Survivin在胃肠道间质瘤中的表达及其与VEGF表达的相关性

目的 探讨凋亡抑制蛋白Survivin在胃肠道问质瘤(GISTs)组织中的表达情况及其与VEGF表达的相关性.方法 采用免疫组化S-P法检测57例胃肠道间质瘤组织中Survivin蛋白和VEGF蛋白的表达情况.结果 57例GISTs中,Survivin阳性率为66.7%,VEGF阳性率为73.7%.Survivin和VEGF蛋白的阳性表达与GISTs的恶性潜能相关(P<0.01,P<0.05),两者的表达均与GISTs浸润转移、肿瘤直径及坏死相关(P<0.01,P<0.05),而与年龄、性别及发病部位无关(P>0.05).Survivin表达与VEGF表达成正相关(P<0.05).结论 Survivin、VEGF可作为反映GISTs生物学特性的标志物,检测Survivin、VEGF的表达有助于GISTs恶性潜能的评估.Survivin与GISTs组织中VEGF的表达成正相关,两者可能协同促进GISTs的血管生成,参与GISTs的发生发展.     

胃肠间质瘤中survivin、ki-67、bcl-2蛋白的表达及意义

目的 探讨survivin、ki-67以及bcl-2蛋白在胃肠道间质瘤(GIST)中的表达情况及临床意义.方法 采用免疫组化SP法检测78例胃肠道间质瘤组织中survivin、ki-67以及bcl-2蛋白的表达,并统计分析其在不同性质的GIST中的表达差异.结果 78例GIST中,survivn、ki-67以及bcl-2蛋白的阳性表达率分别为69.2%、38.5%和60.2%.survivin,ki-67蛋白在良性、交界性、恶性GIST中的表达有显著差异(P<0.05),而bcl-2在不同性质肿瘤中表达无显著差异(P>0.05).在GIST肿瘤组织中survivin与ki-67表达强度具有显著的正相关(rS'=0.83);survivin与bcl-2阳性表达程度有一定的相关性(r S'=0.57);ki-67表达强度与核分裂记数呈明显的正相关(rS'=0.91).结论 survivin、ki-67、bcl-2在胃肠道间质瘤的发病机制中具有重要作用,surivin和ki-67蛋白的表达率的高低对判断GIST的性质具有重要意义,但bcl-2尚不能作为判断良恶性的指标.     

Survivin与COX-2在食管鳞癌中的表达及其相关性研究

目的探讨凋亡抑制基因survivin在食管鳞癌组织中的表达及其与环氧合酶-2(COX-2)的相关性。方法采用免疫组化S-P法检测68例食管癌组织及15例正常食管黏膜组织中survivin蛋白和COX-2蛋白的阳性表达率。结果survivin蛋白在15例正常食管黏膜中呈阴性表达,而68例食管癌组织中45例阳性,占66.1%,差异有显著性。COX-2蛋白在食管癌组织中的阳性表达率为79.4%(54/68)。survivin蛋白阳性率与年龄、性别、原发部位无关,而与分化程度、有无淋巴结转移相关,并与COX-2蛋白阳性表达呈正相关。(Pearson列联系数为0.434)。结论survivin蛋白在食管癌的发生发展中起重要作用,survivin蛋白与COX-2蛋白密切相关,2者可能存在共同的激活机制,构成肿瘤细胞凋亡的多种途径。     

COX-2及survivin在涎腺多形性腺瘤中表达的定量研究

目的　探讨环氧合酶- 2 (COX- 2 )及生存素(survivin)在良、恶性涎腺多形性腺瘤中的表达及其与肿瘤发生发展的关系。方法　采用流式细胞技术检测5 0例良性、17例恶性涎腺多形性腺瘤组织中COX- 2与survivin的表达,并与10例正常腮腺组织进行对比分析。结果　良、恶性涎腺多形性腺瘤及正常腮腺组织COX- 2的阳性表达率分别为76 %、10 0 %、0 ,其荧光指数(FI)分别为1.79±0 .12、3.0 1±0 .4 0、0 .82±0 .0 5。survivin阳性表达率分别为5 6 %、10 0 %、0 ,FI分别为1.0 6±0 .5 9、1.85±0 .16、0 .5 6±0 .0 8。各组间COX- 2与survivin表达量有明显差异(P均<0 .0 1)。在17例恶性涎腺多形性腺瘤中COX- 2与survivin的协同表达率为10 0 %。结论　COX- 2与survivin基因与涎腺多形性腺瘤的发生及恶变关系密切。     

Livin、MMP-9和ICAM-1在胃肠间质瘤中的表达及意义

采用免疫组化SP法检测58例胃肠道间质瘤(GISTs)组织中Livin、基质金属蛋白酶9(MMP-9)和ICAM-1的表达情况.发现Livin、MMP-9和ICAM-1阳性表达率分别为70.7%、89.7%、60.3%,Livin、MMP-9和ICAM-1的表达与肿瘤的危险度分级均呈正相关;Livin和MMP-9的表达与组织学分型和原发部位也相关.认为Livin和MMP-9的表达可以作为判断GISTs复发转移危险性的可靠蛋白标记.     

胃肠道间质瘤中环氧合酶2基因的表达

目的:探讨胃肠道间质瘤(gastrointestinal stromal tumors,GISTs)中环氧合酶2(cyclooxygenase 2,COX2)基因的蛋白及mRNA表达与临床病理特征及预后之间的关系.方法:采用免疫组织化学EnVision两步法检测GISTs病例肿瘤组织中COX2蛋白的表达情况;采用原位杂交方法检测GISTs中COX2mRNA的表达情况;并对患者进行随访.结果:74例GISTs中,COX2蛋白阳性表达62例,阳性表达率为83.8%;COX2 mRNA阳性表达58例,阳性表达率为78.4%.COX2蛋白及mRNA表达情况在GISTs不同危险度分组间比较差异有统计学意义(P0.05),在高危险度组中阳性表达率最高,而在不同性别、年龄、发生部位、组织学类型及是否转移组间比较差异均无统计学意义(P0.05).38例患者获访,随访率51.4%;COX2蛋白强阳性表达(+++)24例,其中5例转移,2例死亡;其余阴性(-)、弱阳性(+)及中度阳性(++)表达病例均未发现复发、转移或死亡.COX2mRNA强阳性表达(+++)17例,其中3例转移,2例死亡;阴性表达(-)6例,未发现复发、转移或死亡;而弱阳性(+)及中度阳性(++)表达病例中均有1例发生转移,未发现复发及死亡.结论:GISTs中COX2蛋白及mRNA的表达上调提示COX2可作为评估GISTs危险度分级的另一潜在指标,并且可能影响患者预后.     

PTEN、COX-2、Survivin在胃癌中的表达及意义

目的 探讨第10染色体同源丢失性磷酸酶张力蛋白(PTEN)、环氧合酶-2(COX-2)、生存素(Survivin)与胃癌发生发展的关系及作用机制.方法 应用免疫组化S-P法检测80例胃癌组织、15例非胃癌胃黏膜组织中PTEN、COX-2、Survivin的表达.结果 80例胃癌组织中42例PTEN蛋白表达明显下降或缺失,且与胃癌TNM分期、淋巴结转移相关(P＜0.05).COX-2在胃癌组织中的阳性率为67.5%,显著高于正常胃黏膜组织(P＜0.05),并相关于胃癌淋巴结转移、TNM分期.Survivin在胃癌组织中的阳性率为70.0%(P＜0.05),和胃癌分化程度、淋巴结转移、TNM分期有相关性(P＜0.05).在PTEN蛋白阴性的胃癌组中,COX-2阳性率为70.37%,显著高于PTEN阳性组(P＜0.05).结论 抑癌基因PTEN在胃癌及胃癌发展过程中表达逐渐下降或缺失,与凋亡抑制基因COX-2可能存在相互作用,协同Survivin参与了胃癌的发展、转移及浸润.     

侵袭转移相关因子在胃肠道间质瘤中的检测及其意义

目的:研究uPA、MMP-2、MMP-9、TGF-β1等侵袭转移相关因子在胃肠道间质瘤(GISTs)中的表达及其临床病理意义.方法:应用RT-PCR及Western blot法检测uPA、MMP-2、MMP-9、TGF-β1在124例GISTs中的表达.结果:在GISTs中,随着NIH分级增高,uPA、MMP-2、MMP-9、TGF-β1的mRNA表达水平上调,低、中、高危组有明显差异(P<0.05或0.01),其阳性表达率与性别、年龄、组织学类型无关,与肿瘤侵袭转移和黏膜受侵关系密切;四者的蛋白表达水平与mRNA表达一致;uPA与TGF-β1蛋白阳性表达之间呈显著正相关(r=0.356)、UPA与MMP-2、MMP-9蛋白阳性表达之间亦呈显著正相关(r=0.323,0.346).结论:TGF-β1、uPA、MMP-2及MMP-9参与了GISTs的浸润和转移;TGF-β1可能通过上调uPA,激活MMP-2及MMP-9,进而降解细胞外基质.     

Survivin,Caspase-3蛋白在原发性肝癌中的表达及意义

目的:研究原发性肝癌组织及癌旁组织中survivin、caspase-3的表达及其与细胞凋亡的关系.方法:收集原发性肝癌组织及相应癌旁组织标本40例,免疫组织化学方法检测其survivin、caspase-3蛋白表达,原位末端转移酶标记(TUNEL)法检测凋亡指数.结果:85%(34/40)的肝癌组织表达survivin蛋白,而癌旁非肝癌组织内无1例呈阳性表达.survivin蛋白表达的阳性率在肝内转移者为93.5%,显著高于无肝内转移者(55.6%,P＜0.05);在门静脉癌栓浸润者为92.8%,显著高于无门静脉癌栓浸润者(66.7%,P＜0.05).37.5%(15/40)的肝癌组织内可见到caspase-3阳性表达,77.5%(31/40)癌旁组织可见不同程度caspase-3阳性表达,两者比较差异有显著性意义(P＜0.05).所有肝癌组织标本中均可检测到凋亡细胞,但survivin表达阳性者的凋亡指数(1.152%±0.326%)显著低于survivin表达阴性者(4.502%±0.830%,P＜0.05);而caspase-3表达阴性者的凋亡指数(5.016%±0.370%)显著高于caspase-3表达阴性者(1.927%±0.237%,P＜0.05).34例survivin表达阳性组织中有10例见caspase-3表达阳性(29.4%),而6例survivin表达阴性组织中有5例见caspase-3阳性表达(83.3%),两者比较差异有显著性意义(P＜0.05).结论:survivin在肝癌组织中选择性表达,与肿瘤转移、血管浸润等恶性生物学行为有关,survivin对凋亡的抑制可能是其参与肝癌发生的重要机制,其作用机制可能涉及到caspase-3蛋白的抑制.     

胃癌组织中EGFR和COX-2表达的意义及其相关性

目的:探讨表皮生长因子受体(EGFR)和环氧化酶-2(COX-2)的表达与胃癌侵袭、转移因素的关系以及EGFR与COX-2在胃癌组织中表达的相关性.方法:用免疫组化的方法检测61例胃癌组织和相应的20例癌旁组织石蜡切片中EGFR、COX-2表达情况:用Western blot方法检测10例胃癌组织和相应的癌旁组织中EGFR、COX-2蛋白的表达.结果:免疫组化检测胃癌组织中EGFR及COX-2的阳性表达率分别为36.07%、59.02%均明显高于癌旁组织的0%、25%(χ~2=9.903,P<0.01;χ~2=6.972,P<0.01);COX-2表达与浸润深度、淋巴结转移、TNM分期和病理分化程度有关(χ~2=6.333,P<0.05;χ~2=5.588,P<0.05;χ~2=8.826,P<0.01;χ~2=5.653,P<0.05).EGFR表达与淋巴结转移和TNM分期有关(χ~2 =10.648,P<0.01;χ~2=4.150,P<0.05).EGFR与COX-2表达呈明显相关(r=0.316,P<0.05).Western blot方法检测胃癌组织中EGFR及COX-2的蛋白表达高于癌旁组织(35.89±12.50 vs 15.14±2.15,P<0.01;51.29±23.42 vs 27.65±7.42,P<0.05).结论:EGFR、COX-2在胃癌组织中高表达,EGFR、COX-2的表达与胃癌的侵袭、转移密切有关,COX-2表达与EGFR显著相关.     

凋亡相关基因survivin、bcl-2及caspase-3在胆囊癌中的表达及意义

目的探讨凋亡相关基因survivin、bcl-2及caspase-3在胆囊癌中的表达及其在胆囊癌发生、发展的可能作用及相互关系。方法应用免疫组织化学SABC法,检测39例胆囊癌组织、15例胆囊腺瘤组织和12例慢性胆囊炎组织中survivin、bcl-2及caspase-3表达情况,分析其与胆囊癌临床病理的关系,并探讨survivin、bcl-2及caspase-3表达在胆囊癌中的相关性。结果survivin在胆囊癌中的阳性表达率为71.8%,而在胆囊腺瘤及慢性胆囊炎中均无表达;bcl-2在胆囊癌中的表达阳性率为71.8%,而在胆囊腺瘤及慢性胆囊炎中均无表达;bcl-2在胆囊癌中的表达阳性率为38.5%,在胆囊腺瘤中为93.3%,在慢性胆囊炎中为8.3%,胆囊腺瘤bcl-2表达明显高于胆囊癌(P<0.01),胆囊癌bcl-2表达明显高于慢性胆囊炎组织(P<0.05)。caspase-3在胆囊癌中的表达阳性率为43.6%,胆囊腺瘤及慢性胆囊炎中caspase-3表达率均为100%。survivin表达与患者的临床病理无关。bcl-2及caspase-3的表达与胆囊癌患者的性别、年龄、肿瘤的大小无关,而阳性率在组织分化程度、不同Nevin分期组间差异有显著性(P<0.05)。survivin与bcl-2及caspase-3表达没有相关性(P>0.05),bcl-2与caspase-3表达具有良好的相关性(P<0.05)。结论survivin和bcl-2在胆囊癌中有较高表达,而caspase-3在胆囊癌中的表达下降;bcl-2与caspase-3可反映胆囊癌的某些临床病理特点;survivin、bcl-2及caspase-3共同调节胆囊癌细胞凋亡,进而影响胆囊癌的发生、发展。     

生存素和环氧化酶-2在T细胞淋巴瘤中表达及临床意义研究

目的探讨生存素(Survivin)和环氧化酶-2(cyclooxygenase-2,Cox-2)在T细胞非霍奇金淋巴瘤(T cell non-Hodgkin’s lymphoma,T-NHL)中的表达及临床意义。方法对2000年1月至2006年12月中南大学湘雅医院和中南大学湘雅二医院57例T-NHL和10例良性淋巴结病变采用免疫组化SP法检测组织中Survivin和Cox-2的表达,并与相应的临床参数进行对比分析。结果Survivin和Cox-2在T-NHL中的阳性表达率分别为78.9%和57.9%,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。Survivin的表达与Cox-2的表达呈正相关(P<0.01)。Sur-vivin和(或)Cox-2阳性组5年存活率均分别低于Survivin和(或)Cox-2阴性组,差异有统计学意义(P<0.05)。多因素分析显示,Survivin和Cox-2均是T-NHL的独立预后因素。结论Survivin和Cox-2在T-NHL中表达上调以及两者之间表达呈正相关,提示Survivin和Cox-2的表达与T-NHL的发生发展有关,且提示预后不良。     

Study of the expressions of p53 and bcl-2 genes, the telomerase activity and apoptosis in GIST patients

AIM: To explore the relationship between clinicobiological behavior and the expression levels of telomerase activity, apoptosis, p53 gene and bcl-2 gene in gastrointestinal stromal tumors (GISTs). METHODS: The intensity of telomerase activity, apoptosis, p 53 and bcl -2 expression in GISTs were detected by telomeric repeat amplification protocol, in situ end-labeling technique, and immunohistochemistry, respectively. RESULTS: The positive rates of telomerase activity of malignant GIST, potential malignant GIST and benign GIST were 85% (17/20), 22.8% (2/9) and 0 (0/9), respectively. The apoptosis indices of malignant GIST, potential malignant GIST, and benign GIST were 11.7 ± 5.4, 30.2 ± 5.6 and 45.2 ± 7.2, respectively. The intensity of telomerase activity and apoptosis were related to the biological characteristics of GISTs (85% vs 22.8%, 0, 0; P < 0.01 or 11.7 ± 5.4 vs 30.2 ± 5.6, 45.2 ± 7.2, 72.1 ± 9.3; P < 0.05). The intensity of telomerase activity was negatively correlated with cellular apoptosis (22.9 ± 8.4 vs 9.5 ± 5.7, P < 0.01). The intensity of telomerase activity was positively correlated with p53, bcl-2 expression (40.0% vs 78.9%, 40.0% vs 84.2%; P < 0.05). CONCLUSION: The detection of telomerase activity, apoptosis and its control genes in GIST will be helpful for the discrimination of the malignant and benign GIST and evaluation of the prognosis.     

Expression and significance of new inhibitor of apoptosis protein survivin in hepatocellular carcinoma

AM: To investigate expression and significance of inhibitor of apoptosis protein survivin in hepatocellular carcinoma (HCC). METHODS: The expression of survivin and vascular endothelial growth factor (VEGF) was investigated in 38 cases of HCC tissues and 38 liver cirrhosis tissues by immunohistochemistry and Western blot. The relationship between the expression of survivin and clinicopathological factors of HCC was analyzed. RESULTS: Survivin protein was detected in 23 (60.5%) of 38 HCCs and 3 (7.9%) of 38 liver cirrhosis tissues. In 23 cases of HCC which expressed survivin, the expression of VEGF was positive in 18 cases and slight positive or negative in 5 cases. While in 15 cases of HCC which did not express survivin, 12 cases did not express or slightly expressed, and 3 cases expressed VEGF. In liver cirrhosis tissues, the expression of VEGF was as follows: 24 cases were negative, 10 cases were weak positive and 4 cases were strong positive. The expression of survivin was coincident with the expression of VEGF in HCC (P<0.01). The expression of survivin in HCC had no relationship with the patients' age, gender, tumor size and differentiation level of HCC, while it was related to the metastasis of HCC. The protein quantitative analysis by Western blot also showed that overexpression of survivin in HCC was closely correlated to the expression of VEGF (P<0.01). Furthermore, stronger expression of survivin and VEGF was also found in patients with metastasis rather than in those with no metastasis (P<0.01). CONCLUSION: Survivin plays a pivotal role in the metastasis of HCC, and it has some correlation with tumorigenesis. The expression of survivin in the primary lesion is very useful as an indicator for metastasis and prognosis of HCC. It could become a new target of gene therapy of HCC.     

凋亡抑制基因survivin bcl-2 bax在肺癌中表达的研究

目的检测肺癌患者癌组织和癌旁组织中survivin、bcl-2及bax的基因表达,探讨它们的相关性及与肺癌发生、发展的关系。方法应用TUNEL原位细胞凋亡检测方法及免疫组化方法,对1998—2004年华中科技大学同济医学院附属协和医院收治的163例肺癌患者手术常规石蜡包埋组织中癌基因survivin、bcl-2及bax的表达进行检测,并与其中106例患者的癌旁组织对比,分析免疫组化结果及其与肺癌的病理特征和预后关系。结果在癌旁肺组织中,survivin、bcl-2、bax蛋白阳性表达率分别为1·9%(2例)、29·2%(31例)、93·47%(99例);肺癌组织内,三者阳性表达率分别为69·9%(114例)、62·0%(101例)、52·8%(86例)。异常增高的survivin、bcl-2表达呈明显相关。结论细胞凋亡和增殖失控,相关基因survivin、bcl-2和bax蛋白异常表达在肺癌发生发展中起重要作用。survivin、bcl-2可能在肺癌癌变及浸润过程中起着重要作用,可作为判断肺癌生物学行为和预后的参考指标。     

胃肠道间质瘤的临床诊治及病理免疫组化分析

目的 探讨胃肠道间质瘤（GISTs）的临床诊治方法及病理免疫组化特征。方法 对我院2003年8月至2006年6月经手术及病理证实为GISTs的26例病例作回顾性分析。用免疫组化SP法检测CD117、CD34、Vimentin、desmin及S-100等5种抗体的表达情况。结果 26例GISTs中,胃12例,占46．2％;小肠10例,占38．5％;食管1例,占3．8％;直肠2例,占7．7％;肠系膜1例,占3．8％。其中良性9例（9／26）,低度恶性9例（9／26）,恶性8例（8／26）。位于小肠者均为交界性及恶性,其恶性度与其它部位的肿瘤相比差异有显著性（P〈0．05）,良、恶性间质瘤的大小比较差异有显著性（P〈0．05）。术前诊断GISTs仅3例,术前诊断率为11．5％,多误诊为胃癌、平滑肌瘤等。CD117、CD34、Vimentin、desmin及S-100阳性率分别为92％（24／26）、88％（23／26）、100％（26／26）、4％（1／26）、12％（3／26）。结论 GISTs可发生于任何年龄,但多见于50岁以上的中老年人。GISTs可发生在从食管到直肠的消化道的任何部位,主要发生在胃和小肠,肿瘤发生部位和大小与肿瘤良恶性密切相关。GISTs术前诊断较困难,CD117和CD34在间质瘤的诊断中具有重要价值。     

舒林酸诱导胃癌BGC-823细胞凋亡的研究

目的 探讨舒林酸诱导人胃癌BGC-823细胞株凋亡的作用及其机制。方法将舒林酸作用于人胃癌BGC-823细胞,并设置不同的作用浓度和作用时间,应用流式细胞术、TUNEL法检测胃癌细胞的凋亡率;免疫组化（S-P）法检测凋亡基因蛋白bcl-2、Sru—vivin的表达以及环氧合酶-2（COX-2）蛋白的表达情况。结果 流式细胞仪检测出凋亡峰;其凋亡检测率及TUNEL法检测的细胞凋亡率均高于对照组（P〈0.05）;免疫组化结果显示凋亡基因蛋白bcl-2、survivin等在胃癌细胞表达下降,COX-2蛋白的表达阳性率也显著低于对照组,均呈时间和剂量依赖性（P〈O.05）。结论舒林酸可诱导胃癌BGC-823细胞凋亡,其机制与抑制凋亡抑制基因bcl-2和survivin的表达及下凋COX-2蛋白的表达有关。     

siRNA和环氧合酶-2选择性抑制剂对结肠腺癌细胞survivin表达的影响

近年生存素（survivin）在结直肠腺癌发病机制中的作用备受关注，环氧合酶-2（COX-2）选择性抑制剂NS-398在小干扰RNA（siRNA）静默survivin后对结直肠腺癌的影响目前鲜有报道。目的：研究survivin-siRNA和NS-398对结肠腺癌细胞株SW620的作用，为防治结直肠腺癌寻求新途径。方法：将SW620细胞分为空白组、NS-398组、siRNA干扰组、siRNA阴性对照组和联合组，分别以实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）和蛋白质印迹法检测survivinmRNA和蛋白表达，分别以甲基噻唑基四唑（MTY）法和流式细胞仪检测细胞增殖和凋亡情况。结果：与siRNA阴性对照组相比，siRNA干扰组和NS-398组survivin mRNA和蛋白表达显著下调，SW620细胞抑制率和凋亡率显著升高，作用均呈时间依赖性（P〈0．01）；两者联合应用的作用进一步增强（P〈0．01）。结论：survivin-siRNA和NS-398均可使SW620细胞survivin mRNA和蛋白表达下调，抑制细胞增殖，促进细胞凋亡，两者联用的作用进一步增强。