商榷酵母菌芽殖细胞的分类鉴别

《中成药研究》1987年3月“检测糖(蜜)浆制剂中酵母菌的一点体会”一文附表中:三种样品(蜂皇益寿精、双宝素口服液、维磷补汁)经染色镜捡,均为G~+酵母细胞一端芽殖。按Lodder分类系统,酵母菌分为39属380多种     

掺血麝香的简易鉴别法

<正> 我们用联苯胺法鉴别掺血麝香,获得较满意的结果现介绍如下。取样品少许,置点滴板上,加1%联苯胺的冰醋溶液(临用时配制)1～2滴,再加3%过氧化氢溶液1滴,立即呈绿色或蓝色,证明是掺血麝香。非掺血麝香不显色。此法简便,灵敏可靠。原理:动物血液内,血     

介绍几种药材的理化鉴别新方法

一、人参 Radix Ginseng 1、取人参粗粉2g,加甲醇15ml,于50-60℃水浴浸渍30分钟后过滤。取滤液1滴滴于滤纸上,待干后,置紫外光灯下观察,呈黄绿色荧光 2、取人参粉末少许,放于白瓷板上,热后滴加浓硫酸1-2滴,呈棕褐色。一、三一七 Radix Notoginseng 1、三七粗粉2g,加甲醇15ml,于50-60℃水浴浸渍30分钟后过滤。取滤液     

复合菌落的检出

复合菌落系指两种真菌在平板上生长的特殊现象,具体讲,就是霉菌紧紧环绕着酵母菌,形成一个菌落,故称为“复合菌落”。在检验杏仁止咳糖浆中,发在其虎红培养基平板中有色泽疑似酵母菌,其菌落边缘呈毛状似霉菌生长,经显微镜鉴别,有酵母细胞和菌丝状物质。在五倍放大镜下,用接种科进行分离操作,分取菌落中心粉红色物质和边缘毛状物,分别接种在蔡氏培养基平板中。经25℃培养七天,粉红物质只见少许生长痕迹,毛状物质在平板中生长成灰绿色菌落,镜     

蔷薇科中药配方颗粒微生物限度检查法方法学研究

目的:建立蔷薇科8种代表性中药(山楂、苦杏仁、桃仁、地榆、枇杷叶、木瓜、乌梅和金樱子)配方颗粒微生物限度检查法,并进行方法学验证。方法:采用平皿法和培养基稀释法。结果:其中5种(山楂、苦杏仁、桃仁、木瓜和乌梅)中药配方颗粒可采用平皿法进行细菌、霉菌及酵母菌计数检查;另外3种(地榆、枇杷叶和金樱子)可用培养基稀释法进行细菌计数、霉菌及酵母菌计数检查;控制菌均可用常规法检查。结论:蔷薇科中药配方颗粒多数无抑菌性,少数对个别菌谱的微生物有一定的抑菌性。     

川芎嗪、冰片对纤毛持续运动时间的影响

目的:考察“纤毛持续运动时间体外及体内法”在川芎嗪、冰片上的运用。方法:(1)体外法———取离体蛙上腭黏膜,滴加药液后于40倍光学显微镜下观察黏膜纤毛持续运动时间。再洗净黏膜,观察纤毛摆动是否恢复,并记录从恢复摆动开始至摆动再次停止所持续的时间。(2)体内法———于青蛙上腭黏膜滴加药液或生理盐水,接触30 m in后洗净,分离上腭黏膜于40倍光学显微镜下观察黏膜纤毛持续运动时间。结果:川芎嗪离体法及在体法的纤毛持续运动时间相对百分率分别为9.8%、87.3%;冰片离体法及在体法的纤毛持续运动时间相对百分率分别为9.3%、89.5%。结论:纤毛持续运动时间体外及体内法均可以作为中药鼻黏膜毒性筛选方法之一,并各有利弊。川芎嗪、冰片对体外纤毛持续运动时间有显著的毒性影响。     

咽炎清丸微生物限度检查方法的研究

目的:研究咽炎清丸的微生物限度检查方法。方法:按照《中国药典》微生物限度检查法的规定,采用平皿法(1 mL/皿)对咽炎清丸细菌数、霉菌和酵母菌数进行测定;采用直接接种法对咽炎清丸控制菌进行测定。结果:采用平皿法对细菌、霉菌和酵母菌进行检查,细菌回收率均大于70%;采用直接接种法对控制菌(大肠埃希菌、大肠菌群)进行检查,试验组、阳性对照组均验出控制菌;阴性对照组未检出试验菌。结论:可采用平皿法(1 mL/皿)进行细菌、霉菌和酵母菌数检查;采用直接接种法进行控制菌(大肠埃希菌、大肠菌群)检查。     

熄风通脑胶囊微生物限度检查方法的验证

目的:建立熄风通脑胶囊的微生物限度检查方法。方法:按照《中国药典》2010年版的规定,进行该品种微生物限度检查方法的验证。结果:常规方法显示,细菌计数、霉菌及酵母菌计数,试验菌的回收率均达70%以上;控制菌试验组呈阳性,阴性菌对照组呈阴性。结论:细菌、霉菌、酵母菌检查可按常规平皿法;控制菌检查分别按大肠埃希菌和沙门菌常规检查法。处方中某些药味虽然有一定的抗菌作用,但组成制剂后,在验证试验中并不体现出抑菌活性。     

9种中药口服制剂微生物限度与控制菌检查法的建立及方法学验证

目的:建立9种中药口服制剂微生物限度与控制菌检查的方法并进行验证。方法:按2010年版《中国药典》,用大肠埃希菌、枯草芽胞杆菌、金黄色葡萄球菌、黑曲霉和白色念珠菌对健胃清肠合剂等9个中药口服制剂进行微生物限度检查方法学验证,采用直接接种法进行控制菌检查方法验证。结果:按供试品制备方法,各阳性菌样品的回收率均高于70%。结论:健胃清肠合剂、复方萱草颗粒、健胃消食合剂、健胃止泻合剂、健胃止血合剂、痛风平颗粒可按常规法进行细菌、霉菌及酵母菌的检查;通窍鼻渊丸、清热解毒合剂可用培养基稀释法(0.5 m L/皿)进行细菌检查,姜石肠炎康颗粒可用培养基稀释法(0.2 m L/皿)进行细菌检查,霉菌及酵母菌的检查均可按常规法进行。各品种控制菌均可用常规法进行检查。     

菌种保存试验

菌种保存是微生物学中的一项重要工作,其目的在于保存菌种的生活能力,并尽可能维持其原有的生物学特性,为生产、科研和教学及时提供合乎要求的菌种。菌种保存的方法很多,在日常工作中,使用何种方法,应根据微生物本身特性和实验室设备条件而定。归纳起来有两类:一类是将在培养基中生长好的菌种(或加保护剂)移至另外的容器内进行保存,如砂土管保存法,冷冻真空干燥保存法。砂土管保存法适用于细菌的芽胞,霉菌和放线菌的孢子的保存。认为不适宜于保存无芽肥的细菌和酵母菌,而冷冻真空干燥法,由于是在低温真空条件下进行干燥,符合叶天星(1952)氏等归纳的保     

雏凤精的化学成分研究

<正> 雏凤精为由鹿茸、鸡胎、羊鞭、淫羊藿、人参、补骨脂、当归、黄芪等20余味中药加工精制而成的口服液,主要适用于气血两虚、腰酸背痛、头晕耳鸣、肾亏滑泄及妇女子宫虚冷、月经不调等。为了考察其组方中有效的化学成分,进行了以下几方面的试验。鉴别实验 1.蛋白质鉴别:取本品5滴滴于滤纸上,滴加5滴茚三酮试液,于100℃烘箱中加热5～10分钟呈紫红色。本反应灵敏度高,重现性好。2.丹皮酚定性鉴别:取本品80ml 进行水蒸汽蒸馏,馏液加120ml 乙醚提取,回收乙醚得结晶,将结晶用丙酮2ml 溶解,作为供试品溶液。另取丹皮酚对照品加丙酮制成含生药5mg/ml 的溶液,作为对照溶液,照薄层层析法试验,吸取上述两种溶液各20μl,分别点于同一硅胶 G 薄层板上,以环已烷:醋酸乙酯(3:1)为展开剂,展开,取出,晾     

中成药大肠杆菌的判断

<正> 中成药大肠杆菌检查的判断方法是在鉴别平皿上(伊红美蓝,简称EMB或麦康凯)不长菌或长菌而菌落不典型者,则认为该药品未检出大肠杆菌。菌落典型者才继续做纯培养、镜检和生化反应。生化结果完全符合大肠杆菌条件者,则报告该药品检出大肠杆菌。几年来,在对中成药各种剂型所进行的大肠杆菌检查,约3000个样品中,凡在伊红美蓝平皿上长菌者,不管其菌落典型与否,都继续做纯培养、镜检和生化反应。结果检出28批药品,其生化反应结果完全符合大肠杆菌条件,即乳糖发酵呈阳性(产酸产气)I、MR、VP、C呈+、+、-、-;或-、+、-、-;镜检也全为革兰氏阴性杆菌。但是,这28批检品在EMB平皿上菌落生长不一样,其中12批检品菌落生长典型,呈紫黑色,有金属光泽、园形、表面光滑、湿润。占检出总数的     

原发性输尿管癌24例临床分析

目的提高原发性输尿管癌的诊治水平。方法回顾性分析24例原发性输尿管癌患者的临床特点、诊断、治疗及预后。结果输尿管癌首发症状以肉眼血尿常见;阳性率较高的检查有逆行尿路造影、薄层CT扫描+三维重建(MSCTU)、磁共振水成像(MRU)、输尿管镜检查;手术方法以输尿管全长加膀胱袖状切除为主,其他手术方式有输尿管部分切除加端端吻合术、输尿管部分切除加膀胱袖状切除及输尿管镜电灼术;术后5 a生存率50%(12/24),10 a生存率30%(8/24)。结论 B超、静脉肾盂造影、逆行尿路造影是原发性输尿管癌最常用的基本诊断方法,结合CTU、MRU及输尿管镜等其他检查可减少漏诊。原发性输尿管肿瘤预后不良,肿瘤分期、分级是决定预后的主要因素,应提高术前诊断的准确性。     

电子束辐照对广枣药材及水提液灭菌效果的影响

目的:探究电子加速器辐照灭菌对广枣药材和广枣水提液中有效成分没食子酸和总黄酮及微生物水平的影响。方法:采用2、4、6、8、10 kGy五个辐照剂量对广枣去核粉末和广枣水提液进行电子加速器辐照,分别比较辐照前后的性状特征、有效成分没食子酸和总黄酮含量以及细菌菌落总数、霉菌、酵母菌菌落总数的变化。结果:不同剂量电子束辐照后,广枣去核药材粉末图谱相似度高达0.999及以上,没食子酸和总黄酮含量无显著性差异,细菌菌落数、霉菌酵母菌菌落总数显著性降低(P<0.05),当辐照剂量为6 kGy时,微生物水平符合《中华人民共和国药典》2020版规定。广枣水提液性状、总黄酮未见明显差异,没食子酸含量显著降低(P<0.05),细菌菌落数、霉菌酵母菌菌落总数显著性降低(P<0.05),当辐照剂量为6 kGy时,微生物水平符合《中华人民共和国药典》2020版规定。结论:不同剂量的电子束辐照灭菌对广枣去核药材质量无显著影响,且辐照剂量达6 kGy时达到良好的灭菌效果。电子加速器辐照适用于广枣去核药材粉末灭菌,而对广枣水提液的质量影响显著,主要体现于降低没食子酸的含量。     

中药理化鉴别(十一)

6.牛蒡子(ゴボヴシ) 原植物 Arctium tappa Linne.的果实科名 Compositae(菊科) 理化反应①取本品粉末0.5克,加甲醇5毫升及氢氧化钠试液3滴,在水浴上加热2～3分钟,冷却,过滤,滤液滴加氯化铁试液1～2滴时,溶液呈绿蓝色～紫蓝色。②取本品粉末0.5克,加间苯二酚乙醇溶液(1→200)1毫升,仔细振摇后,挥去乙醇,残留物加盐酸2～3滴显紫棕色～红紫色。 7.山楂(サンザ) 原植物 Crataegus cuneata Siebold et Zuccarini,C.pinnatifida Bunge var.major N.E.Brown 的     

黄连对白假丝酵母菌性阴道炎家兔阴道组织中TGF-β1表达的影响及临床意义

目的:探讨黄连对家兔阴道组织中免疫状态的影响。方法:将雌激素化家兔随机分成黄连治疗组(A组)、克霉唑治疗组组(B组)、生理盐水组(C组),同时设未雌激素化未作任何处理的空白对照组(D组),除D组外在接种后第3、6、11天动态观察各组家兔阴道灌洗液中白假丝酵母菌菌丝生长情况,并在不同时间点处死家兔,摘取阴道组织,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测阴道组织中TGF-β1的表达变化。结果:接种后,A、B、C 3组阴道灌洗液均有菌丝及芽管形成;用药后,A、B组未见菌丝及芽管,仅见散在孢子,C组见大量菌丝生长、芽管形成;雌激素化后A、B、C三组阴道组织中TGF-β1表达水平均较D组明显升高(均P0.05),但三组间无明显差异(均P0.05)。用药后A组TGF-β1表达水平较B组、C组显著下降,差异有统计学意义(均P0.01)。结论:黄连既能抑制白假丝酵母菌菌丝生长,又能下调阴道组织中TGF-β1的表达,改善阴道局部的免疫状态,可能是抑制白假丝酵母菌病发生及复发的重要原因,有望成为一种新的治疗复发性白假丝酵母菌病的靶向药物。     

不同采集时间芫花叶中羟基芫花素的含量分析

本文用薄层扫描法对不同采集时间(5～10月份)芫花叶中羟基芫花素进行了定量分析。为合理采集芫花叶提供了实验依据。羟基芫花素:从芫花叶中提取、分得,经化学、光谱、纯度鉴定,证明为纯品。仪器及条件:CS-930双波长薄层扫描仪(日本岛津公司),用外标法,线性参数SX=3,λ_(?)=353nm,狭缝1.2×1.2mm~2,⊿y=0.1,灵敏度:中。薄层板:硅胶G(粒度10～40μ),加0.8%CMC-Na液,调匀后铺板,105℃活化1hr。1.标准溶液的制备:精密称取羟基芫花素标准品1.0499mg,于1ml容量瓶中。加甲醇适量后滴加1滴二甲亚砜试剂水浴加热使全溶。放冷,加甲醇至刻度,摇匀,即得浓度为1.0499mg/ml的标准溶液,备用。2.样品液的制备:取5～10月份干燥芫花叶各1份,精密称取1g,置直滴式脂肪油提取器中用甲醇水浴回流提取8hr,提取液浓缩后移入50ml容量瓶中,加甲醇至刻度,即得样品溶液。3.薄层层离:将标准液和6份样品溶液(各点     

水敷散、硝矾散微生物限度方法学验证

目的 建立并验证水敷散、硝矾散微生物限度的检验方法。方法 按照《中华人民共和国药典》(四部)“非无菌产品微生物限度检查”对水敷散和硝矾散进行微生物限度检验方法验证。结果 水敷散和硝矾散需氧菌总数、霉菌与酵母菌总数、控制菌采用无菌滤纸过滤后再薄膜过滤方法检查,其实验组菌落数减去供试品对照组菌落数的值与菌液对照组菌落数的比值均在0.5～2的范围内。结论 两种制剂均可采用无菌滤纸过滤后薄膜过滤的方法进行微生物限度检查。     

密环片

<正> 本品为密环粉片。系用密环粉直接压片制成。【性状】本品为黄色糖衣片,除去糖衣呈棕褐色,味甜微苦。【鉴别】取本品片心粉末,按下法检查,应显相同的斑点: (1)取本品粉末1g,加石油醚(沸程60～90℃)10ml,浸泡一小时,不时振摇,取其上清液,点样于硅胶G薄层板上,以石油醚—醋酸乙脂(9∶1)为展开剂,用1%香草     

肉豆蔻饮片微生物计数检查方法研究及其在霉变过程中菌落总数的测定

目的：研究肉豆蔻饮片微生物限度检查的方法,分析不同霉变程度肉豆蔻饮片需氧菌、霉菌及酵母菌菌落总数的变化趋势。方法：参照2015年版《中国药典》四部“通则1105非无菌产品微生物限度检查：微生物计数法”进行方法的建立和验证,采用建立的方法对霉变过程中的肉豆蔻饮片进行微生物计数。结果：肉豆蔻饮片对方法适应性验证的5种菌均有抑制作用,需采用培养基稀释法进行检验。随着霉变程度加大,肉豆蔻饮片需氧菌、霉菌、酵母菌菌落总数均呈升高趋势,且加速0-6天时增长缓慢,6-9天呈爆发式增长,9-39天匀速增长。结论：该方法可用于肉豆蔻饮片的微生物计数。建议对易霉变药材肉豆蔻增设需氧菌、霉菌、酵母菌总数限值,以保障用药安全。