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相似文献
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1.
目的比较目前常用的外周血DNA提取的三种方法。方法用三种方法提取全血DNA,通过吸光度检测、PCR扩增分析各自优缺点。结果三种方法提取的DNA纯度和作为模板PCR扩增无显著差别,只是操作时间和成本不同。结论天根离心柱型试剂盒应用比较广泛,Promega试剂盒操作时间最短,Chelex-100方法最经济,适合微量提取。  相似文献   

2.
目的:将传统酚/氯仿提取DNA方法改进,建立一种快速、经济的从全血中提取高质量基因组DNA的方法。方法:用双蒸水破红细胞,KI30秒内充分裂解白细胞、细胞核,然后通过高浓度NaCL沉淀蛋白,酚-氯仿-异戊醇混合液同时萃取。结果:提取的基因组DNA吸光度值A260/280为(1.84±0.03),产量为(27.2±2.6)μg/ml全血。提取基因组DNA凝胶电泳条带完整,PCR扩增目的条带完整。结论:本方法是一种快速、经济的外周血DNA提取方法,适合大规模人群基因组学研究。  相似文献   

3.
目的探索冰冻血样的最佳提取方法,保证DNA检测分析的质量。方法采用离心柱法和磁珠法进行DNA提取,分析所得DNA的浓度和纯度。结果两种DNA提取方法提取DNA纯度均符合实验要求(1.6~1.9),两种方法无统计学差异;磁珠法提取冻存血样所得DNA浓度高于离心柱法,有统计学意义。结论对于冰冻血液的DNA提取,磁珠法优于离心柱法。  相似文献   

4.
人血DNA的提取方法   总被引:3,自引:2,他引:1  
张琳  朱天慧 《天津医药》1993,21(2):112-114
  相似文献   

5.
DNA提取方法进展   总被引:46,自引:0,他引:46  
DNA的提取是分子生物学研究的基础技术,提取的DNA的纯度及结构完整性是进行基因工程各项研究所必需的条件。近年来一些新的或改进的DNA提取纯化方法不断出现,本文对从陆生动物、植物、微生物以及海洋生物提取DNA的方法进行综述。  相似文献   

6.
3种方法从血清标本中提取HBV DNA的比较   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的:比较3种从血清标本中提取HBVDNA方法的效果,选出一种快速、简单、高效提取血清中HBVDNA的方法。方法:收集40例经荧光PCR定量检测HBVDNA含量全部大于1.0×104copies·ml-1的血清标本,用3种方法提取标本中的HBVDNA,然后进行荧光定量PCR检测,对检测结果进行统计学分析。结果:用裂解液煮沸法提取的HBVDNA模板含量最高,与另外2种方法之间的差异有显性(P<0.05)。结论:裂解液煮沸法是一种快速、简单、高效的提取血清中HBVDNA的方法。  相似文献   

7.
目的建立从极少量血凝块中快速提取基因组DNA的方法,并对其应用价值进行评价。方法分别对TIANamp基因组DNA提取试剂盒和TaKaRa全能基因组DNA提取试剂盒进行方法改良,并提取DNA,比较2种方法提取DNA的含量和纯度;并用人P450酶系的CYP3A4*4引物对提取的DNA进行PER扩增,检测生物活性。结果用TaKaRa全能基因组DNA提取试剂盒提取的DNA在含量、纯度和生物活性上均优于用TIANamp基因组DNA提取试剂盒提取的DNA。结论应用TaKaRa全能基因组DNA提取试剂盒可以对极少量的血凝块进行基因组DNA提取,方法简便快速,在分子生物学研究中有重要的实际意义和推广价值。  相似文献   

8.
川芎DNA提取方法的研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的 以伞形科蒿本属植物川芎Ligusticum chuanxiong Hort.叶为材料,研究川芎DNA的提取方法 .方法 分别采取CTAB法、高盐低pH法、木本植物DNA提取法、改良高盐低pH法提取基因组DNA,并对4种方法进行了改进.通过0.9%琼脂糖凝胶电泳和RAPD两种方法检测所提取的DNA样品.结果 比较DNA产量、质量等,确定了木本植物DNA提取法最佳.结论 木本植物DNA提取法为最佳方法.  相似文献   

9.
快速曲霉菌基因组DNA的提取方法   总被引:1,自引:0,他引:1  
金欣  陈建魁  于农  宋世平  尹秀云 《河北医药》2009,31(22):3150-3151
随着骨髓移植、器官移植的广泛应用,侵袭性曲霉感染逐渐增多。研究曲霉致病的分子机制以及进行临床快速基因诊断已成为研究的热点。而这些工作的前提就是获得足量、高质、稳定的供分析用的DNA分子。我们经过反复摸索、比较找出一个较为简便、经济、可靠的方法,报告如下。  相似文献   

10.
不同种类中药材的DNA提取方法   总被引:4,自引:0,他引:4  
目的 根据不同种类中药材来选择DNA提取方法。方法 根据作者对各种药材鉴定的实践经验,结合国内外有关代表性的论文,进行归纳和整理。结果 分析了不同DNA提取方法适用范围和局限性。结论 根据药材种类、贮存时间,选取合适的提取方法和适当的样品量。  相似文献   

11.
文献报道的组织提取DNA的方法,大多操作步骤复杂,花费时间长。我们介绍一种“一步法”提取DNA,可明显提高从石蜡切片中提取DNA量,且不需要额外试剂或特殊仪器,花费时间短。1材料和方法1.1组织标本58份病理档案石蜡包埋组织块,在室温中保存直至被选用。1.2主要试剂、仪器DNA提取液“一步法”:变性缓冲液终浓度:1×PCR缓冲液,0.45%NP40,0.45%Tween20,100μg/ml PK。酚-氯仿提取法:10%SDS,10mg/ml PK,饱和酚,氯仿,醋酸钠等。Tag DNA聚合酶为上海生物工程技术有限公司产品,三磷酸去氧核糖核苷(dNTP)为北京TaQGENE公司产品,DNA…  相似文献   

12.
目的 比较筛选最适于贝母属药用贝母的总DNA提取方法。方法 利用试剂盒法、改良的CTAB法、改良的SDS法提取贝母属药用贝母的总DNA;通过核酸蛋白检测仪及琼脂糖凝胶电泳方法检测其浓度和纯度;进行ISSR-PCR扩增检测所得总DNA质量。结果 3种方法均可提取出产量较高的基因组DNA,但试剂盒法相较提取的总DNA纯度最高,质量最好,并且均能扩增出丰富清晰的条带,稳定性高,操作简单耗时短。改良的CTAB法、SDS法提取的总DNA纯度、质量均次于试剂盒法,操作复杂耗时长,不适用于下游的分子生物学实验。结论 试剂盒法为贝母属药用贝母总DNA提取的最佳方法,其所得样品适用于PCR及其他分子生物学研究。  相似文献   

13.
摘要:目的比较结直肠癌患者粪便细菌DNA提取方法的优缺点及获得DNA的质与量,有利于结直肠癌患者肠道相关分子微生态的研究。方法采用传统法,化学裂解法和TIANamp bacteria DNA Kit试剂盒法,提取粪便中细菌DNA,比较其作为模板,用于细菌16SrRNA基因PCR扩增后凝胶电泳的优缺点及用核酸蛋白检测仪Biophotmeter测定提取DNA的质与量。结果传统法提取DNA的量及纯度均较低(22.37±2.45,3.24±0.22),化学裂解法和试剂盒方法提取的量及纯度均较高,(分别为33.87±2.06,2.18±0.44;38.60±9.00,1.70±0.09);传统法与化学裂解法、试剂盒法相比差异有统计学意义(P〈0.05),化学裂解法与试剂盒法相比差异无统计学意义(P〉0.05),但以试剂盒法为佳。结论3种方法各具优缺点,不同的DNA提取方法会影响结直肠癌患者肠道相关分子微生态的研究结果。与传统法和化学裂解法比较,试剂盒提取法的效率更高,能够检测到更多种类的细菌,更合适肠道相关分子微生态的研究。  相似文献   

14.
目的 以发菜为研究对象比较不同的提取DNA方法,筛选出了一种适合快速提取发菜DNA的方法。方法 分别利用自主研发的硅珠DNA纯化技术、细菌试DNA提取试剂盒和植物DNA提取试剂盒提取发菜基因组DNA。结果 本实验室开发的硅珠DNA提取纯化技术具有快速、无毒以及获得的发菜DNA纯度高等优势。通过PCR扩增和测序得到16S rRNA基因,利用Blast软件进行序列比对,与发菜同源性为99%。结论 本研究研制的发菜基因组DNA提取方法可用于发菜源性的分子鉴定。  相似文献   

15.
芋螺基因组DNA提取方法的优化   总被引:5,自引:2,他引:5  
热带药用海洋生物芋螺产生的芋螺毒素(Conotoxin),已成为神经科学研究的有力工具药和新药开发的新来源。近来出现了从芋螺基因组DNA中克隆新型芋螺毒素基因的新方法.因而快速获得芋螺基因组DNA是分离多样性毒素基因、建立基因库及药用芋螺基因资源开发的前提。本研究采用不同的DNA提取方法.从6种芋螺的不同组织和器官中分离总DNA,经综合比较,建立了简便快速的提取芋螺总DNA的改良苯酚-SDS优化方法。  相似文献   

16.
目的比较福尔马林固定石蜡包埋组织(FFPET)中3种DNA提取方法,研究哪种方法更简便,更适合做DNA甲基化特异性PCR(MSP)。方法分别用二甲苯脱蜡法,改良TES水浴法和试剂盒法提取乳腺癌组织中的DNA,PCR扩增进行比较。结果二甲苯脱蜡法和试剂盒法提取的DNA电泳条带清晰可见,改良TES脱蜡法未见条带。结论二甲苯脱蜡法和试剂盒法提取的DNA均可用于做甲基化特异性PCR。  相似文献   

17.
药用百合鳞叶中总DNA提取方法的研究   总被引:2,自引:0,他引:2  
目的:对药用百合DNA的提取过程进行改良和优化,筛选出较理想的DNA提取方法。方法:在传统十六烷基三甲基氯化铵(CTAB)提取方法基础上,进行改良和优化,寻找出一种实用的DNA提取方法。结果:用改良CTAB法提取的总DNA的OD260/OD280在1.6~2.0之间,电泳条带清晰,其含量和纯度完全满足引物扩增分析的要求。结论:本试验中的百合鳞叶总DNA的提取方法简便实用,所得DNA的产量和纯度均能满足基因工程操作的要求。  相似文献   

18.
一种快速提取丝状真菌产黄青霉DNA的方法   总被引:1,自引:0,他引:1  
介绍一种快速有效的提取丝状真菌产黄青霉染色体DNA的方法。该方法以100mmol/L Tris、100mmol/L NaCl、50mmol/L.EDTA-Na2和2%SDS(pH9.0)为提取液,经石英砂研磨破壁.获得了较高质量的染色体DNA,该法较酶解法和氯化苄法廉价、快速、安全,且不影响其后续的分子生物学操作。  相似文献   

19.
20.
贵州黔西荔波少数民族全血DNA提取方法的探讨   总被引:4,自引:0,他引:4  
目的 研究贵州黔西荔波少数民族全血提取样品DNA的价值。方法 采用低渗溶血酚氯仿提取法和PCR扩增检测提取DNA的质量。结果 两地区八少数民族2307份均获得基因组DNA。结论 血细胞在-85℃存放3~6个月,用经典的酚氯仿提取法均能获得较高质量的DNA样品。  相似文献   

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