互隔交链孢霉诱导小鼠气道变态反应性炎症动物模型的构建

目的研究使用互隔交链孢霉孢子构建C57BL/6小鼠肺部变态反应性炎症模型的方法。方法模型组、阳性对照组和阴性对照组各12只小鼠。模型组以互隔交链孢霉孢子悬液致敏和激发小鼠,分别于第0、5、10天腹腔注射霉菌孢子悬液,第14天开始连续4天鼻滴霉菌孢子悬液。阳性对照组以鸡卵蛋白(OVA)代替霉菌孢子,阴性对照组以磷酸缓冲液(PBS)代替霉菌孢子。进行肺组织病理检查,支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞计数分类和总蛋白浓度测定,ELISA测定BALF中的白细胞介素-4(IL-4)和干扰素-γ(IFN-γ)及血浆中的总IgE和特异性IgE,测定小鼠气道阻力。结果模型组和阳性对照组可见明显炎症细胞浸润,特别是嗜酸性粒细胞,而阴性对照组则未见。BALF中细胞总数和嗜酸性粒细胞比例较阴性对照组明显升高(P<0.05);BALF上清中IL-4、总蛋白水平较阴性对照组明显升高(P<0.05),IFN-γ水平较阴性对照组降低(P<0.05)。血浆中总IgE和特异性IgE较阴性对照组明显升高(P<0.05)。小鼠气道阻力较阴性对照相比有明显升高(P<0.05)。结论使用互隔交链孢霉孢子致敏和激发C57BL/6小鼠成功的建立了小鼠气道变态反应性炎症模型。     

磷酸酰肌醇-3激酶抑制剂对小鼠气道炎症影响的实验研究

目的观察磷酸酰肌醇-3激酶(PI3K)抑制剂LY294002对卵白蛋白(OVA)诱导哮喘小鼠气道炎症的影响。方法Balb/c小鼠30只,随机分为三组,每组10只:PI3K抑制剂治疗组(LY组),OVA组和正常对照组(NC组)。通过OVA多次腹腔注射致敏和反复雾化激发,建立哮喘小鼠模型。末次抗原激发后48h收集支气管肺泡灌洗液(BALF)和骨髓标本,计数细胞总数和嗜酸性粒细胞(Eos),并行肺组织学检查。结果与OVA组比较,LY组BALF中细胞总数及Eos绝对数明显减少(p<0.05);肺组织中细支气管、血管周围Eos浸润得到控制,气道粘液分泌减少。结论PI3K抑制剂(LY294002)对卵白蛋白(OVA)致敏的哮喘小鼠气道炎症具有抑制作用。     

食品致敏性评价啮齿类动物模型研究——C3H/HeJ小鼠动物模型

目的研究C3H/HeJ小鼠作为食品致敏性评价动物模型的可行性,探讨不同致敏途径适当的致敏周期以及辅助性T淋巴细胞因子的变化。方法通过经口灌胃及腹腔注射两种途径给予雌性C3H/HeJ小鼠致敏蛋白——卵清蛋白(OVA),共35天。分别在第14、28、35天内眦取血分离血清,测定OVA特异性IgE。于第35天取脾脏,荧光实时定量PCR检测Th2型细胞因子IL-4及Th1型细胞因子IFN-γ的mRNA表达水平。结果与阴性对照组相比,经口灌胃OVA组小鼠第28和35天血清中OVA特异性IgE浓度显著升高(P0.05);腹腔注射OVA+Al(OH)3组小鼠第14、28和35天血清中OVA特异性IgE浓度显著升高(P0.05)。与阴性对照组相比,OVA组与OVA+Al(OH)3组小鼠细胞因子IL-4的表达水平均显著升高;细胞因子IFN-γ的mRNA表达水平均显著降低。结论C3H/HeJ小鼠可以作为食品致敏性评价动物模型,经口灌胃途径及腹腔注射途径的最佳致敏周期分别为14天和28天。     

Research on Allergenicity of Major Allergen Group Ⅰ from Dermatophagoides farinae Expressed in Tobacco

目的 探讨烟草表达的粉尘螨Ⅰ类变应原重组蛋白对小鼠的致敏性.方法 40只BALB/c小鼠随机分为4组,分别为PBS阴性对照组、卵白蛋白阳性对照组、原核表达Der f1(pDer f1)组、烟草表达Der f1(tDerf1)组,各组小鼠分别于第0、7、14天腹腔注射,PBS组给予PBS,其余3组分别用卵白蛋白、pDer f1、tDerf1致敏,第21天起连续7d雾化吸入激发,24h后处死.通过肺组织病理切片观察小鼠肺部炎症,收集支气管肺泡灌洗液(BALF)进行总细胞及分类计数,以ELISA法检测BALF、脾细胞培养上清(SCCS)的特异性细胞因子IL-2、IL-4、IL-5、IL-17和IFN-γ和血清中变应原特异性IgE、IgG1及IgG2a抗体浓度.结果 PBS组小鼠肺部未见明显病理改变,卵白蛋白、pDer f1、tDer f1组小鼠肺部出现明显的炎症.tDer f1组小鼠BALF中的细胞总数、嗜酸性粒细胞、中性粒细胞、淋巴细胞、抗原特异性细胞因子IL-4、IL-5、IL-17和SCCS中IL-4、IL-5、IL-17均明显高于阴性对照组(P＜0.01),而与阳性对照组相比无统计学意义;tDer f1组小鼠BALF和SCCS中IL-2、IFN-γ均低于阴性对照组,差异有统计学意义(P＜0.01);卵白蛋白、pDer f1、tDerf1组特异性IgE和IgG1抗体水平均高于PBS组(P＜0.01).结论 从烟草中表达的重组Derf1蛋白对小鼠具有致敏作用,其可作为变应原进一步研究.     

重组粉尘螨Ⅱ类变应原致敏小鼠肺部变应性炎症模型的建立

目的探讨以重组粉尘螨Ⅱ类变应原(rDerf2)建立小鼠肺部变应性炎症模型的方法。方法将30只6～8周龄雌性SPF级BALB/c小鼠,随机分为PBS组(阴性对照组)、卵清蛋白(OVA)组(阳性对照组)和rDerf2组(实验组)。实验组分别于第0、7、14天用rDerf2对小鼠腹腔进行注射致敏;再于第21天开始,连续7d进行雾化激发;对照组分别用PBS和OVA代替。最后一次雾化激发后24h内处死动物,观察肺组织病理变化、支气管肺泡灌洗液(BLAF)中的白细胞计数及分类,用ELISA测定BLAF和脾细胞培养上清中白细胞介素2(IL-2)、IL-4、IL-17和IFN-γ的含量及血清中IgG1、IgE抗体水平变化。结果实验组和阳性对照组BALB/c小鼠肺组织呈现明显的炎症性病理改变;rDerf2组的BALF中白细胞总数〔(17.39±1.03)×106/L〕及嗜酸性粒细胞(EOS)〔(1.61±0.03)×106/L〕计数,均明显高于PBS组(P<0.01);BALF中IL-4〔(78.92±9.06)pg/ml〕、IL-17〔(201.63±31.26)pg/ml〕与PBS组比较呈明显的高水平表达(P<0.01);而IL-2〔(8.29±1.27)pg/ml〕和IFN-γ〔(51.04±15.85)pg/ml〕的含量则显著下降(P<0.01);上述指标在脾细胞培养上清中出现类似的变化。rDerf2组血清中IgE〔(37.63±6.57)IU/ml〕、IgG1〔(16.68±2.90)μg/ml〕的含量表现为Th2型反应增强趋势;但OVA组和rDerf2组间所有指标差异均无统计学意义(P>0.05)。结论用rDerf2腹腔注射致敏后再雾化激发的方式能够成功构建小鼠肺部变应性炎症模型。     

烟草表达的粉尘螨Ⅰ类变应原重组蛋白的致敏效果研究

目的探讨烟草表达的粉尘螨Ⅰ类变应原重组蛋白对小鼠的致敏性。方法 40只BALB/c小鼠随机分为4组,分别为PBS阴性对照组、卵白蛋白阳性对照组、原核表达Der f1(pDer f1)组、烟草表达Der f1(tDerf1)组,各组小鼠分别于第0、7、14天腹腔注射,PBS组给予PBS,其余3组分别用卵白蛋白、pDer f1、tDerf1致敏,第21天起连续7 d雾化吸入激发,24 h后处死。通过肺组织病理切片观察小鼠肺部炎症,收集支气管肺泡灌洗液(BALF)进行总细胞及分类计数,以ELISA法检测BALF、脾细胞培养上清(SCCS)的特异性细胞因子IL-2、IL-4、IL-5、IL-17和IFN-γ和血清中变应原特异性IgE、IgG1及IgG2a抗体浓度。结果 PBS组小鼠肺部未见明显病理改变,卵白蛋白、pDer f1、tDer f1组小鼠肺部出现明显的炎症。tDer f1组小鼠BALF中的细胞总数、嗜酸性粒细胞、中性粒细胞、淋巴细胞、抗原特异性细胞因子IL-4、IL-5、IL-17和SCCS中IL-4、IL-5、IL-17均明显高于阴性对照组(P<0.01),而与阳性对照组相比无统计学意义;tDer f1组小鼠BALF和SCCS中IL-2、IFN-γ均低于阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.01);卵白蛋白、pDer f1、tDerf1组特异性IgE和IgG1抗体水平均高于PBS组(P<0.01)。结论从烟草中表达的重组Derf1蛋白对小鼠具有致敏作用,其可作为变应原进一步研究。     

支气管肺泡灌洗液嗜酸性粒细胞、白细胞介素-17及干扰素-γ与成人哮喘控制水平相关性研究

目的 探讨支气管肺泡灌洗液嗜酸性粒细胞(eosnophils, EOS)、白细胞介素-17(interleukin-17, IL-17)及干扰素-γ(interferon-γ, IFN-γ)与成人哮喘控制水平相关性。方法 选取本院2018年12月—2021年6月收治的51例成人哮喘患者为病例组,同期于本院行气管镜肺泡灌洗检查的20例健康成人作为对照组。获取2组支气管肺泡灌洗液,检测其EOS、IL-17、IFN-γ水平。评估哮喘ACQ-5评分。结果 病例组支气管肺泡灌洗液EOS、IL-17水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);随着哮喘控制程度的下降,支气管肺泡灌洗液EOS、IL-17水平逐渐增加,IFN-γ逐渐下降,差异有统计学意义(P<0.05);EOS、IL-17与哮喘ACQ-5评分成正相关关系,差异有统计学意义(P<0.05)。IFN-γ与哮喘ACQ-5评分无显著相关性(P>0.05)。受试者工作特征曲线分析显示,IL-17诊断哮喘灵敏度及特异度较高,EOS特异度高,IFN-γ灵敏度高。结论 成人哮喘支气管肺泡灌洗液EOS、IL-17水平升高,I...     

内毒素在小鼠过敏性哮喘模型所起作用的实验研究

目的建立小鼠过敏性哮喘模型,在过敏原的致敏和激发阶段给予不同剂量内毒素(即脂多糖LPS),探讨内毒素在哮喘模型中的作用机制。方法建立BALB/c小鼠哮喘模型,设立实验组和对照组开展后续实验。实验组包括:鸡卵清白蛋白(OVA)致敏,OVA激发组;OVA致敏,LPS激发组;OVA致敏,OVA+LPS联合激发组;LPS暴露于OVA致敏前,OVA激发组;对照组包括试剂对照组和健康对照组。各实验组的LPS剂量均分为高、中、低三个剂量组。通过测定小鼠气道阻力和肺顺应性来反映其肺功能改变;流式细胞术(FCM)测定FITC、PE阳性细胞数,表征CD4+CD2+5调节性T淋巴细胞(以下简称Treg细胞)的相对比例;荧光实时聚合酶链反应定量测定肺脏和脾脏Foxp3mRNA表达的水平;ELISA法测定血浆总IgE和OVA特异性IgE水平,抗体夹心ELISA法测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中Th2细胞因子(IL-4和IL-5)的水平;计数BALF中白细胞总数和嗜酸性粒细胞等各类白细胞所占百分比;常规病理切片观察肺组织改变情况。结果结果表明,与哮喘模型组小鼠相比,在LPS各处理组中,总体上能诱导Treg细胞的产生,改善肺功能,降低IgE滴度,降低Th2介导的免疫反应,同时诱导肺部炎症。尤其是在致敏阶段腹腔注射内毒素可以缓解由过敏原诱导的气道炎症和改善肺功能,诱导肺组织和脾组织Foxp3mRNA表达的增加。结论LPS抑制了Th2介导的过敏反应,可能与Foxp3表达量的增加相关,后者诱导Treg细胞增殖,对哮喘症状起到缓解作用。     

灭活卡介苗对哮喘小鼠治疗作用及机制探讨

目的 探讨灭活卡介苗治疗哮喘小鼠的作用机制.方法 40只Balb/c小鼠随机分4组,模型组:皮下注射卵蛋白(OVA)加氢氧化铝凝胶首次致敏,第7、14天用等量致敏液腹腔注射,第21天后用OVA超声雾化,连续激发7 d.对照组:用生理盐水代替OVA氢氧化铝混合液注射,雾化用生理盐水代替OVA,处理同模型组.治疗组:致敏激发同模型组,连续激发7 d之后,以灭活卡介苗皮内注射,1次/周,共13周,每隔1月用OVA超声雾化激发3 d.治疗对照组处理:激发同治疗组,用生理盐水代替灭活卡介苗皮内注射,时间同治疗组.所有动物均在末次激发后处死,分别行肺组织切片及支气管肺泡灌洗,取灌洗液行细胞分离与计数、细胞因子IL-4、IL-13、IFN-γ测定.结果 模型组较对照组:IFN-γ值减低[(54.44±14.60)pg/ml vs (85.14±18.17)pg/ml](P＜0.01);IL-4值增高[(26.96±8.95)pg/ml vs (14.37±4.62)pg/ml](P＜0.01);IL-13值增高[(120.52±34.09)pg/ml vs (70.99±22.14)pg/ml](P＜0.01).治疗组较治疗对照组IFN-γ值增高[(95.96±26.86)pg/ml vs (48.53±13.89)pg/ml],(P＜0.01);IL-4值减低[(16.79±7.58)pg/ml vs (30.53±13.34)pg/ml](P＜0.05);IL-13值减低[(95.42±15.17)pg/ml vs (139.25±21.58)pg/ml](P＜0.05).结论 灭活卡介苗治疗对哮喘小鼠有治疗作用,其机制可能与调节Th1/Th2型细胞因子平衡、重建Th1免疫反应及抑制Th2免疫反应有关.     

AR大鼠IL-5、IFN-γ表达水平与鼻黏膜EOS相关性

目的 探讨变应性鼻炎(AR)大鼠脾组织白介素-5(IL-5)、γ-干扰素(IFN-γ)表达水平与鼻腔黏膜嗜酸性粒细胞(EOS)数相关性.方法 经腹腔隔日1次注射卵清蛋白(OVA)变应原7次后,鼻腔滴入OVA鼻内激发制作AR大鼠模型,并维持10d,最后1d于激发后0.5、1、2、4、6和8h处死动物,采用酶联免疫吸附法定量检测各时段大鼠脾组织IL-5和IFN-γ含量,计数鼻黏膜EOS数,并对IL-5、IFN-γ与EOS之间进行相关性分析.结果 与对照大鼠比较,AR大鼠在各时段EOS数均增加(P＜0.05);AR大鼠在激发后1、2、4、6h脾组织IL-5表达水平分别为(382.86±196.17)、(456.45±149.82)、(286.33±106.56)、(259.50±128.74) pg/mL,均高于对照大鼠(P＜0.05),IFN-γ表达水平分别为(16.82±7.63)、(28.47 ±13.33)、(20.37 ±9.73)、(21.73±10.30) pg/mL,均低于对照大鼠(P＜0.05),IL-5表达水平和鼻黏膜EOS数呈正相关(r=0.942,P=0.000),IFN-γ表达水平与EOS数呈负相关(r=-0.604,P=0.000).结论 AR大鼠脾组织IL-5、IFN-γ表达与鼻黏膜EOS数明显相关.     

健康欢乐园

进入伏天，持续高温，可是我们办公室的空调就是不给面子——坏了!热得金丰是坐又坐不下，扇扇子又出汗。不行，这样下去肯定不行，金丰嚷嚷。主编打了电话找来了修空调的师傅，可是没有梯子。“金丰，你和云崖到物业取一下梯子。”主编微笑着说。     

妇科“安检”2005

2005年即将离去，本期关注将视角投向广大女性最常见，也是女性所特有的妇科疾病。都说女人能顶半边天，我们更要时刻保持良好的精神和身体状态，拒绝疾病造访。不如趁现在对自己的身体状况做个全面的总结，有病早治，无病早防，以最佳状态迎接新一年的到来。[编者按]     

梅毒患者外周血TH1/TH2淋巴细胞比的检测

目的探讨梅毒患者外周血TH1/TH2淋巴细胞比分布的漂移情况及其与梅毒病程的相关性. 方法采用流式细胞分析技术检测38例Ⅱ期梅毒患者和20例健康体检者外周血CD3 、CD8-T细胞胞内细胞因子IFN-γ和IL-4的表达. 结果与正常对照组相比,显性梅毒、隐性梅毒患者的TH1细胞数降低,TH2细胞数增高,TH1/TH2比值降低,差异有显著性(P<0.01);而隐性梅毒与显性梅毒比较,其TH1淋巴细胞数显著下降(P<0.05),TH2和TH1/TH2比值差异均无显著性(P>0.05). 结论梅毒患者TH1型反应模式占弱势状态,TH2型反应模式处于优势状态,TH1/TH2平衡失调,TH1/TH2平衡向TH2方向漂移,这可能导致机体不能有效清除TP,促进疾病向潜伏阶段发展.     

2型糖尿病并发肺结核患者血浆Th1／Th2型细胞因子研究

目的分析2型糖尿病并发肺结核（T2DM-FIB）患者血浆中干扰素-γ（IFN-γo组）,每组加例。采用酶联免疫吸附（ELISA）法测定各组血浆中IFN-γ和IL4水平,并采用多元线性回归模型分析影响2者分布的相关因素。结果IFN-γ浓度表现为并发组〉TB组〉T2DM组〉Hco组,组问差异有统计学意义,IL4在4组间未见差异;血糖控制差、未治疗糖尿病、患糖尿病后减重多、肺部空洞同血浆IFN-γ存在正关联,糖尿病微血管并发症、调查时体质指数与其存在负关联。结论T2DM—PTB患者血浆中Th1／Th2应答有所上调,此上调与血糖控制差、TB病理损伤有关,但2者间孰因孰果尚待研究。     

卵巢癌患者外周血Th1/Th2细胞因子的变化趋势及其临床意义

目的:分析卵巢癌患者外周血Thl和Th2细胞的细胞因子变化,为其免疫治疗提供实验依据。方法:用刺激物刺激43例卵巢癌患者外周血CD3+T细胞增加细胞因子的表达,然后加入荧光标记的特异性抗细胞因子单克隆抗体,特异性抗体与抗原结合,最后应用流式细胞仪分析特异性细胞因子表达水平。用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中相应的细胞因子水平,同时设正常对照组,以评价其水平变化趋势。结果:卵巢癌患者Thl型细胞因子干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-12(IL-12)表达水平较正常对照组显著降低,Th2型细胞因子白细胞介素-4(IL-4)和白细胞介素-10(IL-10)表达水平较正常对照组升高,差异有统计学意义。肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平较正常对照组升高,差异有显著性。结论:卵巢癌患者Th2型细胞因子模式占优势,这可能是肿瘤细胞发生免疫逃逸,从而导致肿瘤的发生或者转移的原因之一。     

抗生素诱导肠道菌群失调在RSV感染小鼠模型上对肺部Th1/Th2的影响

[目的]探讨抗生素诱导肠道菌群失调在RSV感染小鼠模型上对肺部Th1/Th2的影响。[方法]RSV组小鼠鼻腔接种RSV,抗生素加RSV组小鼠鼻腔接种RSV后连续口服抗生素头孢哌酮7d,接种后d9和d16进行变应原气道激发,d19检测BALF中细胞总数和分类计数,ELISA检测细胞因子水平、肺组织病理评分以及流式细胞仪检测肺部DC亚型和成熟度。[结果](1)小鼠感染RSV后,BALF接种到Hep-2细胞可以引起典型CPE,直接免疫荧光证实肺部有RSV抗原,BALF中细胞总数升高,以淋巴细胞增加为主,肺部可见明显炎症,说明RSV感染小鼠模型建立成功;(2)与对照组比较,RSV感染组和抗生素加RSV组小鼠肺部以Th1优势应答为主;(3)与RSV组比较,抗生素加RSV组小鼠BALF中细胞总数和分类计数、IL-4、IL-10和IFN-γ水平、肺部病理评分以及肺部DC亚型和成熟度无统计学差异。[结论]RSV感染可以掩盖或者逆转抗生素诱导肠道菌群失调小鼠易被诱导的肺部Th2样反应。     

热烈祝贺第七届全国会员代表大会暨第十届全国营养学术会议胜利召开

<正>中国营养学会第七届全国会员代表大会暨第十届全国营养学术会议是我国营养学界四年一次的盛会。全国各地的会员代表将听取本届理事会的工作报告,并进行换届选举。同时听取有关营养学最新进展的专题报告,并交流新的学术成就。我们对大会的胜利召开表示最热烈的祝贺!对第六届理事会