大鼠移植性肝癌模型的制作

Walker- 2 5 6肿瘤肝脏移植制作大鼠移植性肝癌模型 ,已被广泛应用于肝癌介入等实验性治疗和影像学诊断等方面的研究。目前国内多采用瘤块肝包膜下移植的方法制作该模型 ,但操作相对复杂。我们在大鼠肝动脉介入实验中总结出肿瘤细胞肝内注射建立大鼠移植性肝癌模型的方法 ,该法操作相对简单 ,周期短 ,成功率高。现报告如下。1　材料和方法1.1　动物和瘤株　雄性 SD大鼠 4 8只 ,体质量 2 0 0～ 2 5 0 g,供接种肿瘤用。断奶 1周的 SD幼鼠 6只 ,体质量 80～ 10 0 g,供瘤株传代用 ,均为清洁级。均购自第二军医大学实验动物中心。大鼠 Walker-…     

Walker-256大鼠移植性肝癌模型探讨

目的 Walker-256细胞质肝内接种制备大鼠移植性肝癌模型.方法 取体重150～180g雄性Spraque-Dawley (SD)大鼠72只,随机分为实验组和对照组:实验组(n=60)肝内接种Walker-256细胞质;对照组(n=12)肝包膜下注射相同剂量的生理盐水,1周后观察肿瘤大小、并进行病理学检测.结果 实验组大鼠共有15只大鼠死亡,而移植瘤肝癌模型出瘤率为100% (45/45),大多数大鼠伴有肺以及腹腔转移,并且均经过病理学证实.结论 Walker-256细胞质肝内接种可以成功建立适宜临床研究的肝癌模型.     

小鼠肝癌原位移植模型的建立及生物学特性

目的:探讨建立小鼠肝癌原位移植模型的可行性,并观察其生物学特性.方法:用肝癌细胞株H22接种于ICR小鼠皮下,建立异位移植模型,然后用此移植瘤组织再接种于小鼠肝内,建立肝原位移植瘤模型.结果:小鼠肝癌原位移植模型成功率为95.6%,自发转移率为81.8%;大量腹水发生率为40.9%,自发消退率为0%.模型平均自然生存期为28 d,约移植14 d后进入快速增殖期.结论:小鼠肝癌原位移植模型成功率高,有高转移、无自发消退现象,可作为研究肝癌转移机制和药物筛选的理想模型.     

SD大鼠移植性CBRH-7919肝癌模型的建立

目的探讨SD大鼠种植性CBRH-7919肝癌模型的制作方法。方法先用CBRH-7919大鼠肝癌细胞瘤株接种裸鼠肩胛部皮下,再将生成的肿瘤组织移植接种于30只成年SD大鼠肝脏内,术前1周、术后连续2周内给每只大鼠肌注地塞米松2.5毫克/天。术后4周用超声检查仪和核磁共振（MRI）检查肿瘤生长情况,筛选建模成功的大鼠,并从中随机抽取5只大鼠,处死后取出肝脏内肿瘤进行病理学检查。结果 30只大鼠中有4只死亡。剩余的26只中有23只大鼠共长出28个肿瘤样结节,建模成功率为76.7%（23/30）。肿瘤大小为8.3±4.2mm。病理类型均为肝细胞性肝癌。结论直视下向免疫抑制SD大鼠肝脏内接种制作大鼠肝细胞癌模型,是一种操作方便、简单、成功率高的方法。适用于介入治疗等实验方面的研究。     

大鼠移植性肝癌模型的建立及其磁共振表现

目的探讨在SD大鼠上建立一种理想的、适用于介入治疗和MRI观察的移植性肝癌模型的可行性。方法用腹腔肝癌移植种鼠（Walker-256）含癌细胞的腹腔液注入SI）雄性幼鼠腹腔内行保种传代；同时行SD雄性幼鼠腋下及腹股沟皮下注射种植，7d后将皮下种植成功的实体瘤组织，切成2mm×2mm×2mm的组织块，并植入40只SD成年雄性大鼠左肝包膜下制成移植性肝癌模型。于移植术后8d时用MRI观察肿瘤体积及其特征，并取肿瘤标本做病理切片检查。结果腹腔移植传代鼠经病理组织学检查证实，3次传代保种均成功。大体标本观察结果显示，肿瘤组织呈灰白色鱼肉状．与周围正常肝组织分界较清楚，肿瘤内无明显坏死和出血，其周围血管丰富。MRI检杏示37只移植性大鼠肝内出现单个结节状肿瘤，肿瘤平均体积为（0．18±0．09）cm^2；其中有2只出现腹水。肝癌病灶在T1WI上旱低信号，在T2WI上呈高信号。结论大鼠实验模型建立成功率高，MRI检查效果良好，适用于肝癌的介入治疗的研究。     

免疫抑制剂FK506对大鼠移植性肝癌肿瘤生长和脾转移的影响

目的 观察在大鼠移植性肝癌模型中不同FK506剂量下肿瘤的大小和侵润以及脾脏转移情况,用以评价FK506对肝癌细胞增殖和转移的情况.方法在Wistar大鼠肝左叶种植walker-256细胞株成瘤的癌组织块以构建转移性肝癌模型,54只大鼠随机分为FK506低剂量组(0.5 mg/kg*d),正常剂量组(1.0 mg/kg*d)和空白对照组,测量肿瘤大小,通过病理组织学观察7、14、21 d脾脏转移发生率和中位数.结果与空白组相比,第14、21天两个剂量组肝癌体积明显增大(P<0.05);同时也出现了脾转移,第14天FK506各组转移中位数均不同.根据病理组织学,各组脾转移的发生率没有明显性差异.结论用药早期,脾脏还存在免疫功能,免疫抑制剂不能完全压制抗肿瘤效应.低剂量FK506也许有利于减少癌症脾转移,仍需进一步的探讨FK506低剂量长期使用在肝癌复发和转移的作用.     

肝硬变大鼠肝内移植型肝癌模型的制作

我们利用Ｗａｌｋｅｒ－２５６瘤株制作成肝硬变大鼠肝内移植型肝癌模型，方法简单，周期短，成功率高，类似肝癌患者病因学，该模型适用介于治疗的实验研究，影像，超声早期诊断研究以及抗肿瘤药物的筛选。     

改良法大鼠原发性肝癌模型的建立

我国肝癌患者的特点是大多在肝硬化基础上发生。通过建立类似人肝癌的动物模型可以探讨肝癌生长的发生及发展规律,寻找对肝癌生长、发展有抑制作用的药物,探索治疗肝癌的有效方法。二乙基亚硝胺(diethylnitrosamine,DENA)因其诱癌变过程与人类肝癌发生过程十分相似,且诱癌成功率近100％,方法简单、易行,因此被广泛用于制作肝癌大鼠模型。     

大鼠移植性肝癌MRI信号特征与定量分析

通过对Ｗａｌｋｅｒ２５６移植性肝癌的动物模型的ＭＲＩ图像信号以及Ｔ１值、Ｔ２值的测定分析。提出了在０．３５Ｔ磁场强度大鼠移植性肝癌ＭＲＩ信号定量分析的模式和意义。     

裸大鼠人高转移肝癌皮下和原位移植模型的建立

目的探讨建立裸大鼠人高转移肝癌的皮下和原位移植模型的可行性,并观察其生物学特性。方法体外培养人高转移肝癌株HCCLM3接种于裸大鼠皮下,建立皮下移植模型,然后用此移植瘤组织再接种于裸大鼠肝内,建立肝原位移植瘤模型。皮下移植的裸大鼠每周称重、测量瘤径,原位移植的裸大鼠每周称重,两组裸大鼠分别于移植8周后处死,通过巨检、镜检等观察移植肿瘤的生物学特性。结果裸大鼠皮下均成瘤,未见肺转移,裸大鼠原位移植成瘤率90％,肺转移70％,腹水发生率50％,自发消退率0％。结论裸大鼠人高转移肝癌HCCLM3移植瘤模型成功率高,原位移植有高转移,无自发消退现象,可作为研究肝癌转移和药物筛选的理想模型。     

大鼠肝内移植型肝癌模型的建立

本文报道我科1981年5月～1982年12月进行大鼠肝癌肝内移植模型实验,共移植大鼠108只,癌肿成活率为91.7％。肝癌鼠自然生存期为31天。长成的肝癌其病理组织学与临床肝细胞癌相似。该模型的优点是移植的肝癌生长在肝脏上,与临床的肝癌病例相似。本实验每移植1次,周期短,一般为两周左右,最长不超过30天。     

大鼠原位肝移植模型的技术改进

目的:探讨大鼠原位肝移植模型的技术改进.方法:选取体质量相近的SD大鼠作为供受体,分别用Kamada"二袖套法"和改良"二袖套法"(改良的方法包括:提高肝上下腔静脉的吻合质量、改进门静脉和肝下下腔静脉套管的吻合及胆总管的重建等)建立大鼠原位肝移植模型,比较两组在总的手术时间﹑无肝期时间﹑受体手术时间以及手术成功率上的差异.结果:两组手术成功率分别是78.9%(71/90)和91.7%(55/60)(P＜0.05),而两组在总的手术时间﹑无肝期时间﹑受体手术时间上无统计学差异.结论:改良的大鼠原位肝移植模型是一种简单﹑易行﹑稳定的肝移植研究模型.     

两种方法建立人肾透明细胞癌裸鼠原位移植转移模型及其比较

目的建立人肾癌裸小鼠原位移植转移模型,并比较两种不同方法的结果.方法将肾癌完整组织块和肿瘤细胞悬液种植于裸小鼠肾包膜形成原位移植瘤,并观察和比较两种方法所建立模型的肿瘤生长状况、移植成功率和自发转移的发生率.结果肾癌完整组织块接种的原位成瘤率达75.0%,肾、肺门淋巴结转移率均73.3%,肺转移发生率53.3%;细胞悬液种植的原位成瘤时间较组织块法延迟10 d,成瘤率为40.0%,肺、肾门淋巴结转移率均12.5%,肺脏无转移.结论两种原位移植转移模型均具有人肾细胞癌自然生长过程的特点,肾癌完整组织块原位移植模型优于细胞悬液原位接种模型,为研究人肾细胞癌转移机制和抗转移实验治疗提供了有力工具.     

大鼠实验性非酒精性脂肪性肝炎模型的研究

目的建立非酒精性脂肪性肝炎实验动物模型。方法SD大鼠30只,随机分为对照组(n=10)和模型组(n=20)。对照组喂普通饲料,模型组喂普通饲料并给予脂肪乳剂灌胃(10ml／kg)。动态观察血清TG、TC、ALT、AST、MDA、SOD、FFA和肝脏TG、TC、MDA、SOD、FFA的变化,并行肝脏病理学检查。结果2周后,随机处死模型组中的10只,与正常组相比,发现血清TG、TC、ALT和肝脏MDA均明显升高,而肝脏SOD则明显降低,病理显示有2只轻度脂肪变性,尚无炎症病灶出现。第3周处死剩余动物,发现肝指数、血清脂质、ALT、AST、MDA、FFA和肝脏TG、MDA、FFA与对照组相比均显著升高,而SOD则明显降低;光镜下所见模型组出现弥漫性肝细胞脂肪变性,并有炎症病灶。结论通过3周脂肪乳剂的喂养,形成了非酒精性脂肪性肝炎。     

高脂饮食诱导青春期前雌性大鼠 多囊卵巢综合征的实验研究

目的 复制高脂饮食诱导青春期前雌性大鼠的多囊卵巢综合征（PCOS）动物模型,探讨其生殖 和代谢特征。方法 将青春期前雌性大鼠随机分成C 组和D 组,C 组接受正常饮食,D 组接受高脂饮食,连 续喂养105 d。另将成年雌性大鼠随机分成A 组和B 组,A 组接受1% 羧甲基纤维素,B 组接受1 mg/kg 灌服 来曲唑,连续喂养21 d。观察各组体重、动情周期和卵巢组织学变化,检测各组空腹血糖、胰岛素、糖耐量、 计算胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）、定量胰岛素敏感性检测指数、血脂水平、性激素水平、促黄体激素受 体（LHR）及促卵泡激素受体（FSHR）mRNA 的表达。结果 B 组0、7、14 及21 d 体重低于A 组（P <0.05）; B 组观察结束后卵巢重量高于A 组（P <0.05）;B 组喂养21 d 后糖耐量曲线下面积（AUC）高于A 组（P <0.05）; D 组49、77 及105 d 的糖耐量AUC、空腹胰岛素、HOMA-IR、血清总胆固醇、雌二醇及孕酮高于C 组 （P <0.05）,C 组定量胰岛素敏感性检测指数、睾酮高于D 组（P <0.05）。结论 高脂饮食可诱导青春期前雌 性大鼠PCOS,并产生代谢紊乱和卵巢改变,与PCOS 患者临床观察相似。     

非套管法大鼠异体原位单肺移植动物模型的建立

 目的 建立稳定的大鼠非套管法异体原位左肺移植模型。方法 使用250~350 g Sprague Dawley（SD）大鼠进行实验,采用显微外科技术,分别连续缝合支气管和肺动、静脉,建立大鼠异体原位左肺移植模型。观察大鼠存活时间,移植肺脏血管、支气管吻合口通畅性。结果 10只接受左肺移植的受体大鼠均成功脱离呼吸机,供肺冷缺血时间约40 min,热缺血时间约40 min,总手术时间约130 min。解剖后检查示各吻合口均通畅。结论 非套管法大鼠原位左肺移植模型具有稳定、可靠、接近临床肺移植的优点。     

阿霉素肾病大鼠podocin mRNA和蛋白的表达

目的观察阿霉素肾病大鼠肾小球上皮细胞足突蛋白podocin mRNA和蛋白的表达。方法肾病组予阿霉素5mg/kg尾静脉注射一次,正常对照组予等量生理盐水尾静脉注射,注射后2周24h尿蛋白定量>30mg为肾病模型成立。观察4周后留24h尿行蛋白定量及血生化检查,并应用半定量RT-PCR和印迹法(Western blotting)测定podocinmRNA和蛋白质的表达。结果正常对照组大鼠podocin蛋白表达的相对量是5·26±1·19,而肾病组大鼠podocin蛋白基本不表达;正常对照组、肾病组podocin分子mRNA的相对值分别为1·06±0·19、1·96±0·98,肾病组大鼠podocinmRNA的表达与正常对照组相比显著上调(P<0·05)。结论阿霉素肾病大鼠蛋白尿的产生可能与podocin蛋白表达的减少有关。     

大鼠脊髓T11段全横断损伤模型的建立及护理

目的 制备大鼠脊髓T11全横断动物模型，模拟脊髓损伤，为后期的干细胞移植治疗研究提供实验依据。方法 16只健康Wistar大鼠随机分为两组：对照组（n=8）及脊髓损伤组（SCI组，n=8）。SCI组咬除T9-T10棘突及相应椎板，横切断暴露的脊髓T11，夹除约0.3-0.5cm脊髓，对照组仅行椎板切除术。术后1，3，7，14，21d分别进行BBB运动功能评分。对模型进行人工排尿、排便、悬吊鼠尾等护理措施。结果 SCI组所有动物在术后均表现出典型的脊髓截瘫症状，BBB运动功能评分很低，与对照组相比具有非常显著性差异（P〈0.01）。护理措施降低了截瘫大鼠并发症的发生。结论 建立了大鼠脊髓T11段全横断损伤模型，并摸索出了一套有效的截瘫模型的护理方法。     

大鼠高脂饮食性和酒精性脂护肝超微结构比较

目的：给予大鼠饲喂高脂饮食和灌注白酒分别制造大鼠高脂饮食性和酒精性脂肪肝模型,观察两种模型肝脏形态学和超微结构的区别。方法：选和4～6周龄雄性SD大鼠45只,分为3组：正常对照组,只给予普通饲料;高脂饮食组,用高脂饲料喂养,连续8周;酒精组,用体积分数为60％白酒灌胃,初始剂量为8g/kg,每2周增加2g,直到16g/kg维持16周。试验末,将运动麻醉,取部分肝组织制备病理切片,另取部分制备电镜。结果：正常对照组大鼠肝组织形态结构正常,肝小叶规则,无脂滴发现;高脂饮食组可见多处脂质沉积,但尚无明显的肝纤维化表现,电镜下可见肝细胞胞浆内有大量脂护滴积聚;酒精组脂肪肝大鼠肝细胞有脂肪变性的表现,电镜下可见类结晶体,线粒体肿胀,内质网扩张、断裂,数量较少,溶酶体内有电子密度增高的颗粒沉积。有一定量的脂滴。结论：大鼠高脂饮食性脂肪肝超微结构改变主要以肝细胞细胞浆内脂肪滴沉积为主,而酒精性脂肪肝主要以线粒体肿胀和其他细胞器的变性和结构改变为主。