HBsAg及AFP在肝细胞癌组织中的表达及其相关性

目的进一步探讨HBV感染在肝细胞癌（HCC）发病中的作用。方法选择40份HCC、癌旁肝组织标本及6份正常肝组织标本,用免疫组化SP法检测其HBsAg与甲胎蛋白（AFP）表达。结果正常肝组织中HBsAg及AFP表达均为阴性;HCC和癌旁肝组织中HBsAg及AFP表达阳性率分别为70%、90%（P〈0.05）,HCC和癌旁肝组织AFP表达阳性率分别为87.5%、82.5%（P〉0.05）;HCC及癌旁肝组织中HBsAg阳性者AFP表达阳性率明显高于HBsAg阴性者（P〈0.05）。结论 HBV感染可能通过诱发肝细胞产生AFP参与HCC发病,具体机制有待进一步研究。     

DLC-1基因在肝细胞癌组织中表达的研究

目的 研究肝癌缺失基因-1（DLC-1）在人原发性肝癌组织中的表达及与肝细胞癌侵袭转移的关系。方法收集51例复旦大学附属中山医院外科手术切除的肝细胞癌及癌旁正常组织标本，用荧光定量RT-PCR方法分析组织中DLC-1基因的表达。结果在51对配对的肝细胞癌与癌旁无瘤肝组织中，前者DLC-1基因表达水平明显低于后者（P〈0．01），且高侵袭性肝细胞癌组明显低于低侵袭性肝细胞癌组（P〈0．05）。结论DLC-1基因在HCC组织中呈低表达，其表达水平与其侵袭性高低相关。     

肝癌细胞表达差异片段MRG 98.2的临床意义

目的 筛选肝细胞癌（HCC）相关基因,探讨其在HCC发病中的临床意义。方法 用差异显示技术对比研究正常肝组织、HCC组织及癌旁肝组织之间mRNA的表达差异,以肝cDNA片段MRG98．2为探针,对10例HCC及癌旁肝组织进行斑点印渍分析,并通过逆转录聚合酶链反应（RT－PCR）方法检测这些标本血管内皮生长因子（VEGF）mRNA的表达水平。结果 从HCC组织中获得的差示片段MRG98．2在7例HCC标本中表达阳性（70％）,癌旁肝组织弱表达（2／10）或无表达。VEGF mRNA在7例MRG98．2 阳性表达的HCC组织中的6例表达上调。结论 MRG98．2是HCC相关的基因片段,其表达与VEGF mRNA相关,并可能与肿瘤浸润转移、患者的预后不良有关。     

Cx43基因在肝细胞癌中的表达及意义

目的探讨肝细胞癌（hepatocellularcarcinoma，HCC）中Cx43基因的表达及其在HCC发生中的意义和机制。方法应用Western印迹和RT-PCR方法分别检测Cx43蛋白和Cx3mRNA在26例HCC组织，22例癌旁组织和9例正常肝组织中的表达。结果Cx43蛋白在HCC中的表达明显低于正常肝组织和癌旁组织（P〈0.05）；Cx3mRNA在HCC、癌旁组织和正常肝组织表达无显著差异（P〉0．05）。结论Cx43蛋白的表达下调可能是HCC发生的重要环节之一，这可能与该基因在转录后翻译或翻译后蛋白质的加工修饰过程的调控异常有关。     

应用组织芯片检测原发性肝细胞癌中Hedgehog信号通路的表达

目的：了解Hh通路在HCC的表达情况。方法：将44例原发性肝细胞癌组织及其相应的癌旁肝组织制成含88个微组织的组织芯片，采用免疫组织化学方法分别检测了Hh信号通路中Shh、Ihh、Ptch-1和Gli-2在两种组织中的表达情况，并分析其与HCC临床病理组织学的相关性。结果：在HCC组织中Shh、Ptch-1和Gli-2表达阳性率分别为63．6％、45．5％和68．2％，高于癌旁肝组织（P〈0．05）。在不同分化组和转移组中，Gli-2的阳性表达率差异具有显著性（P〈0．05）。结论：组织芯片技术可高效、平行地进行肿瘤分子病理研究；Hh信号通路的过度激活参与了HCC的发生，可能成为HCC治疗的潜在新靶标。     

LZTS1蛋白在肝组织及HepG2细胞中的表达

目的探讨LZTS1蛋白在正常肝、肝细胞癌组织及癌旁慢性肝纤维化、肝硬化组织中的表达,以及在人肝癌细胞系HepG2中的表达。方法选择我院正常人肝组织、原发性肝细胞癌和癌旁慢性肝纤维化、肝硬化组织标本共50例,采用免疫组化方法检测不同肝组织样本中LZTS1蛋白,光镜下观察LZTSI阳性细胞表达定位和分布,按表达面积和表达强度半定量计分。同时培养HepG2人肝癌细胞系,免疫印迹和细胞免疫组化方法检测HepG2细胞中内源性LZTS1的表达,并以正常肝细胞L02为对照。SPSS统计分析各组间的表达差异。结果LZTSI蛋白在正常胆管上皮胞浆中表达。肝细胞包膜和胞浆中均表达,且阳性细胞呈规律性分布。LZTS1蛋白在肝细胞癌组织中14／20例（70％）表达强阳性,5／20例（25％）中等表达;癌旁肝硬化结节中10／17例（58．8％）强阳性表达,6／17（35．3％）例中等阳性表达;慢性肝纤维化组织中1／3（33．3％）例弱阳性,2／3例（66．7％）中等阳性。20例HCC组织中有17例为HBV—HCC,其中13例（76．5％）LZTSI蛋白呈强阳性表达。结论LZTS1蛋白主要表达于正常胆管上皮和肝细胞胞浆,且在肝腺泡中呈规律性分布。在肝癌、肝硬化组织和HepG2细胞中表达增高。     

原发性肝细胞癌及癌旁组织中环氧合酶-2的表达及其意义

目的：研究人原发性肝细胞癌（HCC）组织和癌旁非瘤组织中的环氧合酶－2（COX－2）蛋白及基因表达情况,方法：采用免疫组织化法和原位分子杂交法,研究27对原发性肝细胞癌及癌旁非肿瘤组织,5例正常肝组织中COX－2的蛋白和基因表达,结果：高分化HCC中COX－2蛋白表达显著高于中分化和低分化HCC（P分别＜0．05）以及癌旁组织和正常组织（P分别＜0．01）,癌旁组织的COX－2表达显著高于正常组织（P＜0．05）,癌旁组织,中分化和低分化HCC之间COX－2的表达强度差异无显著性（P＞0．05）,在COX－2蛋白阳性的肝癌细胞和癌旁肝细胞胸胞胞质中可见到COX－2mRNA呈阳性表达,结论：COX－2的过度表达可能参与了高分子HCC的致癌过程。     

Plk1与Survivin蛋白在肝细胞癌中的表达及意义

目的探讨Plk1和凋亡抑制蛋白Survivin在HCC中表达情况,为临床诊断和治疗提供理论依据。方法采用免疫组化法检测100例肝细胞癌标本中Plk1、Survivin的表达。结果⑴肝细胞癌中,Survivin蛋白的表达明显高于癌旁正常组织（P〈0.05）,Survivin在肝细胞癌组织中的表达与患者性别、年龄、肿瘤分化程度、AFP表达及是否侵犯肝被膜均无关联（P〉0.05）。与HBsAg表达有关联（P〈0.05）。⑵肝细胞癌组织中,Plk1阳性表达明显高于癌旁正常组织（P〈0.05）;Plk1在肝细胞癌组织中的表达与患者性别、年龄、AFP表达、HBsAg表达及是否侵犯肝被膜均无关（P〉0.05）,与肿瘤分化程度相关（P〈0.05）。⑶肝细胞癌组织中,Plk1与Survivin表达呈正相关（P〈0.05）。结论 Plk1与Survivin的联合检测为肝细胞癌的诊断和治疗提供新的依据。     

Shh信号通路在肝癌中的表达及与β-catenin的关系

目的探讨原发性肝细胞癌（Hepatocellular Carcinoma,HCC）中Sonic Hedgehog（Shh）信号通路基因和15-catenin的表达情况及其临床意义。方法采用免疫组织化学方法对49例HCC和相应癌旁肝组织中Glil和β-catenin蛋白表达。荧光定量PCR检测2个肝癌细胞系和正常肝细胞中相应基因mRNA的表达情况。结果免疫组化染色与RT-PCR示Glil在HCC组织中的阳性表达率为77．56％,而癌旁肝组织为40．82％,两者差异具有显著意义（P〈0．05）。β-catenin蛋白在HCC中的表达显著高于癌旁肝组织（P〈0．05）,且与Glil的表达呈正相关（r=0．594,P=0．000）。Glil和β-cateninmRNA在肝癌细胞株中高表达,在正常肝细胞中低表达（P〈0．05）。结论Glil和β-catenin在肝癌细胞中均过度表达,可能协同作用促进肝癌细胞异常增殖,参与HCC的发生和发展。     

SOCS3在肝细胞癌组织中的表达及意义

目的：观察细胞周期蛋白SOCS3在肝细胞癌组织中的表达,并探讨其表达与患者预后的关系。方法分别应用免疫组化法和Western blot法检测50例肝细胞癌组织、癌旁组织术后病理标本及17例正常肝组织新鲜标本中SOCS3的表达,分析SOCS3表达与肝细胞癌患者临床特征及生存期的关系。结果 SOCS3在肝细胞癌组织、癌旁组织中低表达,在正常肝组织中表达较高（P＜0．05）;SOCS3同肿瘤分化程度、肿瘤大小有关（P均＜0．05）,同AFP水平及有无肝炎无关（P均＞0．05）;其阳性表达患者比阴性表达患者生存期较长（P＜0．05）。结论 SOCS3在肝细胞癌组织中低表达,其表达同病理分化程度、肿瘤大小及患者生存期相关。     

HCC与存活素（survivin）——在肝细胞癌中存活素的核易位：癌细胞生长的关键？

存活素近来被认为是一种抗凋亡蛋白和细胞分裂的调节因子。在肝细胞癌（HCC）和正常肝组织中该蛋白的表达和定位尚未完全被阐明。作在47例HCC和癌旁肝组织标本中检测了存活素、Fas、增殖细胞核抗原（PCNA）及凋亡的表达。为了进一步确定存活素表达与细胞增殖及凋亡的关系，作在同一HCC标本中对存活素和PCNA进行了免疫染色和TUNEL双重染色。47例HCC患中有35例出现存活素阳性的免疫染色（74％）。     

肝癌、肝硬化组织中GrB、CD57、CD3阳性细胞的表达研究

目的 探讨颗粒酶B（GrB）^＋、CD57^＋、CD3^＋细胞在原发性肝细胞癌（HCC）、癌旁、肝硬化及正常肝组织中的数量、分布及意义。方法 HCC60例、单纯性肝硬化62例、正常肝组织23例,以免疫组化SP法进行GrB、CD57、CD3染色,对阳性细胞数进行定量分析。结果 ①各组GB^＋细胞平均数从高到低为：癌旁、HCC、正常肝、肝硬化（P〈0．05）;各组CD57^＋,细胞平均数从高到低为：HCC、癌旁、正常肝、肝硬化（P〈0．05）;各组C3^＋细胞平均数从高到低为：癌旁、HCC、肝硬化、正常肝（P〈0．05）。②HCC中CrB^＋细胞、CD5细胞、CD3^＋细胞与组织学分级均无明显关系。③HCC中CrB^＋细胞、CD57^＋细胞随临床分期的发展有下降趋势（P〈0．05）;HCC中CD3^＋细胞平均数与临床TNM分期无关。①HCC中15月内有转移组的CrB^＋、CD57^＋、CD3^＋细胞数均少于无转移组（P〈0．01）。结论 GrB^＋、CD57^＋、CD3^＋细胞可作为反映机体抗肿瘤特异性细胞免疫状态及判断预后的重要指标。     

肝细胞癌组织中信号素3F 蛋白表达变化及其与患者预后的关系

目的：探讨肝细胞癌（HCC）组织中信号素3F（SEMA3F）蛋白表达与患者预后的关系。方法采用Western blot法检测32例HCC患者手术切除的HCC组织（ HCC组）和相应癌旁肝组织（对照组）标本中的SEMA3F蛋白表达,分析SEMA3F蛋白表达水平与HCC临床病理特征、复发转移及预后的关系。结果 HCC组及对照组SEMA3F蛋白表达阳性率分别为84％、97％,HCC组SEMA3F蛋白表达量低于对照组（P＜0．05）。肿瘤有包膜者SEMA3F蛋白表达量高于无包膜者,肿瘤为单个结节者表达量高于多个结节者（P均＜0．05）。 HCC组有、无肝硬化者的SEMA3F蛋白表达量差异无统计学意义。15例SEMA3F蛋白低表达者复发率显著高于17例高表达者,生存时间短于高表达者（P均＜0．05）。结论 SEMA3F可能在抑制HCC的侵袭转移中起重要作用。癌组织中SE-MA3F表达水平有助于判断HCC患者的预后。     

肝穿刺活检标本中巨噬细胞和自然杀伤细胞检测诊断肝癌的价值

对32例原发性肝细胞肝癌（HCC）患者的肝穿刺活检标本进行Kuffer细胞（KC）及肝脏自然杀伤（NK）细胞检测，并与其手术切除标本的检测结果比较。结果肝活检标本与手术标本的KC及NK细胞数量及分布情况无显著差异（P〉0．05）。手术标本中癌组织的KC数量明显少于癌旁组织（P〈0．05），CD68、CD57阳性细胞数量呈线性正相关。KC主要位于肝血窦处，呈圆形、星形或纺锤形．胞质呈棕黄色，NK细胞呈圆形较小。KC数量与HCC分化程度密切相关．与肝脏NK细胞数量呈线性正相关。认为肝活检组织中KC和NK细胞数量是诊断HCC有价值的指标。     

用树鼩cDNA芯片研究树鼩肝癌中参与信号传导的部分基因变化情况

目的利用树鼩cDNA芯片研究黄曲霉毒素B1（AFBl）和（或）乙型肝炎病毒（HBV）引起的树鼩肝细胞癌（HCC）发生过程中参与信号传导的部分基因表达变化情况，从而进一步探讨HCC发生的分子机制。方法实验树鼩分3组：A组（AFB1组）、B组（AFB1＋HBV组）、C组（正常对照组）。所有动物在实验过程中定期接受剖腹手术取肝组织检查，至肝癌形成时处死动物取肝癌和癌旁组织。用树鼩cDNA芯片检测实验第30、60、90周肝活检组织、肝癌组织及其癌旁组织中各基因的表达情况，并用实时逆转录聚合酶链反应（Real time RT-PCR）法验证cDNA芯片结果。结果在A组和B组从癌前到癌变过程中胰岛素样生长因子-Ⅱ（IGF-Ⅱ）、C-rel、核因子-κB2（NF—κB2）均显示有差异表达，同时bcl-2、细胞周期素A（cyclin A）、睫状神经营养因子（CNTF）仅在B组显示有差异表达。而C组这几个基因无差异表达。实验组与对照组比较，在诱癌的早、中期（30、60周）均出现CNTF及cyclin A的差异表达。realtime RT PCR结果与cDNA芯片检测结果基本一致。A组IGF-Ⅱ、C—rel基因及B组IGF-Ⅱ基因，在肝癌组织表达水平明显低于癌旁及实验30、60周组织，而癌旁与实验30、60周相比较则无明显差异；B组CNTF基因在癌旁、肝癌及60周之间比较无明显改变，但均明显高于30周；A组CNTF基因表达水平在癌旁、肝癌组织高于癌前组织，但差异无统计学意义；C组这3个基因不同时期比较亦无明显差异。结论树目自部分信号传导通路相关cDNA芯片应用于检测树目目HCC发生过程中信号传导通路中各基因表达的变化，对进一步了解树鼠甸HCC发生的机制有重要实用价值。IGF-Ⅱ、NF-κB2、C-rel、Bcl-2、cyclin A及CNTF这几个基因与树HCC的发生发展密切相关。     

肝细胞凋亡与肝癌癌前病变

目的观察肝细胞癌（HCC）癌分组织与单纯肝硬变二者在肝细胞凋亡的区别，以探讨癌前病变的特性．方法HCC癌旁标本及单纯肝硬变标本分别为24及对例（A及B组），全部作原位末端标记（ISEL），HBsAg免疫组化及HE观察分析ISEL阳性强度分4级，作A、B组比较，卡方统计．结果A组的肝细胞ISEL阳性率及阳性强度均显著高于B组（P＜0．01）．阳性细胞核深棕色，散在分布，以汇管区及纤维隔周边部为多．A组绝大多数属静息性门脉性肝硬变；而B组尚有慢活肝及侵重肝肝硬变炎症B组较A组明显（P＜0．05）．HBsAg阳性率A组89．4％，B组93．7％ISEL阳性与HBsAg、肝细胞活跃增生和肝细胞非典型增生无相关性此外，发现A组中有1例“凋亡性肝硬变”，其ISEL及HE均证明50％的肝细胞有凋亡结论HCC癌旁肝硬变的凋亡发生率明显高于单纯肝硬变者，认为肝细胞凋亡是HCC癌前病变的一种特性，与癌的发生有关．     

乙型肝炎病毒相关性肝癌组织维生素D受体表达情况分析

目的 探讨乙型肝炎病毒相关性肝细胞癌（HCC）组织维生素D受体（VDR）表达变化及其与癌旁肝硬化组织和正常组织的异同。 方法 取10例乙型肝炎病毒相关性HCC组织及其癌旁肝组织和4例正常肝组织,采用实时荧光定量PCR法检测组织VDR mRNA水平,采用免疫组织化学法检测组织VDR表达,采用Western blot法检测组织VDR蛋白表达。 结果 免疫组织化学法检测发现HCC组织、癌旁组织和正常肝组织均有VDR表达,主要在细胞质表达,而细胞核基本无表达;癌组织VDR mRNA为（2.77±0.30）,显著高于癌旁肝硬化组织的（1.62±0.21）或正常肝组织的【（1.57±0.19）,P<0.01】;Western blot分析发现,HCC组织VDR蛋白相对表达量为（1.15±0.57）,显著高于癌旁肝硬化组织的（1.02±0.25）或正常肝脏组织的【（0.37±0.11）,P<0.01】。 结论 VDR可能参与了HCC的发生发展过程。     

肝细胞癌及癌旁肝组织中SMAD3蛋白与细胞外信号调节激酶的表达及其相关性

目的　研究SMAD3蛋白与细胞外信号调节激酶 (ERK1)表达在肝细胞癌 (HCC)发生中的作用 ,并探讨其相关性。方法　采用SABC免疫组织化学方法检测 7例正常肝肝组织和 2 1例HCC及其癌旁组织中SMAD3蛋白和ERK 1的表达及其分布。结果　在正常肝组织、癌旁肝组织、肝癌组织中SMAD3蛋白的表达呈逐级递减的趋势 (P <0 .0 1) ;与之相反 ,ERK1的表达呈逐级递增的趋势 (P <0 .0 1) ,两者呈显著负相关 (P <0 .0 1)。结论　SMAD3蛋白表达水平的上调以及ERK1的过表达可能与HCC的发生有关     

PGE_2,mPGES-1和HBx在肝细胞癌的表达及相关性

目的研究肝细胞癌（HCC）患者的前列腺素E2（PGE2）、微粒体型前列腺素E2合成酶-1（mPGES-1）与乙型肝炎病毒X蛋白（HBx）的表达情况、相关性和临床意义。方法采用酶联免疫法检测65例HCC患者外周血和癌组织的PGE2水平,用免疫组织化学法检测癌组织及癌旁肝组织mPGES-1和HBx的表达,并分析这些指标与患者的临床病理特征的关系。结果肝癌组织PGE2含量明显高于癌旁肝组织,分别为（9.10±2.03）ng/g和（2.78±0.19）ng/g;肝癌患者外周血中PGE2含量为（128.74±14.44）pg/ml,与肝癌组织中PGE2含量呈正相关（r=0.862）;HCC组织中HBx和mPGES-1的阳性表达率分别为86.2%和78.5%,而癌旁肝组织的HBx和mPGES-1阳性表达率分别为81.5%和46.2%,其中mPGES-1蛋白在肝癌组织及癌旁肝组织的阳性表达率差异有统计学意义（P〈0.05）。HBx和mPGES-1的表达升高与肝癌分化程度和肝外是否转移相关（P〈0.05）;HBx的表达与mPGES-1的表达呈正相关（r=0.389）;外周血PGE2水平和组织mPGES-1的表达呈正相关（r=0.526）。结论肝细胞癌与PGE2、HBx、mPGES-1表达相关;可以通过检测肝细胞癌患者外周血的PGE2水平来辅助评估肝癌的复发转移;HBx和mPGES-1可作为肝癌的治疗靶点进行更深入的研究。     

脆性组氨酸三联体基因异常转录与肝癌关系的研究

目的：研究脆性组氨酸三联体(FHIT)基因异常转录与肝细胞癌(HCC)的相关性。方法：利用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和单链构象多态性(SSCP)技术检测24对肝癌及癌旁组织、4例正常肝组织中FHIT的转录和突变情况。结果：11例肝癌组织(46％)标本、2例(8％)癌旁正常组织检测到异常转录本，正常肝组织无异常转录。结论：FHIT基因异常转录可能是导致肝细胞癌形成的一个重要因素。