肿瘤转移抑制因子CD82/KAI1在假孕小鼠子宫的表达及其对小鼠胚胎着床的影响

目的:研究CD82/KAI1mRNA及蛋白在假孕d1-8小鼠子宫中的表达规律,以及CD82/KAI1抗体对小鼠胚胎体外发育及着床的影响。方法:用RT-PCR及免疫组织化学技术观察CD82/KAI1mRNA及蛋白在假孕小鼠子宫的表达规律。将8-细胞小鼠胚胎培养于含不同浓度CD82/KAI1抗体的培养液中,观察囊胚形成及脱透明带的情况。妊娠d4小鼠宫角注射CD82/KAI1抗体,于妊娠d8观察小鼠胚胎植入数量。结果:①CD82/KAI1mRNA在假孕d1-8小鼠子宫中均有表达,于d4、d5表达最丰富。CD82/KAI1蛋白在假孕d1-8的子宫基质细胞及腺上皮细胞均有表达,假孕d1-4腔上皮细胞无表达,假孕d5子宫腔上皮细胞出现弱阳性表达,从d6开始子宫腔上皮细胞表达逐渐增强。②一定浓度的CD82/KAI1抗体可明显抑制囊胚的形成率(1∶400,P<0.05)和脱带率(1∶800,P<0.05)。③宫角注射一定量的CD82抗体可以显著提高小鼠胚胎的着床数(8.35±0.17vs4.52±0.24,P<0.05)。结论:CD82/KAI1在妊娠小鼠子宫的表达是非胚胎依赖性的。CD82/KAI1在小鼠胚胎发育和着床过程中发挥重要作用。     

肿瘤转移抑制因子CD9/MRP-1基因在小鼠围着床期子宫内膜的动态表达

目的:探讨肿瘤转移抑制基因(CD9)/运动相关蛋白(MRP-1)mRNA和蛋白在胚胎着床过程中的作用。方法:应用RT-PCR和免疫组化技术观察CD9/MRP-1mRNA和蛋白在早孕和假孕小鼠子宫中的表达规律。结果:早孕d1-4小鼠子宫组织均有CD9/MRP-1mRNA表达,且d4表达最多;其蛋白主要表达在d1-4的子宫内膜上皮细胞,且早孕d2-4CD9/MRP-1在子宫基质细胞散在阳性表达。假孕d1-8小鼠子宫组织均有CD9/MRP-1mRNA表达,假孕d5表达开始增加,至d6达到峰值。而CD9/MRP-1蛋白在假孕d1-8子宫内膜腺上皮均有表达,而子宫内膜腔上皮均无表达。假孕d2-5,子宫基质细胞出现散在阳性表达。结论:①CD9/MRP-1在早孕小鼠子宫中呈动态表达,提示它在胚胎精确侵袭子宫内膜的调节中发挥作用。②CD9/MRP-1在妊娠小鼠子宫的表达是非胚胎依赖性的。     

肿瘤转移抑制因子CD82/KAI1对植入前小鼠胚胎体外发育的影响

目的:研究CD82/KAI1mRNA及蛋白质在小鼠胚胎中的表达规律及其对小鼠胚胎体外发育的影响。方法:①应用RT-PCR及免疫荧光技术观察CD82/KAI1mRNA及蛋白质在小鼠不同发育时期胚胎中的表达规律。②在不同CD82/KAI1抗体浓度的培养液中,培养小鼠8-细胞胚胎,观察囊胚发育率、孵化率和胚胎细胞数的变化。结果:①CD82/KAI1mRNA在小鼠不同时期胚胎中均有表达,于8-细胞期及桑葚胚表达较丰富,CD82/KAI1蛋白表达于各期胚胎细胞的胞膜和胞浆,在桑葚胚期CD82蛋白还强表达于胚胎细胞的胞核。②一定浓度的CD82/KAI1抗体可明显抑制胚胎的发育速度(1∶800,P<0.05),降低囊胚的形成率(1∶400,P<0.05)和孵出率(1∶800,P<0.05),减少囊胚细胞数(1∶800,P<0.05)。结论:CD82/KAI1在小鼠胚胎的发育过程中可能发挥重要作用。     

转移抑制基因KAI1/CD82在妇科肿瘤中的研究进展

转移抑制基因KAI1/CD82主要参与调节细胞间的黏附,使肿瘤细胞不易脱离原发灶而抑制转移,同时对肿瘤细胞的迁移和在转移部位的增殖有抑制作用.对KAI1/CD82基因的结构、功能及其在妇科高转移性肿瘤中的变化规律及意义作一综述.KAI1/CD82在妇科高转移性肿瘤中表达下降或完全不表达,可作为一项预测肿瘤转移及肿瘤治疗的靶目标.     

转移抑制基因KAI1／CD82在妇科肿瘤中的研究进展

转移抑制基因KAI1／CD82主要参与调节细胞间的黏附，使肿瘤细胞不易脱离原发灶而抑制转移，同时对肿瘤细胞的迁移和在转移部位的增殖有抑制作用。对KAI1／CD82基因的结构、功能及其在妇科高转移性肿瘤中的变化规律及意义作一综述。KAI1／CD82在妇科高转移性肿瘤中表达下降或完全不表达，可作为一项预测肿瘤转移及肿瘤治疗的靶目标。     

白血病抑制因子在小鼠早孕期子宫内膜表达规律及调节的研究

目的 :研究在小鼠胚泡着床中白血病抑制因子 (LIF)的生物学作用以及卵巢激素对LIF表达的调节。方法 :收集孕 1～ 8d小鼠子宫内膜 ,并以动情间期小鼠子宫内膜作为对照 ;将孕 2～ 4d小鼠随机分为 4组 ,分别灌服戊酸雌二醇 (10 0 0 μg/kg)、安宫黄体酮(10 0 0 μg/kg)、戊酸雌二醇 (10 0 0 μg/kg) +安宫黄体酮 (5 0 0 μg/kg)或植物油 ,孕 4d收集子宫内膜。采用流式细胞仪检测LIF在小鼠早期妊娠子宫内膜中的表达规律以及卵巢激素对LIF的调节作用。结果 :LIF呈时序性表达 ,孕第 1、2天表达量与未孕期相似 ,第 3天开始升高 ,第 4天达高峰 ,此后缓慢下降 ,第 7天降到未孕期水平 ;戊酸雌二醇对小鼠孕早期子宫内膜的LIF表达有上调作用。结论 :LIF可能是小鼠胚泡着床过程中的一个重要细胞因子 ,它在孕早期子宫内膜的表达受卵巢激素的调控     

肿瘤转移抑制基因KAI1在子宫内膜癌原发灶和转移灶组织中的表达及其临床意义

目的:研究子宫内膜癌原发灶和转移灶组织中KAI1蛋白的表达并探讨其临床意义。方法:应用免疫组化S-P法检测KAI1蛋白在子宫内膜癌76例原发肿瘤和44例转移肿瘤中的表达,并分析其与临床病理特征的关系。结果:子宫内膜癌原发灶组织中KAI1的阳性表达随着手术-病理分期(P=0.0089)、组织学分级(P=0.0103)增高及深肌层浸润(P=0.0356)而降低,并与盆腔淋巴结转移(P=0.0091)、宫旁或附件受累(P= 0.0073)呈显著相关,与年龄(P=1.0000)、宫颈是否受累(P=0.0911)以及病理类型(P =0.7927)均无相关性。KAI1在子宫内膜癌的肌层浸润癌灶组织和淋巴结转移癌灶组织中的阳性表达差异有统计学意义(P=0.01)。KAI1表达阴性组和阳性组的生存率差异具有统计学意义(P=0.0043),多因素分析显示KAI1表达不是子宫内膜癌的独立预后因素。结论:KAI1蛋白在子宫内膜癌的发展进程中表达缺失,它可能作为临床预测子宫内膜癌患者发生淋巴结转移和评估预后的综合指标之一。     

肿瘤转移相关因子在子宫内膜异位症中的研究

在子宫内膜异位症（EMs）的发生发展过程中雌激素具有重要的作用，因此，很多关于EMs机制的研究是与雌激素相关的。但异位内膜具有类似于肿瘤样的转移与侵袭生长能力，并且该病具有复发性，具体的分子机制目前还不完全明确。研究结果显示参与肿瘤转移侵袭与血管形成的一些分子在异位内膜的发生与发展中具有一定作用，如整合素、基质金属蛋白酶（MMP）及其组织抑制剂（TIMP）、血管内皮生长因子（VEGF）及其受体（KDR）等。就该方面的研究进展综述。     

Meis1在围着床期小鼠子宫内膜中的表达

目的:探讨Meis1在围着床期小鼠子宫内膜中的作用。方法:采用免疫组织化学定位检测Meis1在小鼠子宫内膜中的表达;采用Real-time RT-PCR和免疫印迹方法,分别在mRNA和蛋白水平定量检测Meis1在围着床期小鼠子宫内膜中的表达水平。结果:免疫组织化学结果显示,Meis1蛋白主要表达于小鼠子宫内膜腺上皮细胞的细胞膜和胞质以及基质细胞和蜕膜细胞的细胞核中,在围着床期小鼠子宫内膜中的表达随妊娠天数的增加而增加,着床后在基质和蜕膜中的表达增强;在孕第4日显著增加,孕第5日达高峰,孕第6日表达下降。Real-time RT-PCR和免疫印迹结果显示,Meis1的表达随妊娠天数的增加逐渐增强,孕第4日明显增强,孕第5日达高峰,孕第6日开始下降。结论:Meis1在围着床期小鼠子宫内膜中呈规律表达,与小鼠着床窗吻合,提示Meis1是调控围着床期子宫内膜容受性的重要因子。     

肿瘤转移相关因子在子宫内膜异位症中的研究

在子宫内膜异位症(EMs)的发生发展过程中雌激素具有重要的作用,因此,很多关于EMs机制的研究是与雌激素相关的.但异位内膜具有类似于肿瘤样的转移与侵袭生长能力,并且该病具有复发性,具体的分子机制目前还不完全明确.研究结果显示参与肿瘤转移侵袭与血管形成的一些分子在异位内膜的发生与发展中具有一定作用,如整合素、基质金属蛋白酶(MMP)及其组织抑制剂(TIMP)、血管内皮生长因子(VEGF)及其受体(KDR)等.就该方面的研究进展综述.     

TRAIL在小鼠胚胎着床过程中子宫内膜的表达

目的:检测TRAIL在小鼠胚胎着床过程中子宫内膜的表达,探讨它在蜕膜细胞凋亡中的作 用。方法:采用RT-PCR及免疫组化技术检测妊娠d 1-8小鼠子宫组织TRAILmRNA及蛋白的表 达情况。结果:妊娠d 1-8的小鼠子宫组织均有TRAIL mRNA的表达,且着床期间的表达较着床前 明显增加(P<0．05)。妊娠d 1-3,小鼠子宫内膜无TRAIL蛋白表达;妊娠d 4,TRAIL表达在小鼠胚 胎定位、黏附点的子宫内膜腔上皮细胞;妊娠d 5-6,TRAIL定位于胚胎着床点附近的蜕膜细胞中; 妊娠d 7-8,TRAIL表达在与子宫蜕膜邻近的胚胎滋养层细胞中。结论:在小鼠胚胎着床过程中, TRAIL诱导子宫内膜腔上皮细胞凋亡可能是胚胎跨越上皮屏障的重要机制之一,且TRAIL诱导的 蜕膜细胞和胚胎滋养层细胞的凋亡在滋养层细胞对子宫内膜的适度侵入过程中起重要作用。     

Annexin A1在小鼠胚泡植入不同时期子宫内膜组织中的表达及意义

目的:探讨Annexin A1在小鼠胚泡植入期的作用。方法:双向聚丙烯酰胺凝胶电泳(2D-PAGE)分析孕d3、d5、d7小鼠子宫内膜蛋白质组,用差异蛋白质组学显示pI约5.1、分子量约38kD的蛋白点在d3、d5上调,且在d5更明显。经基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)测定其胶内酶解后的肽质量指纹谱(peptide mass fingerprint,PMF)和数据库搜索对此蛋白点进行鉴定;再用RT-PCR、原位杂交、Western blot和免疫组织化学技术进行验证分析。结果:该蛋白点鉴定为鼠源性Annexin A1;d5小鼠子宫内膜组织中Annexin A1的mRNA和蛋白质水平均增加。结论:Annexin A1可能参与胚泡着床这一重要生命活动过程。     

T细胞淋巴瘤侵袭转移诱导因子l(Tiam1)在动情周期小鼠子宫内膜中的表达

目的:探讨T细胞淋巴瘤侵袭转移诱导因子l(Tiam1)在动情周期中小鼠子宫内膜的表达规律。方法:采用RT-PCR、免疫组织化学法和Western blotting分别检测小鼠子宫内膜在动情前期、动情期、动情后期和动情间期Tiam1mRNA和蛋白的表达规律。结果:在动情周期中,小鼠子宫内膜mRNA在动情期表达最高,与其它3期相比具有显著性差异,P<0.01;免疫组织化学和Westernblotting的结果也显示Tiam1蛋白在动情期子宫内膜的表达规律与RT-PCR的结果一致。结论:Tiam1在小鼠动情周期子宫内膜中呈动态表达,提示Tiam1可能参与了动情周期子宫内膜变化的调控。     

sLe~x在小鼠胚泡植入早期子宫内膜中的表达及作用

目的:探讨唾液酸化的路易斯寡糖(sLex)在胚泡植入早期小鼠子宫内膜的表达及作用。方法:①应用免疫组化方法对sLex在小鼠妊娠早期子宫内膜的表达进行定位,免疫印迹法以另一侧为自身对照,检测妊娠d1-5小鼠子宫内膜sLeX的表达情况。②向妊娠小鼠一侧子宫角注射sLeX单克隆抗体,观察其对胚胎着床的影响。结果:妊娠d1-5小鼠子宫内膜组织中,sLeX表达量逐渐增加,在植入窗口期(d4)达高峰;子宫角注射抗体后对胚泡植入有明显的抑制作用。结论:在小鼠胚泡植入早期,sLex参与了胚泡的植入过程,在胚泡和子宫内膜的识别过程中发挥重要的作用。     

mmu-miR-141在早孕小鼠胚胎着床前、后子宫内膜中的表达及作用

目的:探讨mmu-miR-141在早孕小鼠胚胎着床前、后子宫内膜组织中的表达及作用。方法:荧光定量PCR(FQ-PCR)及原位杂交检测早孕小鼠胚胎着床前、后子宫内膜mmu-miR-141的表达;MTT和流式细胞术检测孕第4日(d 4)子宫内膜基质细胞被mmu-miR-141抑制剂作用72 h后其细胞活力和细胞凋亡情况。结果:mmu-miR-141在小鼠胚胎着床后(d 6)子宫内膜组织中的表达明显低于着床前(d 4)(P<0.05),且表达于基质细胞;其表达下调能使基质细胞增殖活力下降(P<0.05),细胞凋亡增加(P<0.01)。结论:mmu-miR-141通过调控子宫内膜基质细胞的增殖或凋亡,在早孕小鼠胚胎着床前、后的子宫内膜组织中发挥重要的作用。     

人子宫内膜细胞共培养体系对早期鼠胚体外发育的影响

目的:研究人子宫内膜共培养体系对早期鼠胚体外发育的影响及移植后的妊娠情况。方法:将2-细胞小鼠胚胎与人子宫内膜细胞进行体外共培养,对照组为无营养细胞的单纯培养液,每日在显微镜下观察胚胎的发育情况。将培养到囊胚期的胚胎移植回小鼠的子宫腔,观察着床情况。结果:共培养体系中68.3％的2-细胞胚胎发育至桑椹胚期,50.8％发育至囊胚期,囊胚的孵化率为36.7％,胚胎的着床率为25.0％。而对照组只有24.8％的2-细胞胚胎发育至桑椹胚期,11.4％到达囊胚期,且其中大部分为早期囊胚即停止发育。另外对照组细胞碎片出现早且多,卵裂球不均匀,胚形态差,移植后胚胎的着床率仅为3.1％。结论:人子宫内膜细胞共培养体系可以促进小鼠胚胎的体外发育,改善胚胎的质量,提高着床率。