幽门螺杆菌的长丝体变异及返祖

我们采用改良Hp培养基(HBSV培养基)对Hp进行自然诱导,发现Hp球形变异体在含有适量蛋黄和血清的培养中容易返祖及传代,部分培养超过5天的菌落中有长丝体形成,或在球变体两侧形成长短不等的菌丝。长丝体变异的菌落与一般无异,但形态多较大,长丝体约为典型菌的3～10倍以上,菌体弯曲不规则或缠绕,粗细不均,胞壁缺陷,但可在普通渗透压的平板上生长。长丝体不稳定,接种于Hp或HBSV培养基返祖成典型的“S”形Hp。本研究提出这样的假说:Hp变异由典型“S”形→球变→长丝体和巨球体变异→返祖成典型Hp,Hp的这种变异可能存其传染和感染复发中起重要作用。     

幽门螺杆菌的形态变异及返祖

目的幽门螺杆菌（Ｈｐ）在体外很易发生球形变,目前一般认为是不能培养的退化状态．而对Ｈｐ在环境中生存方式和如何感染大量人群仍不清楚,为此本研究对Ｈｐ的形态变化尤其是球形变的返祖进行了研究．方法本研究通过对１８株Ｈｐ在不同条件下的培养,观察其生存及形态变化,并在加有鸡蛋和小牛血清的空弯培养基上及加有血清有布氏肉汤培养基中是进行培养和返祖,观察其变异规律．结果Ｈｐ可在室温液体中繁殖,１８株中观察到３株球形体Ｈｐ在室温下的返祖,除常见球形变外的Ｈｐ杆状弯曲、长杆状、短杆状、长丝体、巨球体、丝球体、原生质体及细小“Ｓ”和弧形变异．并根据Ｈｐ形态变化的顺序及表型,初步发现Ｈｐ由典型“Ｓ”或多螺旋形态变为杆状弯曲、长杆状、短杆状、然后变为球形、长丝体、巨球体、丝球体、原生质体的规律．部分变异体在一定条件下可返祖．结论Ｈｐ易发生多形变化,有一定规律．可在室温下生长繁殖,球形体可在Ｈｐ鸡蛋培养基上或室温液体培养基中返祖．提示Ｈｐ的球形变在其感染和治疗后的复发中起重要作用     

幽门螺杆菌的球形体及体外返祖

本研究通过对18株Hp在改良的Hp鸡蛋培养基和多种条件下的液体培养.观察到Hp的部分变异规律及3株球形体Hp在室温下的返祖，研究提示Hp可在室温下繁殖，球形体可在室温下返祖，Hp的球形变在其Hp的感染和治疗后的复发中起重要作用.     

幽门螺杆菌的球形体及体外返祖

本研究通过对18株 Hp 在改良的 Hp 鸡蛋培养基和多种条件下的液体培养,观察到 Hp 的部分变异规律及3株球形体 Hp 在室温下的返祖,研究提示 Hp 可在室温下繁殖,球形体可在室温下返祖,Hp 的球形变在其 Hp 的感染和治疗后的复发中起重要作用。     

幽门螺杆菌研究的现状与展望

大量的研究证据表明,幽门螺杆菌(Hp)是慢性活动性胃炎的病原菌:是消化性溃疡的重要致病因素;是胃MALT淋巴瘤的重要致病因子;还可能是胃癌的协同致癌原。 Hp的典型形态为S状、海鸥状弯曲,但Hp在体外长期培养时可出现球形变,由于球体有完整的胞壁和鞭毛,故不属于严格的L型菌。研究表明,球形     

小肠结肠炎耶氏菌L型的初步研究

5株小肠结肠炎耶氏菌用人工诱导方法获得二株L型细菌,血清型为O:5,27;O:37。与去氧胆酸钠-抗生素诱导法和溶菌酶诱导法结果一致。二株经抗生素诱导者在改良Kagan培养基上出现典型的L型菌落,涂片染色可见菌体呈长丝体和膨大的巨形体,能通过0.45μm的除菌滤膜,在高盐肉汤内呈颗粒状沉淀生长。L型细菌与抗血清试管凝集滴定比原型和返祖型低2～3个稀释度,生化反应出现对一些糖类的发酵能力减弱,水杨素、七叶灵、肌醇等由原型的阳性反应变为阳性,从而可致耶氏菌生化分型的改变。L型细菌对一些抗生素的敏感性与原型和返祖型有差异。     

幽门螺杆菌群体遗传中多态现象与选择平衡

幽门螺杆菌(Hp)是自然界分布最广、人群感染率最高、株间变异最多、临床差异最大的细菌之一，这些特性一度给诊疗工作带来许多困惑。Martinetal曾这样写道：将Hp冠以“坏的”、“非常坏的”头衔的同时，一定还有“中性的”或“好的”菌株存在。随着群体遗传学、分子生物学研究的不断深入使Hp具有的庞大异质性逐渐浮出水面。Hp基因确有许多中性变异，也确有一些变异以不同的毒力梯度(Viralene egradiant)作用于宿主；随着人类社会的进步Hp的病原学地位也在发生变化。     

不同环境中人芽囊原虫包囊的结构观察

目的 观察人芽囊原虫包囊在不同环境中的光学和超微结构的形态特点。方法 从粪便分离人芽囊原虫，转种至改良的Jones培养基培养72h后，再转种至混合纤维素脂微孔滤膜成囊培养基和Suresh成囊培养基中培养。采用光学和电子显微镜对培养基中与粪便中的包囊进行光学和超微结构的观察。结果 光镜下观察，新鲜粪便中的包囊微小圆球形，具有折光性，不同的个体大小悬殊，HE染色可显示囊壁有3层。用Suresh成囊培养基培养的包囊圆形或椭圆形，中心体色淡，内有大小不等的孢子体。混合纤维素脂微孔滤膜培养的包囊均较大，有空泡型、颗粒型、薄壁与厚壁包囊之分。透射电镜下观察，无纤维层的裸露包囊形态大都是圆形或卵圆形。包囊直径为14μm。包囊呈典型的人芽囊原虫核，其线粒体较多，胞质中糖原呈大小不一块状。结论 包囊在不同环境中的形态基本相同、大小不一、结构多型。     

一株在普龙亚培养基上菌落形态变异鼠疫菌的发现与研究

自从１９２９年 首先发现鼠疫菌的变异现象以来，在这方面积累了不少资料。特别是菌落形态方面的变异早已被人们所认识。本文报道的菌落形态变异菌株只在普龙亚培养基（龙胆紫、亚硫酸钠琼脂培养基）上生长时菌落形态明显变异，而在普通琼脂培养基上生长时仍呈现典型的鼠疫茵落形态。这在以往材料中尚未见到类似报道。通过对其报道说明普龙亚培养基对特殊变异菌株培养出的菌落形态不具有典型鼠疫苗落的特征，在鼠疫监测中必须引起足够的重视。这对鼠疫监测工作中培养基的选择和应用可能提供有益的资料。１材料和方法１】材料】 １１Ｗ株来源…     

钩端螺旋体培养基的改进

在国内首次应用硫酸铵盐析法提取兔血清白蛋白,然后加适量刺激钩端螺旋体(以下简称钩体)的生长物质,配制成钩体实验培养基浓缩液。用13个血清群95个血清型株的3～15代传代培养试验证实:菌株发育丰盛,通常细胞浓度约达2.0×10~8/ml,菌形正常、运动活泼、视野清晰、培养物血清学特性无改变;因不含免疫球蛋白,故对各血清型株不易引起变异,保持固有血清学特性。适合于一般或专业实验室作分离、研究、保藏钩体菌种用。本培养基浓缩液用法简便,经适当稀释后即可使用。     

壳聚糖体外抗幽门螺杆菌机制研究

目的 探讨壳聚糖抗幽门螺杆菌(Hp)的作用机制。方法 将Hp与壳聚糖溶液作用24和48h后，取上清液测天冬氨酸转氨酶(AsT)活性和葡萄糖含量．并在透射和扫描电镜下观察Hp的细菌形态和超微结构变化。结果Hp与壳聚糖溶液作用后上清液巾渗漏的AST活性和葡萄糖含量显著高于对照组(P＜0．01或P＜0．05)；透射电镜见Hp肜态多样，以球形体为主，并可见V形、U形和不规则形；Hp胞壁变薄不完整，有的菌体细胞壁部分或全部脱落消失．细菌轮廓模糊，结构不清，且发生不同程度的凹陷变形，甚至穿孔和破碎；胞质内容物稀疏，空隙明显扩大；细菌内部结构消失或分布异常，胞质不均匀或密度下降，出现高电子密度颗粒。扫描电镜见Hp形态多样，以球形体为主．并可见U形和不规则形；细菌表面广泛改变，粘附有可折射物质，外观呈毛刺状。结论 壳聚糖可能通过破坏Hp外膜的结构、功能和通透性，使细菌内容物渗出，细菌破裂；且从破损的细胞外膜进入Hp菌内．与胞质作用，扰乱其代谢这两种机制发挥抗Hp作用。     

干细胞培养基成球培养法筛选结肠癌干细胞的生物学特性

目的探讨干细胞培养基成球培养法筛选结肠癌干细胞的相关蛋白表达及生物学特性。方法用干细胞培养基成球培养法筛选结肠癌干细胞,Western blot检测干细胞相关蛋白的表达,流式细胞仪检测细胞周期;同时检测干细胞增殖、黏附、耐药及侵袭能力,并摸索结肠癌干细胞最佳冻存条件。结果用干细胞培养基成球培养法成功培养出了结肠癌细胞球,检测发现干细胞相关蛋白表达增强,静止期细胞比例明显升高,细胞增殖速度慢,黏附性、耐药性、侵袭性均强于亲本细胞。结论干细胞培养基成球培养法筛选的细胞球中富集了肿瘤干细胞,为结肠癌干细胞的研究提供了良好的细胞模型。     

肺部不动杆菌感染32例临床疗效分析

不动杆菌属于葡萄糖非发酵菌．即是一群不能利用葡萄糖或仅能以氧化形式利用葡萄糖的革兰阴性球杆菌．主要有硝酸盐阴性杆菌(Ac．anitratum)和多形模仿菌(Ac．lwoffi)。形态为革兰阴性球杆菌，近似球菌。临床标本或固体培养基培养的细菌多数呈双排列，与奈瑟菌属相似。该菌无芽胞．多数无鞭毛．专性需氧．普通培养基上生长良好。不动杆菌作为院内感染常     

不同环境中人芽囊原虫包囊的结构观察

目的　观察人芽囊原虫包囊在不同环境中的光学和超微结构的形态特点。　方法　从粪便分离人芽囊原虫 ,转种至改良的Jones培养基培养 72h后 ,再转种至混合纤维素脂微孔滤膜成囊培养基和Suresh成囊培养基中培养。采用光学和电子显微镜对培养基中与粪便中的包囊进行光学和超微结构的观察。　结果　光镜下观察 ,新鲜粪便中的包囊微小圆球形 ,具有折光性 ,不同的个体大小悬殊 ,HE染色可显示囊壁有 3层。用Suresh成囊培养基培养的包囊圆形或椭圆形 ,中心体色淡 ,内有大小不等的孢子体。混合纤维素脂微孔滤膜培养的包囊均较大 ,有空泡型、颗粒型、薄壁与厚壁包囊之分。透射电镜下观察 ,无纤维层的裸露包囊形态大都是圆形或卵圆形。包囊直径为 14 μm。包囊呈典型的人芽囊原虫核 ,其线粒体较多 ,胞质中糖原呈大小不一块状。　结论　包囊在不同环境中的形态基本相同、大小不一、结构多型。     

幽门螺杆菌根除治疗前后快速尿素酶试验诊断的准确性

目的 评价快速尿素酶试验(RUT)在根除治疗前后诊断幽门螺杆菌(Hp)感染的准确性。方法 选择250例接受胃镜检查的患者，123例无Hp根除治疗史，127例为Hp根除治疗后复查患者。每例患者取胃窦和胃体活检标本各3块，分别用于RUT、细菌培养和病理组织学检查。以细菌培养及病理组织学检查结果作为“金标准”，即培养和(或)组织学检查结果阳性者为Hp阳性，而培养和组织学检查结果同时阴性者为HP阴性或HP根除。结果 末行Hp根除治疗的患者RUT正确的诊断了86例Hp阳性中的84例和37例Hp阴性中的34例，其敏感性和特异性分别为97．7％和91.9％。根除治疗后RUT敏感性和特异性分别为64.3％和99.0％。然而，根除治疗后6个月以上复查胃镜，RUT敏感性和特异性均达100％。结论 根除治疗前和根除治疗后6个月以上复查，RUT诊断Hp感染准确性高。     

阿司匹林和吲哚美辛对幽门螺杆菌生长的抑制作用

目的 探讨体外培养条件下，阿司匹林和吲哚美辛对幽门螺杆菌（Hp)生长的影响，以及阿司匹林存在时，Hp对几种常用抗生素敏感性的影响。方法 Hp接种于含不同浓度阿司匹林或吲哚美辛的布氏肉汤中培养，测定不同培养时间菌液的吸光度，稀释法计数活菌数，革兰染色观察细菌形态，琼脂稀释法测定阿司匹林和吲哚美辛的最低抑菌浓度（MIC），E-检测法检测Hp对甲硝唑，克拉霉素及羟氨苄青霉素的MIC，结果 阿司匹林和吲哚美辛可抑制Hp的生长，这种抑制作用呈剂量依赖性，与培养基pH改变无关，400μg/ml阿司匹林或100μg/ml吲哚美辛体外培养48h可使Hp完全溶解破坏，阿司匹林和吲哚美辛对Hp的体外MIC90分别为512和128μg/ml。阿司匹林存在时，分别使100%，75%及75%的Hp对羟氨苄青霉素，甲硝唑及克拉霉素的MIC降低，提示阿司匹林可使Hp对上述抗生素的敏感性增高。结论 阿司匹林和吲哚美辛可抑制Hp的生长。阿司匹林可提高Hp对甲硝唑，克拉霉素及羟氨苄青霉素的敏感性。     

兔外周血间充质干细胞的分离培养及诱导分化

目的 研究间充质干细胞(MSCs)在创伤修复中的作用并为MSCs作为组织工程种子细胞奠定实验基础.方法 抽取创伤后兔外周血,用密度梯度离心法分离纯化单个核细胞;α-MEM培养基培养,并测定细胞生长曲线;应用成骨和成软骨诱导剂定向诱导,检测分化能力.结果 原代培养的MSCs呈圆形、梭形、多角形,传代纯化后呈均一的长梭形.其生长曲线均呈典型的"S"形.外周血MSCs成骨诱导后7 d碱性磷酸酶染色阳性;21 d出现钙沉积,茜素红染色呈阳性.成软骨诱导2周后Ⅱ胶原免疫细胞化学染色阳性.结论 皮肤损伤刺激后可从外周血中获取MSCs,体外分离培养的MSCs具备向成骨及成软骨细胞分化特性;可用于组织工程种子细胞的研究.     

幽门螺杆菌适应性球形变异相关蛋白的筛选及鉴定

目的对幽门螺杆菌（Hp）在有氧胁迫条件下由螺旋体转变成球形体的适应性调节蛋白进行筛选及鉴定。方法运用双向电泳技术比较Hp螺旋体与球形体的全菌蛋白表达谱,差异蛋白进行胶内酶切,肽混合物使用基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱仪（MALDI-TOF-MS）进行质谱分析,将肽质量指纹谱数据输入互联网上的蛋白质数据库进行检索。结果获得7个与Hp球形变异相关的适应性调节蛋白,即翻译延长因子Tu（EF-Tu）、丙酮酸-黄素蛋白氧化还原酶（POR）、黄素氧化还原蛋白（FldA）、尿素酶G（UreG）、热休克蛋白10（Hsp10）烷基化氢化氧化酶（Ahp）、超氧化物歧化酶（SOD）。结论共筛选出7个与Hp球形变异相关的适应性调节蛋白,对有氧胁迫下Hp球形体的形成机制研究和抗Hp药物靶位和疫苗候选靶位的筛选具有参考价值。     

癌组织中幽门螺杆菌球形体的超微结构研究

目的　揭示癌组织中幽门螺杆菌 (Hp)球形体的超微结构特征。 方法　通过透射电镜观察Hp球形体感染阳性的 4例胃癌、2例食管癌组织中Hp球形体的超微结构。结果　Hp球形体多散在性分布于癌巢、癌间质以及进入癌细胞、巨噬细胞等细胞胞质。Hp球形体与其他细菌的L型一样 ,形态不规则 ,呈多形性 ,且大小不等、胞浆电子密度不等、胞壁缺失等。Hp球形体有A、B两种类型 ,A种体积较小 ,胞浆致密 ,细胞膜上带有鞭毛 ,此种活性较强 ;B种体积较大 ,胞浆疏松 ,细胞膜上不带鞭毛 ,此种可能已退变。结论　Hp球形体仍具有活性 ,因而 ,在Hp的传播、相关疾病的治疗复发和相关肿瘤的发生过程中起重要的作用。     

幽门螺杆菌基因多态性与克拉霉素耐药性关系的研究

目的研究幽门螺杆菌（Helicobacter pylori,Hp）对克拉霉素耐药情况及与23S rRNA基因点突变的关系。方法因上消化道症状进行胃镜检查的189例患者获得胃活检组织,微需氧培养得到坳,提取11例敏感菌和和19例耐药菌的DNA,对23S rRNA基因进行PCR扩增,再对敏感菌和耐药菌的23S rRNA基因进行全基因测序对比和生物信息学分析。结果Hp菌株对克拉霉素的耐药率是29．2％;19个对克拉霉素耐药的却菌株中17株出现23S rRNA基因突变,各种突变的比例分别为A→G36．8％、G→A21．5％、C→T15．8％、A→C10．5％和T→C5．3％。11例敏感株及2例耐药株均未发现23S rRNA基因突变。结论克拉霉素耐药的却菌株比较常见,23SrRNA基因的多个不同位点突变均与跏对克拉霉素耐药有关,而A—G和G—A突变是主要的形式。