

慢性日本血吸虫病患者唾液中特异性抗体的检测

[目的 ]研究日本血吸虫病患者唾液中抗血吸虫特异性抗体检测的可行性。 [方法 ]应用 EL ISA检测血吸虫病患者及正常人唾液中的抗血吸虫抗体并与血清中的特异性抗体比较。[结果 ]慢性血吸虫病患者唾液 32份 ,阳性 2 9份 (90 .6 % ) ,血清 32份 ,阳性 32份 (10 0 % ) ,经χ2 检验两者间差别无显著性意义 (P>0 .0 5 )。正常人唾液140份 ,阳性 8份 (5 .75 % ) ,正常人血清 15 6份 ,阳性 6份 (3.8% ) ,两者间差别无显著性意义 (P>0 .0 5 )。 [结论 ]检测唾液中的特异性抗体可以作为血吸虫病免疫诊断或筛查的一种无创伤性方法     

梅毒反向筛查和ECDC筛查在恶性肿瘤患者中的应用

<正>梅毒是由苍白密螺旋体(treponema pallidum,TP)主要通过性活动传播,其诊断依靠临床表现及病史,但血清学检测仍是主要的诊断依据。梅毒血清学试验分为两种:非梅毒螺旋体试验(NTT)如快速血浆反应素环状卡片试验(RPR)、梅毒甲苯胺红不加热血清试验(TRUST),梅毒螺旋体试验(TT),如梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)、时间分辨荧光     

400例抗—HBc阳性其他HBV血清学标志物检测结果分析

我们采用酶联免疫吸附试验 (EL ISA)法检测了 40 0例抗- HBc阳性乙肝病毒 (HBV)感染者的其他血清学标志物(HBs Ag、抗 - HBs、HBe Ag、抗 - HBe) ,现对将结果报告如下。资料与方法 :本文男 2 6 0例、女 140例 ,年龄 2 6～ 6 4岁、平均 45岁。均为体检正常 ,经 EL ISA法证实抗 - HBc阳性者。对受检者采集空腹血 ,离心后备用。采用 Model- 45 0型酶标仪及 EL ISA法测定血清 HBs Ag、抗 - HBs、HBe Ag、抗 -HBe。结果 :本文 HBs Ag阳性 2 84例 (占 71% ) ,抗 - HBs阳性5 8例 (占 14.5 % ) ,HBe Ag阳性 116例 (占 2 9% ) ,…     

微波ELISA法对日本血吸虫病流行区不同人群的检测结果

作者前已报道用微波 EL ISA法诊断日本血吸虫病具有快速 EL ISA类同的敏感性和特异性 ,而且具有更为快速的优点 ,全过程仅需 5 min即可显色观察结果 ,可提高血吸虫病检测的工作效率 [1 ]。本文进一步将此法应用于现场 ,结果报告如下。1　材料与方法1.1　试剂盒　微波 EL ISA与快速 EL ISA所用试剂盒 ,均为中国疾病预防控制中心寄生虫病所提供的快速 EL ISA试剂盒。1.2　试验血清分组　 11999年收集江西波阳县有血吸虫疫水接触史患者血清 2 0 3例 ,其中含历史粪孵阳性患者血清 13例 ,历史 IHA阳性 2例 ,晚期血吸虫病患者血清 11…     

水蛭可溶性抗原诊断日本血吸虫病的初步研究

目的　探讨水蛭可溶性抗原 (L SA)用于诊断日本血吸虫病的可能性。　方法　首先用 Western blot对 L SA与日本血吸虫病患者血清的交叉反应性进行分析 ,进而对 L SA- EL ISA用于诊断慢性血吸虫病的效果作出评价。　结果　经 SDS- PAGE及 Western blot技术分析的结果表明 ,L SA的主要蛋白组分区带为 8条 ,其中分子质量为 116～ 118、72、4 5和 31ku蛋白组分可被日本血吸虫病患者血清所识别 ;用 L SA- EL ISA检测慢性血吸虫患者血清 85份 ,阳性检出率为90 .5 9% (77/ 85 )检测正常人血清 87份和其它 3种寄生虫病患者血清 5 6份 ,假阳性率分别为 4 .6 0 % (4/ 87)和 1.79% (1/5 6 )。与 SEA- EL ISA法比较 ,两者敏感性和特异性差异无显著性 (P>0 .0 5 )。　结论　日本血吸虫病患者血清中存在较多的抗 L SA抗体 ;用 L SA检测慢性血吸虫病显示出较好的敏感性和特异性 ,因而水蛭是一种值得进一步研究的血吸虫异源抗原