不同肥料栽培对岩黄连中生物碱含量的影响研究

目的:考察施加不同肥料对岩黄连药材中生物碱含量的影响。方法:以岩黄连药材中总生物碱、脱氢卡维汀和卡维汀含量为指标,应用多元logistic回归分析肥料中不同元素对岩黄连药材质量的影响。结果:氮元素与岩黄连中总生物碱、脱氢卡维汀、卡维汀含量和综合评分呈正相关,硅酸盐菌与上述指标呈负相关,钾、微量元素则在不同生物碱中呈现不同的相关关系。结论:综合评价岩黄连总生物碱、脱氢卡维汀、卡维汀的含量,复合肥可作为岩黄连栽培的理想肥料。     

不同干燥方法对岩黄连中脱氢卡维汀及总生物碱含量的影响

目的:研究探讨不同干燥方法对岩黄连药材不同部位(根、茎、叶、花序)中主要有效成分脱氢卡维汀及其总生物碱含量的影响.方法:对不同干燥方法所得岩黄连药材不同部位中脱氢卡维汀(HPLC法)和总生物碱(紫外分光光度法)的含量进行测定和统计分析.结果:与传统干燥方法(阴干、晒干、60℃烘干)相比,常温真空干燥法和真空冷冻干燥法所得岩黄连药材中脱氢卡维汀含量相对较低,而阴干法所得药材中脱氢卡维汀的含量较高,其中根和花序中脱氢卡维汀含量最高,分别为冻干法所得药材的相应部位中含量的3.4倍和2.2倍.不同干燥方法对药材各部位中总生物碱含量的影响与对脱氢卡维汀含量的影响基本一致.结论:岩黄连采收后,干燥方法对所得干燥药材中脱氢卡维汀及总生物碱的含量有较大影响,以阴干法所得药材中二者的含量最高.     

野生与人工栽培岩黄连药材的比较

目的 研究野生与人工栽培岩黄连中总生物碱及脱氢卡维丁量的差异.方法 采用紫外分光光度法对药材中总生物碱进行定量测定,用高效液相色谱法测定岩黄连药材中脱氢卡维丁的量,并对测定方法进行了系统的方法学考察.结果 人工栽培的岩黄连药材中总生物碱的量达到3.20%以上,脱氢卡维丁的量在0.80%以上.野生的岩黄连药材中总生物碱的量在0.75%左右,脱氢卡维丁的量均在0.20%左右.结论 野生岩黄连药材中总生物碱及脱氢卡维丁的量比人工栽培的要低.     

不同产地岩黄连中总生物碱和脱氢卡维丁的比较研究

目的建立岩黄连中总生物碱和脱氢卡维丁的含量测定方法,并探讨不同产地岩黄连二者含量。方法以脱氢卡维丁为对照,分光光度法测定总生物碱含量;RP-HPLC法测定脱氢卡维丁含量,以Lichrosopher-C18柱为分析柱,0.01mo1/LKH2PO4水溶液(用磷酸调pH=3)-乙腈(75∶25)为流动相,检测波长347 nm,柱温30℃,流速1.0 ml/min。结果广西和贵州产的岩黄连药材总生物碱和脱氢卡维丁含量较高,且广西产的药材两者含量较稳定。结论所建立的方法操作简便快速,结果准确可靠。测定的不同产地样品中,以广西产的药材质量较好且稳定。     

高效液相色谱法测定岩黄连总碱胶囊中3种生物碱含量

岩黄连中主要有效成分是以脱氢卡维丁为代表的生物碱类化合物[1],这类化合物具有潜在的抗HBV活性和肝保护活性[2]。有文献[3]报道使用高效液相色谱法测定岩黄连药材中脱氢卡维丁的含量。但未见采用高效液相色谱法同时测定3种生物碱含量的文献报道。建立高效液相色谱法定量测定岩黄     

基于组效关系的壮药岩黄连抑制HSC-T6细胞增殖活性成分辨识研究

目的建立岩黄连提取物的化学成分与其抑制大鼠肝星状细胞(HSC-T6)作用的组效关系模型,寻找与药效显著相关的活性成分。方法采用正交设计法提取得到9个岩黄连提取物,通过HPLC法对岩黄连提取物进行成分表征,以共有峰的相对峰面积来表征其相对质量分数;MTT法测定岩黄连提取物抑制HSC-T6细胞增殖活性,以抑制率为评价指标;利用SIMCA-P11.5软件的正交投影偏最小二乘法(OPLS)分析,研究共有峰与药效的相关性,根据S-载荷图与变异权重参数(VIP)值辨识显著活性成分;通过MTT法及流式细胞仪验证所筛选成分的活性。采用细胞乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒观察所筛选成分对人正常肝细胞(HL-7702)LDH活性的影响。结果 HPLC法对9个岩黄连提取物进行表征分析结果确定了21个共有峰,其中19、18、13、20、14和16号共有峰(VIP1)与岩黄连抑制HSC-T6细胞增殖活性显著相关,并鉴定18、19和20号共有峰代表的化合物分别为脱氢卡维丁、巴马汀和小檗碱。MTT结果显示不同质量浓度脱氢卡维丁、巴马汀及小檗碱对HSC-T6细胞增殖具有明显抑制作用;流式细胞术检测结果也与MTT结果一致,脱氢卡维丁、巴马汀及小檗碱(0.10 mg/m L)处理HSC-T6细胞后的凋亡率分别为42.12%、42.22%、36.73%,明显高于对照组的1.69%(P0.01)。细胞毒性实验发现当脱氢卡维丁终质量浓度低于0.15 mg/m L,巴马汀与小檗碱终质量浓度低于0.10 mg/m L时,对HL-7702细胞不具有明显的细胞毒作用。结论通过组效关系研究首次发现岩黄连提取物中脱氢卡维丁、巴马汀与小檗碱在体外能显著抑制HSC-T6细胞增殖并诱导其凋亡,且在有效质量浓度下不具有明显的细胞毒作用,表明这3种化学成分极有可能是岩黄连抗肝纤维化作用的潜在活性成分且在应用中具备一定的安全性;同时也提示基于组效关系的研究思路可为天然植物药活性成分的辨识提供行之有效的方法。     

高效液相色谱法测定岩黄连药材中3种生物碱

目的建立岩黄连药材中脱氢卡维丁、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱的测定方法,为完善药材质量评价提供参考依据。方法色谱柱为Agilent XDB C18(150 mm×4.6 mm5,μm),流动相为乙腈-0.01 mol/L磷酸二氢钾水溶液(21:79),柱温30℃,检测波长347 nm,体积流量1.0 mL/min。结果脱氢卡维丁的线性范围为15.015～90.09μg/mL(r=0.999 7),平均回收率为99.01%(RSD=2.97%);盐酸巴马汀的线性范围为14.97～89.82μg/mL(r=0.999 9),平均回收率为100.48%(RSD=2.73%);盐酸小檗碱的线性范围为3.55～28.40μg/mL(r=0.999 7),平均回收率为99.67%(RSD=2.54%)。结论本方法准确、可靠、重现性好,可用于岩黄连药材的质量控制。     

HPLC测定岩黄连生物总碱中脱氢卡维丁、盐酸巴马汀和盐酸小檗碱

目的:建立高效液相色谱法测定岩黄连生物总碱中脱氢卡维丁、盐酸巴马汀及盐酸小檗碱含量的方法,为完善岩黄连生物总碱的质量评价提供依据。方法:采用高效液相色谱法,以Agilent XDB C18(4.6 mm×150 mm,5μm)为色谱柱,以乙腈-0.01 mol.L-1磷酸二氢钾水溶液(18.5∶81.5)为流动相,流速1.0 mL.min-1,柱温30℃,检测波长347 nm。结果:脱氢卡维丁进样量在15.375～92.25 mg.L-1(r=0.999 9)呈良好的线性关系,平均加样回收率96.43%,RSD 1.13%;盐酸巴马汀进样量在14.91～89.46 g.L-1(r=0.999 9)呈良好的线性关系,平均加样回收率96.28%,RSD 1.22%;盐酸小檗碱进样量在3.525～28.2 mg.L-1(r=0.999 7)呈良好的线性关系,平均加样回收率为103.02%,RSD 1.35%。结论:所建立的方法简便、准确、重复性好,可以用于控制岩黄连生物总碱的质量。     

壳寡糖促进岩黄连总碱提取物中原小檗碱型生物碱成分肠道吸收的研究

目的 :考察壳寡糖对岩黄连总碱提取物中原小檗碱型生物碱活性成分肠道吸收的促进作用. 方法 :采用大鼠在体肠单向灌流模型,研究添加不同浓度壳寡糖后岩黄连总碱中脱氢卡维丁、盐酸小檗碱和盐酸巴马汀的吸收动力学参数变化,评价壳寡糖对药物成分肠道吸收的促进作用. 结果 :壳寡糖的浓度对3个活性指标成分在大鼠肠道的吸收速率常数(K_a)和有效渗透系数(P_eff)具有不同程度的影响,在0.5%壳寡糖溶液中活性指标成分的K_a和P_eff增加明显,呈现较强的吸收促进作用. 结论 :壳寡糖对岩黄连生物碱中原小檗碱型生物碱活性成分的肠道吸收有一定促进作用.     

岩黄连生物碱在大鼠胃肠道的吸收动力学研究

目的:以脱氢卡维丁为指标成分研究岩黄连总生物碱在大鼠胃、肠的吸收动力学特征.方法:采用大鼠在体胃、肠吸收模型,以高效液相色谱法测定胃、肠灌注液中药物的含量.结果:药物在胃和小肠中的每小时吸收百分率分别为8.88%,2.08%;药物在大鼠十二指肠、空肠的吸收速率常数略高于回肠和结肠部位,但无显著性差异;药物中、高浓度的吸收速率常数基本一致,低浓度的吸收速率常数明显降低;随灌流液pH升高,药物吸收速率常数增大,但也无显著性差异.结论:药物在胃、全肠道均有吸收,但吸收均较差,胃中高于小肠中;不同肠段和灌流液不同pH对吸收无显著性影响;中、高浓度范围内表现为被动扩散吸收机制.     

基于UPLC-PDA生物碱指标性成分含量合特征图谱的不同产区黄连（味连）整体质量表征研究＊

目的 通过对不同产地黄连（味连）药材质量进行分析，得到黄连药材质量差异表征。方法 采用UPLC-PDA色谱法，建立黄连生物碱指标性成分含量合特征图谱分析方法，采用PLS-DA模型分析，找到不同产区黄连药材质量差异表征。结果 不同产区黄连药材特征图谱色谱峰数量和成分类型一致，以生物碱类成分和非生物碱类成分相对含量同时考量可将黄连药材分为3类：第1级黄连药材主要来源于四川、重庆产区，生物碱和非生物碱类成分含量均较高，9（酚类）号色谱峰成分相对含量为主要相关成分；第2级黄连药材主要来源于四川、重庆产区，生物碱和酚类成分含量较高，1（未知）、13（黄连碱）、2（酚类）、5（其他）、12（生物碱）号色谱峰成分相对含量为主要相关成分；第3级黄连药材主要来源于湖北、重庆、四川产区，生物碱和非生物碱含量较低，11（生物碱）、6（酚类）、8（未知）号色谱峰成分相对含量为主要相关成分。结论 不同产区黄连药材质量差异表征为：四川产黄连药材主要表现为生物碱类成分、其他类成分含量较高，与其他产区黄连差异较大；重庆产黄连主要表现为酚类成分含量较高；湖北产区黄连与重庆产区黄连相似。     

基于组效关系的壮药岩黄连提取物抑制人肝癌细胞SMMC-7721活性成分辨识研究

目的基于高效液相色谱(HPLC)分析方法,结合人肝癌SMMC-7721细胞模型,通过组效关系研究,寻找与药效活性相关的成分。方法通过分析岩黄连正交9个提取物样品,以HPLC对岩黄连提取物进行成分表征,确定了20个共有峰。采用MTT法检测岩黄连提取物抑制人肝癌细胞SMMC-7721活性,以抑制率为评价指标,将其与HPLC图共有色谱峰的相对峰面积进行正交投影的偏最小二乘法(orthogonal partial least squares,OPLS)分析,根据变异权重系数(variable importance in the projection,VIP)辨识显著活性成分。结果结果表明,岩黄连提取物中11个共有峰与其抑制SMMC-7721细胞活性显著相关,贡献较大的共有峰依次为15122011710425113,其中15号与17号共有峰分别为脱氢卡维丁与巴马汀。经细胞试验验证,发现0.20,0.25,0.30mg·ml-1脱氢卡维丁组细胞增殖抑制率分别为(69.67±1.0)%,(72.47±0.3)%,(73.08±1.1)%,0.20,0.30,0.40mg·ml-1巴马汀组细胞增殖抑制率分别为(36.14±2.8)%,(66.03±0.7)%,(70.66±0.6)%。结论通过组效关系研究发现岩黄连提取物中脱氢卡维丁和巴马汀对肝癌SMMC-7721细胞的增殖具有抑制作用,提示这两个化学物质可能是岩黄连抗肝癌作用的潜在活性成分。     

分光光度法测定岩黄连不同部位总生物碱的含量

目的建立一种简单快速的方法来测定岩黄连总生物碱含量,为岩黄连质量控制提供依据。方法采用氯仿超声提取岩黄连不同部位样品,依据酸性染料比色法的原理,以盐酸小檗碱为对照,溴甲酚绿为指示剂,在416 nm波长下比色测定样品中总生物碱含量。结果吸光度值与生物碱含量线性关系良好(r=0.999 1);回收率为101.91%,RSD为1.75%;测定结果在3 h内稳定,RSD为1.09%;岩黄连根部生物碱含量最高,达到48.77 mg/g,叶和夹果其次,花和茎中最低。结论该测定方法简便可靠,可用于岩黄连质量控制;部位不同总生物碱含量也不同。     

黄连单枝连商品规格等级及生物碱含量研究

目的研究黄连药材单枝连的外观性状量化指标以及与药材内在生物碱含量的相关性,为黄连单枝连药材商品规格等级的合理划分提供依据。方法对不同产地单枝连外观性状特征进行聚类分析。采用HPLC法测定了单枝连中6种生物碱含量,并对外观性状指标与内在生物碱含量之间进行了相关性分析,结合生产实际,依据分析结果建立单枝连商品规格分级标准。结果结合生产实际筛选出单枝连长、直径和单枝重作为分级指标,通过聚类分析,将黄连单枝连商品规格分为四个等级。特级黄连长不小于4.5 cm,直径不小于7.0 mm,重量不低于1.4 g;Ⅰ级黄连长不小于4.0 cm,直径不小于5.5 mm,重量不低于1.1 g;Ⅱ级黄连长不小于3.5 cm,直径不小于4.5 mm,重量不低于0.8 g;Ⅲ级黄连长不小于2.5 cm,直径不小于3.5 mm,重量不低于0.5 g。生物碱含量测定结果表明不同商品等级黄连的生物碱含量间无显著差异,不同产地黄连生物碱含量存在显著差异。相关性分析表明,单枝连外观性状指标与内部生物碱含量无显著相关性。结论此方法制定出的黄连商品规格分级标准适用于黄连商品生产流通领域,有利于黄连药材的质量控制。     

不同品种和产地黄连的总生物碱含量测定

目的：评价不同产地和品种的黄连药材的内在质量。方法：以总生物碱含量作为评价黄连内在质量的主要指标,以紫外分光光度法测定不同品种和产地的黄连的总生物碱含量。结果：7个样品黄连总生物碱的含量为5．80％－9．31％,其中云[连含量最高,味连（南岸连）含量最低。结论：品种不同其含量不同,而同品种不同产地其含量也是不同的。     

HPD-100树脂分离纯化岩黄连生物总碱的工艺研究

目的:研究大孔树脂吸附分离纯化岩黄连生物碱的工艺。方法:采用静态吸附实验考察HPD-100、D101、AB-8等10种树脂对岩黄连生物碱的吸附效果,筛选出吸附性能较好的树脂,进一步采用固定床吸附法分离岩黄连提取物中生物总碱,探讨主要参数对生物总碱固定床穿透曲线及洗脱曲线的影响。结果:HPD-100树脂吸附性能优于其它所考察的树脂,经HPD-100树脂固定床吸附分离后,岩黄连提取物中生物总碱含量从39%提高到76%、收率达到83%以上;岩黄连生物碱的穿透曲线可以通过Bohart-Adams模型方程拟合,拟合方程能较准确地预测其穿透时间。结论:HPD-100大孔树脂适合于岩黄连生物总碱的分离纯化。     

黄连解毒汤用半仿生法提取药材组合方式的优选

目的 :选择半仿生法提取黄连解毒汤的最佳药材组合方式。方法 :以小檗碱、黄芩苷、栀子苷、总生物碱、总黄酮的含量、干浸膏得率及无水乙醇提取精制液的高效液相梯度洗脱总积分面积等为指标进行综合判定。结果与结论 :黄连解毒汤以黄连、黄柏与栀子合煎 ,黄芩单煎的提取方式为佳。     

我国黄连(味连)质量评价研究

目的:探索黄连(味连)成分动态变化,对各主产地黄连作出质量评价。方法:对我国黄连(味连)药材主产地的重庆石柱县及巫溪县、四川洪雅县及大邑县、陕西镇坪县、湖北利川县的黄连样品(3～5年生)进行成分分析比较,以黄连主要生物活性成分小檗碱、黄连碱、药根碱、巴马汀及总生物碱为指标,分别采用HPLC和UV测定其含量。结果与结论:各地黄连(味连)所测指标性成分及总生物碱含量总体上以5年生为高,结合产量等因素考虑,黄连(味连)药材以5年生采挖为宜;各地黄连(味连)在所测指标成分含量上有一定差异,但均符合现行《中国药典》2000年版规定,总体质量情况良好。     

川黄连多指标成分定量及特征图谱建立研究＊

目的 测定川黄连（味连、雅连、凤尾连）中7个生物碱（小檗碱、黄连碱、巴马汀、药根碱、表小檗碱、非洲防己碱、格陵兰黄连碱）的含量并建立3种川黄连的特征图谱，构建川黄连科学的质量控制方法，以提升川黄连药材、饮片及其中成药制剂的质量控制水平，保障临床用药安全有效。方法 建立了同时测定7个黄连生物碱成分的HPLC含量测定方法，经方法学验证该方法准确性、重现性、精密度、稳定性、线性均符合要求。测定6批味连、6批雅连、3批凤尾连的7个生物碱的含量以及总生物碱的含量；建立了黄连药材HPLC特征图谱测定方法，经方法学验证，该方法精密度、重现性、稳定性均符合要求。结果 味连的总生物碱含量最高，7个生物碱在味连、雅连、凤尾连中含量各不相同，差异较大；通过对15批黄连的特征图谱相似度的分析，找出共有特征峰15个，与黄连生物碱对照品比对后，指认了8个峰，均为黄连生物碱成分。结论 川黄连多指标成分定量结合特征图谱，可以有效控制川黄连药材的质量，为2020年版《中华人民共和国药典》黄连药材质量标准的完善与提高提供参考。     

我国黄连(味连)质量评价研究

目的:探索黄连(味连)成分动态变化,对各主产地黄连作出质量评价。方法:对我国黄连(味连)药材主产地的重庆石柱县及巫溪县、四川洪雅县及大邑县、陕西镇坪县、湖北利川县的黄连样品(3～5年生)进行成分分析比较,以黄连主要生物活性成分小檗碱、黄连碱、药根碱、巴马汀及总生物碱为指标,分别采用HPLC和UV测定其含量。结果与结论:各地黄连(味连)所测指标性成分及总生物碱含量总体上以5年生为高,结合产量等因素考虑,黄连(味连)药材以5年生采挖为宜;各地黄连(味连)在所测指标成分含量上有一定差异,但均符合现行《中国药典》2000年版规定,总体质…