肿瘤坏死因子样弱凋亡诱导因子在骨关节炎软骨细胞的表达及诱导产生MMP-9的研究意义

目的 通过观察肿瘤坏死因子样弱凋亡诱导因子(TWEAK)在骨关节炎(OA)软骨细胞的表达情况,研究TWEAK诱导软骨细胞产生基质金属蛋白酶(MMP-9)的影响,探讨其在OA发病中的作用机制.方法 体外分离培养OA软骨细胞,用RT-PCR和免疫荧光法检测MMP-9的表达;将软骨细胞与不同浓度水平的重组人TWEAK(rhTWEAK)共培育,用ELISA法检测培养细胞上清液MMP-9的水平.结果 RT-PCR及免疫荧光结果显示TWEAK在OA软骨细胞的表达主要定位于细胞质中;当TWEAK终浓度为200 μg/L、500 μg/L时,其诱导软骨细胞产生MMP-9的水平明显高于对照组,具有统计学意义(P<0.05).结论 TWEAK在OA软骨细胞中广泛表达,其通过诱导产生MMP-9引起OA软骨的破坏,从而在OA的发病中起作用.     

可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体在强直性脊柱炎患者血清中的表达及临床意义

目的探讨肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(sTRAIL)在强直性脊柱炎(AS)患者和健康个体血清中的表达及其临床意义。方法应用ELISA法检测60例AS患者和30例健康对照血清sTRAIL的浓度;应用ESR自动化分析仪和特定蛋白分析仪分别测定红细胞沉降率(ESR)和血浆C反应蛋白(CRP);分析HLA-B27阳性和阴性的AS患者血清sTRAIL水平与ESR、CRP的相关性。结果AS患者血清sTRAIL浓度明显高于对照组(P<0.01),且HLA-B27阳性和阴性AS患者均明显高于对照组(P<0.01),但两者比较,差异无统计学意义(P>0.05)。在HLA-B27阳性AS患者中,血清sTRAIL水平与CRP呈明显的相关性而与ESR的相关性并不明显;而HLA-B27阴性AS患者血清sTRAIL与ESR及CRP均无显著相关性。结论血清sTRAIL水平在AS中明显上调,与HLA-B27阳性与否无显著相关性。AS患者血清sTRAIL与ESR无相关性,而与CRP是否具有显著相关性受到HLA-B27阳性与否的影响。总之,血清sTRAIL水平的改变可能与AS的发生和发展密切相关。     

肿瘤坏死因子拮抗剂治疗强直性脊柱炎的最新研究

肿瘤坏死因子拮抗剂用于治疗强直性脊柱炎，近两年来在国外研究得比较多，内阐述了肿瘤坏死因子拮抗剂治疗强直性脊柱炎的机制及最有前途的几个药物(英昔单抗、恩利、沙利度胺、Humira)的临床试验、使用方法、副作用等方面的最新成果。     

肿瘤坏死因子-α拮抗剂治疗对强直性脊柱炎患者骨代谢指标的影响

目的：观察强直性脊柱炎（AS）患者骨代谢指标变化及接受TNF-α拮抗剂治疗对AS患者骨代谢指标的影响。方法测定25名AS高活动（ASDAS＞2.1）强直性脊柱炎患者炎症指标、血清骨钙素N端中分子（N-MID）、β胶原降解产物（？-Crosslaps）及总I型胶原氨基端前肽（P1NP）水平,计算ASDAS,后经TNF-α拮抗剂治疗12周后复查上述骨代谢指标。并进行分析。结果 AS治疗前组与对照组在年龄、性别方面差异无统计学意义（P＞0.05）。AS治疗前组血清？-Crosslaps、N-MID和P1NP水平明显高于健康对照组。经12周TNF-α治疗前后组间比较,AS治疗后组ASDAS评分、ESR和CRP指标均较AS治疗前组降低,TNF-α拮抗剂治疗后AS组在疾病活动度方面有明显改善;AS组治疗后？-Crosslaps显著降低（P＞0.05）, N-MID和P1NP变化无统计学意义（P＞0.05）。结论 TNF-α拮抗剂治疗不仅可改善AS疾病活动度,同时对AS患者骨吸收骨破坏进行有效的阻止。     

强直性脊柱炎患者外周血单个核细胞中Toll样受体表达及功能的研究

目的 研究强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)中Toll样受体(toll like receptors,TLRs)的表达及功能,并探讨TLRs在AS发病中的作用。方法 通过荧光定量PCR的方法检测21例AS患者及21例健康对照者PBMCs上TLR1～TLR10的表达; 采用ELISA的方法检测AS患者及健康对照者PBMCs中TLRs介导的细胞因子产生水平,并检测患者及健康对照血浆中细胞因子的水平。结果 与对照组相比,AS患者组PBMCs中TLR4的表达水平显著升高,差异具有统计学意义(P=0.004),其他TLRs在两组间的表达差异无统计学意义; AS患者PBMCs中TLR4介导的肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)的产生水平显著增高(P值分别为0.003和0.009); AS患者血浆中TNF-α的表达水平较健康对照组显著升高(P=0.021)。结论 AS患者PBMCs中TLR4的表达及细胞因子产生能力增强,TLR4通路可能在AS发病过程中起重要作用。     

肿瘤坏死因子样微弱凋亡诱导因子对骨关节炎软骨细胞作用实验研究

目的研究肿瘤坏死因子样微弱凋亡诱导因子（TWEAK）对体外培养骨关节炎（OA）软骨细胞的作用,同时探讨炎性细胞因子白细胞介素-1β（IL-1β）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）与TWEAK之间的关系。方法体外培养OA患者原代软骨细胞,分别用TWEAK（75ng/mL）,TWEAK（75ng/mL）和IL-1β（5ng/mL）,TWEAK（75ng/mL）和TNF-α（5ng/mL）作用细胞48h,MTT检测细胞因子对软骨细胞的增殖作用影响;ELISA检测细胞培养上清液中MMP-13、IL-6和Fas的分泌表达。结果 MTT结果表明细胞因子刺激软骨细胞后对细胞增殖无明显影响。TWEAK和IL-1β组诱导MMP-13表达增加（P〈0.05）;TWEAK和IL-1β组,TWEAK和TNF-α组均诱导IL-6表达增加（P〈0.05）。3组Fas分泌表达差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 IL-1β与TWEAK,TNF-α与TWEAK分别诱导OA软骨细胞MMP-13和IL-6表达增加,可能参与关节软骨损伤和OA的病程发展。     

家族性强直性脊柱炎肿瘤坏死因子-α遗传多态性的检测

目的探讨家族性强直性脊柱炎肿瘤坏死因子-α遗传多态性检测的临床意义,为临床研究提供方向。方法以已经确诊有7例强直性脊柱炎患者且拥有122个核心家庭成员的四代大家族为研究对象,采用连接酶检测聚合酶链反应(LDR-PCR)法对上述所有患者进行肿瘤坏死因子α受体基因予以检测,回顾性分析检测结果。结果 AS组与非AS组TNF1基因rs767455位点A和G等位基因频率及分布频率基本相同,差异无统计学意义(P>0.05),与既往关于AS和健康者TNF1基因rs767455位点A和G等位基因频率及分布频率的研究存在差异;AS组与非AS组TNF2基因rsl061622位点G和T等位基因频率及分布频率基本一致,差异无统计学意义(P>0.05)。结论家族性强直性脊柱炎病患其亲属较之于一般人群可能会因遗传高危因素更易并发强直性脊柱炎,需严密关注。     

肝病患者血清肿瘤标记物含量及肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体表达在癌变中的临床意义

目的 探讨血浆透明质酸(HA)、层黏连蛋白(LN)、Ⅲ型胶原(ⅢC)、Ⅳ型胶原(ⅣC)、甲胎蛋白(AFP)和肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)受体-2(DR5)、诱捕受体-1(DcR1)的表达与肝纤维化及肝癌变的关系.方法 用ELISA方法测定正常对照组(A 组)、肝炎组(B 组)及肝硬化并发肝癌组(C 组)的HA、ⅢC、ⅣC 及LN 和AFP 的含量,用WesternBlotting 检测肝癌手术的癌组织、癌旁组织AFP、DR5 和DcR1 的表达.结果 HA、LN、ⅢC、ⅣC 和AFP 的血清含量由高到低:C 组＞B 组＞A 组;(1)ⅢC、ⅣC、LN 的相关性:A、B、C 组ⅢC、ⅣC、LN 表达呈正相关,r 分别为0.623、0.651、0.714 (P 均＜0.05).(2)C 组的各个观察指标均高于B 组和A 组,特别是血清AFP 和HA 含量,在A 组和B 组之间尽管也有统计学的意义(P ＜0.05),但是C 和A、B 组比较,这两者的含量显著性升高(P ＜0.001).(3)Western Blotting 分析显示,癌旁组织的AFP 和DcR1 表达明显低于癌组织(P 均＜0.05);而DR5 在癌旁组织表达则明显高于癌组织(P 均＜0.05).结论 由肝炎到肝硬化、肝癌的过程中HA 的累聚以及LN、ⅢC、ⅣC 和AFP 的表达是一个渐进的基因激活过程;AFP、DR5 和DcR1 在肝癌组织的表达变化预示癌细胞耐受凋亡诱导.     

肿瘤坏死因子拮抗剂治疗强直性脊柱炎的最新研究

肿瘤坏死因子拮抗剂用于治疗强直性脊柱炎,近两年来在国外研究得比较多,文内阐述了肿瘤坏死因子拮抗剂治疗强直性脊柱炎的机制及最有前途的几个药物(英昔单抗、恩利、沙利度胺、Humira)的临床试验、使用方法、副作用等方面的最新成果。     

脓毒症患者肿瘤坏死因子样凋亡微弱诱导剂的表达及意义

目的探讨脓毒症患者肿瘤坏死因子样凋亡微弱诱导剂（tumor necrosis factor-like weak inducer of apoptosis,TWEAK）的表达及其临床意义。方法全身炎症反应综合征（systemic inflammatory response syndrome,SIRS）患者112例,其中脓毒症患者75例为感染性SIRS组,非感染性SIRS患者37例为非感染性SIRS组。感染性SIRS组又分为脓毒症组22例、严重脓毒症组32例和脓毒性休克组21例,检测各组血清TWEAK、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）、白细胞介素-6（interleukin-6,IL-6）及C反应蛋白（C-reactive protein,CRP）水平。结果感染性SIRS组血清TWEAK与TNF-α水平明显高于非感染性SIRS组（P〈0.05）,IL-6、CRP水平与非感染性SIRS组比较差异无统计学意义（P〉0.05）;4组血清TWEAK、TNF-α水平两两比较差异有统计学意义（P〈0.05）,且随脓毒症程度加重,血清TWEAK、TNF-α水平逐渐升高;4组血清CRP、IL-6水平两两比较差异均无统计学意义（P〉0.05）;血清TWEAK水平在细菌、真菌及混合细菌真菌感染中差异无统计学意义（P〉0.05）。结论血清TWEAK水平与感染病原菌无关,脓毒症患者TWEAK含量明显升高,可作为脓毒症患者的重要检测指标。     

Th1/Th2细胞因子在强直性脊柱炎中的表达及其意义

目的 探讨Th1/Th2细胞因子网络在强直性脊柱炎(As)中的变化及其意义.方法 采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定AS患者血清和关节液Th1/Th2型细胞因子TNF-α、IL-17、IL-10和IL-4的水平,并与正常对照组比较.结果 AS患者血清TNF-α、IL-17和IL-10水平均显著高于正常对照组,IL-4的水平显著低于正常对照组;AS患者关节液TNF-α、IL-17和IL-4的水平显著高于血清水平.结论 AS患者血清Th1/Th2型细胞因子表达存在异常,为Th1优势型.     

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体在大肠癌中的表达及意义

目的探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)在大肠癌组织中的表达情况及其与临床病理的关系。方法采用免疫组化SP法和流式细胞分析方法对41例大肠癌组织和9例癌旁正常组织TRAIL的表达情况进行检测并比较。结果TRAIL蛋白免疫组化染色定位于细胞膜和细胞浆,癌组织中阳性表达率为24.4%,明显低于正常组织的66.7%(P<0.05);流式细胞分析该蛋白表达量,癌组织平均荧光指数为0.92±0.09,亦明显低于正常组织的1.05±0.12(P<0.05)。癌组织中,TRAIL蛋白表达随着分化程度的降低呈逐步下降趋势(P<0.05);淋巴结转移与否的表达无统计学差异。结论大肠癌组织中TRAIL表达下降,并与组织分化程度有关。     

青藤碱对体外人外周血单个核细胞肿瘤坏死因子α表达的影响

目的观察青藤碱对体外培养人外周血单个核细胞TNF-α表达的影响。方法将分离的正常人外周血单个核细胞分成5组,分别给予0.9%氯化钠注射液、高剂量青藤碱、中剂量青藤碱、低剂量青藤碱和地塞米松;孵育48 h后,提取细胞培养液上清液,用放免法检测肿瘤坏死因子α的含量,用半定量RT-PCR法检测外周血单个核细胞中TNF-αmRNA的表达。结果高剂量青藤碱组和地塞米松组细胞培养液的上清液TNF-α含量明显低于0.9%氯化钠注射液组(P<0.05),高剂量青藤碱组的TNF-α的含量水平明显低于中、小剂量青藤碱组(P<0.05),且其外周血单个核细胞TNF-α的mRNA表达水平较0.9%氯化钠注射液组有显著下降(P<0.05)。结论抑制人外周血单个核细胞表达TNF-α可能是青藤碱治疗强直性脊柱炎的机制之一。     

Toll样受体4在强直性脊柱炎患者外周血白细胞中的表达及临床意义初探

目的：探讨Toll样受体4（Toll-likereceptor 4,TLR4）在不同人群外周血白细胞的差异表达及其在强直性脊柱炎（ankylosing spondylitis,As）中的意义。方法：应用流式细胞术检测60例AS患者及40例健康对照外周血淋巴细胞、单核细胞和中性粒细胞TLR4的表达。结果：TLR4在外周血淋巴细胞、单核细胞和中性粒细胞均有表达,以单核细胞表达为主;HLA-B27阳性和阴性AS患者外周血3种细胞TLR4的阳性表达率均明显高于对照组（P〈0．001）,但两者之间并无显著差异。结论：TLR4主要表达于外周血单核细胞,但AS患者外周血3种细胞表达均上调,这种上调与HLA-B27阳性与否无关,提示TLR4信号通路的异常与AS的发病相关。     

强直性脊柱炎伴乙型肝炎病毒携带患者使用肿瘤坏死因子拮抗剂的肝脏安全性研究

目的：探讨AS伴HBV携带患者接受TNF拮抗剂治疗的肝脏安全性问题。方法：回顾性分析曾在中山大学附属第三医院接受TNF拮抗剂治疗的AS伴HBV携带患者随访期间的临床资料、HBVDNA水平和肝酶学变化情况。结果：共有10例患者分别使用依那西普或英夫利昔单抗治疗,其中停药3例。5例患者曾出现HBVDNA水平升高,其中停药2例。5例患者曾出现不同程度肝酶学异常,其中停药3例。4例患者同时出现肝酶学异常和HBVDNA水平升高,其中停药2例。随访结束时所有患者HBVDNA水平、肝酶学均处于正常范围,未出现严重肝损害或死亡病例。结论：AS合并HBV携带患者应用TNF拮抗剂安全、有效,但需密切监测肝功能和HBVDNA水平。     

强直性脊柱炎患者Toll样受体4表达和sTRAIL、TNF-α、IL-12水平的研究

目的探讨Toll样受体（toll-like receptor,TLR）4、可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（soluble TNF-related apoptosis-inducing ligand,sTRAIL）、白介素（interleukin,IL）-12、肿瘤坏死因子（tumornecrosis factor,TNF）-α在强直性脊柱炎（ankylosing spondylitis,AS）发病中的作用。方法采用ELISA双抗体夹心法检测110例AS患者和60例正常对照的血清IL-12、TNF-α及sTRAIL水平,并采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法检测两组对象外周血单个核细胞TLR4基因水平,同时采用两点终点法测定C反应蛋白（C-reactive protein,CRP）、Wintnobe法检测红细胞沉降率（erythrocyte sedimentation rate,ESR）,分析各指标与AS的关联。结果 AS患者TLR4 mRNA表达、血清sTRAIL含量均明显高于正常对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）。但TNF-α、IL-12与AS发病的相关性无统计学意义（P〉0.05）。AS患者组中,血清sTRAIL与CRP（r=0.445,P〈0.05）、TNF-α与ESR（r=0.622,P〈0.01）均呈正相关。结论 TLR4通路异常及sTRAIL水平增高可能在AS的发病及炎症反应中发挥一定的作用。     

血清可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体检测的临床意义

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumor necrosis factorrelated apoptosis-inducing ligand,TRAIL)是TNF超家族成员之一,其最早由Wiley等[1]于1995年从人心肌c DNA文库中克隆并命名。TRAIL具有膜结合型和可溶型(s TRAIL)2种形式,在金属蛋白酶作用下,可被水解形成s TRAIL,s TRAIL保留了死亡受体结合域及功能域,与膜型TRAIL具有相同的生物学活性。目前大量研究表明,在自身免疫性疾病、肝病、     

强直性脊柱炎中血清高迁移率族蛋白 B1和肿瘤坏死因子α的表达与疾病相关性的研究

目的：探讨强直性脊柱炎（AS）患者血清高迁移率族蛋白 B1（HMGB1）和肿瘤坏死因子α（TNFα）的表达及其与疾病活动的相关性,以寻找治疗 AS 新靶点。方法本研究纳入50名 AS 患者,其中30例为初诊未治疗活动期患者,20例为治疗三个月稳定期患者。从同地区选取性别、年龄和种族与疾病组配对的30名正常志愿者作为健康对照。通过 ELISA 方法测定不同组别的血清 HMGB1与 TNFα的表达,检测治疗前后与对照组血清 HMGB1与 TNFα的表达水平,比较分析 AS 患者 HMGB1与 TNFα变化以及其与炎性指标、AS 躯体功能指数 BASFI 和 AS 活动性指数 BASDAI 之间的相关性。结果AS 患者血清中 HMGB1和 TNFα水平明显高于正常组,稳定期较活动期患者二者水平明显下降,但仍高于健康对照组;AS 患者血清中 HMGB1和 TNF-α水平均与血沉、超敏 C 反应蛋白（hsCRP）、BASFI、BASDAI 呈正相关;AS 患者血清中 HMGB1和 TNFα水平呈明显的正相关。结论AS 中 HMGB1与 TNFα的表达升高,与疾病活动性正相关,且两种因子有较强的正相关性,HMGB1在 AS 的发病中可能扮演了重要角色。     

肿瘤坏死因子α基因多态性对强直性脊柱炎发病易感性和临床病变程度的影响

背景肿瘤坏死因子α基因多态性与强直性脊柱炎发生与发展的关系是近年强直性脊柱炎遗传学研究的热点.目的探讨肿瘤坏死因子α基因启动子-238和-308位点多态性对强直性脊柱炎发病易感性和病变程度的影响.设计病例-对照观察.单位第二军医大学长海医院风湿免疫科.对象随机选择1999-01/2003-12在第二军医大学长海医院风湿免疫科就诊的强直性脊柱炎患者108例,各对象间均无血缘关系.男女比为5.31;年龄13～71(30±12)岁,根据骶髂关节破坏程度X射线片评估为Ⅰ～Ⅳ级.另从解放军上海血站(长海医院)随机选取100名健康献血者作为对照,年龄19～56(33±9)岁,男女比为4.91,参与者均知情同意.方法每例参与者取外周血,加乙二胺四乙酸A抗凝后进行肿瘤坏死因子-α基因启动子的聚合酶链反应扩增和纯化;对聚合酶链反应产物测序,并用Chromas 1.62软件展示分析DNA测序结果.②以X射线骶髂关节片分级和肿瘤坏死因子α-308位点(G/C)和(G/A)的对应值评估其对疾病程度的影响.主要观察指标以DNA直接测序法对-238和-308位点进行基因分型,并分析基因类型与疾病临床表现之间的关系.结果①肿瘤坏死因子α-238G/G基因型和-238G/A基因型强直性脊柱炎组有106例(98.1%)和2例(1.9%),正常对照组有95例(95.0%)和5例(5.0%),两组间比较无显著性差异.②肿瘤坏死因子α-308.1.1(G/G)基因型和-308.1.2(G/A)基因型强直性脊柱炎组有89例(82.4%)和19例(17.6%),正常对照组中有85例(85.0%)和14例(14.0%).两组比较亦无显著性差异.③根据骶髂关节X射线分级判定疾病严重程度与肿瘤坏死因子α-308位点G/G和G/A基因型之间的关系强直性脊柱炎患者X射线片Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级和Ⅳ级时,(G/G)型为3/35/40/11例,(G/A)型为1/12/6/0例.两组差异比较意义显著(x2GMH=4 77,P＜0.05).结论在观察对象中未发现肿瘤坏死因子α基因启动子-238和-308位点多态性与强直性脊柱炎发病易感性相关,但根据骶髂关节损害程度X射线分级说明肿瘤坏死因子α基因启动子-308位点的多态性对强直性脊柱炎的严重程度有影响.