晚期糖基化终产物对不同血液透析龄患者单核细胞分泌功能的影响

目的:观察晚期糖基化终产物对不同血液透析龄患者单核细胞分泌炎症细胞因子的影响,探讨晚期糖基化终产物对慢性肾功能衰竭和透析患者微炎症的作用机制。方法:①选择广东医学院附属医院肾内科2004-12/2006-02收治的慢性肾功能衰竭患者63例,其中保守治疗组16例,血液透析组47例,血液透析组按透析时间长短分为短期、中期及长期透析3组,以15例健康体检者为正常对照。②收集清晨空腹或透析前肝素抗凝全血5.0～6.0mL,分离外周血单个核细胞后分3组继续培养24h:AGE-BSA组给予糖基化的牛血清白蛋白(25mg/L)刺激,牛血清白蛋白组给予牛血清白蛋白(25mg/L),空白对照组不给刺激。③培养24h后收取培养上清液采用ELISA法测定白细胞介素1β和肿瘤坏死因子α的质量浓度。结果:①外周血单个核细胞白细胞介素1β分泌量:自发状态(空白对照)的正常对照组及保守治疗组分别为(10.08±0.77),(14.32±0.54)ng/L,短期、中期及长期透析组高于保守治疗组[(78.55±7.89),(56.16±1.66),(37.03±1.78)ng/L,P<0.05],且分泌量随血液透析时间的增加而减少(P<0.05);给予牛血清白蛋白刺激后,各组的白细胞介素1β分泌量与空白对照比变化不大(P>0.05);给予糖基化的牛血清白蛋白刺激后,各组的白细胞介素1β分泌量均显著高于空白对照(P<0.01),短期、中期及长期透析组低于保守治疗组[(132.09±23.66),(94.09±13.07),(68.14±10.56),(160.34±17.06)ng/L],且随血液透析时间的增加分泌量减少(P<0.05)。②外周血单个核细胞肿瘤坏死因子α分泌量:自发状态(空白对照)的正常对照组及保守治疗组分别为(8.57±0.32),(10.89±0.68)ng/L,短期、中期及长期透析组高于保守治疗组[(43.12±8.01),(30.78±5.34),(19.06±3.91)ng/L,P<0.05],且分泌量随血液透析时间的增加而减少(P<0.05);给予牛血清白蛋白刺激后,各组的肿瘤坏死因子α分泌量与空白对照比变化不大(P>0.05);给予糖基化的牛血清白蛋白刺激后,各组的肿瘤坏死因子α分泌量均显著高于空白对照(P<0.01),短期、中期及长期透析组低于保守治疗组[(72.62±20.11),(51.08±14.78),(35.03±6.67),(103.14±9.05)ng/L],且随血液透析时间的增加分泌量减少(P<0.05)。结论:血液透析患者普遍存在微炎症状态,晚期糖基化终产物参与慢性肾功能衰竭微炎症发生与发展,长期血液透析导致单核细胞功能紊乱而加重肾功能衰竭的进展。     

同型半胱氨酸和晚期糖基化终产物影响血管内皮细胞凋亡的协同效应

目的:观察两种尿毒症毒素同型半胱氨酸和晚期糖基化终产物是否协同影响血管内皮细胞的凋亡程度。方法:实验于2006-01/03在中南大学湘雅三医院中心实验室完成。①参考Makita的报道体外制备晚期糖基化终产物,将牛血清白蛋白50g/L、D-葡萄糖0.5mol/L、磷酸盐缓冲盐液0.2mol/L(pH7.4)和蛋白酶抑制剂用0.22μm滤膜过滤除菌,37℃孵育60d。采用荧光分光光度分析法鉴定。晚期糖基化终产物修饰的牛血清白蛋白中晚期糖基化终产物含量为90.52U/mg。②将不同浓度的同型半胱氨酸和晚期糖基化终产物单独或联合作用于人脐静脉内皮细胞株ECV304细胞,分为空白对照组;同型半胱氨酸干预组(分别加入0.05,0.1,0.5,1.0,5.0mmol/L的同型半胱氨酸);同型半胱氨酸 晚期糖基化终产物联合干预组(分别加入0.05,0.1,0.5,1.0,5.0mmol/L的同型半胱氨酸和终浓度为50mg/L的晚期糖基化终产物)。③采用Hoechst染色和流式细胞技术检测细胞凋亡程度。结果:①Hoechst33258染色检测内皮细胞凋亡结果:同型半胱氨酸 晚期糖基化终产物联合干预组在0.05～5.0mmol/L各个浓度较对照组和单纯同型半胱氨酸组都有明显差别(P<0.01)。②流式细胞仪检测内皮细胞凋亡结果:联合干预组总凋亡率为(15.31±2.14)%,早期凋亡率为(9.16±1.38)%,均显著高于同型半胱氨酸或晚期糖基化终产物单独干预组(P<0.01)。结论:同型半胱氨酸和晚期糖基化终产物对血管内皮细胞的凋亡具有协同诱导作用。     

抗晚期糖基化终产物受体抗体对晚期糖基化终产物引起心肌细胞胞内游离钙瞬变的影响

目的:观察抗晚期糖基化终产物受体(RAGE)抗体对晚期糖基化终产物刺激引起的体外培养乳鼠心肌细胞胞游离钙瞬间升高的影响。方法:实验于2004-07/12在南方医科大学基础部中心实验室及南方医科大学心血管内科实验室进行。①取新生1-3dSD大鼠心脏在Petridish培养皿中行原代心肌细胞培养。②培养3-5d的原代心肌细胞分为2大组,第1大组:人血清白蛋白组、AGEs-HSA组、抗RAGE抗体10,50mg/L组;第2大组:人血清白蛋白组、AGEs-HSA组、丙种球蛋白10,50mg/L组。处理组试验前用相应浓度抗体提前预孵2h。③将处理好的细胞用荧光钙离子指示剂Fluo-3/AM标记后,于激光共聚焦显微镜下观察刺激后细胞内游离钙浓度(以荧光值表示)变化。人血清白蛋白组给予人血清白蛋白200mg/L刺激,其他各组给予晚期糖基化终产物修饰的人血清白蛋白200mg/L刺激。结果:①第1大组组间比较:AGEs-HSA组细胞荧光峰值和荧光值升高幅度均高于人血清白蛋白组[147.47±21.72,98.66±28.51;(78.47±22.94)%,(26.93±6.72)%;P均<0.05],抗RAGE抗体10,50mg/L组细胞荧光峰值和荧光值升高幅度均小于AGEs-HSA组[68.48±20.94,59.78±5.95;(-33.21±21.57)%,(1.80±7.00)%;P均<0.05]。②第2大组组间比较:AGEs-HSA组和丙种球蛋白10,50mg/L组细胞荧光峰值均高于人血清白蛋白组(61.72±28.62,59.60±17.20,39.04±5.62,P<0.05),后3组间比较无差异。结论:抗RAGE抗体可以阻断晚期糖基化终产物引起的心肌细胞胞内游离钙离子浓度升高,提示晚期糖基化终产物引起心肌细胞胞内游离钙离子浓度升高是由RAGE介导的。     

骨形成蛋白-7对晚期糖基化终产物诱导大鼠腹膜间皮细胞上皮-间叶转化的影响

目的探讨骨形成蛋白-7(BMP-7)对晚期糖基化终产物诱导大鼠腹膜间皮细胞上皮-间叶转化(EMT)的影响。方法晚期糖基化终产物诱导发生上皮-间叶转化的体外培养大鼠腹膜间皮细胞,分别经含5 ng/mL及80 mmol/L晚期糖基化终产物的M199培养基和含10 ng/mL BMP-7及80 mmol/L晚期糖基化终产物的M199培养基培养48 h,以含80 mmol/L晚期糖基化终产物的M199培养基为对照,应用实时定量PCR法检测间皮细胞E-cadherin、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原(Collagen I)、转化生长因子β1(TGF-β1)、血管内皮生长因子(VEGF)mRNA的表达;应用Western印迹法检测E-cadherin、α-SMA蛋白的表达;应用ELISA法检测间皮细胞TGF-β1、VEGF蛋白表达水平。结果 BMP-7作用后,上皮-间叶转化的大鼠腹膜间皮细胞E-cadherin mRNA和E-cadherin蛋白表达水平显著增加(P<0.05)。BMP-7作用后,上皮-间叶转化的大鼠腹膜间皮α-SMA、Collagen I、TGF-β1、VEGFmRNA和α-SMA、TGF-β、VEGF蛋白表达水平显著下降(P<0.05)。结论 BMP-7能上调上皮-间叶转化的大鼠腹膜间皮细胞E-cadherin表达和下调α-SMA、Collagen I、TGF-β、VEGF表达,BMP-7能逆转晚期糖基化终产物诱导大鼠腹膜间皮细胞EMT。     

吡哆胺对体外晚期糖基化及其终产物形成的抑制作用

目的体外观察吡哆胺对晚期糖基化和晚期糖基化终产物(AGEs)形成的抑制作用。方法应用牛血清白蛋白-葡萄糖试验和N-乙酰-甘氨酰-赖氨酸甲基酯-核糖两种体外试验,观察吡哆胺对糖基化反应及AGEs形成的抑制效果。结果牛血清白蛋白-葡萄糖试验显示,吡哆胺对糖基化反应具有明显抑制效果。在50 mmol/L和200 mmol/L葡萄糖浓度下,当吡哆胺浓度为50 mmol/L时,相对抑制率均在50%以上。200 mmol/L吡哆胺对糖基化的抑制作用最强,其相对抑制率分别达到92.12%和86.73%。N-乙酰-甘氨酰-赖氨酸甲基酯-核糖试验证明,吡哆胺能明显抑制晚期糖基化产物AGEs的形成。随着吡哆胺剂量的增大,吡哆胺对AGEs形成的抑制作用明显增强。结论吡哆胺对体外晚期糖基化反应和AGEs形成有明显抑制作用。     

晚期糖基化终产物刺激单核细胞产生活性氧的信号传导机制

目的 ：探讨晚期糖基化终产物（advanced glycation end products,AGE）诱导单核细胞产生活性氧的机制。方法采用密度梯度离心法分离健康成人外周血单核细胞,经AGE修饰的人血清白蛋白（AGE-HSA）刺激后,用化学发光法测定活性氧（reactive oxygen species,ROS）的生成;分别应用超氧化物歧化酶（SOD）、NADPH氧化酶特异性抑制剂apocynin、抗AGE受体（RAGE）抗体预处理单核细胞,观察AGE-HSA刺激单核细胞生成ROS的变化。结果 AGE-HSA可以诱导单核细胞产生ROS。SOD可以有效的清除AGE刺激单核细胞后分泌的大量的ROS;抗RAGE抗体、apocynin通过阻断AGE与RAGE的结合及抑制NADPH氧化酶的活性可以有效地抑制ROS产生。结论 AGE可通过RAGE激活NADPH氧化酶产生ROS。     

晚期糖基化终产物诱导大鼠腹膜间皮细胞上皮-间叶转化

目的探讨晚期糖基化终产物对大鼠腹膜间皮细胞上皮-间叶转化(EMT)的影响,建立大鼠腹膜间皮细胞EMT模型。方法体外培养的大鼠腹膜间皮细胞经含40 mmol/L晚期糖基化终产物(AGEs)、80 mmol/L AGEs的M199培养基分别培养48、72 h;以正常M199培养基和含80 mmol/LBSA的M199培养基为对照。采用相差显微镜观察细胞形态学改变,应用实时定量PCR法检测间皮细胞E-cadherin、α-SMA、Collagen I、TGF-β1、VEGF mRNA的表达;应用Western blot检测E-cadher-in、α-SMA蛋白的表达;应用ELISA法检测间皮细胞TGF-β1、VEGF蛋白表达水平。结果①AGEs(40 mmol/L、80 mmol/L)刺激后,大鼠腹膜间皮细胞由典型的上皮细胞形态逐渐变为梭形及不规则形,类似肌成纤维细胞;②AGEs(40 mmol/L、80mmol/L)刺激后,大鼠腹膜间皮细胞α-SMA、Collagen I、TGF-β1、VEGF mRNA和α-SMA、TGF-β、VEGF蛋白表达水平显著增加(P<0.05);③AGEs(40 mmol/L、80 mmol/L)刺激后,大鼠腹膜间皮细胞E-cadherin mRNA和E-cadherin蛋白表达水平显著下降(P<0.05)。结论 AGEs能上调α-SMA、Collagen I、TGF-β、VEGF表达和下调E-cadherin表达,AGEs诱导大鼠腹膜间皮细胞EMT。     

晚期糖基化终产物对健康成人外周血单核细胞肿瘤坏死因子α和血红素加氧酶-1表达的影响

目的:探讨不同浓度晚期糖基化终产物(advanced glycation end-product,AGE)对健康成人外周血单核细胞肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)及血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)表达的影响。方法:分离健康成人外周血单核细胞,随机分组,利用不同浓度体外制备的AGE修饰牛血清白蛋白(AGE-BSA)刺激,观察不同时间点每组细胞培养上清液中TNF-α表达量及细胞内HO-1mRNA的表达。结果:AGE-BSA可增加健康成人外周血单核细胞TNF-α的释放并可诱导健康人外周血单核细胞内HO-1mRNA的表达。结论:AGE可上调健康人外周血单核细胞TNF-α和细胞内HO-1mRNA的表达。     

晚期糖基化终产物对健康成人外周血单核细胞肿瘤坏死因子α和血红素加氧酶-1表达的影响

目的：探讨不同浓度晚期糖基化终产物（advanced glycation end-product，AGE）对健康成人外周血单核细胞肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）及血红素加氧酶-1（heme oxygenase-1，HO-1）表达的影响。方法：分离健康成人外周血单核细胞，随机分组．利用不同浓度体外制备的AGE修饰牛血清白蛋白（AGE-BSA）刺激，观察不同时间点每组细胞培养上清液中TNF-α表达量及细胞内HO-1 mRNA的表达。结果：AGE—BSA可增加健康成人外周血单核细胞TNF-α的释放并可诱导健康人外周血单核细胞内HO-1 mRNA的表达。结论：AGE可上调健康人外周血单核细胞TNF-α和细胞内HO-1 mRNA的表达     

炎症相关细胞因子与Ph阴性骨髓增殖性肿瘤的相关性

目的 探讨经典型骨髓增殖性肿瘤(MPN)患者血清炎症相关细胞因子[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、白细胞介素2受体(IL-2R)、IL-6、IL-8、IL-10]水平及其临床意义.方法 选取50例费城染色体(Ph)阴性(Ph-)的初诊MPN患者[MPN组,其中真性红细胞增多症(PV)16例、原...     

韶关市农村留守儿童孤独感状况调查

目的了解广东省韶关市农村地区留守儿童孤独感现状及其影响因素。方法对韶关市某地区两所农村小学3～6年级学生中的489名留守儿童采用儿童孤独量表和自编调查表进行问卷调查。结果17．6％留守儿童存在孤独感，不同性别孤独感发生率无差异性，不同年龄及不同年级间孤独感发生率差异均有极显著性（P〈0.01）；随年级增加，孤独感发生率呈下降趋势（X^2趋势=5．970，P〈0.05）。留守儿童孤独感与健康状况、学习成绩、学习困难程度、父母教育方式、父母间关系和老师教育方式等因素显著相关（P〈0.01～0．05）。结论农村地区留守儿童中存在一定程度的孤独感问题，老师和家长应以正确的态度和方法对待留守儿童，以减少其孤独感的发生。     

产科新生儿不同部位经皮测黄报警预值的可靠性观察

目的对比观察产科新生儿不同部位经皮胆红素（TCB）报警预值的可靠性。方法132例产科新生儿采取随机数字分组法分为正常产组和剖宫产组各66例,新生儿均于产后第4天同一时间点应用KJ8000经皮测黄仪分别测量额、胸、腹、额胸、额胸腹TCB值,TCB〉12．9mg／dl者,取得亲属同意抽取静脉血检测血清胆红素（SB）,对比分析不同部位TCB及其与sB值的差异。结果两组分别有17例或21例达到TCB报警预值。两组TCB或sB相同方法及相同部位比较,差异无统计学意义（P〉0．05）;两组TCB不同部位对比,额部值最低、胸部值最高,且与其他部位同组对比差异均有统计学意义（P〈0．01）;两组sB值对比差异无统计学意义（t=1．53,P〉0．05）,与不同部位TCB对比均以胸部数值差异无统计学意义（P〉0．05）,而与其他部位TCB两组差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论正常产与剖宫产新生儿术后sB对比差异无意义;TCB动态监测以胸部结果更接近SB。     

Determination of loss of quality of life

Physiatrists are a valuable resource in legal settings, where assessment of functional capacity to perform work and of future medical needs must be determined. Physiatrists help determine what future medical care is needed to restore and maintain an individual at the maximum level of life function. This article focuses on the use of a quality of life (QOL) rehabilitation model, rather than a medical model, for enhancing functional performance, modifying environments, and facilitating patient coping. We discuss use of the QOL model to describe and influence a patient's physical, psychological, cognitive, vocational/economic, and social/leisure domains.     

护士选择性应用静脉留置针现状分析

[目的]了解护士选择性应用留置针的现状以及主要影响因素,为指导临床留置针合理应用提供理论依据。[方法]采用自设问卷对138名护士留置针选择性使用情况及其影响因素进行调查。[结果]约1／4的护士并不知道应选择性使用留置针,近60％的护士在实际工作中选择留置针的意识较差;护士选择性应用留置针的决策受多因素影响;不同科室、职称及是否具有带教资格选择性应用留置针的影响因素不尽相同;绝大部分护士希望参加选择性应用留置针相关内容的培训。[结论]临床护士操作前考虑留置针选择的意识有待加强。建议实施有针对性的培训以提高护士选择性应用留置针的能力。     

血液透析患者家庭护理提供者的生活质量调查

目的:了解江汉油田血液透析(血液透析)患者家庭护理提供者(护理者)的生活质量。方法:对60例血液透析患者的家庭护理提供者进行一般情况和生活质量综合评定问卷(QOLI-74)调查,并进行相关性和多因素回归分析。结果:家庭护理提供者各维度的主观生活满意度与其客观指标相关,但也与其需求、年龄、文化程度、与患者的关系有关。结论:客观状态是影响主观生活满意度的重要因素,同时应考虑护理者的需求、年龄、文化程度、与患者的关系对护理者主观生活满意度的影响。