大黄虫丸对大鼠肝星状细胞基质金属蛋白酶表达及活性的影响

目的观察大黄[庶虫]虫丸对大鼠肝星状细胞间质胶原酶（MMP-1）基因表达及分泌到培养基中的明胶酶A（MMP-2）活性的影响。方法分离培养大鼠肝星状细胞（HSC）,制备大黄[庶虫]虫丸大鼠药物血清,温育HSC。逆转录多聚酶链反应（RT-PCR）法观察MMP-1的表达。酶谱法检测MMP-2的活性。结果大黄[庶虫]虫丸药物血清可明显促进HSC对MMP-1的基因表达,同时可明显增加HSC合成的MMP-2的含量和活性（P〈0．05）。结论大黄[庶虫]虫丸的抗肝纤维化作用与其促进HSC的MMP-1基因表达,增加MMP-2的含量和活性有关。     

大黄(庶虫)虫丸对大鼠肝星状细胞活化及增殖的影响

目的观察大黄(庶虫)虫丸对大鼠肝星状细胞活化及增殖的影响。方法用链酶蛋白酶和胶原酶原位灌注消化正常大鼠肝脏,Nycodenz 密度梯度离心分离肝星状细胞(HSC),在制备大黄(庶虫)虫丸大鼠药物血清的基础上,温育 HSC。采用 MTT 比色法测定细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡及增殖周期情况。结果药物血清对体外培养的 HSC 有抑制作用,且存在浓度剂量依赖关系,但作用较弱,需在20%以上方见到差异有显著性(P<0.05),对 HSC 凋亡及细胞增殖周期则未见明显影响(p>0.05)。结论大黄座虫丸对 HSC 增殖有一定抑制作用,但可能不是其抗肝纤维化作用的主要途径,其抗肝纤维化作用与诱导细胞凋亡无关。     

大黄虫丸经旁分泌途径对早期肝纤维化的干预作用

目的 观察大黄(庶虫)虫丸经旁分泌途径对大鼠肝星状细胞增殖及其表达TGF-β_1 基因的影响. 方法采用Nycodenz 分离液非连续密度梯度离心法同步分离急性CCl_4 损伤模型大鼠和正常大鼠肝的枯否细胞(KC)和星状细胞(HSC).在制备正常鼠血清和大黄(庶虫)虫丸药物血清的基础上,将它们分别加入KC 培养板内作用48 h 后制备成正常鼠KC 条件培养液(NKCCM)和损伤鼠KC 条件培养液(KCCM).将NKCCM 和KCCM 作用于活化的HSC 24 h 后,采用MTT 法和3H-TdR 掺入法检测HSC 增殖的变化;采用半定量RT-PCR 法扩增TGF-β_1 mRNA 以检测HSC 表达TGF-β_1 基因的情况. 结果旁分泌组各组的HSC 增殖幅度及TGF-β_1 基因的相对表达量较正常对照组NKCCM 组均明显增加(P<0.05或0.01).同时旁分泌组中,含药血清作用的5%,10%和20% KCCM 组较无药物血清作用的0% KCCM 组HSC 的增殖能力及TGF-β_1 基因的相对表达量则下降,且随药物浓度的升高逐渐降低,其组间差别有统计学意义(P<0.05或P<0.01).结论 大黄(庶虫)虫丸可明显抑制经旁分泌途径活化的大鼠HSC 的增殖及TGF-β_1 基因的表达,且其抗肝纤维化效应与药物剂量间存在一定的依赖关系.     

大黄(庶虫)虫丸对大鼠两种肝纤维化模型的影响

目的:观察大黄(庶虫)虫丸抗肝纤维化作用.方法:采用四氯化碳(CCl4)和免疫损伤(BSA)模型,观察大黄(庶虫)虫丸对大鼠肝功能及肝组织病理学影响.结果:大黄(庶虫)虫丸组肝功能明显改善,肝纤维化程度明显低于模型组(P＜0.05).结论:提示大黄(庶虫)虫丸有抗肝纤维化的作用.     

大黄、虫对药对雌孕激素负荷大鼠子宫肌瘤模型孕激素及其受体的影响

目的 研究大黄、(庶虫)虫对大鼠子宫肌瘤模型孕激素及其受体的影响.方法 将70只SD大鼠随机分为7组:正常对照组、模型组、大黄(庶虫)虫小剂量组、大黄(庶虫)虫中剂量组、大黄(庶虫)虫大剂量组、大黄(庶虫)虫丸组、桂枝茯苓胶囊组,采用雌孕激素负荷法建立大鼠子宫肌瘤模型,放射免疫法测定大鼠血清孕激素(P)水平,免疫组织化学染色观察大鼠子宫平滑肌细胞孕激素受体(PR)的表达.结果 模型大鼠血清中P水平,子宫平滑肌细胞PR的表达明显高于正常大鼠,大黄(庶虫)虫可降低血清中P水平,抑制平滑肌细胞PR的表达.结论 P及PR在子宫肌瘤生长中起重要作用,这可能是大黄(庶虫)虫治疗子宫肌瘤的机理之一.     

大黄(庶虫)虫丸对实验性子宫内膜异位症大鼠免疫功能的影响

目的:观察大黄(庶虫)虫丸对EMT大鼠免疫功能的影响.方法:采用大鼠子宫内膜异位症(EMT)动物模型,造模成功后按照异位内膜体积将大鼠随机分为大黄(庶虫)虫丸中高剂量组、大黄(庶虫)虫丸中低剂量组、西药组、模型组,并以假手术组为对照,灌胃治疗4周后检测指标.结果:①大黄(庶虫)虫丸中高剂量组、大黄(庶虫)虫丸中低剂量组、西药组对异位子宫内膜有明显抑制作用,与治疗前异位内膜体积(V1)相比,异位内膜体积(V2)明显缩小(P<0.01);②大黄(庶虫)虫丸中高剂量组能明显提高EMT大鼠胸腺、脾脏重量指数(P<0.01),降低血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平(P<0.01);③病理组织学分析显示:大黄(庶虫)虫丸中高剂量组能明显增加胸腺皮质厚度、脾小节大小及淋巴细胞数,明显降低异位内膜腺体体密度、提高腺腔值、降低淋巴结生发中心体密度(P<0.01).结论:大黄(庶虫)虫丸治疗子宫内膜异位症的部分机制可能改善子宫内膜异位症大鼠免疫功能有关.     

大黄虫丸对动脉粥样硬化大鼠脂代谢及胰岛素样生长因子的影响

目的:观察胰岛素样生长因子(IGF-1)在动脉粥样硬化(AS)模型中的表达,并探讨大黄(庶虫)虫丸调节血脂及抗AS的机制.方法:用高脂饲料喂养加Vit D3建立大鼠AS模型,用大黄虫丸喂饲8周后,观察各组大鼠血脂(TG,TC,HDL-C,LDL.C)、丙二醛(MDA)、超氧化物岐化酶(SOD)、胰岛素样生长因子(IGF-1)含量.结果:模型组IGF-1含量与对照组比较显著降低;大黄 虫丸组与模型组IGF-1含量明显升高.结论:大黄虫丸通过调节血脂、抗氧化损伤、提高血清IGF-1表达,而抑制血管平滑肌细胞的凋亡,发挥抗AS的作用.     

大黄(*虫)虫丸对大鼠肝星状细胞表达TGF-β1的影响

目的:探讨大黄(*虫)虫丸对大鼠肝星状细胞表达转化生长因子β1(TGF-β1)的影响.方法:用CCl4复合因素致大鼠肝纤维化模型,同时分别给予3种剂量大黄(*虫)虫丸治疗,免疫组化方法观察TGF-β1、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的合成表达及纤维化程度分级.结果:经给予大黄(*虫)虫丸干预治疗常规剂量组大鼠TGF-β1、α-SMA表达与模型组比较差异无显著性(P＞0.05),但双倍剂量组和三倍剂量组TGF-β1、α-SMA在汇管区及不连续纤维间隔的表达明显减弱(P＜0.05,P＜0.01).结论:大黄(*虫)虫丸较大剂量能抑制肝星状细胞增殖和分泌TGF-β1,减少胶原生成,从而减弱肝星状细胞的自分泌放大效应,这可能是大黄(*虫)虫丸抗肝纤维化作用的主要机制之一.     

大黄(庶虫)虫丸抑制动脉粥样硬化斑块及TNF-α表达

目的:观察大黄(庶虫)虫丸对动脉粥样硬化(AS)斑块及肿瘤致死因子-α(TNF-α)表达的影响,对进一步研究动脉粥样硬化的发病机制,努力找到干预其机制的方法及对AS防治有着非常重要的意义.方法:大鼠高脂饲料喂养8周后,测定血清甘油三酯(TG)、总胆固醇 (TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C) 、肿瘤致死因子-α(TNF-α)含量的变化;剥离主动脉,进行病理学检查.结果:与模型组比较,大黄(庶虫)虫丸组大鼠血清TG、TC、LDL、MDA含量明显降低,HDL-C升高, TNF-α 含量明显降低;模型组大鼠主动脉壁内膜显著增厚向管腔突起,可见粥样斑块形成,给大黄(庶虫)虫丸的大鼠在一定程度上减轻动脉粥样硬化程度.结论: 大黄(庶虫)虫丸具有抗动脉粥样硬化作用,其机制可能与降血脂和下调TNF-α表达有关.     

大黄(庶虫)虫丸对阿霉素肾硬化大鼠血栓素B2、6-酮-前列腺素F1α的影响

目的 探讨大黄(庶虫)虫丸对阿霉素肾硬化大鼠尿蛋白排泄率、血脂、血浆血栓素B2(TXB2)和6-酮-前列腺素F1α(6-Keto-PGF1α)的影响.方法 大鼠在单侧肾切除、分次阿霉素尾静脉注射的基础上喂饲高脂饲料,造成弥漫性系膜增生伴局灶节段性肾小球硬化动物模型.将大鼠分为假手术组、空白组、大黄(庶虫)虫丸组、苯那普利组,观察各组大鼠尿蛋白、血脂、血浆TXB2和6-Keto-PGF1α水平.结果 大黄(庶虫)虫丸可明显降低大鼠尿蛋白排出量;降低血浆胆固醇含量;升高血浆6-Keto-PGF1α及降低TXB2水平.结论 大黄(庶虫)虫丸能够祛瘀扶正,促进气血运行,通畅血脉,改善血流动力学,对阿霉素所致的肾损害具有一定的保护作用,其机制可能与其调节血栓素/前列腺素平衡有关.     

肾乐和法安明防治大鼠肾小球硬化机制的探讨

目的：观察肾乐和法安明（达肝素钠）对5/6肾切除大鼠残肾组织中Ⅳ型胶原和基质金属蛋白酶-9（matrix metalloproteinase-9,MMP-9)/组织金属蛋白梅抑制物-1（tissue inhibitors of metalloproteinase-1,TIMP-1）基因表达的影响，旨在探讨两种药物对细胞外基质降解酶系MMP-9/TIMP-1的影响，从而进一步提示其减轻肾小球硬化的机制。方法：用5/6肾切除的方法诱导大鼠局灶节段性肾小球硬化模型并给予肾乐（4g·kg^-1·d^-1)及法安明（1000IU·kg^-1·d^-1）治疗20周，观察大鼠血压、蛋白尿、血肌肝、血脂和残余肾组织的病理改变程度，以及残肾组织Ⅳ型胶原、MMP-9的沉积和TIMP-1基因的表达。结果：肾乐及法安明治疗组显著降低5/6肾切除大鼠血压、蛋白尿、血肌肝、血脂和减轻肾组织的病理改变程度，并且显著减少残肾组织中Ⅳ型胶原、MMP-9沉积以及下调Ⅳ型胶原、MMP-9/TIMP-1的基因表达；定量分析结果显示，与5/6Nx组比较，肾乐组和法安明组MMP-9的表达量分析下调了30.0%、28.5%TIMP-1的表达量分别下调了59.3%、55.0%。结论：肾乐和法安明可能通过调节MMP-9/TIMP-1的基因表达，减轻肾小球重塑过程中细胞外基质的异常代谢和积聚，促进了细胞外基质的降解，这可能是肾乐和法安明防治肾小球硬化的重要作用机制之一。     

虫草菌丝提取物抗二甲基亚硝胺诱致大鼠肝硬化肝窦毛细血管化作用机制的研究

目的 探讨虫草菌丝提取物（CME）对二甲基亚硝胺（DMN）诱致大鼠肝硬化肝窦毛细血管化作用的机制。     

参芪泄浊饮对腺嘌呤肾间质纤维化模型大鼠肾组织MMP-9、TIMP-1基因表达的影响

目的:观察参芪泄浊饮对慢性肾衰大鼠肾组织基质金属蛋白酶9(MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)基因表达的影响。方法:采用Yokozawa法复制慢性肾衰大鼠模型,随机分为参芪泄浊饮高剂量组、常规剂量组、氯沙坦组、模型组及空白组,高剂量组、常规剂量组、氯沙坦组分别予参芪泄浊饮水煎液20 m L/(kg·d)、参芪泄浊饮10 m L/(kg·d)、氯沙坦9 mg/(kg·d),模型组与空白组大鼠均予纯净水10 m L/(kg·d),连续给药8周,全部大鼠麻醉后腹腔采血,取左肾,ELLISA法测量血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、丙氨酸转氨酶(ALT)并采用荧光定量PCR检测肾脏MMP-9、TIMP-1 mRNA的表达。结果:1高剂量组Scr水平明显低于常规剂量组、氯沙坦组及模型组;常规剂量组与氯沙坦组无明显差别,且均低于模型组;2高剂量组MMP-9 mRNA表达水平明显高于常规剂量组、氯沙坦组及模型组;常规剂量组与氯沙坦组无明显差别,且均高于模型组;高剂量组TIMP-1 mRNA表达水平明显低于常规剂量组、氯沙坦组及模型组;常规剂量组与氯沙坦组无明显差别,且均低于模型组;3各组ALT水平较空白组比较均无显著差别。结论:参芪泄浊饮可通过调节MMP-9及TIMP-1表达来缓解慢性肾衰肾脏功能的恶化。     

犀黄丸对大肠癌LoVo细胞基质金属蛋白酶2,9蛋白表达的影响

[目的]研究犀黄丸含药血清对大肠癌LoVo细胞中基质金属蛋白酶-2,9(MMP-2,MMP-9)表达的影响及意义。[方法]应用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法,检测犀黄丸含药血清作用下LoVo细胞培养上清液中MMP-2、MMP-9的蛋白表达水平。[结果]在犀黄丸含药血清的干预下,LoVo细胞中MMP-2、MMP-9的蛋白分泌水平与空白对照组比较明显下调,差异具有统计学意义(P<0.05)。[结论]犀黄丸可能通过抑制MMP-2和MMP-9的蛋白表达,达到抑制大肠癌转移的作用。     

膈下逐瘀汤对免疫性肝纤维化大鼠肝组织MMP-9和TIMP-2表达的影响

目的:观察膈下逐瘀汤对肝纤维化大鼠肝组织基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及基质金属蛋白酶组织抑制因子-2(TIMP-2)表达的影响。方法:大鼠随机分为空白对照组、膈下逐瘀汤组、猪血清组、猪血清+膈下逐瘀汤组。猪血清腹腔注射诱导大鼠免疫性肝纤维化模型,同时膈下逐瘀汤灌胃给药干预。消化法检测肝组织羟脯氨酸含量,ELISA法检测肝组织MMP-9和TIMP-2蛋白含量,实时定量RT-PCR检测肝组织MMP-9和TIMP-2 mRNA表达。结果:与模型对照组比较,膈下逐瘀汤可显著降低肝组织羟脯氨酸、MMP-9及TIMP-2蛋白含量,下调肝组织MMP-9、TIMP-2 mRNA水平。结论:膈下逐瘀汤可有效地逆转实验性大鼠肝纤维化,其机制可能与调节MMP-9和TIMP-2的表达有关。     

调气通络方对慢性脑供血不足病人血清基质金属蛋白酶2的影响

目的观察调气通络法对血瘀证慢性脑供血不足（CCCI）病人血清基质金属蛋白酶2（MMP-2）的影响。方法将临床CCCI诊断明确,属于血瘀证符合纳入标准的60例病人随机分为中药组和西药组,在同时给予肠溶阿司匹林基础上,中药组和西药组分别给予调气通络方与西药尼莫地平治疗21 d,用酶联免疫吸附法检测用药前后血清MMP-2的变化。结果治疗前两组血清MMP-2水平相当（P〉0.05）;中药组治疗前后血清MMP-2水平差异有统计学意义（P〈0.05）;西药组治疗前后MMP-2水平差异无统计学意义（P〉0.05）;治疗后中药组与西药组血清MMP-2水平差异无统计学意义（P〉0.05）。结论调气通络方对慢性脑供血不足病人降低MMP-2具有较好的作用,效果优于尼莫地平。     

养精种玉汤对原因不明不孕患者子宫内膜基质金属蛋白酶-9表达及性激素调节的影响

目的 探讨养精种玉汤对原因不明不孕患者黄体中期子宫内膜基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及其抑制物-1(TIMP-1)表达及性激素调节的影响。方法采用原位杂交、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,对22例原因不明不孕患者服用养精种玉汤前后黄体中期子宫内膜行MMP-9及TIMP-1mRNA检测,放射免疫法测定同期血清雌二醇(E2)、孕酮(P)水平。结果治疗后黄体中期血清E2水平为(451．501±226．342)pmol／L,显著高于治疗前水平(304．656±135．853)pmol／L,治疗前后比较,差异有显著性(P<0．015);治疗后血清P水平为(46．502±19,948)nmol／L,显著高于治疗前水平(33．782±15．459)nmol／L,治疗前后比较,差异亦有显著性(P<0．01)。治疗后黄体中期子宫内膜腺上皮细胞胞浆、胞核MMP一9mRNA阳性颗粒较治疗前加深,间质变化不显著,MMP-9mRNA表达水平(灰度比值)为0．617±0．186,显著高于治疗前水平0．490±0．370,治疗前后比较,差异有显著性(P<0．C15);治疗前后TIMP-1mRNA在腺上皮、间质表达变化不显著,灰度比值分别为0．588±0．191和0．621±0．146,差异无显著性(P>0．05)。相关分析提示,治疗前、后P的差值与MMP-9mRNA差值呈正相关(r=0．682,P<0．01)。结论养精种玉汤疏肝、补肾,提高黄体中期血清P水平,进而促进子宫内膜MMP-9基因表达,有利于子宫内膜细胞外基质降解而适于胚泡种植。     

冠心病稳定型心绞痛患者MPO及MMP-9表达变化

目的 探讨冠心病稳定型心绞痛患者血清髓过氧化物酶（MPO）和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）表达变化.方法 采用液相芯片分析系统同步检测206例经冠状动脉造影证实的稳定型心绞痛患者及28名健康对照者血清MPO和MMP-9表达程度,并分析其与冠脉病变程度的相关性.结果 稳定型心绞痛患者血清MPO、MMP-9表达程度较健康对照者升高（P〈0.01）;二者变化具有显著正相关（P〈0.01）,且与冠脉病变程度Gensini积分无明显相关.结论 稳定型心绞痛患者冠脉斑块具有一定程度炎性反应和不稳定性,其中表达程度升高者可能处于向不稳定型心绞痛过度的阶段.MPO和MMP-9可能成为判定稳定型心绞痛患者危险分层的依据.     

急性脑梗死患者血清基质金属蛋白酶-9变化及醒脑静注射液的干预作用

目的探讨血清基质金属蛋白酶-9（MMP-9）与急性脑梗死的关系,观察醒脑静注射液对MMP-9的干预作用。方法选择急性脑梗死患者46例,随机分为常规组与治疗组。常规组单纯采用西药常规治疗,治疗组在常规组基础上加用醒脑静注射液静滴,并在第1天、第3天、第8天、第14天时清晨空腹抽取肘静脉血,对比MMP-9变化。结果治疗组治疗后第14天MMP-9浓度降至正常,MMP-9浓度下降程度明显高于常规组,特别在大面积梗死亚组。结论MMP-9血清浓度与急性脑梗死面积大小成正比。经药物治疗后,MMP-9血清浓度无高峰出现,呈缓慢下降曲线,醒脑静注射液干预治疗组下降更明显。