慢性乙型肝炎患者血清IL-12、IL-6的水平变化和CD_（28）表达的研究

目的探讨IL-12、IL-6和淋巴细胞CD28分子在慢性乙型肝炎发病中的作机制。方法严格按照病例入选标准选取50例患者和20例健康志愿者,每例空腹抽取外周静脉血5 ml,3000 rpm离心10 min,吸取上层血清1.0 ml,放置-70℃冰冻保存备检,同时通过流式细胞仪检测所有患者外周血CD2＋8淋巴细胞所占比例。采用双抗体夹心ABC-ELISA法检测患者外周静脉血血清中细胞因子IL-12、IL-6的水平,比较慢性乙型肝炎患者与健康对照组及急性乙型肝炎之间Th1和Th2细胞因子表达的差异。结果HBeAg（-）慢性乙型肝炎患者IL-12、IL-6水平显著高于健康对照组（P〈0.01）,HBeAg（-）慢性乙型肝炎患者CD2＋8T淋巴细胞所占比例升高,显著高于健康对照组（P〈0.01）,急性乙型肝炎组水平最高,HBeAg（-）慢性乙型肝炎患者CD2＋8T淋巴细胞水平低于HBeAg（＋）慢性乙型肝炎患者,差异有统计学意义（P〈0.01）。结论慢性乙型肝炎患者Thl型细胞因子表达强弱与HBV感染肝脏的炎症活动密切相关;Th2细胞因子表达增强,与HBV的持续感染、免疫耐受形成有关;CD28分子在乙型肝炎病毒的清除过程中起重要作用。     

拉米夫定对慢性乙型肝炎血清IFN-γ和IL-10水平的影响

目的探讨拉米夫定治疗对慢性乙型肝炎患者血清IFN-γ和IL-10水平的影响及临床意义。方法根据患者对拉米夫定治疗12个月后不同应答情况分组进行回顾性研究,利用双抗体夹心ELISA法检测治疗前后不同时相点血清IFN-γ、IL-10水平,以与正常对照校对后的IFN-γ/IL-10比值作为Th1/Th2平衡指标,健康献血员作对照。结果HBeAg阳性完全应答组治疗前IFN-γ水平高于部分应答组,治疗后可见IFN-γ水平升高、IL-10水平降低,Th1/Th2平衡得以恢复并保持Th1优势应答;HBeAg阳性部分应答组和HBeAg阴性组治疗后IFN-γ和IL-10水平变化不大,Th1/Th2平衡仍以Th2为优势;YMDD变异后血清IFN-γ水平降低,血清IL-10水平升高。结论拉米夫定应答程度与治疗前血清IFN-γ水平有关;治疗后Th平衡的恢复是完全应答实现的保证;Th平衡可以作为HBeAg阴性慢性乙型肝炎患者血清免疫学应答的评价指标,YMDD变异对机体抗HBV免疫有一定的影响。     

乙型肝炎病毒感染患者外周血白细胞介素-18表达水平与乙型肝炎病毒感染的相关性探讨

目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)感染患者外周血白细胞介素(IL)-18表达水平与HBV感染的相关性。方法选取2018年5月至2019年5月我院收治的HBV患者190例,其中包含HBV携带者33例,急性乙型肝炎组30例,慢性乙型肝炎轻度组42例,慢性乙型肝炎中度组26例,慢性乙型肝炎重度组16例,重度急性肝炎组14例,重度慢性肝炎组29例,并选取同期我院接受健康体检的健康人23名作为健康对照组。分析所有入组人员IL-18水平,分析不同HBV载量患者IL-18表达情况,探讨HBV感染患者外周血IL-18表达水平与HBV感染的相关性。结果与健康对照组比较,急性乙型肝炎组与慢性乙型肝炎轻度组患者IL-18水平明显降低(P<0.05),病毒携带组患者IL-18水平无明显变化(P>0.05),慢性乙型肝炎中度组、重度组、重度急性肝炎组以及重度慢性肝炎组患者IL-18水平明显升高(P<0.05),随HBV感染所导致的肝脏炎症坏死程度加重IL-18水平呈现明显升高趋势;本次研究接受组织病理检测患者43例,其中HBV携带者23例,慢性乙型肝炎轻度组20例,G4分级IL-18水平高于G3、G2、G1以及G0患者(P<0.05),G3分级IL-18水平高于G2、G1以及G0患者(P<0.05),G2分级IL-18水平高于G1以及G0患者(P<0.05);HBV高载量患者IL-18水平低于中载量、低载量组(P<0.05),HBV中载量患者IL-18水平低于低载量患者(P<0.05);经相关性分析显示,外周血IL-18与HBV载量存在负相关性,差异有统计学意义(r=-0.862,P<0.05)。结论外周血IL-18水平与患者HBV载量呈负相关性,可以通过对患者IL-18水平进行分析的方式,了解患者疾病进展情况以及预后情况。     

HBV感染者血清及PBMC培养上清液IL-12水平的检测及意义

目的:探讨急性乙型肝炎、慢性乙型肝炎、HBsAg携带者及正常人血清和PBMC培养上清液中IL-12水平及其意义。方法:应用FicollHypaque密度梯度离心法从肝素化外周血中分离PBMC,用ELISA方法检测血清及PBMC培养上清液IL-12水平。结果:(1)血清IL-12:急性乙型肝炎血清IL-12阳性率30%,慢性乙型肝炎50%,HBsAg携带者10%,正常人为0。(2)PBMC培养上清液IL-12水平:急性乙型肝炎(121.09±97.43)pg/ml,慢性乙型肝炎(57.11±40.51)pg/ml,HBsAg携带者(25.4±15.86)pg/ml,正常人(38.35±33.86)pg/ml。结论:慢性乙型肝炎血清IL-12阳性率显著高于正常人,急性及慢性乙型肝炎PBMC培养上清液IL-12水平显著高于HBsAg携带者,提示HBV感染者血清IL-12阳性率及PBMC培养上清液IL-12水平与肝脏炎症活动有关。     

HBV感染者IL-18基因转录及其血清中含量测定

为探讨白细胞介素18(IL-18)在乙型肝炎病毒(HBV)感染中的作用,从68例HBV感染者(无症状携带者15例,慢性肝炎35例,重型肝炎18例)和24例健康献血员血液中分离出外周血单个核细胞(PBMC)及血清,应用RT-PCR及ELISA分别对IL-18基因的转录和血清中IL-18的含量进行检测。结果表明,重型肝炎组IL-18基因转录水平高于正常对照组(P<0.01),无症状携带者组低于正常对照组(P<0.05,P<0.01),慢性肝炎组与正常对照组差异无显著意义(P>0.05)。随着病情加重,IL-18水平上升。肝组织炎症活动度不同的慢性肝炎病人之间IL-18基因转录水平及其血清中的含量的差异均有显著意义(P<0.05),肝组织炎症程度越重,IL-18含量越高。结论:IL-18可能参与了宿主对HBV的免疫应答,与肝脏炎症程度相关。     

α—1b干扰素治疗慢性乙型肝炎疗效与血清白细胞介素—12水平的关系

为了探讨α-1b干扰素治疗慢性乙型肝炎疗效与血清白细胞介素-12水平的关系,应用ELISA双抗体夹心法动态检测36例接受α-1b干扰素治疗慢性乙型肝炎患者血清IL-12的水平,治疗后血管IL-12水平显著高于治疗前,治疗应答组（HBV清除和/或HBeAg/抗Hbe血清转换）血清IL-12水平显著高于无应答组。结论IL-12能特异性促进TH1细胞发育,是一种重要的抗HBV细胞因子。动态监测血清IL-12水平变化,是预测α-1b干扰素治疗慢性乙型肝炎患者疗效的良好指标之一。     

慢性重型肝炎血清白细胞介素12和血小板衍生生长因子水平

目的 探讨慢性重型肝炎患者血清白细胞介素12(IL-12)和血小板衍生生长因子(PDGF)水平测定的临床意义.方法 采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)检测48例慢性重型肝炎患者血清IL-12和PDGF水平,并与部分肝损害指标进行同步分析.结果 慢性重型肝炎患者体内IL-12和PDGF水平显著高于正常对照(P分别＜0.05,＜0.01).经内科综合基础治疗后,血清IL-12水平较治疗前有明显升高(P＜0.01),血清PDGF水平较治疗前显著降低(P＜0.01).结论 IL-12和PDGF作为观察慢性重型肝炎患者机体的免疫状态、炎症反应程度和肝纤维化进程的指标,可以反映肝炎活动的严重程度,具有重要的临床参考价值.     

乙型肝炎病毒检测指标及临床意义再认识

乙型肝炎表面抗原(HBsAg)是由HBV的基因编码所决定的,存在于Dane颗粒外壳及小球状和管状颗粒中。感染HBV后血中检出HBsAg的时间一般为4周至6个月。血清中检出HBsAg,可以是携带者,也可以发病。乙型肝炎之潜伏期、急性期、迁延性、慢性活动性及乙型肝炎后肝硬化,无症状携带者均可检出HBsAg,这提示他们均已被HBV感染。单项HBsAg(+)不能作为诊断肝炎的唯一依据,HBsAg     

免疫球蛋白 A肾病病人血清白细胞介素 -17、白细胞介素 -18表达变化与乙型肝炎病毒感染的相关性

目的探讨免疫球蛋白 A(IgA)肾病病人血清白细胞介素 -17(IL-17)、白细胞介素 -18(IL-18)表达变化与乙型肝炎病毒(HBV)感染的相关性。方法选取 2016年 3月至 2019年 3月南阳市中心医院 224例 IgA肾病病人,其中乙型肝炎病毒感染 67例作为感染组,未感染病人 157例作为未感染组。另选取无肾脏疾病的单纯乙型肝炎病毒感染病人 67例作为对照组。对比三组不同乙肝病毒脱氧核糖核酸( HBV-DNA)载量病人、乙肝表面抗原( HBeAg)阴性及阳性病人血清 IL-17、IL-18水平,分析血清 IL-17、IL-18对 IgA肾病病人 HBV感染的诊断价值及与 HBV-DNA载量、肝功能［谷草转氨酶( AST)、谷丙转氨酶( ALT)］相关性。结果三组血清 IL-17、IL-18水平对比差异有统计学意义( P<0.05),且未感染组 IL-17(12.68±2.13)ng/L、IL-18(360.37±     

慢性乙型肝炎患者血清IL-32、IL-6、IL-8检测及其意义

目的:探讨白细胞介素(IL)-32、IL-6、IL-8在慢性乙型肝炎(CHB)患者血清中的变化及其临床意义。方法:使用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)对120例慢性乙型肝炎患者(病例组)进行血清IL-32、IL-6、IL-8及ALT、ALB、TB、AST等肝功能指标水平检测,并与40例健康体检人员(对照组)做比较。结果:(1)病例组的血清IL-32、IL-6、IL-8水平均显著高于对照组(P<0.05),且CHB组的血清IL-32、IL-6、IL-8水平随轻度、中度、重度分型呈逐渐升高的趋势;(2)慢性乙型肝炎患者的血清IL-32水平与ALT、TB水平呈现正相关(r=0.54,P<0.05),与ALB水平呈负相关(r=-0.41,P<0.05);血清IL-6、IL-8水平与ALT、TB水平也呈正相关(r=0.39,P<0.05;r=0.36,P<0.05),与ALB水平呈显著负相关(P<0.05);(3)血清IL-32与IL-6、IL-8水平成正相关,(p<0.05);IL-6与IL-8也成显著正相关(r=0.62,P<0.05)。结论:慢性乙型肝炎患者血清中IL-32、IL-6、IL-8水平的变化,及其与肝功能的相关,能够反映出肝细胞损害的程度及病情严重程度,对慢性乙型肝炎的诊断及预后有着潜在的临床应用价值。     

慢性乙型肝炎患者血清TGF-β_1、IL-18的检测及临床意义

目的探讨慢性乙型肝炎(CHB)患者血清TGF-β1、IL-18水平的变化及其临床意义。方法采用ELISA法检测49例CHB患者及30例健康成人血清TGF-β1、IL-18水平,并同时检测各项肝功能指标。结果CHB患者血清TGF-β1、IL-18水平均显著高于对照组(P<0.01),且随CHB的严重程度增高而升高:血清TGF-β1、IL-18水平与血清各项肝功能指标呈正相关(P<0.01);HBeAg阴性组血清中TGF-β1水平较HBeAg阳性组明显低(P<0.01),HBeAg阳性组血清中IL-18水平较HBeAg阴性组明显低(P<0.01)。结论CHB患者血清TGF-β1、IL-18水平与肝细胞损伤指标呈正相关,这对于了解肝组织炎症活动及肝细胞损伤程度具有重要意义,联合检测TGF-β1及IL-18水平有助于肝脏炎症病变的诊断和评估。     

慢性乙型肝炎血清LHBs与HBV DNA、HBeAg、ALT的相关性

目的探讨HBV表面大蛋白(LHBs)与HBV DNA、HBeAg、ALT的相关性及LHBs指标在慢性乙型肝炎(CHB)诊治中的临床意义。方法选择324例CHB患者,分别检测LHBs、HBV DNA、HBeAg、ALT。血清LHBs和HBeAg采用ELISA法,HBV DNA检测采用荧光定量PCR法。结果 324例CHB患者血清中,随着HBV DNA载量的升高,LHBs的浓度呈上升趋势,两者之间有良好的相关性(r=0.97,P<0.01),且LHBs的阳性率也逐步增加,不同组别间LHBs阳性率差异均有统计学意义(P<0.05);在171例HBeAg阴性血清中,LHBs和HBV DNA的阳性率分别为66.08%和61.99%(P>0.05);171例HBeAg阴性血清中,113例LHBs阳性与58例LHBs例阴性组血清ALT有统计学差异(P<0.05)。结论 LHBs是反映HBV感染者,特别是HBeAg阴件患者体内病毒复制程度敏感、可靠指标;检测CHB患者血清中LHBs对于了解乙型肝炎肝细胞损伤程度、抗病毒疗效和评估预后具有一定的临床价值。     

慢性乙型肝炎乙肝病毒基本核心启动子变异的实验与临床研究

目的 研究乙型肝炎基本核心启动子(BCP)变异与慢性乙型肝炎病情的关系.方法 通过PCR及其产物直接检测128例慢性乙型肝炎(CHB)患者HBV,同时检测患者HBV定量及血清生化指标.结果 128例标本中nt1762、1764变异(双变异)共检出56例,nt1753、1762、1764变异(三变异)共检出10例,肝炎肝硬化(LC)组中双变异明显高于其他CHB组(P＜0.05);双变异组的HBeAg、ALB明显低于无变异组(P＜0.05),三变异组HBeAg明显低于双变异组(P＜0.05).结论 BCP区双变异可减少HBeAg的表达,引起肝功能受损严重并导致肝硬化的发生,BCP区尚有新发现的变异如三变异也可影响HBeAg的表达.     

慢性乙型肝炎血清HBV DNA定量检测及其临床意义

目的 探讨慢性乙型肝炎（CHB）病人血清HBV DNA含量与HBeAg及肝损害程度的关系。方法 应用定量PCR法和ELISA法检测116例CHB病人血清HBV DNA含量与HBVM。结果 血清HBeAg阳性组HBV DNA含量显著高于HBeAg阴性组（P＜0．05）;CHB轻、中、重度血清HBV DNA含量逐渐降低（P＜0．05）。结论 基因水平证实HBeAg是HBV复制指标;随着肝损害程度加重,血清HBV DNA含量逐渐下降;定量检测HBV DNA对判断肝损害程度、指导抗病毒治疗有重要意义。     

Low serum HBV DNA levels and development of hepatocellular carcinoma in patients with chronic hepatitis B: a case-control study

AIM: To investigate the level of hepatitis B virus (HBV) DNA in Chinese chronic hepatitis B (CHB) patients below which hepatocellular carcinoma (HCC) is unlikely to occur. METHODS: A total of 92 CHB patients diagnosed with HCC were recruited; 184 CHB patients without HCC, matched for age, sex and HBeAg status were included as controls. HBV DNA levels were performed at the time of HCC development and at the same age time points for control group. RESULTS: The median HBV DNA level in HCC patients was 1.7 x 10(6) copies/mL compared with 2.2 x 10(5) copies/mL in controls (P = 0.006). In HCC patients, 21 (22.8%) were HBeAg(+), with no significant difference in HBV DNA levels compared with controls. Seventy-one (77%) HCC patients were HBeAg(-) with median HBV DNA level of 3.2 x 10(5) copies/mL, compared with 6.0 x 10(4) copies/mL in controls (P = 0.006). In HBeAg(-) patients, the control group had significantly greater proportion of patients having HBV DNA levels <10(5) and <10(4) copies/mL compared with HCC patients. Fifteen per cent of all HCC patients had HBV DNA levels <10(3) copies/mL. CONCLUSIONS: In HBeAg(+) patients, HBV DNA levels were high in both HCC and control patients. In HBeAg(-) patients, HCC was more likely to develop in patients with HBV DNA level >10(4) copies/mL. However, 15% of the patients with HCC had HBV DNA levels <10(3) copies/mL.     

CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞与慢性乙型肝炎病毒感染的关系

目的 探讨调节性T细胞（Treg）在慢性乙型肝炎病毒感染中的免疫调节作用。方法 采用流式细胞术检测慢性活动性肝炎患者、乙型肝炎病毒携带者、乙型肝炎恢复者及健康对照者外周血CIN^＋T细胞中的CIN^＋CD25^＋Foxp3^＋调节性T细胞的比例。采用免疫组织化学法检测肝组织中Foxp3的表达。统计分析外周血中CIN^＋CD25^＋Foxp3^＋调节性T细胞的比例数与血清HBeAg和HBVDNA含量的关系。结果 外周血CIN^＋T细胞中CIN^＋CD25^＋Foxp3^＋调节性T细胞的比例数在慢性活动型肝炎组和乙型肝炎病毒携带组均高于健康对照组（P〈0．05），乙型肝炎病毒携带者组高于乙型肝炎恢复组（P〈0．05）。Foxp3在慢性活动型肝炎组肝组织中的阳性率和阳性细胞数均高于乙型肝炎病毒携带者组（P〈0．05）。外周血HBeAg（＋）患者Treg的比例数高于血清HBeAg（-）患者Treg的比例数（t=1．67．P〈0．05）。患者外周血CIN^＋CD25^＋Foxp3^＋Treg的比例数与血清HBV DNA含量呈正相关（r=0．56，P〈0．01）。结论 CIN^＋CD25^＋Foxp3^＋调节性T细胞可能与乙型肝炎病毒感染慢性化及乙型肝炎病毒的清除有关。     

调节性B细胞在慢性乙型病毒性肝炎患者外周血中的表达

目的 分析慢性乙型病毒性肝炎（简称慢性乙肝,CHB）患者外周血IL-10＋ CD19＋调节性B细胞（Breg）的表达情况及其临床意义.方法 选取CHB患者61例,其中HBeAg阳性患者26例,对照组30例,抽取EDTA抗凝外周血,分离外周血单个核细胞（PBMCs）,anti-IL-10-PE,anti-CD19-APC抗体进行染色后,流式细胞术分析IL-10＋ CD19＋ Breg的表达情况,同时分析HBeAg阳性和阴性患者Breg表达差异以及Breg与CHB临床指标的相关性;ELISA分析血清IL-10表达水平.结果 CHB和HCs组Breg分别为1.75％（1.20％ ～2.55％）和0.78％（0.55％～1.40％）,CHB组Breg表达高于HCs组,两组差异有统计学意义（Z=-4.54,P＜0.01）;CHB患者中HBeAg阳性患者Breg为2.39％（1.68％～2.86％）,较阴性患者1.28％（1.05％～2.25％）显著升高（Z=-3.354,P=0.001）;CHB和HCs组血清IL-10分别为6.80（5.41～8.42） pg/mL和5.75 （4.40～6.54） pg/mL,两者差异有统计学意义（Z=-2.697,P=0.007）,并且CHB组IL-10与Breg呈正相关关系（r =0.335,P=0.008）.结论 慢性乙肝患者外周血Breg表达显著升高,且可能受到HBeAg的影响.     

HBeAg阳性和阴性慢性乙型肝炎病毒学病理学及免疫组化对照研究

目的探讨HBeAg阳性（e＋CHB）与HBeAg阴性慢性乙型肝炎（e-CHB）病毒学、病理学及肝组织免疫组化的特征、差异及其内在规律。方法按照纳入标准选择e＋CHB患者107例;e-CHB患者102例。检测生化学;乙肝五项;HBV DNA定量;肝组织HE染色,MASSON染色及网状纤维染色,进行病理诊断;Knodell HAI评分,纤维化评分;肝组织免疫组化半定量法检测HBsAg、HBcAg。结果临床诊断与病理诊断符合率e＋CHB组62.6%,e-CHB组72.5%;e-CHB组纤维化程度较e＋CHB组重,纤维化评分较高（P〈0.01）。e＋CHB组HBV DNA载量明显高于e-CHB组,有统计学差异（t=5.38,P=0.000）。e-CHB组HBV DNA载量和G分级、评分间有相关性（Pearson相关系数：0.24,P=0.041）;肝组织HBcAg表达强度与血清HBV DNA定量间正相关（P〈0.01）。结论 e-CHB患者肝组织病理损害较重;e＋CHB和e-CHB患者绝大部分存在病理损害。提倡适时进行肝穿刺活检,准确诊断和及时抗病毒治疗。