RT-PCR检测外周血CK19 mRNA及CEA mRNA诊断非小细胞肺癌微转移的研究

目的应用RT-PCR法检测CK19 mRNA、CEA mRNA在非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血中的表达情况并进行比较分析,探讨它们在NSCLC发生、转移及预后中的意义。方法NSCLC患者76例,肺良性疾病患者15例,Ⅳ期非肺癌恶性肿瘤患者30例,健康志愿者20例,均在治疗前抽取外周血,通过RT-PCR法检测CK19 mRNA和CEA mRNA的表达。结果NSCLC患者的CK19 mRNA和CEA mRNA阳性率显著高于肺部良性疾病患者和健康对照组(P<0.05)。CK19 mRNA和CEA mRNA在NSCLC与Ⅳ期非肺癌患者中的阳性表达率无差异(P>0.05)。CK19 mRNA在外周血中的表达率与肺癌组织学类型无关(P>0.05),CEA mRNA在肺腺癌中高度表达(P<0.05)。CK19 mRNA及CEA mRNA与P-TNM分期无关(P>0.05)结论两种肿瘤标志物均可单独作为RT-PCR检测肺癌患者外周血微转移的分子标志物,且CEA mRNA可以帮助临床判断病理类型。该方法的建立可能有利于早期诊断肺癌转移,从而指导临床分期和治疗。     

CEA mRNA及CK19mRNA在非小细胞肺癌外周血中的表达及其与临床病理参数的关系

目的检测非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血中癌胚抗原mRNA(CEA mRNA)及细胞角蛋白19 mRNA(CK19mRNA)的表达及与临床病理参数(病理类型、分期、细胞分化程度、淋巴结转移)之间的相关性。方法采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测48例NSCLC患者、15例肺良性疾病(BLD)患者和10例健康人外周血中CEA mRNA及CK19 mRNA的表达。结果 NSCLC患者外周血中CEAmRNA及CK19 mRNA的阳性表达率分别为58.33%(28/48)、68.75%(33/48),在BLD患者中的阳性表达率分别为6.67%(1/15)、13.33%(2/15),而健康对照组均无表达,差异有统计学意义(P<0.05)。其中Ⅰ、Ⅱ期NSCLC患者外周血中CEA mRNA及CK19 mRNA阳性表达率分别为27.78%(5/18)、83.33%(10/12)及44.44%(8/18)、75%(9/12)。外周血CEA mRNA及CK19 mRNA的阳性表达与临床分期及淋巴结转移密切相关,而与病理类型及分化程度无关。结论 NSCLC患者早期(Ⅰ、Ⅱ期)外周血中也有微转移的存在,说明微转移可能是NSCLC预后不良的原因之一。CEAmRNA与CK19 mRNA均可作为检测NSCLC患者外周血微转移较为合适的分子标志物,联合检测有助于提高检测的准确度。     

胃癌患者腹腔灌洗液CK19 mRNA、CEA mRNA的检测及其临床意义

目的观察采用巢式逆转录 聚合酶链反应（RT-PCR）检测胃癌患者腹腔冲洗液中细胞角蛋白19（CK19）mRNA和癌胚抗原（CEA）mRNA的临床价值。方法收集67例胃癌患者和8例胃良性病变患者腹腔冲洗液或腹水。常规行H-E染色细胞学检查，采用巢式RT-PCR方法检测腹腔冲洗液中CK19 mRNA和CEA mRNA的表达，并以胃癌细胞SGC7901为阳性对照。结果67例胃癌患者腹腔冲洗液中CK19 mRNA的阳性表达率为58.2％（39/67）；CEA mRNA的阳性表达率为53.7％（36/67）；CK19 mRNA和CEA mRNA的联合检测阳性率为67.2％（45/67），皆高于细胞病理学检查的19.4％（13/67），而13例细胞病理学检查阳性患者的CK19 mRNA、CEA mRNA检测结果均为阳性。CK19 mRNA、CEA mRNA阳性率与肿瘤胃壁浆膜受侵、淋巴结转移和胃癌分期明显相关（P＜0.05）。结论采用巢式RT-PCR方法检测胃癌患者腹腔冲洗液中CK19 mRNA、CEA mRNA的表达敏感性高，对于早期诊断胃癌患者腹腔种植转移有一定临床价值。     

大肠癌患者外周血中癌细胞角蛋白20的检测

目的 :以逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)检测外周血大肠癌细胞 ,探讨大肠癌患者外周血中癌细胞存在的临床意义。方法 :应用RT PCR方法检测 47例不同Dukes分期结肠癌患者及其肝转移患者外周血中大肠癌细胞角蛋白 2 0 (CK2 0 ) ,并以大肠癌组织 (2 0例 )和正常健康人外周血 (2 0例 )为对照。结果 :正常健康人外周血中未见CK2 0mRNA表达 ,大肠癌患者外周血中CK2 0mRNA检出率达 40 4% (19/ 47) ,DukesB ,C ,D期患者外周血CK2 0mR NA检出率分别为 2 5 0 % (5 / 2 0 ) ,41 2 % (7/ 17)和 87 5 % (7/ 8) ,(P <0 0 5 )。肝转移患者CK2 0mRNA检出率为87 5 % (7/ 8) ,无肝转移患者检出率为 30 8% (12 / 39) (P <0 0 1)。结论 :CK2 0可作为肿瘤标志物 ,用于检测外周血中的大肠癌细胞 ,预测肿瘤复发及转移 ,识别高危患者     

CK19和CEA mRNA表达与乳腺癌外周血微转移的相关性研究

目的 检测乳腺癌患者外周血中细胞角蛋白19(CK19)和癌胚抗原(CEA)mRNA的表达,探讨其表达是否可作为判断外周血微转移及预后的分子生物学指标.方法 采用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)技术检测45例术前乳腺癌患者及30例乳腺良性病变患者外周血中CK19和CEA mRNA的表达情况.结果 CK19和CEA mRNA在乳腺癌患者血清中阳性率分别为62.2%和53.3%,在30例乳腺良性患者血清中CK19 mRNA阳性率为3.3%,无CEA mRNA表达.乳腺癌患者和良性肿瘤患者血清中CK19、CEA mRNA表达阳性率比较差异有统计学意义(P＜0.01).CK19和CEA mRNA阳性率与临床分期、淋巴结转移均有关,二者表达呈正相关(P＜0.01).结论 乳腺癌患者外周血中CK19和CEA mRNA表达与临床分期密切相关,提示两项指标有望预测乳腺癌外周血微转移和判断预后.     

胃癌患者腹腔冲洗液中CEAmRNA及HpamRNA表达对判断腹腔微转移的临床意义

目的 探讨腹腔冲洗液中CEAmRNA、HpamRNA及MMP-7mRNA表达情况与腹膜微转移关系.方法 采用RT-PCR技术检测80例胃癌患者及16例胃良性肿瘤患者的腹腔冲洗液中的CEAmRNA、HpamRNA及MMP-7mRNA表达水平,并与传统的腹腔冲洗细胞学(PLC)对比分析,寻找与胃癌腹膜微转移有关的肿瘤标志物.结果 胃癌组分别与胃良性瘤组患者比较,腹腔冲洗液中CEAmRNA、HpamRNA、MMP-7mRNA表达阳性率明显增高(P＜0.05),其中CEAmRNA最高,其次为HpamRNA,MMP-7mRNA的阳性率较低(P＜0.05);CEAmRNA、HpamRNA和MMP-7mRNA这三种指标在临床分期、组织学类型、pTNM、淋巴结转移及肝转移间阳性率比较,统计分析显示均有统计学意义(P＜0.05),而在肿瘤部位方面,差异无统计学意义,随着临床分期的增加,这些肿瘤标志物的表达率也明显升高,有淋巴结及远处转移的患者较未转移的患者阳性率也明显升高;随着肿瘤浸润深度的增加,CEAmRNA、HpamRNA、MMP-7mRNA及PLC阳性率也明显增加,统计分析显示有统计学意义(P＜0.01).结论 采用RT-PCR技术检测腹腔冲洗液中的CEAmRNA及HpamRNAA表达,可以用于预测胃癌患者腹膜微转移.     

胃癌患者外周血CEA mRNA的检测及意义

目的 探讨胃癌患者外周血中CEA mRNA的表达及临床意义。方法 采用巢式RT-PCR技术检测70例胃癌患者手术前、后外周血CEA mRNA的表达情况，并以20例健康志愿者为阴性对照组，以10例新鲜胃癌组织作阳性对照。结果 CEAmRNA术前阳性表达率为51．4％，阳性表达率与组织学类型、TNM分期具有显著相关性（P〈0．05），而与肿瘤的部位、患者性别无相关性（P〉0．05）；20例健康志愿者无1例阳性表达，10例胃癌组织均为阳性表达。结论 CEA mRNA作为标志物检测胃癌血循环微转移是可靠的，对于指导临床诊断、治疗及判断预后具有重要意义。     

非小细胞肺癌外周血分子微转移研究

目的: 研究非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血癌胚抗原(CEA)、CK19、Lunx mRNA表达对于肿瘤微转移的价值。方法: 采用RT-PCR技术,对46例NSCLC患者(其中肺癌Ⅰ期组6例,Ⅱ期组9例,Ⅲ期组14例,Ⅳ期组17例))和同期18例良性肺部疾病(对照组)患者外周血CEA、CK19、Lunx mRNA进行检测。结果: NSCLC患者外周血Lunx、CEA、CK19 mRNA的阳性率为52.2%、43.5%、41.3%,其中Ⅰ期组Lunx、CEA和CK19 mRNA的阳性率为16.6%(1/6)、16.6%(1/6)和0%(0/6),与对照组差异均无统计学意义(P > 0.05);Ⅱ期、Ⅲ期和Ⅳ期组NSCLC患者Lunx mRNA的阳性率为44.4%(4/9)、50.0%(7/14)、70.6%(12/17),CEA mRNA的阳性率为33.3%(3/9)、50.0%(7/14)、52.9%(9/17),CK19 mRNA的阳性率为22.2%(2/9)、42.9%(6/14)、64.7%(11/17),肺癌Ⅱ期组Lunx、肺癌Ⅲ期组CEA和Lunx、肺癌Ⅳ期组CEA、CK19、LunxmRNA表达阳性与对照组差异均有统计学意义(P < 0.05~P < 0.01)。结论: 检测外周血CEA、CK19、Lunx mRNA表达可作为诊断早期NSCLC患者微转移重要的参考指标。     

巢式PCR检测胃癌患者外周血CK19 mRNA的临床意义

目的：对外周血CK19 mRNA基因表达的检测,探讨对胃癌患者微转移的诊断价值。方法：采用巢式RT-PCR方法检测63例胃癌患者,20例健康志愿者外周血CK19 mRNA的表达情况。结果：胃癌患者外周血中CK19 mRNA的阳性检出率为36.5%,并与肿瘤TNM分期、肿瘤浸润深度有关（P〈0.05）,而与年龄、性别、肿瘤分化程度、肿瘤大小、有无淋巴结转移无关（P〉0.05）,而健康志愿者外周血中CK19 mR-NA无1例阳性表达。结论：CK19 mRNA可以作为判断胃癌患者外周血微转移的肿瘤标志物。     

RT PCR检测食管癌患者骨髓CEA mRNA的表达及其临床意义

目的：探讨食管癌患者骨髓微转移的检测及临床意义。方法： 以癌胚抗原（CEA）为分子标记物，采用RT PCR技术检测43例食管癌患者及17例食管良性病变患者肋骨骨髓中癌胚抗原的表达。结果： 43例食管癌患者骨髓中CEA mRNA阳性率为34.9 %，食管良性病变患者骨髓中未见表达，两者差异有统计学意义（P＜0.05），CEA mRNA的表达与食管癌患者年龄、性别、病理组织类型、肿瘤细胞分化程度无相关性，但与肿瘤浸润深度和淋巴结转移密切相关（P＜0.05）。结论：用RT PCR法检测食管癌患者肋骨骨髓微转移具有较高的敏感性和特异性，骨髓中CEA的检测可帮助综合判断疾病的恶性程度及患者预后，有助于发现亚临床转移灶。     

胃癌患者MMP-2、CEA的表达及其临床意义

目的: 探讨胃癌患者基质金属蛋白酶2(MMP-2)、癌胚抗原(CEA)的表达及其临床意义。方法: 采用免疫组化S-P法测定胃癌患者活检或手术标本中的MMP-2表达,采用免疫放射分析法(IRMA)检测空腹血清CEA水平,并分析其与分化程度、TNM分期、淋巴结、肝、胰转移和腹膜、脉管受侵犯的关系。结果: CEA血清水平与淋巴结、肝脏、腹腔转移均有一定关系(P<0.01~P<0.005),而与胃癌分化程度、胰腺转移、脉管转移、临床分期均无关系(P>0.05)。MMP-2表达强度与淋巴结、肝脏、胰腺、脉管和腹腔转移与否差异均有统计学意义(P<0.005),与胃癌分化程度、临床分期均无明显关系(P>0.05)。结论: MMP-2、CEA在胃癌的发生和侵袭转移中可能起着重要作用,联合检测MMP-2、CEA的表达有望成为判断胃癌病变发展、预测肿瘤转移潜能的客观指标。     

结直肠癌淋巴结微转移的检测及其临床意义

目的 探讨结直肠癌淋巴结微转移的发生率,研究淋巴结微转移与结直肠癌转移复发的关系。方法 应用免疫组化LSAB法检测结直肠癌肿瘤组织和淋巴结 癌胚抗原（CEA）的表达,并采用逆转录聚合酶链反应（RT－PCR）法检测结直肠癌淋巴结癌胚抗原（CEA）的表达。结果 免疫组化法示50例Dukes‘B期患者128枚淋巴结中发现10枚淋巴结CEA表达,有淋巴结CEA表达的6例患者全部在术后5年内出现肿瘤转移或复发,而其他44例患者只有5例出现肿瘤转移或复发。RT－PCR法示11例肠癌的44枚淋巴结中有12枚淋巴结CEA mRNA表达,而病理组织学检查（HE染色）仅发现3枚淋巴结存在肿瘤转移,免疫组化法发现4枚淋巴结CEA表达。结论 存在淋巴结微小转移的大肠癌患者预后较差,基于RT－PCR的CEA检测可作为早期检测结直肠癌淋巴结微小转移的一种手段,为结直肠癌术后辅助化疗提供理论依据。     

外周血血管生成素-2表达与胃癌淋巴结微转移及预后的关系

目的:检测淋巴结阴性胃癌患者术前外周血血管生成素-2(Ang-2)mRNA表达量的变化,探讨其与淋巴结微转移及预后的关系。方法:应用实时荧光定量RT-PCR检测20例淋巴结阳性胃癌患者和61例淋巴结阴性胃癌患者术前及30位健康者外周血Ang-2mRNA的表达量,同时检测淋巴结组织CK20表达以评价淋巴结微转移,随访术后,分析术前外周血Ang-2mRNA表达量与淋巴结微转移及预后的关系。结果:淋巴结阳性胃癌患者外周血Ang-2mRNA表达量显著高于淋巴结阴性胃癌患者[(9.02±3.74)比(4.30±2.59),P<0.01],两者均显著高于正常对照组(P<0.01);淋巴结微转移阳性患者外周血Ang-2mRNA表达量显著高于淋巴结微转移阴性患者[(5.41±2.25)比(3.95±1.83),P<0.05]。术前外周血Ang-2mRNA表达量与淋巴结阴性胃癌的肿瘤大小、分化程度、浸润深度呈正相关(P<0.05或<0.01),与肿瘤组织类型无关,与术后生存期、术后复发转移及术后生存率呈负相关(P<0.05)。多因素回归分析显示术前外周血Ang-2mRNA表达量是影响淋巴结阴性胃癌患者预后的重要因素。结论:术前外周血Ang-2mRNA表达量可能成为评价淋巴结阴性胃癌患者淋巴结微转移和预后的有价值的临床指标,有助于指导治疗。     

CEA mRNA检测诊断胃周围淋巴结癌细胞微转移

目的:评估癌胚抗原(CEA)mRNA在诊断胃癌细胞淋巴结微转移方面的应用价值。方法:以胃周围淋巴结为检测标本,用反转录套式聚合酶链反应技术(RT-NP-PCR)检测CEA mRNA,用常规病理学方法检查癌细胞。结果:胃癌组胃周围淋巴结38.8?A mRNA阳性,病理学检测17.9%癌细胞阳性;良性胃病组胃周围淋巴结均阴性。RT-NP-PCR检测CEA mRNA与病理学检查癌细胞的结果比较,有非常显著性差异(P<0.01)。结论:CEA mRNA指标诊断胃癌细胞淋巴结微转移的敏感性较高,具有较高的应用价值,可以在病理学诊断胃癌淋巴结转移时开展应用。     

胃窦癌肝十二指肠韧带淋巴结微转移与清扫

目的检测进展期胃窦癌肝十二指肠韧带淋巴结微转移状况,探讨进展期胃窦癌根治术肝十二指肠韧带淋巴结清扫的必要性。方法采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,以细胞角蛋白20(CK20)mRNA为标志基因,对45例进展期胃窦癌患者的86枚肝十二指肠韧带淋巴结标本进行检测。结果45例进展期胃窦癌患者有23例出现肝十二指肠韧带淋巴结CK20阳性(51.11%),与常规病理检查相比,存在显著性差异(P<0.01);常规病理检查阴性的86枚淋巴结有46枚CK20阳性(53.49%),亦存在显著性差异(P<0.01)。肝十二指肠韧带淋巴结微转移与临床分期、浸润深度以及肿瘤分化程度显著相关。结论RT-PCR技术检测CK20 mRNA是诊断胃窦癌淋巴结微转移敏感而特异的方法,进展期胃窦癌根治术应包括肝十二指肠韧带淋巴结的清扫。     

胃癌微转移检测与预后的关系

胃癌微转移检测是近年来研究的热点,已证实胃癌微转移与胃癌的复发、转移密切相关,但胃癌微转移与预后的关系却研究较少。本文就胃癌微转移的概念、检测方法及两个主要指标细胞角蛋白及癌胚抗原在淋巴结、血液、腹腔及骨髓中的表达与胃癌预后的关系进行了综述。探讨胃癌微转移与预后有助于更科学的进行胃癌临床病理分期以及提高患者的生存率。     

胃癌淋巴结微转移的意义

目的 :研究胃癌淋巴结微转移的意义。方法 :用常规 HE和免疫组化 CK1 9检测 10 0例胃癌淋巴结转移。结果 :10 0例胃癌中 ,76例淋巴结明显转移 ,6例淋巴结微转移 ,18例无转移。在 P2 7Kip1 和 P5 3表达及 5年生存期上胃癌淋巴结微转移组与转移组比较差异均有显著性 (P<0 .0 5 ) ;相反 ,微转移组与无转移组比较差异均无显著性 (P>0 .0 5 )。结论 :胃癌淋巴结微转移对预后因子 P2 7Kip1 和 P5 3蛋白表达和 5年生存期影响不大 ,依据免疫组化检测胃癌淋巴结微转移灶方法敏感可行 ,但对胃癌患者的临床治疗与预后意义不大。