非梗阻性无精子症的临床诊断

自1992年卵细胞质内单精子注射(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)技术开始应用于临床以来,为无精子症患者的不育治疗带来了希望。梗阻性无精子症(OA)再通手术失败或没有手术指征的患者,获取附睾和睾丸精子后可进行ICSI。1993年,Craft等[1]首次报道了在非梗阻性无精子症     

非梗阻性无精子症与弱精子症患者精浆中miR-141-5p表达以及精液质量参数差异分析

目的 探究非梗阻性无精子症、弱精子症患者精浆中的miR-141-5p表达差异性。方法 选取2021年2月—2023年6月苏州大学附属第一医院收治的86例非梗阻性无精症患者为非梗阻性无精子症组、94例弱精子症患者为弱精子症组以及同期选取100名健康人为对照组。对比3组的精浆miR-141-5p表达差异性。结果对比3组的精浆miR-141-5p表达水平（3.46±1.42）、（3.39±1.57）、（2.75±0.93）,差异有统计学意义（F=3.560,P<0.05）;而非梗阻性无精子症组与弱精子症组miR-141-5p对比,差异无统计学意义（P>0.05）。3组精液量对比,差异无统计学意义（P>0.05）;弱精子症组在精子总数、精子浓度、精子前向运动率均低于对照组,差异有统计学意义（P均<0.05）。结论 非梗阻性无精子症、弱精子症患者的精浆miR-141-5p水平的表达低于正常健康男性水平,但精液量差异较小。     

梗阻性无精子症的外科治疗

目的探讨梗阻性无精子症的外科治疗方法及效果。方法对30例梗阻性无精子症患者,根据其病因分别采取输精管-输精管吻合术、输精管-附睾管吻合术、输精管-输精管吻合术加对侧输精管-附睾管吻合术。术后6mo及1a末检查患者精子的排出情况,并比较3组手术的效果。结果术后6mo末患者精子出现率73%,精子正常率40%;29%的患者精子运动率>30%;输精管端端吻合术后精子出现率62%,输精管附睾吻合术后精子出现率40%,两组比较差异有极显著性(P<0.01)。结论梗阻性无精子症的外科治疗方法简便、经济,效果较好。     

MD-TESE手术对非梗阻性无精子症患者取精结局的应用研究

目的观察MD-TESE对非梗阻性无精子症患者取精结局的影响。方法选取2012年6月-2015年3月来我院就诊的107例NOA患者为研究对象,其中TFNA组42人,TESE组30人,MD-TESE组35例,对比三组在取精成功率、术后并发症方面的差异,并观察术前与术后3个月血清总睾酮水平的变化。结果 TFNA组SRR为26%（11/42）,TESE组SRR为33%（10/30）,MD-TESE组SRR为48%（17/35）,MD-TESE组SRR均高于睾丸TFNA组（P〈0.01）和TESE组（P〈0.05）。三组术后均未发生感染和睾丸萎缩,TFNA组合TESE组分别有1例发生阴囊血肿,术后3个月血清总睾酮水平与术前无明显差异。结论MD-TESE是一项更安全、更有效的精子获取技术。     

非梗阻性无精子症患者X染色体连锁的TEX11基因多态性研究

目的明确潮州地区男性非梗阻性无精子症患者X染色体连锁的TEX11基因多态性类型及其频率。方法从2012年6月至2018年5月来本院泌尿外科和生殖医学科就诊的患者中收集到217例无精子症患者血液样本,列为实验组的35例患者符合非梗阻性无精子症的诊断标准,以生精(生育能力)正常男性为对照组,应用多重聚合酶链反应(PCR)技术对实验组和对照组的TEX11基因进行扩增,并通过基因测序检测TEX11基因多态性情况,采用Chromas软件、Nucleotide BLAST数据库分析比对基因测序结果,对TEX11基因多态性的位点和类型进行统计。结果实验组TEX11外显子错义突变点有2处,分别是Exon 7:c.389 A>G,突变率37.1%;Exon 17:c.1351 G>A,突变率8.6%。对照组中发现Exon7、Exon 17也有相同位点突变,突变率分别为:37.5%、8.3%。2组之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论在非梗阻性无精子症患者和生精正常男性都发现了TEX11外显子2个相同单核苷酸多态性(SNP)(Exon 7:c.389 A>G;Exon 17:c.1351 G>A),本研究推论这2种突变不影响TEX11的功能。     

显微外科技术治疗梗阻性无精子症的护理体会

无精子症是男性不育中最为严重的一种,发病率为1％。占男性不育的5％～20％．根据病因分为梗阻性无精子症和非梗阻性无精子症两种类型。梗阻性无精子症（obstructive azoospermia,OA）是指患者睾丸有正常的生精功能,由于先天性因素和感染损伤等后天性因素导致输精管道梗阻,使精子无法进入精液中。输精管吻合术和附睾输精管吻合术是治疗OA的两种最为常用的方法,但复通率和致孕率不高。随着显微外科技术的普及应用。     

长春地区425例非梗阻性无精子症患者AZF区微缺失分析

目的探讨长春地区非梗阻性无精子症患者全血基因组AZF区微缺失情况。方法收集长春地区425例男性无精子症患者外周血,用多重PCR的方法对AZF基因4个区域的序列标志位点(STS)进行检查。结果425例无精子症患者中共26例发现AZF区微缺失,占6.12%。其中单独AZFa缺失1例;单独AZFb缺失1例;单独AZFc缺失9例;未发现单独AZFd缺失。所有AZF缺失的患者中带有AZFc缺失共24例,占92.31%。结论长春地区非梗阻性无精子症患者AZF区微缺失以AZFc缺失为主。     

超声对梗阻性无精子症的诊断价值

无精子症临床上分为梗阻性和非梗阻性,其中梗阻性无精子症是男性不育的重要原因之一,占10％～15％。在超声检查开展以前,精道梗阻主要依靠X线造影诊断,但由于其放射损伤性及电离辐射对男性不育患者的潜在影响,在临床上使用一直受到限制。目前,经直肠超声和经阴囊超声为输精管道的诊断提供了无创的影像学检查。     

精囊腺B超测量对射清管梗阻性无精子症的诊断意义

目的通过应用B超测量精囊腺大小及精液检测,探讨单纯性射精管梗阻性无精子症的非创伤性诊断。方法经腹部B超测量此类患者的精囊腺大小、并检测精液量、精液pH值和精浆果糖浓度,与正常有生育能力的男性进行比较。结果患者的精囊腺分别为右侧上下径(23.1±5.7)mm,前后径(9.1±1.7)mm,左侧上下径(25.1±5.4)mm,前后径(10.3±2.4)mm。果糖浓度(23.22±20.64)mg/dl、精液pH值6.48±0.18、精液量(0.72±0.47)ml。正常男子的精囊腺为右侧上下径(33.0±5.1)mm,前后径(14.0±2.8)mm,左侧上下径(33.5±5.2)mm,前后径(13.3±2.0)mm。果糖浓度(274.2±126.7)mg/dl、精液pH值7.2±0.19、精液量(2.95±2.64)ml。结论单纯性射精管梗阻性无精子症患者的精囊腺比正常男子小,两者之间差异有显著意义(P＜0.01);梗阻性无精子症患者,若精囊腺明显偏小,且精液pH值＜7.0,则可以推断为单纯性射精管梗阻性无精子症。     

显微镜下输精管附睾吻合术治疗梗阻性无精子症

梗阻性无精子症(obstructive Azoospermia,OA)是指由于双侧的输精管管道梗阻导致在精液中和射精后尿液中既没有精子也没有生精细胞。梗阻性无精子症比非梗阻性无精子症发生率低,大约占无精子症的15%～20%。以往对于梗阻性无精子症的     

基于高通量基因表达数据库筛选系统性红斑狼疮妊娠并发先兆子痫的关键基因

摘要:目的﹑应用生物信息学方法筛选系统性红斑狼疮(SLE)妊娠并发先兆子痫(PE)的关键基因,并分析其生物学功能。方法从高通量基因表达(CEO)数据库下载SLE妊娠并发PE相关数据集CSE108497,利用R软件筛选差异表达基因(DECs)。采用在线分析工具对DECs进行基因本体(CO)功能注释和京都基因与基因组百科全书(KECC)通路富集分析。利用蛋白质相互作用数据库STRING构建DEGs编码蛋白的相互作用(PPI)网络,并筛选关键基因。绘制受试者工作特征(ROC)曲线评估关键基因对SLE妊娠并发PE的诊断效能。结果﹐从CSE108497数据集中筛选出162个DECGs ,其中105个上调,57个下调。CO分析显示,DECs主要参与T淋巴细胞活化与分化、中性粒细胞介导的免疫调节和脱颗粒等生物学过程。KECC分析表明,DEGs主要调控原发性免疫缺陷,糖酵解和抗原呈递等通路。PPI网络分析获得9个关键基因;:HMGN2,EEFIB2,、RPL32、BTF3 ,MRPL1l EEFID、EEFIAl ,RPl6和RPLPI。ROC曲线提示这些基因对SLE妊娠并发PE具有较高诊断价值,ROC曲线下面积(AUC)均大于0.9。结论―利用生物信息学方法从GEO数据库筛选并鉴定出9个与SLE-妊娠并发PE相关的关键基因,为该病的诊断和治疗提供了新的潜在标志物和靶点。     

Percutaneous biopsy of the testicle: A mini review with a proposal flow chart for non-obstructive azoospermia

Abstract

A general consensus on the role of testicular biopsy in non-obstructive azoospermia (NOA) is needed. This paper reviews and updates technical aspects and clinical performance of the percutaneous testicular biopsy techniques, in particular large-needle aspiration biopsy (LNAB), and proposes a flow chart for the management of NOA.

The English literature and original data were reviewed or analyzed. Large-needle biopsy (LNB) includes large-needle cutting biopsy (LNCB) and large-needle aspiration biopsy (LNAB). LNCB usually requires scrotal incision for the insertion of relatively large needles. Fine-needle aspiration biopsy (FNAB) does not require surgical equipment or expertise, employs the smallest needles (23- to 20-gauge), and permits sperm cytologic detection. LNAB also does not require surgical equipment or expertise, employs needles of size from 20- to 18-gauge, is safe, and can be used for testicular histology and sperm recovery.

An operative flow chart is proposed for the management of NOA in which FNAB, LNAB and open surgical biopsy are used for the optimal management of NOA.     

食管癌新型生物学标志物的筛选以及外周血mRNA初步验证*‘(1.,江苏徐州221000;2.江苏护理职业学院,江苏淮安223001;3.,江苏淮安223022)

摘要:目的 采用生物信息学和实时荧光定量PCR(qgRT-PCR)筛选并验证对食管癌(ESCA)发生和发展起关键作用的基因,以期寻找ESCA的新型生物学标志物。方法﹐检索TCCA数据库,利用韦恩图分析,初步确定ESCA样本中差异表达基因与对无病生存率(DFS)产生最显著影响的基因之间的交又基因。通过对重叠基因进行蛋白质-蛋白质互作(PPI)网络分析,并进行GO和KEGC功能分析,筛选出与ESCA发生,发展相关的关键潜在基因。利用qRT-PCR对ESCA患者外周血中关键基因mRNA 的表达水平进行定量分析并结合患者临床病理参数进行统计学分析,以评估其作为ESCA新型生物学标志物的潜在价值。结果在TCCA数据库中筛选出的ESCA差异表达基因与无病生存基因交叉后,发现存在明显差异表达的基因59个,其中39个基因上调,20个基因下调,且上述基因均明显影响患者的 DFS。经过PPI网络分析后,确定了15个核心互作的上调基因,而下调基因没有形成任何互作网络。进一步对这15个核心互作基因通过CO和KECC富集分析,发现纤维连接蛋白1(FN1)可能是ESCA筛查的潜在生物学标志物。qRT-PCR结果显示,与健康人对照组相比,ESCA患者外周血中FNVl mRNA的表达水平显著升高。结合患者的临床病理参数分析,发现分化程度差、临床病理分期高的ESCA患者外周血FNl mRNA水平明显升高,且证实FNl mRNA水平模型能够有效区分食管癌患者和健康人。结论FNI mRNA可作为ESCA潜在的非侵入性筛查生物学标志物。     

HBV相关肝脏纤维化患者血清miRNA差异表达谱建立及筛选

目的：分析并筛选HBV相关肝脏纤维化患者血清中差异表达miRNA。方法：选择2019年3月至2020年3月进入我院确诊为肝纤维化S2~S3期患者10例,以10例健康人作为对照,以血清作为研究样本。采用Illumina miRNA深度测序分析血清miRNA的表达。比较两组间差异表达的miRNA,对序列读数进行分析,以评估统计学意义。采用R平台进行分层聚类分析,以发现肝纤维化特异性表达的候选miRNA。采用qRT-PCR验证候选miRNA在各组中的表达,采用2-ΔΔCT分析miRNA的相对表达量。预测差异表达miRNA的靶基因,对靶基因进行GO分析。结果：在肝纤维化组和健康组之间,共筛选出78个表达具有显著性差异的miRNA。与健康组相比,肝纤维化组中表达上调的miRNA有30个,表达下调的miRNA有23个。其中,miR-505-3p、miR-197-3p、miR-500a-3p和miR-139-5p下调水平最高,miR-1273g-5p、miR-33a-5p 、miR-3960上调水平最高。选择表达变化最显著的miRNA进行qRT-PCR验证,结果与Illumina miRNA测序结果一致。结论：肝纤维化患者血清中miRNA的表达具有特异性,表达差异显著的miRNA有望成为新的肝纤维化临床诊断标志物。     

家族聚集性高血压心血管疾病标志物功能分类基因表达的研究

Objective To explore the cardiovascular diseases marker gene expression profile of the familial aggregation hypertension patients,and to screen differentially expressed genes.Methods The patients who had directly related family members for more than three generations suffering from hypertension were selected as experiment group, and healthy individuals as control group.Oligo GEArray gene chip technique was used to detect the expression of cardiovascular diseases marker gene in peripheral blood.The ratio of positive/negative standard value ＞2.0, or ≤0.5 and ＞0 was indentified as differential gene.Results Compared with control group,there were 10 up-regulated differential genes in experiment group, composing genes involved in lipid metabolism, immune response-related molecules, cell adhesion molecules, extracellular molecules and coagulation,including apolipoprotein E (ApoE),epithelial V-like antigen-1 (EVA-1),interferon-γ (IFN-γ), interleukin-1β (IL-1β), IL-8, integrin-β1 (ITGB-1), matrix metalloproteinase-9 (MMP-9), uclear factor-κB (NF-κB), platelet endothelial cell adhesion molecule-1 (PECAM-1),selectin-P(SEL-P).There were 3 down-regulated genes, including coagulation factors- Ⅲ (F- Ⅲ ), lectin-like oxidized low density lipoprotein receptor-1 (LOX-1), and serine protease inhibitor-1 (SERPINE-1).Conclusion This study suggested that familial aggregation hypertension related to a variety of gene markers of cardiovascular disease, especially elements concerning coagulation and extracellular protease inhibitor-related genes.     

内镜保胆胆囊组织结石复发易感基因调控研究

目的采用高通量测序技术通过对胆囊结石复发患者胆囊黏膜中基因表达谱的检测及生物信息学的分析,初步了解基因在胆囊结石发生发展中的作用机制。方法用Illumina Hi Seq 2500新一代高通量测序技术对7例胆囊结石及2例胆囊息肉复发患者进行mRNA表达谱差异筛选分析,并对得到的数据进行Gene Ontology(GO)和京都基因与基因组(KEGG)显著性富集统计。结果高通量测序结果显示,差异表达的mRNA差异基因共有150条。通过GO功能显著性富集分析,发现分子功能的GO功能显著富集是抗原结合;而对于生物过程,富集的GO功能是免疫应答;对于细胞成分,富集的GO功能是细胞外区域。KEGG通路富集分析发现最显著的途径是细胞因子-细胞因子受体作用途径(P=0.000)。结论目前的研究表明,研究胆囊结石复发易感基因,可以为预防内镜保胆术后胆囊结石复发的科学研究工作及临床治疗提供一个重要的参考。     

染色体核型分析与Y染色体微缺失联合检测无精子或少精子症的临床应用研究 ',2(1.,四川泸州646000;2.西南医科大学医学检验系，四川泸州646000)

摘要:目的对男性无精子或少精子症 患者进行染色体遗传学病因诊断与分析,探讨染色体核型分析与Y染色体微缺失联合检测对无精子或少精子症的临床应用价值。方法收集四川泸 州地区240例男性无精子或少精子症患者的临床资料及外周 血样本。外周血淋巴细胞按常规染色体培养G显带行核型分析,Y染色体微缺失检测采用多重PCR技术。结果240 例男性无精子或少精子症患者中无精子症患者179例、严重少精子症患者61例。单一染色体核型分析异常检出率为22.92% (55/240),包括单纯染色体数目异常30例、单纯染色体结构异常21例和合并异常4例。单一Y染色体微缺失异常检出率为10.42%(25/240),其中AZFc缺失异常率最高为7.08%。采用核型分析与Y染色体微缺失联合检测的异常检出率为30.83% (74/240),其中6例患者两项结果均异常,两种方法联合应用时较单一方法的检出率高(x2= 30.24,P<0.001)。结论系统地报道了泸州地区男性无精子或少精子症患者的染色体核型及Y染色体微缺失的发生率及类型,同时提出两种方法联合应用可提高异常检出率,对男性不育症患者的病因诊断、遗传咨询及生殖治疗提供了重要指导作用。     

宫颈癌相关差异表达基因的筛选及预后价值分析

目的通过分析GEO数据库中的基因芯片数据,筛选宫颈癌相关的差异表达基因。方法从GEO数据库中下载宫颈癌相关基因表达数据集GSE9750和GSE63514,利用GEO2R工具筛选差异表达基因;利用DAVID在线工具进行GO和KEGG富集途径分析;利用GSE7803、GSE39001和TCGA中的数据对结果进行验证。结果共筛选出176个宫颈癌相关差异表达基因,包括上调基因41个,下调基因135个;INHBA基因在宫颈癌组织中高表达,且与患者的总生存期(HR=2.5,P0.01)和无病生存期呈负相关(HR=2.7,P0.01)。结论通过分析GEO中的基因芯片数据获得多个宫颈癌发病相关的基因,INHBA基因可作为患者的诊断及预后评估的潜在新分子标记。     

家族聚集性高血压心血管疾病标志物功能分类基因表达的研究

目的 对家族聚集性高血压心血管疾病标志物功能分类基因表达进行研究,以筛查候选基因.方法 选择3代以上直系亲属均有原发性高血压病史的患者作为实验组,并以健康志愿者作为对照组.采用Oligo GEArray基因芯片技术检测外周血液心血管疾病标志物基因的表达,以阳性标准值/阴性标准值＞2.0,或≤0.5和＞0的基因为差异表达基因.结果 与对照组相比,实验组心血管疾病标志物功能分类基因表达上调的基因共有10条,涉及脂质代谢、免疫应答相关分子、细胞黏附分子、细胞外分子及凝血基因,包括载脂蛋白E(ApoE)、上皮V样抗原-1(EVA-1)、γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-8、整连蛋白-β(ITGB-1)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、核转录因子-κB(NF-κB)、血小板-内皮细胞黏附分子-1(PECAM-1)、P-选择素(SEL-P);下调基因3条,包括凝血因子-Ⅲ(F-Ⅲ)、血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体-1(LOX-1)、丝氨酸蛋白酶抑制因子-1(SERPINE-1).结论 家族聚集性高血压涉及多种心血管疾病标志物基因,尤其与凝血相关的F-Ⅲ和与细胞外分子蛋白酶抑制剂、凝血相关的SERPINE-1两个基因有关.     

1个结蛋白基因新突变致扩张型心肌病家系的临床特点及遗传分析

摘要:目的对1 个扩张型心肌病的家系进行遗传学分析,探讨其致病性基因变异位点,为遗传咨询提供数据支持。方法收集该家系现存成员的临床资料和外周血,采用外周血DNA提取试剂盒提取白细胞基因组DNA,采用全外显子组二代测序技术筛选出与扩张型心肌病相关的可疑致病性变异,用Sanger 测序对变异位点进行验证,结合家系共分离分析及多种生物信息学方法(如UniProt、PolyPhen-2和Mutation taster 、ANTHEPROT PyM0L等)综合验证和预测该变异的有害性,并根据ACMG指南对该变异位点进一步解读。结果该扩张型心肌病家系符合常染色体显性遗传模式,患病成员均携带结蛋白基因(desmin,DES) ,是未曾报道过的一种杂合错义新突变DES c. 140G>T( p.Ser471le)。生物信息学预测结果显示,该突变可改变蛋白质的二级结构,增加其疏水性并使其抗原性下降，还可使该位点原有的氢键和潜在的磷酸化位点丢失。根据ACMG指南可将该突变解读为可能致病的变异。结论新发现的 DES基因c.140G>T(p.Ser47le)变异可能是该常染色体显性遗传家系的致病原因,该家系患者出现临床表型的时间相对较早且预后不良,突变的检测有助于患者早期诊断与个性化的临床管理及治疗。