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目的比较目前常用的外周血DNA提取的三种方法。方法用三种方法提取全血DNA,通过吸光度检测、PCR扩增分析各自优缺点。结果三种方法提取的DNA纯度和作为模板PCR扩增无显著差别,只是操作时间和成本不同。结论天根离心柱型试剂盒应用比较广泛,Promega试剂盒操作时间最短,Chelex-100方法最经济,适合微量提取。 相似文献
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3种方法从血清标本中提取HBV DNA的比较 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:比较3种从血清标本中提取HBVDNA方法的效果,选出一种快速、简单、高效提取血清中HBVDNA的方法。方法:收集40例经荧光PCR定量检测HBVDNA含量全部大于1.0×104copies·ml-1的血清标本,用3种方法提取标本中的HBVDNA,然后进行荧光定量PCR检测,对检测结果进行统计学分析。结果:用裂解液煮沸法提取的HBVDNA模板含量最高,与另外2种方法之间的差异有显性(P<0.05)。结论:裂解液煮沸法是一种快速、简单、高效的提取血清中HBVDNA的方法。 相似文献
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目的建立从极少量血凝块中快速提取基因组DNA的方法,并对其应用价值进行评价。方法分别对TIANamp基因组DNA提取试剂盒和TaKaRa全能基因组DNA提取试剂盒进行方法改良,并提取DNA,比较2种方法提取DNA的含量和纯度;并用人P450酶系的CYP3A4*4引物对提取的DNA进行PER扩增,检测生物活性。结果用TaKaRa全能基因组DNA提取试剂盒提取的DNA在含量、纯度和生物活性上均优于用TIANamp基因组DNA提取试剂盒提取的DNA。结论应用TaKaRa全能基因组DNA提取试剂盒可以对极少量的血凝块进行基因组DNA提取,方法简便快速,在分子生物学研究中有重要的实际意义和推广价值。 相似文献
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不同种类中药材的DNA提取方法 总被引:4,自引:0,他引:4
目的 根据不同种类中药材来选择DNA提取方法。方法 根据作者对各种药材鉴定的实践经验,结合国内外有关代表性的论文,进行归纳和整理。结果 分析了不同DNA提取方法适用范围和局限性。结论 根据药材种类、贮存时间,选取合适的提取方法和适当的样品量。 相似文献
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文献报道的组织提取DNA的方法,大多操作步骤复杂,花费时间长。我们介绍一种“一步法”提取DNA,可明显提高从石蜡切片中提取DNA量,且不需要额外试剂或特殊仪器,花费时间短。1材料和方法1.1组织标本58份病理档案石蜡包埋组织块,在室温中保存直至被选用。1.2主要试剂、仪器DNA提取液“一步法”:变性缓冲液终浓度:1×PCR缓冲液,0.45%NP40,0.45%Tween20,100μg/ml PK。酚-氯仿提取法:10%SDS,10mg/ml PK,饱和酚,氯仿,醋酸钠等。Tag DNA聚合酶为上海生物工程技术有限公司产品,三磷酸去氧核糖核苷(dNTP)为北京TaQGENE公司产品,DNA… 相似文献
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目的 比较筛选最适于贝母属药用贝母的总DNA提取方法。方法 利用试剂盒法、改良的CTAB法、改良的SDS法提取贝母属药用贝母的总DNA;通过核酸蛋白检测仪及琼脂糖凝胶电泳方法检测其浓度和纯度;进行ISSR-PCR扩增检测所得总DNA质量。结果 3种方法均可提取出产量较高的基因组DNA,但试剂盒法相较提取的总DNA纯度最高,质量最好,并且均能扩增出丰富清晰的条带,稳定性高,操作简单耗时短。改良的CTAB法、SDS法提取的总DNA纯度、质量均次于试剂盒法,操作复杂耗时长,不适用于下游的分子生物学实验。结论 试剂盒法为贝母属药用贝母总DNA提取的最佳方法,其所得样品适用于PCR及其他分子生物学研究。 相似文献
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摘要:目的比较结直肠癌患者粪便细菌DNA提取方法的优缺点及获得DNA的质与量,有利于结直肠癌患者肠道相关分子微生态的研究。方法采用传统法,化学裂解法和TIANamp bacteria DNA Kit试剂盒法,提取粪便中细菌DNA,比较其作为模板,用于细菌16SrRNA基因PCR扩增后凝胶电泳的优缺点及用核酸蛋白检测仪Biophotmeter测定提取DNA的质与量。结果传统法提取DNA的量及纯度均较低(22.37±2.45,3.24±0.22),化学裂解法和试剂盒方法提取的量及纯度均较高,(分别为33.87±2.06,2.18±0.44;38.60±9.00,1.70±0.09);传统法与化学裂解法、试剂盒法相比差异有统计学意义(P〈0.05),化学裂解法与试剂盒法相比差异无统计学意义(P〉0.05),但以试剂盒法为佳。结论3种方法各具优缺点,不同的DNA提取方法会影响结直肠癌患者肠道相关分子微生态的研究结果。与传统法和化学裂解法比较,试剂盒提取法的效率更高,能够检测到更多种类的细菌,更合适肠道相关分子微生态的研究。 相似文献
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目的 以发菜为研究对象比较不同的提取DNA方法,筛选出了一种适合快速提取发菜DNA的方法。方法 分别利用自主研发的硅珠DNA纯化技术、细菌试DNA提取试剂盒和植物DNA提取试剂盒提取发菜基因组DNA。结果 本实验室开发的硅珠DNA提取纯化技术具有快速、无毒以及获得的发菜DNA纯度高等优势。通过PCR扩增和测序得到16S rRNA基因,利用Blast软件进行序列比对,与发菜同源性为99%。结论 本研究研制的发菜基因组DNA提取方法可用于发菜源性的分子鉴定。 相似文献
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芋螺基因组DNA提取方法的优化 总被引:5,自引:2,他引:5
热带药用海洋生物芋螺产生的芋螺毒素(Conotoxin),已成为神经科学研究的有力工具药和新药开发的新来源。近来出现了从芋螺基因组DNA中克隆新型芋螺毒素基因的新方法.因而快速获得芋螺基因组DNA是分离多样性毒素基因、建立基因库及药用芋螺基因资源开发的前提。本研究采用不同的DNA提取方法.从6种芋螺的不同组织和器官中分离总DNA,经综合比较,建立了简便快速的提取芋螺总DNA的改良苯酚-SDS优化方法。 相似文献
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药用百合鳞叶中总DNA提取方法的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
目的:对药用百合DNA的提取过程进行改良和优化,筛选出较理想的DNA提取方法。方法:在传统十六烷基三甲基氯化铵(CTAB)提取方法基础上,进行改良和优化,寻找出一种实用的DNA提取方法。结果:用改良CTAB法提取的总DNA的OD260/OD280在1.6~2.0之间,电泳条带清晰,其含量和纯度完全满足引物扩增分析的要求。结论:本试验中的百合鳞叶总DNA的提取方法简便实用,所得DNA的产量和纯度均能满足基因工程操作的要求。 相似文献
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