广泛耐药结核病快速检测研究

目的探讨和研究广泛耐药结核菌（XDR-TB）的快速检测方法。方法痰结核菌经匡氏PNB（对硝基苯甲酸）琼脂培基直接分型鉴定,用匡氏双相琼脂培基痰菌直接药敏试验技术鉴定结核菌的耐药性。结果 116例痰标本中71例分离物为结核菌株,4例为结核分枝杆菌与非结核分枝杆菌混合感染生长物,非结核非分枝杆菌生长物2例。75例结核菌生长物中9例为XDR株（12%）,平均检出时间19.6d;50例为耐多药结核菌（MDR）株（66.7%）,平均检出时间16.6d。结论采用匡氏双相琼脂培基痰结核菌直接药敏试验技术和匡氏PNB琼脂直接分型鉴定技术可以大大缩短临床XDR-TB、耐多药结核（MDR-TB）的检出时间,结果准确、可靠。     

异烟肼对脓肿分枝杆菌L型的诱导作用

目的探讨异烟肼对脓肿分枝杆菌L型的诱导作用。方法将脓肿分枝杆菌分别接种于含128μg/ml异烟肼和无异烟肼的结核分枝杆菌快速液体培养基中培养。含异烟肼的培养物经0.45μm孔径滤膜过滤,滤液接种于无异烟肼的结核分枝杆菌快速液体培养基内返祖培养。将含异烟肼和无异烟肼的培养物及返祖菌进行细胞壁染色和透射电镜观察其细胞壁完整性,扫描电镜观察其表面微观结构。含异烟肼的培养物转种L型菌琼脂平板培养,无异烟肼的培养物和返祖菌转种营养琼脂平板培养,观察其菌落形态。对返祖菌及诱导前接种菌的16S rDNA进行鉴定。结果在含128μg/ml异烟肼浓度的结核分枝杆菌快速液体培养基中培养的脓肿分枝杆菌细胞壁缺失,形态为球形,L型细菌琼脂平板上菌落呈典型油煎蛋样,而无异烟肼的结核分枝杆菌快速液体培养基中培养的脓肿分枝杆菌细胞壁完整,形态为杆状,营养琼脂平板上呈圆形菌落。128μg/ml异烟肼浓度的结核分枝杆菌快速液体培养基中培养的脓肿分枝杆菌经返祖后,返祖菌细胞壁完整,形态为杆状,营养琼脂平板上菌落也呈圆形。16S rDNA鉴定返祖菌与诱导前接种菌的同源性达100%,为同一种细菌,即脓肿分枝杆菌。结论异烟肼成功诱导脓肿分枝杆菌L型,可用于脓肿分枝杆菌耐药机制和防治研究。     

恒温扩增试纸条法快速检测痰标本中结核分枝杆菌

目的评价恒温扩增试纸条法快速检测痰标本中结核分枝杆菌的试验效果,寻求更简便、快速、准确的痰结核分枝杆菌检测方法,评估结核分枝杆菌恒温扩增试纸条法在基层实验室应用的可行性。方法采用痰涂片抗酸染色法、罗氏培养法和恒温扩增试纸条法对痰标本中的结核分枝杆菌进行检测,对3种方法的检出率进行比较,并采用PNB试验对培养阳性菌株进行菌型鉴定。结果恒温扩增试纸条法检测痰标本中结核分枝杆菌的检出率最高（18．40％）,罗氏培养法次之（14．41％）,痰涂片抗酸染色法的检出率最低（9．09％）;恒温扩增试纸条法与培养法比较的灵敏度为100．00％（65／65）,特异性为99．34％（368／386）;恒温扩增试纸条法检测痰结核分枝杆菌的灵敏度和特异性均为100．00％。结论恒温扩增试纸条法检测痰结核分枝杆菌具有快速、敏感、特异等优点,并可对结核分枝杆菌复合群进行确认,技术操作简便,所需仪器设备简单,适于在基层实验室推广。     

新型液体培养基用于结核分枝杆菌快速培养的研究

目的以新鲜椰子汁和马血清为基础成分,研制一种快速培养结核分枝杆菌的新型液体培养基。方法将300份肺结核患者痰液标本进行直接涂片镜检,按涂阳和涂阴标本配对接种在新型液体培养基和改良罗氏培养基上,比较两种培养基培养的阳性率和阳性结果出现的时间。结果在新型液体培养基与改良罗氏培养基上结核分枝杆菌培养总阳性率分别为36.0%、37.0%,直接涂片镜检阳性痰液标本在新型液体培养基与改良罗氏培养基培养阳性率分别为94.55%、96.36%,直接涂片镜检阴性的培养阳性率分别为2.1%、2.6%,组组各自比较差异均无显著性(P均>0.05);新型液体培养基平均(9.66±3.14)d出现阳性结果,而改良罗氏培养基平均(27.56±7.74)d出现阳性结果,两者差异有显著性(P<0.01)。结论新型液体培养基能快速培养出结核分枝杆菌,其制作方便,价格低廉,操作简单,适合于广大基层医疗机构使用。     

异烟肼对脓肿分枝杆菌L型的诱导作用

目的探讨异烟肼对脓肿分枝杆菌L型的诱导作用。方法将脓肿分枝杆菌分别接种于含128 μg/ml异烟肼和无异烟肼的
结核分枝杆菌快速液体培养基中培养。含异烟肼的培养物经0.45 μm孔径滤膜过滤,滤液接种于无异烟肼的结核分枝杆菌快速
液体培养基内返祖培养。将含异烟肼和无异烟肼的培养物及返祖菌进行细胞壁染色和透射电镜观察其细胞壁完整性,扫描电
镜观察其表面微观结构。含异烟肼的培养物转种L型菌琼脂平板培养,无异烟肼的培养物和返祖菌转种营养琼脂平板培养,观
察其菌落形态。对返祖菌及诱导前接种菌的16S rDNA进行鉴定。结果在含128 μg/ml异烟肼浓度的结核分枝杆菌快速液体
培养基中培养的脓肿分枝杆菌细胞壁缺失,形态为球形,L型细菌琼脂平板上菌落呈典型油煎蛋样,而无异烟肼的结核分枝杆菌
快速液体培养基中培养的脓肿分枝杆菌细胞壁完整,形态为杆状,营养琼脂平板上呈圆形菌落。128 μg/ml异烟肼浓度的结核
分枝杆菌快速液体培养基中培养的脓肿分枝杆菌经返祖后,返祖菌细胞壁完整,形态为杆状,营养琼脂平板上菌落也呈圆形。
16S rDNA鉴定返祖菌与诱导前接种菌的同源性达100%,为同一种细菌,即脓肿分枝杆菌。结论异烟肼成功诱导脓肿分枝杆
菌L型,可用于脓肿分枝杆菌耐药机制和防治研究。
     

结核分枝杆菌快速培养对肺结核的诊断价值分析

目的探讨结核分枝杆菌快速培养对肺结核的诊断价值。方法选取2014年10月至2015年3月安阳市结核病防治所收治的200例肺结核患者,行纤支镜检查抽取痰液,对痰液行结核分枝杆菌快速培养。结果结核分枝杆菌快速培养阳性率为42.0%,活检+刷检阳性率为20.0%。活检+刷检阳性率低于快速培养,差异有统计学意义(P<0.05)。快速培养平均检出时间为(13.4±2.2)d。结论经变色液体培养基对纤支镜抽取痰液行结核分枝杆菌培养,可使涂阴肺结核患者结核分枝杆菌检出率提高,细菌培养检出所需时间缩短。     

痰结核分枝杆菌培养结果及影响因素分析

目的探究吉木萨尔县肺结核病人痰结核分枝杆菌培养结果及影响因素。方法选择吉木萨尔县2015年2月-2017年4月之间的90例肺结核病人作为本次试验的研究对象,分别采集即时痰液以及次日晨起痰液,根据收集时间不同将痰液分为即时痰组和晨起痰组,进行结核分枝杆菌培养,记录培养结果并分析其影响因素。结果即时痰组液体变色培养基的培养时间为(27.3±6.2)d,阳性率为73.33%,改良罗氏培养基的培养时间为(55.6±11.5)d,阳性率为74.44%;晨起痰组变色培养基的培养时间为(26.9±6.8)d,阳性率为88.89%,改良罗氏培养基的培养时间为(56.1±10.9)d,阳性率为85.56%。结论不同培养基、不同标本采集时间均对培养结果有影响,在进行痰结核分枝杆菌培养时选择晨痰可提高检出率,选择液体变色培养基可相对缩短培养时间。     

痰涂片阳性肺结核患者分枝杆菌培养及药敏结果743例分析

目的研究衢州地区痰涂片阳性肺结核患者对常用抗结核药物的耐药情况,为结核病控制和临床用药提供对策.方法对衢州地区的743例痰涂片阳性肺结核患者痰标本进行酸性改良罗氏培养基痰培养,将培养阳性菌株以硝基苯甲酸(PNB)培养基和噻吩-2-2羧酸肼(TCH)培养基进行菌种鉴定,采用绝对浓度间接法对异烟肼(INH)、利福平(RFP)、链霉素(SM)、氧氟沙星(OFLX)、乙胺丁醇(EMB)、卡那霉素(KM)6种抗结核药物进行敏感性试验.结果743例获得菌种鉴定和药物敏感试验结果者中有结核分枝杆菌复合群728例(97.98%),非结核分枝杆菌15例(2.02%).728例结核分枝杆菌复合群中总耐药率为26.63%,初治耐药率为19.35%,复治耐药率为57.32%;总耐多药率为5.36%,初治耐多药率1.39%,复治耐多药率36.59%.6种抗结核药物的耐药顺序依次为INH 8.20%、SM 7.74%、OFLX 4.80%、RFP 1.86%、KM 1.24%、EMB 1.08%.结论衢州地区肺结核患者中耐药情况较为严重,应开展分枝杆菌培养和药敏试验并根据药敏结果组成个体化化疗方案,同时进一步落实和提高非住院肺结核患者全面监督化学治疗(DOTS)质量,提高各类患者的治愈率,减少各种耐药的发生概率.     

耐药肺结核患者痰标本中结核分枝杆菌L型四种检测方法比较

目的:比较耐多药肺结核患者痰标本中结核分枝杆菌L型的四种实验室检查方法及其临床意义.方法:对103例耐多药肺结核患者的痰标本分别采用萋-尼(Ziehl-Neelsen)抗酸染色法、改良罗氏培养法、聚合酶链反应(PCR)和结核分枝杆菌L型培养法进行检测.结果:结核分枝杆菌L型培养阳性率高于抗酸染色涂片、改良罗氏培养和PCR检测(P＜0.05～P＜0.005).结论:结核分枝杆菌L型培养可提高结核分枝杆菌的阳性检出率,对结核病的早期、快速诊断具有重要价值;耐多药肺结核患者有较高的结核分枝杆菌L型感染率,这也是结核病程缓慢变化、复发、难治的重要原因.     

应用MPT64为靶标快速检测结核分枝杆菌生长的研究

目的探讨应用MPT64作为快速检测结核分枝杆菌生长指示的可能性,以期建立一种准确、快速、简便、易于普及开展的结核分枝杆菌生长检测方法。方法应用BACTEC MGIT960分枝杆菌快速培养仪器系统培养法对4株结核分枝杆菌1 mg/mL纯培养物菌液进行10倍稀释共7个稀释浓度的32例菌悬液、64例涂片抗酸染色阳性样本及98例非选择性临床送检样本进行培养。同时,对菌悬液,高浓度MPT64检测阳性时,即对下一浓度每天进行1次MPT64检测,对涂片阳性样本培养管每天进行1次MPT64检测,阴性者检测至培养阳性出现或至培养42 d;对非选择性临床送检样本每周定时进行1次MPT64检测,阴性者检测至培养6周。结果(1)4株结核分枝杆菌1 mg/mL纯培养物菌液稀释试验显示:应用MPT64作为快速检测结核分枝杆菌生长指示的最小菌量为10-7～10-6mg/mL,仪器系统培养法为10-6～10-5mg/mL。(2)64例涂片抗酸染色阳性样本63例培养阳性,其中菌种鉴定为结核分枝杆菌的58例样本中56例MPT64检测阳性,检出时间为3～16 d,平均7.8 d,其培养阳性检出时间为6～30 d,平均13.7 d。其余5例非结核分...