丁酸钠抑制人喉癌裸鼠皮下移植瘤的实验研究

目的 研究丁酸钠对人喉癌裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用,探讨其作用机制.方法 将人喉癌细胞株Hep-2细胞接种于12只裸鼠皮下,建立喉癌移植瘤模型.分为实验组和对照组,每组6只,分别给予丁酸钠和磷酸盐缓冲液(PBS)治疗4周.治疗过程中定期测量肿瘤大小及裸鼠体质量,于治疗结束时取肿瘤组织切片进行HE染色、电镜观察、TUNEL标记及免疫组化S-P法检测Ki-67、survivin蛋白表达情况,取心、肝、肺、脾、肾等组织切片进行药物毒性评估.结果 治疗组肿瘤体积明显小于对照组,肿瘤组织内坏死面积增大,细胞凋亡率显著增高,Ki-67核抗原、survivin蛋白表达水平降低.治疗过程中裸鼠生长良好,无明显毒性反应.治疗结束时,心、肝、肺、脾、肾组织切片光镜下检查未见异常.结论 丁酸钠对人喉癌裸鼠皮下移植瘤有明显的生长抑制作用,其机制可能与抑制survivin表达而诱导细胞凋亡及抑制Ki-67表达有关.治疗剂量的丁酸钠对裸鼠心、肝、肺、脾、肾等组织无毒性.     

重组凋亡素对人卵巢癌裸鼠移植瘤生长抑制作用的影响

目的 观察凋亡素(VP3)基因真核表达质粒对人卵巢癌裸鼠异种移植瘤生长的抑制作用.方法 建立人卵巢癌(COC1)细胞裸鼠异种移植瘤模型.实验裸鼠分为四组:高剂量实验组(pcDNA-VP3质粒DNA,瘤内注射,100μg/只);低剂量实验组(pcDNA-VP3质粒DNA,瘤内注射,50μg/只);空载体对照组[pcDNA3.1(+)质粒DNA,瘤内注射,100μg/只];脂质体对照组(脂质体,瘤内注射,0.2mL/只).每3d测量皮下移植瘤长、宽径,按标准公式V=L×W2X0.52计算移植瘤体积.12天后处死裸鼠,称取瘤重.使用TUNEL法观察凋亡素对皮下移植瘤细胞凋亡程度的影响.结果 pcDNA9·vP3高剂量组和低剂量组卵巢癌裸鼠皮下移植瘤生长明显受抑制.高剂量组和低剂量组肿瘤生长抑制率分别为76%和52%;瘤重抑制率分别为71.9%和49.5%(P<0.05).TUNEL实验结果表明凋亡素在体内以凋亡方式诱导肿瘤细胞死亡.结论 重组凋亡素基因真核表达质粒具有抑制人卵巢癌裸鼠异种移植瘤生长作用.凋亡素在瘤组织中以诱导凋亡方式抑制卵巢癌裸鼠异种移植瘤生长.     

Genistein对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤生长的影响

目的　观察PTK抑制剂Genistein对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤生长的影响。方法　对 3 0例裸鼠建立人卵巢癌皮下移植瘤模型 ,共分为 5组 :对照组 (含 0 0 4%DMSO的生理盐水 ) 0 2mg kg ,Genistein治疗组 0 4mg kgGenistein治疗组 (皮下注射 ) ,Cisplatin( 4mg kg ,静脉推注 )治疗组 ,Genistein与Cisplatin联合治疗组。观察不同药物治疗后第 7、14、2 1、2 8d各组裸鼠皮下移植瘤生长情况及裸鼠体重的变化 ,并进行病理组织学检查。结果　 0 .4mg kgGenistein皮下注射 ,对SKOV3裸鼠移植瘤的生长有明显抑制作用 ,与对照组相比 ,瘤体重量降低 ,肿瘤体积减小 ,坏死面积显著增加 ,但对裸鼠体重无明显影响。应用 0 4mg kgGenistein与 4mg kgCisplatin(静脉推注 )联合处理SKOV3裸鼠移植瘤有增强抑制作用。结论　Genistein具有抑制人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤生长的作用 ;Genistein与化疗药物联合应用可增强抑瘤作用     

人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤模型的建立

目的建立人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤模型。方法将30只裸鼠随机分为两组,实验组15只,对照组15只。培养人卵巢癌细胞系SKOV3细胞,并将浓度调制2×10~7个·mL~(-1),取0.2 mL注射于实验组裸鼠右侧肩胛背部皮下,接种后每日观察两组裸鼠精神、活动、摄食、排便、体质量等情况,是否有肿瘤生长和肿瘤生长速度等。每3 d使用游标卡尺测量肿瘤最长径和最短径,计算肿瘤体积。于接种后第42天将荷瘤裸鼠处死,剥出肿瘤,测量瘤体长径和短径,称取瘤体质量,取肿瘤组织切片后行HE染色,观察肿瘤病理变化。结果细胞注射法可成功建立卵巢癌裸鼠移植瘤模型,瘤体出现时间为3～7 d,成瘤率为93.33%。实验组裸鼠的体质量、精神、活动等情况与对照组无明显差异。共有2例瘤体表面出现破溃。观察结束后,处死裸鼠后完整剥除瘤体,测得肿瘤平均体积为(416.21±134.67)mm~3,肿瘤平均质量为(0.88±0.19)g。剖开瘤体,发现4例可见瘤体中间有坏死液化,取移植瘤组织进行病理检查,肿瘤组织大体表现符合人卵巢癌的特点。结论初步建立了人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤模型,为卵巢癌的进一步研究奠定了基础。     

ILK反义寡核苷酸对人上皮性卵巢癌裸鼠皮下移植瘤的治疗作用

目的 探讨整合素连接激酶(integrin linked kinase,ILK)反义寡核苷酸(antisense oligonucleotide,ASODN)对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤的治疗作用.方法 将人卵巢癌H0-8910细胞株接种于裸鼠皮下,建立人卵巢癌裸鼠模型,并将裸鼠随机分为对照组和治疗组,每次腹腔注射治疗后称量裸鼠体重、肿瘤体积及重量,并计算抑瘤率.同时,分别用脂质体和脂质体-ILK-ASODN转染H0-8910细胞,用WST-1法检测转染后两组细胞体外的增殖情况,用流式细胞术检测细胞凋亡情况.结果 治疗组裸鼠肿瘤体积及重量增长速度受到明显抑制,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.01).转染了ILK-ASODN的治疗组细胞增殖受到显著抑制,凋亡率明显增高,与对照组比较差异均具有极显著意义(P＜0.01).结论 ILK-ASODN在体外能抑制细胞生长、促进细胞凋亡;在体内能明显地抑制肿瘤生长,对人卵巢癌裸鼠移植瘤具有一定的治疗作用.     

丙戊酸对卵巢癌裸鼠移植瘤血管形成的影响

目的探讨丙戊酸(VPA）对卵巢癌裸鼠移植瘤血管形成的影响。方法建立人卵巢癌裸鼠皮下转移瘤模型,将24只裸小鼠随机分为对照组、VPA组、顺铂（DDP）组、VPA+DDP 4组,每组6只。观察并记录各组裸鼠及其皮下移植瘤的生长情况,绘制肿瘤生长曲线、计算肿瘤体积、肿瘤生长抑制率。采用免疫组化SP法检测各组裸鼠皮下移植瘤中CD105 和sFlk-1的表达水平。结果① 治疗组裸鼠移植瘤的体积较对照组明显变小;② 各治疗组肿瘤组织的CD105表达较对照组均明显下降(P＜0.05),sFlk-1表达较对照组均明显增高(P＜0.05)。结论VPA对卵巢癌裸鼠移植瘤有明显抑制作用,其作用机理可能与抑制肿瘤血管形成有关,与DDP联合应用其抑瘤作用增强。     

人卵巢癌3AO裸鼠移植瘤模型的研究

目的 建立符合人上皮性卵巢癌的临床特征,又便于实验观察和分析的人卵巢癌裸鼠(athymic mice)腹腔移植瘤及皮下移植瘤异种移植模型;比较两种模型的成瘤情况并观察其生物学特性.方法 将一定数量的体外培养的人上皮性卵巢癌细胞株3AO分别接种于裸鼠的右后肢皮下和腹腔内,制备人卵巢癌裸鼠皮下及腹腔异种移植瘤模型;并待肿瘤生长至一定程度,切取移植瘤组织,进行病理组织学检查、电镜观察和流式细胞分析.结果 人上皮性卵巢癌裸鼠腹腔移植瘤及皮下移植瘤模型建立的成功率均较高;两者在肿瘤细胞接种数量、肿瘤形成时间、肿瘤形态等方面不同.皮下移植瘤成瘤率93.3%,腹腔移植瘤成瘤率为86.7%.结论 人卵巢癌裸鼠异种移植模型的建立成功率高,并能直接再现肿瘤,可很好地反映肿瘤的生物学行为,便于观察和分析实验结果,为上皮性卵巢癌的实验研究提供了较客观的模型.     

丙戊酸对人卵巢癌裸鼠移植瘤的抑制作用

目的：探讨丙戊酸（valproic acid,VPA）对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用。方法：建立24只人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤模型,随机分成4组,每组6只： (1) 治疗组：包括①VPA组;② 顺铂（diamminedichloroplatinum,DDP）组;③VPA+ DDP组;(2) 对照组。观察各组裸鼠皮下移植瘤生长情况、裸鼠体重的变化,采用流式细胞术（flowcytometry,FCM）检测肿瘤细胞凋亡率、细胞周期时相、裸鼠肝、脑组织细胞的凋亡率和肿瘤细胞中血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）的蛋白含量。结果：治疗组皮下移植瘤抑瘤率分别为40.7%、45.3%、58.0%,差异有统计学意义(P＜0.05);治疗组的凋亡率分别为（27.05±1.63）％、（35.93±3.89）％、（42.59±2.55）％,高于对照组（16.73±2.82）％;肿瘤细胞出现明显的凋亡形态学变化,S期细胞显著减少;各组肝脏和脑组织细胞凋亡率均较低,差异无统计学意义(P＞0.05);治疗组中VEGF蛋白含量明显低于对照组。结论：VPA对卵巢癌皮下移植瘤生长有抑制作用,其作用的实现可能与其诱导肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤血管生成有关。VPA与顺铂联合应用其抑瘤作用增强,而对肝细胞和脑细胞毒性较低。     

canstatin基因治疗对小鼠人卵巢癌移植瘤生长及Caspase-3、Flk-1蛋白表达的影响

目的:探讨canstatin基因治疗对人卵巢癌移植瘤的影响.方法:18只裸鼠皮下接种人卵巢癌H08910PM细胞制备人卵巢癌移植瘤模型,当移植瘤体积达到50 mm3时,随机分3组治疗,分别注射腺病毒介导的canstatin基因(Ad-can)、Ad-GFP和PBS,2次瘤内多点注射,间隔72 h,每次4 × 1010 pfu.治疗期间每周2次用游标卡尺测量皮下移植瘤的长径和短径并计算移植瘤体积;治疗30 d后处死裸鼠,切取肿瘤检测肿瘤组织中Caspase-3、Flk-1蛋白的表达.结果:Ad-can治疗组肿瘤体积小于其余2组(P<0.05).3组肿瘤组织中均有坏死,Ad-can治疗组坏死明显.Ad-can治疗组Caspase-3蛋白表达高于Ad-GFP组和PBS组(P<0.05).Flk-1蛋白的表达低于其他2组(P<0.05).结论:人canstatin基因可能通过诱导肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤的血管生成,从而抑制人卵巢癌细胞的生长.     

脂质体-c-raf-1反义寡核苷酸治疗人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤

目的:探讨c-raf-1反义寡脱氧核苷酸(ASSODN)对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤的治疗作用.方法:将15只裸鼠建立人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤模型,然后随机分成3组予以不同条件处理:对照组(腹腔注射转染液和脂质体),正义治疗组(腹腔注射脂质体-c-raf-1-SODN),反义治疗组(腹腔注射脂质体-c-raf-1-ASODN).治疗期间定期观测裸鼠体重并测量肿瘤体积,计算抑瘤率及肿瘤缩小率.结果:反义治疗组与正义治疗组的抑瘤率分别为68.1%和6.8%,反义治疗组肿瘤缩小率为16.7%,与正义治疗组相比较有明显的差别.各组裸鼠体重变化无明显差别.结论:脂质体-c-raf-1-ASODN对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤有一定的治疗价值,可能成为日后基因治疗的重要方向.     

抗血管内皮生长因子抗体对人浆液性卵巢癌裸鼠移植瘤生长的影响

目的研究抗血管内皮生长因子抗体(抗VEGF抗体)对浆液性卵巢癌生长的抑制作用。方法首次采用人浆液性卵巢癌组织直接接种而建立的裸鼠皮下移植瘤动物模型,观察有中和活性的抗人VEGF121单克隆抗体对肿瘤生长的影响。实验用BALB裸鼠分为两组,每组各6只,治疗组给予抗VEGF 121抗体,100μg/次;对照组给予等体积的磷酸盐缓冲液,均为腹腔内注射,自肿瘤接种后24 h起,每周2次,共9次;肿瘤接种一周起每次给药前测量肿瘤的长径及短径,并计算各时点体积;治疗结束后24 h处死动物,测量肿瘤的重量及计数肿瘤组织中的微血管密度(MVD)。结果①抗体治疗组与对照组裸鼠的体积逐渐出现差异,这种差异随时间的推移逐渐增大,接种第22天差异有显著性(P<0.05),并持续至实验结束。②用药结束后24 h处死裸鼠,治疗组平均瘤重为(0.70±0.11)g,对照组平均瘤重为(1.19±0.18)g,两组相比较有显著性差异(P<0.01)。③对照组肿瘤组织中微血管较密集,MVD值为7.60±1.14,治疗组肿瘤组织中的微血管明显减少,MVD值为4.80±0.83,两组相比较差异有显著性(P<0.05)。结论抗VEGF121单克隆抗体能够有效抑制裸鼠体内浆液性卵巢癌皮下移植肿瘤的血管形成,从而达到抑制肿瘤生长的目的。     

溶血磷脂酸诱导人卵巢上皮癌裸鼠腹腔移植瘤生长研究

目的 观察溶血磷脂酸(LPA)对卵巢上皮性癌裸鼠腹腔移植瘤生长及转移的作用.方法 建立人卵巢上皮性癌腹腔移植瘤模型,16只裸鼠随机分为2组即对照组和LPA处理组,将6×106个未经处理的卵巢上皮癌细胞株SKOV3和用LPA刺激后的SKOV3细胞分别注入2组裸鼠腹腔,待裸鼠自然死亡后,观察移植瘤大小、重量、腹腔转移灶的数目及腹腔脏器转移情况.结果 两组成瘤率均为100%,但LPA组移植瘤生长速度、重量和腹腔转移灶数目均高于对照组(P＜0.01).结论 LPA具有促进卵巢癌细胞在腹腔内增生和浸润转移的作用.     

人参皂甙Rg3对乳腺浸润性导管癌的抗癌作用及其机制

目的　探讨人参皂甙 Rg3 ( Rg3 )抑制裸鼠原位种植人乳腺浸润性导管癌的作用及其机制。方法　采用移植人乳腺浸润性导管癌的雌性裸鼠 15只 ,随机分为 Rg3组、环磷酰胺 ( CTX)组和对照组 ,分别用 Rg3、CTX及对照剂连续灌胃 5 6d,处死后病理标本用光镜及免疫组化检查。结果　 Rg3组瘤重 ( 0 .84± 0 .2 6g)低于对照组( 1.2 0± 0 .2 4g,P=0 .0 5 ) ,CTX组瘤重 ( 0 .75± 0 .2 3 g)明显低于对照组 ( P<0 .0 5 )。免疫组化显示 ,Rg3组的微血管密度 ( 16.68± 8.0 0 )及血管内皮生长因子 ( VEGF)明显低于对照组 ( P<0 .0 5 )。结论　 Rg3抑制人乳腺浸润性导管癌移植瘤生长的机制可能与抑制其新生血管形成有关     

Rb94基因联合放射治疗对荷瘤裸小鼠食管癌细胞生长的抑制作用

目的：探讨人视网膜母细胞瘤Rb94基因联合电离辐射对荷瘤裸小鼠食管癌细胞生长的抑制作用,阐明Rb94基因与放射治疗（放疗）抑制肿瘤细胞生长的协同作用。方法：将食管癌K150细胞接种于BALB/c-nu裸小鼠建立肿瘤模型。实验分为对照组（未进行处理）、Ad-LacZ组（为含LacZ基因但不含Rb94基因的对照腺病毒,分别于0、3和7 d 以Ad-LacZ 感染瘤体）、Ad-Rb94组（分别于0、3和7 d以Ad-Rb94感染瘤体）、照射组（分别于1、4和8 d进行4 Gy γ射线局部照射瘤体）和Ad-Rb94联合照射组（联合组,Ad-Rb94感染后进行4 Gyγ射线局部照射瘤体）。检测各组小鼠食管癌瘤体体积、瘤体质量、肿瘤生长抑制率和肿瘤组织中ABL及JNK的表达水平,并对肿瘤组织进行病理学分析。结果：与对照组比较,Ad-Rb94组、照射组和联合组裸小鼠肿瘤生长速度缓慢,肿瘤生长出现抑制效应;治疗第15天联合组小鼠肿瘤体积明显小于Ad-Rb94组和照射组,与对照组和Ad-LacZ组比较差异有统计学意义（F=26.7,F＝23.8,P<0.01）。治疗结束后联合组小鼠瘤体质量最轻,肿瘤生长抑制率高达81.16%,明显高于Ad-Rb94组（57.84%）和照射组（38.20%）（P<0.01）。与对照组比较,联合组小鼠肿瘤组织中ABL和JNK的表达水平明显升高（P<0.01）。与其他组比较,联合组肿瘤细胞有较少的核分裂和较浅的核深染。结论：Rb94基因联合放疗对荷瘤裸小鼠肿瘤的生长抑制具有协同作用。     

Rab25 siRNA对卵巢癌裸鼠移植瘤的抑制作用

目的 通过RNA干涉抑制Rab25在人卵巢上皮性癌的过表达,观察Rab25 siRNA对卵巢癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用.方法 构建针对Rab25的siRNA重组质粒,稳定转染A2780细胞,建立裸鼠移植瘤模型,测量肿瘤体积、绘制肿瘤生长曲线、计算抑瘤率、移植瘤组织病理学观察.结果 成功建立裸小鼠移植瘤模型,观察30-45d后,发现转染了Rab25 siRNA细胞体内成瘤能力显著下降,与正常对照组及转染空载体组相比,抑瘤率为50.78%、50.64%.结论 阻断细胞内Rab25的表达,可诱导细胞凋亡,缓慢癌细胞生长速度.基于Rab25基因的RNAi技术靶向诱导癌细胞凋亡可望作为卵巢癌治疗的重要辅助手段.     

血管生成抑制剂联合分化诱导剂治疗结肠癌肝脏转移的实验研究

目的:实验通过建立人LOVO细胞结肠癌裸鼠肝脏转移瘤模型,研究血管生成抑制剂(TNP-470)联合分化诱导剂(RA)抗结肠癌转移的效应,二者是否具有协同效果.方法:建立人LOVO细胞结肠癌裸鼠肝脏转移瘤模型,随机分为4组,模型建立后分组治疗,至治疗结束时处死裸鼠,检测肝脏转移率和肝转移结节数及肝脏转移瘤组织中血管内皮生...     

超声定位辐照载药微泡抑制卵巢癌裸鼠皮下移植瘤增殖的实验研究

目的:探讨超声定位辐照载紫杉醇脂质微泡(Paclitaxel-carrying liposome microbubbles,PLM)的方法对裸鼠人卵巢癌移植瘤的抑瘤效应及可能的机制.方法:建立20只人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤模型,随机分成PLM辐照组、紫杉醇药物组、PLM组及生理盐水对照组,每组5只,分别给予不同处理,末次处理24 h后处死裸鼠,测量重量体积,计算抑瘤率;用免疫组织化学sP法检测肿瘤组织中细胞核相关抗原Ki-67并进行半定量分析;在透射电镜下对肿瘤细胞进行形态学观察.结果:与对照组比较,PLM辐照组及紫杉醇药物组对移植瘤的生长有明显的抑制作用,以PLM辐照组的抑瘤率最高(P<0.01);PLM辐照组及紫杉醇药物组肿瘤组织中Ki-67的阳性表达量均下降,前者下降更为明显(P<0.01).透射电镜下观察到PLM辐照组肿瘤凋亡细胞出现较多.结论:与紫杉醇药物组相比,超声破坏PLM的方法对裸鼠SKOV3卵巢癌皮下移植瘤具有较强的体内抑瘤效应,可能是通过诱导细胞的凋亡,抑制肿瘤细胞的增殖活性而延缓肿瘤生长的.     

腺病毒介导的突变型p27对裸鼠大肠癌的抑制作用

目的:以腺病毒为载体,研究外源性突变型p27(p27mt)基因对大肠癌的体内抑制作用.方法:应用细胞移植法把人大肠癌SW480细胞接种于BALB/c裸鼠皮下,构建大肠癌裸鼠模型,将已成功构建的腺病毒介导的突变型p27(Ad-p27mt)及Lac-Z采用瘤体内直接注射法注射到瘤体内,与对照组比较,绘制肿瘤生长曲线,计算肿瘤生长抑制率,并进行细胞凋亡的相关检测.结果:Ad-p27mt基因治疗组肿瘤生长明显受到抑制,有明显的促凋亡作用,与Lac-Z、对照组比较,有显著性差异(P＜0.01).结论:Ad-p27mt基因对大肠癌裸鼠模型的体内肿瘤有明显的抑制作用.