补肾调冲方对去卵巢大鼠性激素水平及下丘脑雌激素受体α、雌激素受体β mRNA表达的影响

[目的]探讨补肾调冲方对去卵巢大鼠血清性激素水平及下丘脑雌激素受体α(ERα)、雌激素受体β(ERβ)mRNA表达的影响。[方法]以假手术组为对照,将去卵巢大鼠随机分为去卵巢空白组,补肾调冲方高、中、低剂量组,已烯雌酚组。采用放射免疫分析法测定血清雌二醇(E2)、促卵泡生成激素(FSH)、促黄体生成激素(LH)水平,采用逆转录-聚合酶联反应(RT-PCR)检测下丘脑ERα、ERβmRNA表达。[结果]去卵巢大鼠血清FSH、LH水平升高,E2及下丘脑ERα、ERβmRNA水平降低,补肾调冲方大鼠血清E2有升高趋势,FSH有降低趋势,补肾调冲方能降低去卵巢大鼠血清LH水平,升高下丘脑ERα、βmRNA的表达。[结论]补肾调冲方在改善去卵巢大鼠性激素水平同时,可能通过影响ERα、ERβmRNA的表达,提高ER的生物效应,从而降低更年期综合征的发生。     

经前舒颗粒对经前期综合征肝气郁证大鼠下丘脑和海马雌激素受体α,β mRNA表达的影响

目的:研究中药复方经前舒颗粒对经前期综合征(PMS)肝气郁证模型大鼠下丘脑和海马中雌激素受体α(ERα)和β(ERβ)mRNA表达的影响.方法:以情志刺激多因素法复制PMS肝气郁证大鼠模型,使用中药复方经前舒颗粒进行干预治疗,采用RT-PCR法检测大鼠下丘脑和海马中ERα和ERβ mRNA表达变化.结果:与正常组大鼠相比,模型组大鼠下丘脑和海马中ERα和ERβmRNA表达量高于正常组(P＜0.05);与模型组大鼠相比,经前舒颗粒给药组大鼠下丘脑和海马中ERα和ERβ mRNA表达量则显著降低(P＜0.05),与正常组无差异.结论:经前舒颗粒可下调下丘脑和海马中ERα和ERβmRNA表达水平,这可能是其治疗PMS肝气郁证的作用机制之一.     

逆针灸干预对去卵巢大鼠下丘脑不同核团ER-α和ER-αmRNA表达水平的影响

目的:探索"逆针灸"对去卵巢大鼠下丘脑功能的调节机制。方法:将3.5月龄SD雌性大鼠30只,随机分为正常组、假手术组、去卵巢模型组、逆针组、逆灸组。逆灸组与逆针组分别预先艾灸、针刺1个月后,与去卵巢模型组、假手术组同时造模。采用免疫组化和原位杂交方法,观察各组大鼠下丘脑室旁核、视上核、弓状核雌激素受体-α(ER-α)和基因表达水平的变化。结果:大鼠去卵巢后下丘脑室旁核ER-α及ER-αmRNA,视上核ER-αmRNA表达均明显升高(P<0.01),视上核、弓状核ER-α表达明显降低(P<0.01);与去卵巢模型组比较预先进行"逆针灸"处理后,大鼠下丘脑室旁核ER-αmRNA表达明显降低(P<0.05),ER-α无明显变化(P>0.05),视上核、弓状核ER-α表达明显升高(P<0.01,P<0.05),视上核ER-αmRNA无明显变化(P>0.05)。结论:"逆针灸""关元"穴能够影响去卵巢更年期大鼠下丘脑不同核团ER-α和ER-αmRNA表达水平的变化,可能是其调节下丘脑功能活动的途径之一。     

基于下丘脑-垂体-卵巢轴探讨藏药二十五味鬼臼丸对绝经后骨质疏松症大鼠的干预作用

目的基于下丘脑-垂体-卵巢轴(hypothalamus-pituitary-ovary axis,HPOA)探讨藏药二十五味鬼臼丸对去卵巢大鼠骨质疏松的影响。方法将40只SD雌性未孕大鼠随机分为假手术组、模型组、雌二醇组、二十五味鬼臼丸组,每组10只。除假手术组仅摘取卵巢旁同样大小的脂肪块,其余3组大鼠均摘除双侧卵巢建立绝经后骨质疏松症(postmenopausal osteoporosis,PMOP)大鼠模型。手术1周后开始给药处理,雌二醇组ig0.1mg/kg戊酸雌二醇,二十五味鬼臼丸组ig441mg/kg二十五味鬼臼丸,假手术组和模型组ig等体积蒸馏水,1次/d,连续12周后,ELISA法检测血清雌二醇、黄体生成素(luteinizing hormone,LH)、卵泡刺激素(follicle stimulating hormone,FSH)、促性腺激素释放激素(gonadotropin releasing hormone,GnRH)水平;RT-PCR检测下丘脑、垂体、左侧股骨远端雌激素受体α(estrogen receptorα,ERα)、雌激素受体β(estrogen receptorβ,ERβ)m RNA表达;免疫荧光染色法检测下丘脑、垂体和右侧股骨远端ERα、ERβ蛋白表达;HE染色法观察大鼠右侧股骨远端组织形态变化;Micro-CT检测右侧股骨远端微结构的改变。结果藏药二十五味鬼臼丸能显著降低大鼠体内血清LH、FSH、GnRH水平(P0.05、0.01),并在HPOA轴中显著性上调下丘脑及垂体ERαm RNA及蛋白表达(P0.01),同时显著性上调股骨ERβm RNA及蛋白表达(P0.01),并能显著回调大鼠股骨密度及骨微结构参数(P0.01)。结论藏药二十五味鬼臼丸可有效防治PMOP,其机制可能与药物直接作用骨组织雌激素受体或作用HPOA轴靶器官相关雌激素受体后,通过改变体内性激素的水平间接调控骨代谢有关。     

补肾方药对去卵巢大鼠骨质疏松的骨组织ER表达的影响

目的：探讨雌激素受体在骨质疏松发病中的作用及补肾方药对其调整作用。方法：通过切除大鼠卵巢造成骨质疏松模型,补肾方药和尼尔雌醇分别灌胃治疗3个月,观察补肾中药对骨质疏松的治疗作用,并且采用免疫组织化学,RT－PCR方法检测大鼠去卵巢前后骨组织中雌激素受体的变化,及补肾中药治疗对其的影响。结果：卵巢切除后大鼠的血清雌二醇水平,腰椎中的雌激素受体表达水平及股骨干骺端雌激素受体mRNA表达均下降。补肾中药能够提高去卵巢大鼠的骨密度,改善其病理变化,提高大鼠血清E2水平,并且可以从RNA,蛋白质两种水平,提高骨组织中的ER的表达,结论：补肾方药对去卵巢实验性骨质疏松大鼠有治疗作用,其作用机制不仅与其拟雌激素样作用有关,而且与其提高ERa在骨组织中的表达有关,进一步表明了雌激素受体在骨质疏松发病中的作用。     

六味地黄丸对去卵巢高血脂大鼠雌激素受体α、βmRNA表达的影响

目的观察六味地黄丸(地黄丸)对去卵巢高血脂大鼠雌激素受体α、β(ER α、β)mRNA 表达的影响。方法采用8周龄雌性大鼠建立去卵巢高血脂模型,将24只大鼠随机分为3组:去卵巢加六味地黄丸组(地黄丸组),去卵巢加苯甲酸雌二醇组(雌二醇组),去卵巢加生理盐水组(对照组),每组8只,地黄丸组用六味地黄丸每天每只2.4g,分2次灌胃,共6周;雌二醇组用苯甲酸雌二醇注射液按每鼠每3天1次皮下注射0.2mg,共12次;对照组给予生理盐水,早晚各1次灌胃,共6周。RT-PCR 法分析 ERα、ERβmRNA 表达。结果 ERα、ERβ mRNA 表达均明显高于对照组(P<0。01)。结论六味地黄丸具有调高去卵巢高脂大鼠主动脉 ERα、ERβ mRNA 的表达的作用,该作用为其在绝经女性防治动脉粥样硬化和冠心病等应用提供了依据。     

电针对产后抑郁大鼠脑组织ER表达的干预作用

目的:探讨产后抑郁(postpartum depression,PPD)模型大鼠前额叶皮质、海马、下丘脑雌激素受体(estrogen receptor,ER)表达分布和变化规律以及电针对ER的影响。方法:选用雌性5～6月龄SD大鼠,随机分为正常组、假手术组、模型组、电针组、西药组,每组均设2、4、6周观察时点。采用免疫组化法测定大鼠前额叶皮质、海马、下丘脑ERα与ERβ阳性细胞表达数。结果:模型组大鼠第2、4、6周前额皮质、海马、下丘脑ERα表达较正常组、假手术组减少,差异有统计学意义(P0.05);电针组、西药组第2、4、6周前额皮质、海马、下丘脑ERα表达均较模型组增加,差异有统计学意义(P0.05);模型组第2周前额皮质,第4、6周前额皮质、海马、下丘脑ERβ表达较正常组、假手术组减少,差异有统计学意义(P0.05),第2周海马、下丘脑ERβ表达较正常组、假手术组增加,差异有统计学意义(P0.05);电针组第6周前额叶皮质,第2、4、6周海马,第4、6周下丘脑,西药组第4、6周前额叶皮质,第2、4、6周海马,第4、6周下丘脑ERβ表达较模型组增加,差异有统计学意义(P0.05)。结论:前额叶皮质、海马、下丘脑ERα与ERβ表达水平的改变可能是PPD模型大鼠PPD发生发展的生物学基础之一,电针对产后抑郁模型大鼠脑组织内ERα和ERβ表达量的调节可能是电针治疗PPD的重要作用机制之一。     

马鬃蛇醇提物对下丘脑抑制大鼠雌激素水平及卵巢ER的影响

目的:研究马鬃蛇醇提物(CVAE)对下丘脑抑制大鼠雌激素水平及卵巢雌激素受体(ER)的影响。方法:sc吗啡建立未成年雌性大鼠下丘脑抑制模型,灌胃给药21d,用放射免疫法测定血清雌二醇(E2)、卵泡刺激素(FSH)水平,用免疫组化法测定卵巢ER。结果:CVAE可提高雌激素受体阳性细胞表达,明显升高血清中E2、FSH水平,大鼠出现动情期提前,并可升高子宫、卵巢的脏器系数。显微镜观察显示,大鼠子宫内膜增厚,腺体数量增多,间质致密。结论:CVAE可提高未成年雌性大鼠下丘脑抑制的E2、FSH水平,增加卵巢ER阳性细胞表达,提示其作用机制可能是通过下丘脑-垂体-卵巢轴的调节。     

电针命门穴对去势骨质疏松模型大鼠肾上腺雌激素受体ERαmRNA表达的影响

目的研究电针命门穴对去卵巢骨质疏松模型(OVX)大鼠肾上腺功能的影响。方法造模成功的雌性SD大鼠18只,随机分为假手术组、模型组、电针组,每组6只。大鼠处死后,用放免法测各组大鼠血清中雌二醇(estradiol,E2)水平,荧光定量PCR(探针法)检测各组大鼠肾上腺ERαmRNA表达。结果模型组与假手术组比较,血清E2水平明显下降,有显著性差异(P0.05),电针组血清E2水平有一定升高,与模型组比较,无统计学意义(P0.05);模型组肾上腺ERαmRNA表达强于假手术组,有统计学意义(P0.05),电针组肾上腺ERαmRNA表达降低,与模型组相比,有显著性差异(P0.05)。结论去卵巢后,大鼠肾上腺可起代偿作用,电针能提高去卵巢骨质疏松大鼠血清雌激素水平,并影响大鼠ERα在肾上腺的表达。     

二丁二仙汤对去势反复尿路感染大鼠模型肾组织TGF—β1、α-SMA和雌激素受体表达的影响

摘要目的：基于去势反复尿路感染大鼠模型,观察中药二丁二仙汤对肾组织TGF—β1及α—SMA和雌激素受体表达的作用,从而探讨二丁二仙汤对去势反复尿路感染大鼠肾组织纤维化的作用机制。方法：采用卵巢次切术后膀胱内多次灌注大肠埃希氏茵制作反复尿路感染模型,建立大鼠去势后反复尿路感染动物模型。取47只雌性大鼠随机分组：生理组7只,去卵巢组10只,模型组10只,西药组（倍美力）10只,中药组（二丁二仙汤）10只共5组,ELISA法检测治疗后各组血清雌二醇水平,光镜下观察肾组织Masson染色,免疫组化方法检测肾组织TGF—β1和α—SMA表达,运用Realtime—PCR方法检测肾组织雌激素受体ERa和ERβ表达。结果：中药组血清雌激素水平表达明显高于西药组,与生理组持平;光镜下观察肾组织Masson染色,各组无明显纤维化变化;免疫组化检测发现,较去势组,模型组肾组织TGF-β1和α—SMA表达增多,中药组和西药组肾组织TGF—β1和α—SMA表达较模型组减少。运用RealTime—PCR法检测肾组织雌激素受体mRNA表达发现,中药组ERβmRNA较模型组下降。结论：二丁二仙汤能提高去势后反复尿路感染大鼠血清雌激素水平,下调肾组织ERβmRNA,抑制肾纤维化指标TGFβ1和α—SMA表达。表明中药二丁二仙汤可能通过上调雌激素水平及下调肾组织局部雌激素受体表达,从而抑制肾组织纤维化。     

经前舒颗粒对PMS肝气郁证模型大鼠海马中雌激素受体蛋白表达及活性的影响

目的 探讨经前舒颗粒对经前期综合征肝气郁证模型大鼠海马雌激素受体(ER)蛋白表达及与配体结合活性的影响。方法 以情志刺激为主多因素造模法复制经前期综合征肝气郁证大鼠模型,使用中药复方经前舒颗粒进行干预治疗,采用免疫组织化学实验和放射性受体配体结合实验,分别检测了正常对照组、PMS肝气郁证组、经前舒干预组大鼠海马中的ER半定量表达水平和与E2的结合活性。结果 与正常组相比,模型组大鼠海马CA1、CA3区ER蛋白表达水平显著升高(P＜0.01,P＜0.05),ER与配体的结合活性也显著增强(P＜0.05,P＜0.05);给药组的差异无统计学意义。结论 大鼠海马中的雌激素受体表达量及与配体结合活性异常升高是经前期综合征肝气郁证的病机之一,也是调肝方药经前舒颗粒的可能作用靶点。     

桂枝茯苓丸联合达那唑治疗子宫内膜异位症临床研究

目的：探讨桂枝茯苓丸联合达那唑对子宫内膜异位症(endometriosis, EM)患者血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)、雌激素受体(estrogen receptor, ERα)及IL的影响。方法将符合入选标准的EM患者316例,采用随机数字表随机分为2组各158例。常规治疗组口服达那唑片;联合治疗组在常规治疗组基础上加用桂枝茯苓丸,均治疗28 d。采用酶联免疫吸附法测定血清血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)、VEGF受体Flk-1、雌激素受体α(estrogen receptor α, ERα)、17β-雌二醇(17β-estradiol, E2)、IL-2、IL-6、IL-8水平。反转录聚合酶链反应检测异位内膜间质细胞VEGF和Flk-1 mRNA表达,评价疗效及复发率。结果联合治疗组总有效率(93.7%比78.5%;χ2＝13.968,P＜0.01)显著高于常规治疗组,复发率(5.4%比13.7%;χ2＝19.984,P＜0.01)显著低于常规治疗组。治疗后,联合治疗组患者血清VEGF[(2.93±0.07)pg/ml比(6.85±0.12)pg/ml;t＝354.679,P＜0.01]、Flk-1[(2.97±0.12)pg/ml 比(5.87±0.17)pg/ml;t＝175.179,P＜0.01]、ERα[(4.93±0.29)pg/ml 比(6.85±0.37)pg/ml;t＝51.337,P＜0.01]、E2[(11.69±1.09)pg/ml比(14.10±0.78)pg/ml;t＝22.601,P＜0.01]、IL-2[(2.27±0.12)pg/ml 比(2.31±0.16)pg/ml;t＝2.514,P＜0.05]、IL-6[(0.39±0.03)pg/ml 比(0.59±0.06)pg/ml;t＝37.476,P＜0.01]、IL-8[(0.47±0.04)pg/ml 比(0.81±0.09)pg/ml;t＝43.393,P＜0.01]水平均显著低于常规治疗组,异位内膜间质细胞VEGF mRNA[(0.69±0.08)比(2.11±0.09);t＝148.229, P＜0.01]和Flk-1 mRNA[(4.67±0.14)比(5.61±0.22);t＝45.311,P＜0.01]表达显著低于常规治疗组。结论桂枝茯苓丸联合达那唑可下调EM患者异位内膜间质细胞VEGF和Flk-1表达,降低血清VEGF、Flk-1、ERα和E2,减轻炎症反应,改善症状。     

大黄、虫对药对雌孕激素负荷大鼠子宫肌瘤模型ERα、ERβ的影响

目的:探讨大黄、虫对药对雌、孕激素负荷大鼠子宫肌瘤模型雌激素受体亚型ERα、ERβ的影响及作用机理。方法:70只SD雌性大鼠随机分成正常对照组、模型组、大黄虫小剂量组、大黄虫中剂量组、大黄虫大剂量组、大黄虫丸组、桂枝茯苓胶囊组。采用雌、孕激素负荷法建立大鼠子宫肌瘤模型,用SABC免疫组化法测定大鼠子宫平滑肌细胞ERα、ERβ的表达水平。结果:模型大鼠子宫平滑肌细胞ERα、ERβ的表达显著增高(P<0.01),各治疗组的ERα、ERβ较模型组均下降(P<0.01)。结论:大黄、虫对药可抑制子宫肌瘤平滑肌细胞ERα、ERβ的表达,这可能是该药治疗子宫肌瘤的主要机理之一。     

雌激素与乳腺癌关系的研究进展

雌激素是一种甾体激素,具有广泛的组织分布,包括生殖系统、骨骼、心血管系统等,可诱导乳腺肿瘤的发生。雌激素导致乳腺癌的完全机制仍不明确,但已知其中重要的机制之一就是刺激乳腺癌组织的生长和抑制凋亡。本文就雌激素,雌激素受体与乳腺癌的关系进行综述。     

雌激素或雌激素样物质对心血管系统的影响及其作用途径与机制

更年期女性因体内雌激素水平降低致雌激素效应减弱,使更年期心血管疾病发病率增高。作为1种重要的固醇类激素,雌激素的作用靶点分布广泛,生物学效应复杂多样,能参与机体多个器官系统功能的调节;但雌激素或雌激素样物质均是通过经典的雌激素受体(ER)α和ERβ或G蛋白偶联的雌激素受体(GPER)等介导的基因或非基因传导通路发挥生物学效应的。雌激素对心血管系统经受体介导的作用途径及其机制的研究对女性更年期心血管疾病的临床治疗具有重要指导意义。本文将就雌激素或雌激素样物质影响心血管系统的作用途径与机制进行综述。     

Anti-breast cancer effects and mechanisms of Xihuang pill on human breast cancer cell lines

Objective

To investigate the anti-breast cancer (BC) effects and mechanisms of action of Xihuang pill (XHP) by conducting in vitro experiments on human BC cell lines.

Methods

Two human BC cell lines (MCF-7 and MDA- MB231) were cultured and treated with XHP. Cell viability was detected using the 3-(4, 5-Dimethylthiazol-2-yl)-2, 5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) assay. Flow cytometry was used to measure the cell cycle and apoptosis. The cell cycle was analyzed with propidium iodide staining. Apoptosis was evaluated using the Annexin V-fluorescein isothiocyanate/propidium iodide method. Western blotting was used to analyze the expression of estrogen receptor (ER)-α and ER-β.

Results

XHP had growth-inhibitory effects on MCF-7 and MDA-MB231 cells with a half-maximal inhibitory concentration (IC50) of 10.14 mg/mL (MCF-7) and 8.98 mg/mL (MDA-MB231). Apoptosis was induced to some extent. Certain changes in the ER were caused. Upregulation of ER-α protein was found in MCF-7 cells. ER-β expression in MDA-MB231 cells was increased. Cell-cycle arrest was not observed in the two BC cell lines. ER-β expression in MCF-7 cells was unchanged. No ER-α expression was shown in MDA-MB231 cells.

Conclusion

These data suggest that XHP can affect cell viability and cause apoptosis, but that the cell cycle is not blocked. XHP has a certain impact on ER expression, but its mechanisms of action of anti-BC effects may not be due to regulation of ER expression.     

疏肝法对围绝经期综合征肝郁证模型大鼠雌激素受体mRNA表达的影响

目的：观察疏肝法对围绝经期综合征(perimenopausal syndrome, PMS)肝郁证模型大鼠行为学及其卵巢雌激素受体(Estrogen receptor, ER)mRNA表达的影响,探讨其作用机制。方法将围绝经期大鼠按随机数字表法分为模型组、柴胡疏肝散组、丹栀逍遥散组,每组8只。采用孤养法联合慢性束缚法制备PMS肝郁证大鼠模型。另将8只3月龄SD健康大鼠作为正常对照组。柴胡疏肝散组大鼠灌胃柴胡疏肝散水煎剂4.0 g/kg,丹栀逍遥散组灌胃丹栀逍遥散水煎剂4.9 g/kg,模型组及正常对照组灌胃等体积生理盐水,1次/d,连续给药21 d。采用旷场实验观察各组大鼠行为学变化;采用放射性免疫技术检测大鼠血清雌二醇、卵泡刺激素及促黄体生成素水平;采用实时荧光定量PCR法检测大鼠卵巢组织ERα、ERβ mRNA表达变化。结果给药后21 d,与模型组比较,柴胡疏肝散组、丹栀逍遥散组大鼠水平运动得分[(49.6±6.0)分、(51.6±5.8)分比(40.0±4.6)分]、垂直运动得分[(14.1±0.7)分、(14.6±2.3)分比(10.9±1.8)分]提高(P＜0.05及P＜0.01);柴胡疏肝散组大鼠卵巢ERα mRNA[(7.42±2.54)比(3.80±1.36)]表达水平升高(P＜0.01),血清卵泡刺激素[(3.96±0.48)mIU/ml比(5.31±0.41)mIU/ml]水平降低(P＜0.01);丹栀逍遥散组大鼠血清促黄体生成素[(6.65±0.46)mIU/ml 比(8.10±0.62)mIU/ml]水平降低(P＜0.01)。结论疏肝法可改善 PMS 肝郁证大鼠的行为学,其治疗机制可能与调节内分泌及提高卵巢雌激素受体基因表达相关。     

葛根素对大鼠局灶性脑缺血后雌激素受体α阳性神经元变化的影响

目的探讨脑缺血损伤后ERα阳性细胞的动态变化及葛根素对其影响。方法制作大脑中动脉阻断模型,使用免疫组化方法观察缺血不同时间ERα免疫阳性神经元的表达。结果在脑缺血后不同时间点,假手术组、雌激素组和葛根素组ERα阳性神经元数量均高于对照组。结论葛根素可以上调脑缺血后ERα免疫阳性神经元的表达,可能通过ERα发挥对脑缺血半暗带神经元的保护作用。     

大鼠模拟经前期综合征肝气逆证不同脑区E2受体、P受体基因表达mRNA水平变化

目的：探讨肝主疏泄与雌二醇受体（ER）、孕酮受体（PR）基因表达的关系。方法：以肝失疏泄所导致的始发证侯肝气逆证为切入点,运用RT-PCR方法,对肝失疏泄产生肝气逆证时的主要改变指标ER、PR的基因表达在中枢不同脑区（下丘脑、边缘叶）mRNA水平上的变化进行探讨。结果：在肝失疏泄产生肝气逆证时ER、PR的活性皆明显下降,且在下丘脑中以PR的活性下降为主,在边缘叶中以ER的活性下降为主。结论：中枢神经系统下丘脑中PR的活性下降和边缘叶中ER的活性下降,可做为诊断肝气逆证的微观指标之一。