中华麦饭石对诱癌大鼠γ-干扰素和脾NK细胞活性的作用

为了探讨中华麦饭石对诱癌大鼠γ-干扰素和NK细胞活性的作用,给Wistar大鼠皮下每周注射二甲肼20mg/kg体重共15周诱导大肠癌,同时饮用10％中华麦饭石浸液27周,在实验第8周、16周和27周分别用常规微板法和同位素释放法检测大鼠血中γ-干扰素滴度和脾NK细胞活性。结果显示,中华麦饭石不仅能升高大鼠大肠癌发生前期和早期的γ-干扰素滴度和脾NK细胞活性(P<0.001),而且能升高大肠癌晚期大鼠的γ-干扰素滴度和脾NK细胞活性。其作用机制可能与其富含的微量元素有关。     

病毒性心肌炎患儿血清白细胞介素-15、IFN-γ的变化及自然杀伤细胞活性的相关研究

目的:探讨血清白细胞介素-15(IL-15)、γ-干扰素(IFN-γ)及自然杀伤细胞(NK细胞)活性在病毒性心肌炎(VM)患儿血清中的检测及意义.方法:应用酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)检测观察组患儿及正常对照组儿童的血清IL-15、IFN-γ水平;采用乳酸脱氢酶释放法检测观察组患儿及正常对照组儿童的NK细胞的活性水平.结果:VM患儿血清IL-15浓度为(348.58±25.36)ng/L,IFN-γ浓度为(60.40±20.10)ng/L,均显著高于对照组;观察组患儿急性期血清NK细胞活性高于正常对照组.结论:IL-15参与了VM早期免疫防御,急性期血清IL-15水平和IFN-γ、NK细胞活性呈明显相关性.     

白细胞介素-15重组体对HBsAg核酸疫苗的免疫佐剂作用

白细胞介素-15(IL-15)属螺旋结构细胞因子家族，它能促进T细胞、自然杀伤(NK)细胞和B细胞增殖及分化；具有诱导淋巴细胞产生γ干扰素(IFN-γ)及肿瘤坏死因子α的作用。IL-15与疫苗共同免疫时可刺激抗体产物增加，细胞毒性T淋巴细胞(CTL)活性加强。将IL-15表达质粒与HBsAg DNA疫苗共同免疫小鼠，以观察其对小鼠免疫应答的影响。     

中药"克疣灵"对尖锐湿疣病人细胞免疫水平调节作用的临床和实验研究

目的 探讨中药“克疣灵”口服液对经6Gyγ-线照射后的SD大鼠及尖锐湿疣(CA)病人外周血清白细胞介素(IL-18)、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平、自然杀伤细胞(NK)活性，以及对局部瘤体组织IL-18、TNF-α表达水平的调节作用机理。方法 采用6Gyγ-线连续照射SD大鼠(0．6Gy／min，距^60Coγ源0．1m，15min／次／日，15日)造成细胞免疫缺陷的实验动物病理模型，并灌饲高低剂量“克疣灵”口服液。临床研究设“克疣灵”口服液治疗组45例，病人，给予“克疣灵”口服液．50ml，3次／日，口服；局部外用“克疣灵”外搽剂4次／日，共6周。对照组40例病人，肌注α-1b基因工程干扰素300万U／次，3次／周；外搽人重组α-2b干扰素凝胶4次，共6周。动物灌饲与病人疗程结束后，采用酶联免疫吸附试验(ELISA)双抗体夹心法测定外周血清IL-8、TNF-α水平，CA病人局部瘤体组织IL-18、TNF-α表达水平，采用同位素释放法测定动物脾脏：NK细胞与人NK细胞活性。结果 “克疣灵”口服液能显著提高造模动物与CA病人外周血清IL-18、TNF-α水平，增强NK细胞的活性，疗后治疗组瘤体治疗部位IL-18、TNF-α表达水平显著高于对照组。结论 “克疣灵”口服液具有显著的正向免疫调节作用，能显著改善造模动物细胞免疫缺陷，增强CA病人的细胞免疫能力。     

硫酸脑苷酯活化Ⅱ型 NKT 细胞对支气管哮喘小鼠Ⅰ型 NKT 细胞活性的影响

目的：观察硫酸脑苷酯活化Ⅱ型自然杀伤(natural killer,NK)T 细胞对支气管哮喘(简称哮喘)小鼠Ⅰ型 NKT 细胞数量及活性的影响。方法将24只 BALB/c 小鼠随机分为对照组、哮喘组和硫酸脑苷酯组,每组8只。流式细胞术检测肺Ⅱ型及Ⅰ型 NKT 细胞的数量及分泌细胞因子水平；酶联免疫斑点吸附法检测脾Ⅱ型及Ⅰ型 NKT 细胞分泌细胞因子水平；CCK8试剂盒检测脾Ⅰ型 NKT 细胞的增殖能力。结果硫酸脑苷酯组小鼠肺Ⅱ型 NKT 细胞分泌 IL-4和γ干扰素(IFN-γ)水平明显高于哮喘组(P <0.01),但肺及脾Ⅰ型 NKT 细胞分泌 IL-4和 IFN-γ水平和脾Ⅰ型 NKT 细胞对α半乳糖神经酰胺的增殖反应明显低于哮喘组(P 值均<0.01)。结论硫酸脑苷酯活化Ⅱ型 NKT 细胞可以抑制哮喘小鼠Ⅰ型 NKT 细胞的活性。     

白细胞介素-23对炎症性肠病患者外周血自然杀伤细胞的免疫调节作用

目的 研究白细胞介素(IL)-23对炎症性肠病(IBD)患者外周血中自然杀伤(NK)细胞促炎细胞因子分泌和细胞毒作用的影响,探讨其在IBD发病中的意义.方法 利用免疫磁珠分离12名健康人、16例克罗恩病(CD)患者和25例溃疡性结肠炎(UC)患者外周血NK细胞.体外培养NK细胞,并予空白刺激、IL-23刺激、IgG刺激或IL-23+IgG联合刺激.酶联免疫吸附试验法检测细胞培养上清中肿瘤坏死因子(TNF)-αa和干扰素(IFN)-γ分泌水平.流式细胞仪检测经不同刺激培养的NK细胞对K562细胞的细胞毒作用.结果 正常对照组的NK细胞经人IgG和IL-23单独刺激后TNF-α、IFN-γ的分泌水平未明显增高(P值均＞0.05),二者联合刺激则能显著促进TNF-α、IFN-γ分泌(P值均＜0.05).单独应用IgG刺激CD和UC患者NK细胞分泌TNF-α、IFN-γ的效果不明显(P值均＞0.05).单独应用IL-23则具刺激作用(P值均＜0.05),二者联合应用的刺激作用更明显(P值均＜0.01).IL-23单独刺激和联合刺激均不能增强正常对照组NK细胞的细胞毒作用(P值均＞0.05).但单独应用IL-23可增强UC和CD患者NK细胞的细胞毒作用(分别为51.5%±7.1%和50.2%±8.7%,P值均＜0.05),且联合刺激可进一步增强该作用(分别为65.3%±6.6%和62.4%±5.5%,P值均＜0.01).结论 IL-23能刺激IBD患者NK细胞分泌TNF-α和IFN-γ,并能增强NK细胞的细胞毒作用,可能直接参与了IBD的发病过程.     

中华麦饭石预防大鼠实验性肝癌时微量元素的作用

为探讨中华麦饭石预防大鼠肝癌时微量元素的作用．给Wistar大鼠食用二甲基奶油黄饲料诱发肝癌，同时饮用10％中华麦饭石浸液26周。实验结束时用ICP法检测大鼠血中10种微量元素。结果显示，实验组对盱癌有预防作用的Ba、Mn、Se、Zn、Fe、Mo和Si均显高于对照组(p＜0.01)，Cu和Cr显低于对照组(p＜0.01)，除Si外，实验组和正常对照组各微量元素差异无显意义(p＞0.05)．结果表明．中华麦饭石对肝癌的预防作用可能与微量元素的作用有关。     

HIF-1α通过调控miR-544对A549肺癌细胞免疫逃逸及 NCR1/NKP46通路的影响

目的探究缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在A549肺癌细胞免疫逃逸中的作用,并初步探究可能作用机制。方法体外培养A549肺癌细胞,转染si-HIF-1α质粒分为Control组、si-NC组、si-HIF-1α组;转染miR-544 mimics质粒分为Control组、NC组、miR-544 mimics组。免疫印迹法检测转染后细胞中HIF-1α蛋白表达;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法miR-544表达;将转染后三组细胞与NK-92MI细胞以靶效比1:5共培养,Elisa法检测培养液中干扰素-γ(IFN-γ)、白介素-2(IL-2)、肿瘤坏死因子-ɑ(TNF-ɑ)水平;CCK8法检测NK-92MI细胞免疫杀伤率;荧光素酶活性检测HIF-1α、miR-544(miR-544、NCR1)调控关系;流式细胞术检测细胞NKP46水平。结果与Control、si-NC组相比,si-HIF-1α组A549细胞中HIF-1α表达降低,共培养组细胞IFN-γ、IL-2、TNF-ɑ水平升高,NK-92MI细胞对A549细胞免疫杀伤率升高,miR-544表达升高(P0.05)。在HIF-1α3’UTR-Wt细胞中,与si-NC组相比,miR-544 mimics组荧光素酶活性降低(P0.05)。与Control、NC组相比,miR-544 mimics组IFN-γ、IL-2、TNF-ɑ水平降低,NK-92MI细胞对A549肺癌细胞免疫杀伤率降低,NCR1表达、NKP46比例降低(P0.05)。在NCR1 3’UTR-Wt细胞中,与NC组相比,miR-544 mimics组荧光素酶活性降低(P0.05)。结论体外抑制A549肺癌细胞中HIF-1α表达后能够促进NK细胞释放免疫因子,增强NK细胞免疫杀伤性,进而抑制A549细胞免疫逃逸,其作用可能与调控miR-544靶向抑制NCR1/NKP46通路实现的。     

甘草酸二铵对二甲基亚硝胺诱导肝纤维化大鼠肝脏胶原增生沉积的影响

目的观察甘草酸二铵的抗肝纤维化作用。方法二甲基亚硝胺腹腔注射诱导大鼠肝纤维化模型,以甘草酸二铵7mg/100g体重灌胃治疗,每日1次,共4周,并以γ干扰素为对照药物。观察大鼠体重、肝脾重量等一般情况;肝脏苏木精-伊红染色与丽春红胶原染色,分级分期观察肝组织的炎性坏死与胶原纤维沉积变化;检测血清肝功能变化与肝组织羟脯氨酸含量。结果模型大鼠肝脏胶原纤维间隔形成,肝小叶与肝窦内胶原增生沉积明显;脾脏明显增大;血清ALT活性升高,肝组织羟脯氨酸含量上升。甘草酸二铵可显著降低模型大鼠肝组织羟脯氨酸含量,减轻肝脏内胶原纤维增生沉积,降低血清ALT活性。与γ干扰素比较作用无明显差异。结论甘草酸二铵有良好的抗二甲基亚硝胺诱导的大鼠肝纤维化效果,其作用机制可能与药物减轻肝脏炎症,抑制肝脏羟脯氨酸与胶原生成有关。     

中华麦饭石预防大鼠实验性肝癌时微量元素的作用

为探讨中华麦饭石预防大鼠肝癌时微量元素的作用,给 Wistar 大鼠食用二甲基奶油黄饲料诱发肝癌,同时饮用10%中华麦饭石浸液26周。实验结束时用 ICP 法检测大鼠血中10种微量元素。结果显示,实验组对肝癌有预防作用的 Ba、Mn、Se、Zn、Fe、Mo 和 Si 均显著高于对照组(p<0.01),Cu 和 Cr 显著低于对照组(p<0.01)。除 Si 外,实验组和正常对照组各微量元素差异无显著意义(p>0.05)。结果表明,中华麦饭石对肝癌的预防作用可能与微量元素的作用有关。     

肝脏自然杀伤细胞在小鼠急性肝衰竭中的作用

目的 探讨肝脏自然杀伤(NK)细胞在3型鼠肝炎病毒(MHV-3)诱导的小鼠急性肝衰竭中的作用.方法 取6～8周龄雌性Balb/cJ小鼠,腹腔注射100 pfu MHV-3,采用流式细胞术检测感染MHV-3 0、24、48、70 h后的Balb/cJ小鼠肝脏、脾脏、外周血和骨髓中NK细胞的百分率及肝脏NK细胞表面活化分子CD69表达的百分率.细胞内细胞因子染色法检测肝脏NK细胞分泌干扰素γ的水平.非放射性细胞毒试验检测肝脏NK细胞的杀伤活性. 结果Balb/cJ小鼠感染MHV-3后,肝脏NK细胞的比例显著升高,在感染48 h后达到峰值(43.9%±2.3%),约为感染前的4倍,随后仍维持在较高水平至小鼠死亡;外周血NK细胞比例同样明显升高,在感染48 h后达到峰值(18.0%±5.4%),但随后显著同落,至70 h仅为1.3%±0.6%,脾脏和骨髓NK细胞比例均先明显减少后又有所上升.肝脏NK细胞在MHV-3感染48 h后其表面活化分子CD69表达明显上调,杀伤活性显著增强,同时分泌干扰素Y的水平也显著增加. 结论 Balb/cJ小鼠感染MHV-3后,来自骨髓和脾脏的NK细胞在肝脏迅速大量募集和活化,且杀伤活性显著增强,分泌干扰素Y水平也显著增加,表明肝脏NK细胞在MHV-3导致的急性肝衰竭中可能发挥着关键作用.     

注射用胸腺法新治疗老年慢性支气管炎急性发作期的临床疗效分析

注射用胸腺法新(thymosinα1 for injection)是一类具有生物活性的细胞免疫调节剂,它对人体T细胞的成熟起促进作用,并使内源性α干扰素(IFN-α)和产生γ干扰素(IFN-γ)的效应增强,还能使自然杀伤细胞(NK)和淋巴细胞(CD3+,CD4+,CD8+)的活性增加;可用于治疗各种细胞免疫功能低下疾病及肿瘤的辅助治疗;Gold-stein等将330名65岁至100岁(平均74岁)的老年人在进行流感疫苗接种的同时,注射胸腺法新1.6 mg/次,每周2次,共4周,发现凡注射胸腺法     

玉屏风口服液抑制小鼠前列腺癌皮下移植瘤的免疫学机制

目的探讨玉屏风口服液对小鼠前列腺癌皮下移植瘤的抑制作用及其免疫学机制。方法将体外培养的小鼠前列腺癌RM1细胞接种于C57B/L小鼠皮下,构建小鼠前列腺癌皮下移植瘤模型,荷瘤小鼠随机分为4组,分别灌胃给予玉屏风口服液0、0.5、1和2 ml,1次/d,共28 d,末次给药的第2天眼球取血处死小鼠,取瘤测瘤体积,苏木素-伊红(HE)染色检测组织学变化,取脾细胞检测淋巴细胞增殖能力和自然杀伤(NK)细胞杀伤活性,ELISA方法检测血清中白细胞介素(IL)-2、IL-4、干扰素(IFN)-γ及肿瘤坏死因子(TNF)-α水平。结果玉屏风口服液处理后,小鼠前列腺癌皮下移植瘤体积缩小,肿瘤组织出现坏死及炎细胞浸润,淋巴细胞增殖能力和NK细胞杀伤活性增强,血清中IL-2、IFN-γ及TNF-α含量增加。结论玉屏风口服液可抑制小鼠前列腺癌皮下移植瘤的生长,其抑瘤作用与增强小鼠免疫功能有关。     

甲状腺癌患者外周血T细胞亚群和NK细胞活性动态变化及临床意义

采用流式细胞仪检测80例甲状腺癌患者(观察组)术前及术后2周、4 a外周血T细胞亚群和NK细胞活性,40例健康体检者为对照组.结果 与对照组比较,观察组术前CD 4 T细胞、CD 4 T/CD 8 T值及NK细胞活性明显降低,而CD 8 T 细胞升高,与TNM分期有关;术后2周较术前CD 4 T细胞、CD 4 T/CD 8 T值及NK细胞活性明显升高,而CD 8 T细胞降低;术后4 a随访发现,上述指标变化趋势同术后2周,无复发转移者升高或降低幅度更显著.提示甲状腺癌患者T细胞亚群及NK细胞活性检测对分析病情、判断疗效及估计预后有一定价值.     

肝癌组织、癌旁组织中HBsAg、HCV抗原表达与T细胞亚群及NK活性的相关性研究

研究肝癌组织、癌旁组织中HBsAg、HCV抗原表达与T细胞亚群及NK活性的相关性。采用免疫组织化学方法(SP法)对肝癌组织及癌旁组织中的HBsAg、HCV抗原表达进行了标记和分析,同时对外周血T细胞亚群及 NK活性进行检测。肝癌患者中,CD4 细胞减少,CD8 细胞升高,CD4 ／CD8 比值及NK细胞的活性均比正常对照组明显降低,且HBsAg阳性、HCV抗原阳性者比阴性者下降更显著。肝癌组织、癌旁组织中HBsAg、HCV抗原表达与外周血T细胞亚群及NK活性Spearman相关性分析,与NK细胞、CD4 细胞、CD8 细胞、CD4 ／CD8 相关系数分别为-0．67,-0．28,0．35,-0．50(P<0．001)。肝癌患者出现免疫紊乱与乙肝、丙肝病毒感染有关,且混合感染者免疫功能紊乱较显著,提示抗病毒治疗可能改善肝癌患者的免疫功能。     

重症胸部创伤大鼠Th1／Th2平衡变化的实验研究

目的检测重症胸部创伤大鼠受伤后7d外周血单个核细胞（PBMC）培养上清液γ-干扰素（IFN-γ）、白细胞介素4（IL-4）水平,研究其Th1、Th2细胞功能的动态变化。方法雄性SD大鼠20只随机分为对照组与创伤组,创伤组大鼠进行胸部撞击建立重症胸部创伤模型,对照组进行假撞击。分别于受伤前及受伤后第1、3、5、7天取全血各1．0ml,分离PBMC体外培养72h,收集上清液冻存,ELISA法集中检测IFN-γ、IL-4浓度。结果两组大鼠伤后IFN-γ、IL-4水平均迅速升高,但创伤组IFN-γ水平低于对照组,而IL-4水平高于对照组。两组大鼠IFN-γ上升倍数／IL-4上升倍数（△IFN-γ/△IL-4）比值伤后均升高,创伤组在伤后第3天恢复1．0左右、并继续降低至0．34,对照组伤后7d内始终高于1．0。结论轻度创伤可以诱导大鼠Th1细胞功能加强;重症创伤大鼠在伤后早期以Th1细胞功能增强为主,创伤急性期后随着Th2细胞功能持续增强、Th1细胞功能受到抑制,发生Th1细胞向Th2细胞的漂移。     

针刺血清对胃溃疡大鼠胃黏膜细胞磷脂酶Cγ-1活性的影响

目的:观察针刺胃经穴后的血清对胃溃疡大鼠胃黏膜细胞磷脂酶Cγ-1(PLCγ-1)活性的影响.方法:大鼠60只随机分为溃疡血清组、胃经血清组、胆经血清组、胃经血清 PD153035组和胆经血清 PD153035组,采用水浸束缚法制作胃溃疡模型,利用链霉蛋白酶消化法分离胃黏膜细胞,分别用表皮生长因子受体(EGFR)抑制剂PD153035和血清孵育胃黏膜细胞,应用酶联免疫吸附(ELISA)法检测PLCγ-1活性.结果:胃经血清组(13.0±7.5nkat/g)大鼠胃黏膜细胞PLCγ-1活性与溃疡血清组(6.5±0.3nkat/g)比较有显著性差异(P=0.01);胃经血清组大鼠胃黏膜细胞PLCγ-1活性与胆经血清组(7.2±1.8nkat/g)比较有显著性差异(P=0.02);胃经血清组大鼠胃黏膜细胞PLCγ-1活性与胃经血清 PD153035组(7.4±2.7nkat/g)比较有显著性差异(P=0.02).结论:针刺胃经穴后的血清能刺激胃黏膜细胞中PLCγ-1的活化,并且存在经脉-脏腑的特异性联系.     

小鼠口服弓形虫DNA混合疫苗的免疫保护反应

目的 观察携带弓形虫表面抗原复合基因重组沙门氏菌经口免疫BALB/c小鼠所诱导的免疫反应。 方法 构建弓形虫主要表面抗原SAG1、SAG2复合基因真核表达质粒，将其转入减毒鼠伤寒沙门氏菌BRD509 (BRD509/pSAG1/SAG2)，经口服免疫BALB/c小鼠，以携带空载体质粒的减毒沙门氏菌BRD509及生理盐水（NS）组为对照，分别于每次免疫前和免疫后断尾取血，并于末次免疫后第4周取小鼠脾脏测定T淋巴细胞增殖活性、天然杀伤细胞（NK细胞）活性和T细胞亚群；ELISA法测定IgG抗体及血清中的细胞因子干扰素（IFN-γ），白介素-4（IL-4）。与末次免疫后4周，每只小鼠腹腔注射0.1 ml(10⁵)弓形虫RH株速殖子攻击，观察小鼠存活时间。 结果 免疫组小鼠的IgG抗体水平明显提高，滴度为1∶100；NK细胞杀伤活性和T细胞增殖活性也明显增强，其中NK细胞杀伤活性为85%±7%，T细胞增殖指数为2.83，与对照组相比差异有统计学意义(P < 0.05)。免疫鼠攻击感染后平均存活时间比对照组长5 d。 结论 弓形虫口服DNA混合疫苗可诱导小鼠产生保护性免疫。     

IL-12对伯氏疟原虫红内期感染小鼠IFN-γ、TNF-α、IL-10水平的影响

IL-12是一种具有多种生物学活性的细胞因子，可诱导T细胞，NK细胞产生IFN-γ及TNF—α等细胞因子。增强T细胞、NK细胞毒活性并调节CD2Th细胞向Th1分化等。已有报道，IL-12在伯氏疟原虫(P．berghei，P．b)感染中具有诱导免疫保护作用和产生毒副反应的双重活性，诱导保护作用而减少毒副反应。剂量是关键。本文拟观察IL-12对伯氏疟原虫红内期感染小鼠IFN-γ、TNF-α、IL-10水平的影响，     

IL-18的研究进展及其与哮喘的关系

IL-18是一种分布广泛的细胞因子，具有诱导IFN-γ等细胞因子的产生，增强NK细胞活性，对其他细胞因子也有重要的调节作用，从而在介导炎症，调节机体的免疫功能方面具有重要作用。现将其生物学活性及其在哮喘中的作用综述如下。