CAIX／MN／G250mRNA在肾癌根治术前后表达的检测

目的探讨肾癌相关蛋白CAIX／MN／G250mRNA在肾细胞癌（renal cell carcinoma,RCC）手术前后的表达水平及临床意义。方法应用RT—PCR技术检测57例RCC患者癌组织及术前外周血中CAIX／MN／G250mRNA的表达情况,并选择15例癌旁肾组织、15例正常肾组织及40例健康人外周血作对照,对术前外周血CAIX／MN／G250mRNA阳性RCC患者术后随访4周,并对其外周血CAIX／MN／G250mRNA水平进行半定量检测。结果57例RCC患者,其CAIX／MN／G250mRNA阳性率在外周血中为59．6％（34／57）,癌组织中为78．9％（45／57）,显著高于对照组（P〈0．01）。在肾透明细胞癌患者的外周血及癌组织中,CAIX／MN／G250mRNA的阳性率分别为76．2％（32／42）和95．2％（40／42）,均显著高于相应对照组（P〈0．01）。RCC患者外周血及癌组织中CAIX／MN／G250mRNA阳性率均随临床分期的增加而增加（P〈0．01）。34例外周血阳性患者CAIX／MN／G250mRNA水平术前2h、术后7、14、21和28d分别为0．54±0．13、0．56±0．15、0．34±0．13、0．29±0．18和0．22±0．11。RCC患者外周血CAIX／MN／G250mRNA水平在肾癌根治术后随时间的推移呈下降趋势（P均〈0．05）。结论使用RT—PCR技术检测CAIX／MN／G250mRNA对肾癌尤其是透明细胞癌有较好的特异性和敏感性。外周血CAIX／MN／G250mRNA检测可作为肾癌微转移的检测指标用于RCC的诊断、疗效评价及预后判断。     

肾癌患者外周血中Pax—2 mRNA检测对控制微转移的意义

目的 由于Pax-2对肾细胞癌具有较高特异性，可以作为肾细胞癌的一种肿瘤标志物，因此探讨Pax-2在肾细胞癌患者外周血中的表达及其对微转移的意义。方法 用RT-PCR法检测25例患者外周血中的Pax-2 mRNA表达，以10例其他肿瘤患者和5例健康人为阴性对照，以β-actin为内对照。结果 19例患者外周血中有Pax-2 mRNA的表达（阳性率为76%），其他肿瘤和正常人中有1例表达Pax-2 mRNA（阳性率为6.7%），差异有显著性（x^2=18.027,P&;lt;0.01）。Pax-2 mRNA的表达与肿瘤分类、临床分期无相关性（x^2=3.206,3.181,P&;gt;0.05）。结论 外周血中Pax-2 mRNA的检测可以较敏感地检测到血液中肾癌细胞，有助于早期诊断肾细胞癌及其微转移，从而改善患者的预后，提高生活质量。     

尾加压素Ⅱ在肾癌患者血液和孵育组织中的表达

目的测定肾癌患者和正常对照人群血液和孵育组织中尾加压素Ⅱ(Urotensin Ⅱ,UⅡ)的表达量,以期探讨UⅡ表达在肾透明细胞癌发生中的临床意义。方法对20例肾透明细胞癌患者及20例对照人群通过放免方法检测血液和孵育组织UII的表达。结果肾癌患者和正常对照人群血液和孵育组织中均有UⅡ表达。放免结果显示肾透明细胞癌组患者血浆UII水平(50.08±4.77 pg/ml)与正常对照组血浆UⅡ(45.55±6.05 pg/ml)相比差异无统计学意义(P>0.05)。肾透明细胞癌组织孵育后UII水平(30.83±8.51 pg/mg pro)明显高于正常肾组织(16.09±3.13 pg/mgpro)(P<0.01)。结论肾透明细胞癌组织可分泌UⅡ,且较正常肾组织高,提示UⅡ可能与肾透明细胞癌的发生、发展有关,UⅡ可能通过自分泌或旁分泌的方式发挥作用。     

精囊蛋白SG1在肾透明细胞癌中的表达和预后意义

目的探讨精囊蛋白SG1在肾透明细胞癌患者癌旁组织和癌组织中的表达差异,结合临床指标,研究其临床意义。方法以qRT-PCR检测24例明确诊断为肾透明细胞癌患者的癌组织和癌旁组织中的SG1表达水平,以免疫组化研究53例肾透明细胞癌标本中的SG1蛋白表达水平,并进一步研究其临床意义。结果 qRT-PCR显示癌组织中的SG1水平明显低于癌旁组织的(P<0.01)。53例癌组织中,抗SG1免疫组化染色30例阳性(57%),明显低于对应癌旁组织的全部阳性(100%)。SG1表达量和肾透明细胞癌临床分期呈负相关(pT1² vs.pT32 vs.pT3⁴,P<0.000 1),且SG1表达阴性的患者复发概率升高(P<0.01)。结论 SG1在肾透明细胞癌中为低表达,SG1可预测肾透明细胞癌的进展和预后。     

TSP-1在肾透明细胞癌与外周血中的表达及临床意义

目的 检测并分析凝血酶敏感蛋白-1(thrombospondin-1,TSP-1)在肾透明细胞癌患者肾癌、癌旁组织、正常肾组织及外周血中的表达及临床意义.方法 收集47例肾透明细胞癌患者的标本包括:47例肾癌组织、41例癌旁组织、38例正常肾组织、35例患者外周血标本,制备组织抽提液及外周血清.运用ELISA法检测三种组织及血清中TSP-1的表达,并结合临床资料分析其临床意义.结果 TSP-1在肾癌组织、癌旁组织、正常肾组织三者间的表达水平分别为36.44±4.80ng/mL、42.55±4.12ng/mL、46.55±1.55ng/mL,依次递增,三种组织间的表达水平,两两比较均有统计学差异(P均＜0.01).TSP-1在肾癌组织中的表达,随着肾癌TNM分期与Fuhrman分级的提高而均降低,且都呈负相关(r=-0.84,P＜0.01;r=-0.70,P＜0.01).结论 TSP-1在肾透明细胞癌组织中低表达,可能在抑制肿瘤血管形成过程中起重要作用;TSP-1在肾透明细胞癌组织中的表达与肾癌的TNM分期和Fuhrman分级关系密切,可作为评判肾透明细胞癌发展及恶性程度的指标.     

DC-CIK联合化疗对晚期肾癌患者外周血中微转移表达的影响

目的:检测转移性肾细胞癌(mRCC)患者DC-CIK联合化疗前后外周血中G250 mRNA表达的变化,探讨其与生物化学治疗疗效的相关性.方法:31例mRCC患者首先经实时定量逆转录-聚合酶链反应(real-time quantitative RT-PCR,qRT-PCR)检测外周血G250 mRNA为阳性表达,予2周期的DC+CIK联合化疗后,再次检测外周血中G250 mRNA阳性表达情况,并评价DC-CIK联合化疗对肿瘤的疗效.结果:生物化学治疗后31例G250 mRNA阳性的患者外周血中18例(58.1％)表达下降,5例(16.1％)无明显变化,8例(25.8％)表达水平呈上升,与化疗前相比差异有统计学意义(P＜0.01);治疗后,11例部分缓解(PR)(35.5％),9例稳定(SD)(29.0％)、11例进展(PD) (35.5％);mRCC患者外周血中G250 mRNA表达变化与生物化疗疗效显著相关(r=0.498).结论:检测mRCC患者外周血中G250 mRNA变化可用于评价生物化疗的疗效.     

肾癌患者外周血中Pax-2 mRNA检测对控制微转移的意义

目的由于 Pax-2对肾细胞癌具有较高特异性,可以作为肾细胞癌的一种肿瘤标志物,因此探讨 Pax-2在肾细胞癌患者外周血中的表达及其对微转移的意义. 方法用 RT-PCR法检测 25例患者外周血中的 Pax-2 mRNA表达,以 10例其他肿瘤患者和 5例健康人为阴性对照,以β-actin为内对照. 结果 19例患者外周血中有 Pax-2 mRNA的表达(阳性率为 76%),其他肿瘤和正常人中有 1例表达 Pax-2 mRNA(阳性率为 6.7%),差异有显著性(χ 2=18.027,P< 0.01). Pax-2 mRNA的表达与肿瘤分类、临床分期无相关性(χ 2=3.206,3.181,P >0.05). 结论外周血中 Pax-2 mRNA的检测可以较敏感地检测到血液中肾癌细胞 ,有助于早期诊断肾细胞癌及其微转移,从而改善患者的预后,提高生活质量.     

Ang-2和VEGF在肾透明细胞癌中的表达及与肿瘤血管生成的关系

【目的】探讨Ang-2、VFGF及CD34在肾透明细胞癌中的表达及与肾透明细胞癌血管形成的关系。【方法】应用免疫组化S-P法,分别检测80例肾透明细胞癌组织及10例癌旁正常肾组织中Ang-2,VFGF及CD34的表达。【结果】肾透明细胞癌组织中Ang-2、VFGF阳性表达率分别为61.25%(49/80)、73.75%(59/80),均明显高于癌旁肾组织(P<0.01)。【结论】Ang-2对肿瘤血管生成的影响呈VFGF依赖性,Ang-2及VFGF在肾透明细胞癌血管生成中起协同促进作用。     

G250、Ki-67和Bax在肾细胞癌组织中的表达与术后生存率的关系

目的检测G250/MN/CA（简称G250）、Ki-67和Bax在肾细胞癌及癌旁组织中的表达,探讨G250在肿瘤发展过程中的作用,以及G250、Ki-67和Bax表达对肾细胞癌患者术后生存率的影响。方法采用免疫组化SP法检测54例肾癌组织和18例癌旁组织中G250、Ki-67和Bax的表达。结果G250、Ki-67和Bax免疫染色位于肾癌细胞的细胞膜、细胞核和细胞质,三者在肾细胞癌与癌旁组织中的阳性表达差异均有统计学意义;Ki-67和Bax在肾细胞癌不同病理分级和临床分期中的阳性表达差异有统计学意义,而G250的阳性表达差异无统计学意义。随访的47例患者中,G250阳性组患者术后远期无瘤生存率低于G250阴性组,但二者间的差异无统计学意义;进一步研究表明G250阳性高表达的患者术后无瘤生存率明显高于低表达者,经Log-rank检验差异有统计学意义。Ki-67阳性组患者术后远期无瘤生存率低于Ki-67阴性组,二者间的差异无统计学意义。Bax阳性组患者术后远期无瘤生存率高于Bax阴性组,二者间的差异有统计学意义。结论G250作为一种新的肾细胞癌特异性标志物,在肾细胞癌尤其是肾透明细胞癌的诊断、筛选方面具有良好的前景,并可能影响患者的术后无瘤生存率,但其表达与肾细胞癌临床分期及病理分级无明显相关;肾细胞癌中Ki-67和Bax的表达与肾细胞癌临床分期及病理分级有明显相关性,后者的表达同时也会影响患者术后的无瘤生存率。联合检测肾细胞癌组织中G250、Ki-67和Bax的表达有利于早期诊断肾细胞癌,并有利于判断患者的预后情况,对临床工作有指导意义。     

肾透明细胞癌组织中miRNA-185水平的变化及其意义

目的探讨肾透明细胞癌组织中微小RNA-185（miRNA-185）水平的变化及其意义。方法提取22例手术患者肾癌组织和癌旁正常组织中的miRNAs,用RT-PCR的方法初步检测miRNA-185在肾癌组织和癌旁正常组织中的表达情况。采用Real-time PCR的方法定量分析miRNA-185在肾癌组织及癌旁正常组织中的表达情况。结果电泳结果显示,miRNA-185和U6 RNA均呈单一条带,其所处的位置及其在正常组织和癌组织中的表达情况符合前期的预计。Real-time PCR结果显示,miRNA-185在肾癌组组织中呈高表达,较癌旁组组织平均升高5.14倍。22例标本中有17例（77%）肾癌组组织中miRNA-185阳性表达率为77.3%（17/22）,明显高于癌旁组的22.7%（5/22）（P〈0.05）。G1期的4例肾癌标本均较相应的癌旁正常组织呈现低表达,高表达的则离散分布在G2和G3期。相关性分析结果显示,miRNA-185在肾透明细胞癌组织中的相对表达量与肾癌病理学分期呈正相关（r=0.58,P〈0.05）。结论 miRNA-185在肾癌组织中呈显著高表达,提示其与肾透明细胞癌的发生与演进有关,有望成为指导肾透明细胞癌诊断、治疗、预后的新靶点。     

肝素酶和低氧诱导因子-2α基因在肾细胞癌中的表达及意义

目的探讨肝素酶(Hpa)和低氧诱导因子(HIF-2α)基因在肾细胞癌组织中的表达及临床意义。方法免疫组织化学法检测66例不同分型、分级、分期肾癌标本及35例正常肾组织中Hpa和HIF-2α的表达,分析其表达与肾癌分级分期的关系及二者表达的相关性。结果 66例肾透明细胞癌标本中,Hpa阳性表达28例,阳性率为42.4%;HIF-2α阳性表达43例,阳性率为65.2%。癌旁正常肾组织中Hpa阳性表达2例,HIF-2α阳性表达3例,35例正常肾组织中Hpa、HIF-2α阳性表达较少。与癌旁正常组织比较,差异均有统计学意义(P0.05)。结论 Hpa和HIF-2α表达与肾细胞癌分期分级关系密切,共同参与了肾癌的发生发展。     

miR-452在肾透明细胞癌中的异常表达研究

目的检测miR-452在肾透明细胞癌组织中的表达差异,探讨miR-452在肾癌发生过程中的作用。方法提取20例肾透明细胞癌及其相应癌旁组织的总RNAs,通过逆转录(RT)方法获得cDNA后,采用实时定量PCR(RT-qPCR)技术检测组织中miR-452的表达差异,并分析其与肾癌患者临床病理特征的关系。结果与相应的癌旁组织相比,miR-452在肾透明细胞癌组织中显著高表达,癌组织较癌旁组织升高约4.69倍,但其异常表达与肾癌患者临床病理特征并无显著相关性。结论 miR-452在肾透明细胞癌组织中明显高表达,其可能作为重要的致癌基因参与了肾癌的发生与发展过程,可能成为潜在的肾癌标志物,为肾癌的早期诊断及治疗提供新靶点。     

乳腺癌患者外周血中SBEM mRNA的表达及意义

目的 探讨乳腺癌患者外周血SBEM mRNA表达情况及其与临床病理因素的相关性.方法 运用巢式逆转录-聚合酶链反应(nRT-PCR)检测56例乳腺癌患者外周血SBEM mRNA表达情况,以乳腺良性肿瘤患者及健康者各20例作为对照.结果 乳腺癌患者外周血SBEM mRNA表达阳性率为46.4%(26/56),乳腺良性肿瘤患者及健康者表达阳性率均为0.0%(0/20,P<0.05);乳腺癌患者外周血SBEM mRNA表达阳性率与患者有无淋巴结转移及TNM分期相关(P<0.05),但与年龄、肿瘤大小无关(P>0.05).结论 乳腺癌患者外周血SBEM mRNA可作为乳腺癌微转移的判断指标,对乳腺癌临床分期、预后判断和治疗起重要作用.     

抑癌基因P16和Rb在肾癌中的表达和意义

为了探讨肾癌抑癌基因P16、Rb与临床病理及预后的关系,采用免疫组织化学S—P法对53例肾癌中P16、Rb进行检测。结果显示:53例肾癌P16表达的阳性率为37.73%,其阳性表达与肿瘤的病理分级、临床分期及预后均密切相关,差异有显著性(P<0.05),提示P16在抑制肾肿瘤的发生、发展中起重要作用,可以作为判定肾肿瘤恶性程度、自然病程及预后的客观指标。应用Rb基因蛋白抗体检测肾癌(S—P法),其阳性率为67.92%,说明肾癌与Rb基因活化有关。同时还发现RB蛋白表达与肾癌分级、分期及预后均无相关性(P>0.05),提示Rb蛋白表达在肾癌发生中并不起主导作用或只是多种因素之一。两种抑癌基因在肾癌中同时表达的阳性率为15.09%,说明癌基因之间有协同关系(P<0.025)。     

EphA2、E-cadherin在喉鳞状细胞癌中的表达及其相关研究

[目的]探讨EphA2、E-cadherin在喉鳞状细胞癌中的表达和其与喉鳞状细胞癌临床病理特征的关系,以及EphA2、E-cadherin在喉鳞状细胞癌中表达的相关性.[方法]采用链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶链接法(SP法)检测62例喉鳞状细胞癌和60例正常鳞状上皮中EphA2、E-cadherin的表达情况.[结果]①EphA2在喉鳞状细胞癌中表迭的阳性率为82.26%(51/62),在正常鳞状上皮中表达阳性率为36.67%(22/60),EphA2在喉鳞状细胞癌中的表达明显高于正常鳞状上皮(P<0.01);②E-cadherin在喉鳞状细胞癌中表达阳性率为45.16%(28/62),在正常鳞状上皮表达的阳性率为93.33%(56/60),E-cadherin在喉鳞状细胞癌中的表达明显低于正常鳞状上皮(P<0.01);③EphA2、E-cadherin的表达与喉鳞状细胞癌的组织分化程度、颈淋巴结转移和TMN分期有关(P<0.05),而与喉鳞状细胞癌患者的年龄和性别无关(P>0.05);④EphA2、E-cadherin在喉鳞状细胞癌中的表迭呈负相关(r=-0.325,P<0.01).[结论]①EphA2可能在喉鳞状细胞癌的发生发展中起一定的促进作用,EphA2的高表达可能提示了喉鳞状细胞癌的恶性程度;②E-cadherin可能在喉鳞状细胞癌发生发展中起一定的抑制作用,E-cadherin的低表达可能提示了喉鳞状细胞癌的恶性程度.     

GPD1L在肾透明细胞癌中的表达及其临床意义

目的分析甘油磷酸脱氢酶1样抗原(GPD1L)在肾透明细胞癌中的表达及其临床意义。方法选用包含79例肾透明细胞癌及10例肾脏正常组织的组织芯片,使用免疫组织化学染色法(免疫组化)检测GPD1L蛋白的表达情况,并运用癌症基因组图谱(TCGA)数据库收集包含GPD1L mRNA资料的肾透明细胞癌患者相关资料。观察组织芯片中肾脏正常组织与肾透明细胞癌组织GPD1L蛋白的表达部位及表达强度,分析TCGA中肾脏正常组织与肾透明细胞癌组织GPD1L基因的表达水平差异。按基因芯片或TCGA中肾透明细胞癌GPD1L蛋白或mRNA表达情况分为高表达组与低表达组,分析肾透明细胞癌患者GDP1L蛋白或mRNA表达与临床特征及总体生存期(OS)的关系。应用单因素和多因素Cox比例风险回归分析肾透明细胞癌患者OS的影响因素。结果组织芯片中,GPD1L蛋白阳性染色呈棕黄色或褐色,在肾透明癌细胞与肾脏正常组织中主要表达于肾小管上皮的细胞胞质中,GPD1L蛋白在肾透明细胞癌组织表达强度低于其在正常肾脏组织中的表达强度(P <0.001),GPD1L蛋白低表达组中病理分级高和临床分期晚者比例高于高表达组(P均<...     

UCA1在肾癌中的表达分析及临床意义研究

目的检测长链非编码RNA UCA1在肾癌组织、肾癌细胞系中的表达水平,比较配对组织间、细胞系之间的表达差异,分析UCA1表达水平与患者临床特征之间的关系,探究其在肾癌中的临床意义。方法提取肾癌细胞系及46对配对组织中的总RNA,反转录获得c DNA后通过实时荧光定量PCR方法检测UCA1的表达量,使用统计学软件分析UCA1表达的差异性及其表达水平与患者临床特征之间的相关性。结果 UCA1在肾癌组织中表达水平明显高于配对癌旁正常组织(P<0.001),在肾癌细胞(786-O、ACHN、769P、Caki-2)中表达水平高于人胚肾细胞(293T)(P<0.001)。标本中共有38例(82.609%)肾癌标本UCA1表达上调,癌组织中UCA1表达量与患者临床特征无明显相关性(P>0.05)。结论 UCA1在肾癌组织及细胞系中表达明显上调,提示其和肾癌的发生发展有一定关系。     

PD-1和PD-L1在透明细胞肾细胞癌患者外周血和肿瘤组织中的表达及相关性

目的探讨透明细胞肾细胞癌(cc-RCC)患者外周血和肿瘤组织中程序性细胞死亡受体1(PD-1)/程序性细胞死亡配体1(PD-L1)的表达水平及其相关性。方法采用双抗体夹心ABC-ELISA法检测48例cc-RCC患者与10例正常外周血sPD-1和sPD-L1,采用免疫组化检测48例cc-RCC肿瘤组织和10例正常肾组织中PD-1和PDL1的表达。结果 cc-RCC组外周血sPD-L1均数明显高于对照组(4.17 ng/ml对0.86 ng/ml,P0.01),PD-1/PDL1在cc-RCC肿瘤组织的阳性率明显高于对照正常组织的阳性率(39.6%/45.8%对0,P0.01),肿瘤组织中PDL1表达与外周血sPD-L1水平呈正相关性(相关系数r=0.721,P=0.000)。结论 PD-1和PD-L1参与cc-RCC的病理过程,肿瘤组织中PD-L1高表达可能会使外周血sPD-L1水平升高。     

分化抑制因子4、转录因子1在肾透明细胞癌中的表达及关系探讨

目的:研究分化抑制因子4(Id4)及转录因子1(E2F1)在肾透明细胞癌中的表达情况。方法:免疫组化SABC法检测40例肾透明细胞癌(肾癌组)、10例癌旁(癌旁组)和10例正常肾组织(正常组)中Id4、E2F1的表达,探讨二者在肾透明细胞癌发病机制中的作用及相互关系,并分析二者与肿瘤病理分级、临床分期的关系。结果:肾癌组Id4阳性表达率为67.5%,明显高于癌旁组的30.0%和正常组的20.0%(P<0.05);肾癌组E2F1阳性表达率为75.0%,亦明显高于癌旁组的40.0%和正常组的20.0%(P<0.05);二者在肾透明细胞癌中的表达成正相关(r=0.588,P<0.05);但两者阳性表达率与肾透明细胞癌病理分级、临床分期无明显相关(P>0.05)。结论:Id4及E2F1在肾透明细胞癌发病机制中起重要作用,或单独或共同促进肿瘤形成,但对肾癌患者预后评估价值不大;Id4、E2F1二者可为临床肾癌靶向治疗提供一种新的选择,是一种具有吸引力的抗肿瘤治疗靶点。     

肾透明细胞癌和肾嫌色细胞癌差异性表达CD256/CD257及其潜在意义

目的通过检测CD256/CD257在肾癌组织中的表达特点,分析CD256/CD257表达与肾癌临床病理分期、分级以及病理分型的关系。方法依据2002年AJCC肾癌TNM分期标准对90例肾癌组织进行病理分析。采用免疫组化技术(S-P法)和荧光定量PCR技术检测CD256、CD257在组织病理切片的表达情况。与临床病理特征结合进行统计分析。结果研究发现CD256、CD257在肾癌的表达与肾癌分期和分级没有显著相关性,但是CD256在肾透明细胞癌肿瘤组织中有高表达,在肾嫌色细胞癌肿瘤组织中无表达,而在两类肿瘤的癌旁组织中均为弱表达,表达于肿瘤细胞或肾小管上皮细胞的胞质/胞膜;CD257在肾透明细胞癌肿瘤组织中不表达,在肾嫌色细胞癌肿瘤细胞中等至高表达,而在两类肿瘤的癌旁组织中均为中等至高表达,表达于肿瘤细胞或肾小管上皮细胞的胞质/胞膜。CD256/CD257mRNA水平与蛋白水平一致。CD256、CD257在肾透明细胞癌和肾嫌色细胞癌呈现的差异性表达具有统计学意义(P<0.05)。结论 CD256、CD257在肾透明细胞癌和肾嫌色细胞癌的差异性表达可能与不同类型肾细胞癌的发生与分化有着紧密联系,值得深入研究。