2 171例地中海贫血产前基因诊断回顾性分析

目的：对广东省妇女儿童医院产前诊断中心1 506例α地中海贫血和665例β地中海贫血产前基因诊断进行回顾性分析。方法：对α地中海贫血产前基因诊断采取裂隙聚合酶链反应（gap-PCR）以及PCR结合反向点杂交（RDB）方法,β地中海贫血产前基因诊断采取PCR结合RDB方法,若夫妇一方携带少见突变则加用DNA测序方法。结果：1 506例α地中海贫血产前基因诊断病例中共检测出262例水肿胎,72例血红蛋白H病。665例β地中海贫血产前基因诊断病例中共检测出174例重型β地中海贫血。结论：地中海贫血产前基因诊断有效减少了水肿胎和重型β地贫患儿的出生,对于优生优育、减少围生期并发症具有重要意义。     

海南地区地中海贫血产前基因诊断的临床研究

目的:研究检测α-地中海贫血及β-地中海贫血在产前基因诊断中的临床应用价值。方法:对孕妇夫妇携带地中海贫血的48例风险胎儿的羊水(或脐血)应用单管多重PCR体系和反向点杂交法,进行α-地中海贫血和β-地中海贫血基因诊断。结果:共检测出地中海贫血胎儿38例。其中α-地中海贫血14例,包括东南亚缺失型杂合子(--SEA/αα)2例,东南亚缺失型纯合子(--SEA/--SEA)8例,左缺失型杂合子(-α4.2/αα)1例,右缺失型杂合子(-α3.7/αα)2例,非缺失型点突变(ααT/αα)1例;β-地中海贫血24例,包括CD41-42杂合子16例,CD41-42纯合子2例,-28(A-G)杂合子3例,双重杂合子(IVS2nt654/CD41-42,-28(A-G)/CD71-72(+A),CD41-42/-α3.7)3例。其中10例重型地贫儿引产,1例重型地贫儿产后新生儿死亡,其余均足月分娩存活。所有病例经引产或正常分娩后留取脐带血,作地贫基因诊断,与产前诊断结果一致。结论:应用单管多重PCR体系及反向点杂交法能快速、准确进行α-和β-地中海贫血产前基因检测,这对于有效预防重型地中海贫血胎儿出生具有重大临床意义。     

地中海贫血高风险胎儿的产前基因诊断

目的　探讨地中海贫血 (简称地贫 )高风险胎儿宫内基因诊断的价值。　方法　 12 8例地中海贫血高风险胎儿于妊娠中期抽取羊水 10～ 2 0 ml或脐血 1m l进行基因诊断。　结果　 12 8例被检胎儿中基因正常 32例 ,α地贫缺失杂合子 38例 ,纯合子 2 7例 ;β地贫单一突变杂合子 18例 ,纯合子 4例 ,双重杂合子 9例 ;β地贫基因突变类型及频率依次为 :CD41- 42 (47.5 % ) ,IVS- - 6 5 4(42 .5 % ) ,CD17(A- T) (7.5 % )及 - 2 8(A- G) (2 .5 % )。无一例发生严重母胎并发症 ,重型地贫胎儿 40例均在知情同意前提下及时终止妊娠。　结论　筛查地贫高风险胎儿并及时进行产前基因诊断安全、有效、准确。在地贫高发区域 ,应作为常规产科检测方法。     

α-地中海贫血的产前基因诊断

目的应用PCR技术,对9例父母双方均为γ珠旦白基因缺失杂合子的胎儿进行羊水产前基因诊断.方法聚合酶链反应(PCR)技术.结果9例中3例胎儿表现为基因正常序列(aa/aa),4例胎儿纯合子(--/--),2例胎儿为杂合予(--/aa).B超检查疑有胎儿水肿的3例胎儿,经基因诊断仅有1例是纯合子,1例是杂合子和另1例是正常.结论PCR在α地中海贫血胎儿产前诊断决定胎儿是否存留的最可靠的方法,宣传教育和人群筛查十分必要,尽早发现杂合子夫妻,实施有效的产前诊断是降低水肿胎出生的根本所在.     

α-地中海贫血的产前基因诊断

目的研究聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术在α地中海贫血产前诊断中的价值。方法应用ＰＣＲ技术,对１１例父母双方均为α珠蛋白基因缺失杂合子的胎儿（１例双胎）行羊水产前基因诊断,扩增产物中出现２２４ｂｐＤＮＡ片段为正常α类珠蛋白基因序列,出现６３０ｂｐＤＮＡ片段的扩增带代表有α类珠蛋白基因缺失,若同时出现２２４ｂｐ和６３０ｂｐ两个ＤＮＡ片段的扩增带,则表示为杂合子。结果３例胎儿表现为基因正常序列（αα／αα）,４例胎儿为杂合子（－－／αα）（其中１例为双胎之一）,４例胎儿为纯合子（－－／－－）（其中１例为双胎之一）。Ｂ超检查疑有胎儿水肿的３例胎儿,经基因诊断仅有２例为纯合子,而另外１例为杂合子。引产的４例胎儿为纯合子α－地中海贫血,其中有１例全身水肿,２例为典型的Ｂａｒｔ′ｓ水肿儿,１例四肢短小、腹疝形成。结论ＰＣＲ技术用于α－地中海贫血的产前诊断,具有快速、准确的特点     

280例β-地中海贫血高风险患儿的产前基因诊断分析

β—地中海贫血(β—地贫)是由β—珠蛋白链合成减少或缺乏引起的发病率很高的血液系统常染色体隐性遗传性疾病，发病原因是由于血红蛋白四聚体α—链和非α—链之间生成数量上失去平衡而导致溶血。华南地区为高发地区，广东β—地贫携带率为3．36％。目前，β—地贫重症患者缺乏有效的根治方法，患者大都幼年夭折。因此，高风险胎儿产前诊断，防     

应用PCR-RDB技术对β地中海贫血进行快速产前基因诊断

目的　为了降低 β地中海贫血重症患儿的出生率 ,达到优生的目的。　方法　对 5 2 7对孕妇及其配偶进行血液学筛查 ,用 PCR- RDB法对夫妇双方均为 β地中海贫血携带者的孕期夫妇进行产前基因诊断 ,并取脐血验证结果。　结果　共筛出 β地中海贫血阳性患者 2 8例 ,轻型 β地中海贫血阳性率为 2 .6 6 %。男女阳性率为 1∶ 1.15 ,4例产前基因诊断中 ,确定正常胎儿 1例 ,重症胎儿 3例(纯合子 1例 ,双重杂合子 2例 ) ,重型 β地中海贫血胎儿于诊断后两周内终止妊娠。　结论　 PCR-RDB技术可有效减少 β地中海贫血重症患儿的出生 ,具有重要的优生学意义。     

双胎及三胎妊娠地中海贫血产前基因诊断研究

目的:探讨双胎妊娠和三胎妊娠地中海贫血的产前基因诊断情况。方法:对27例双胎妊娠和三胎妊娠患者进行绒毛膜穿刺或羊膜囊穿刺胎儿取样,采取裂隙聚合酶链反应以及聚合酶链反应结合反向点杂交方法进行产前基因诊断。结果:在进行α地中海贫血产前基因诊断的20例双胎妊娠及1例三胎妊娠中,共对43个胎儿进行取材,共检测出6例Bart's水肿胎,3例血红蛋白H病。在进行β地中海贫血产前基因诊断的6例双胎妊娠中,共对9个胎儿进行取材,共检测到3例中重型β地中海贫血。结论:地中海贫血的多胎妊娠孕妇产前基因诊断能较有效检出Bart's水肿胎和中重型β地中海贫血患儿,可预防重型地中海贫血患儿的出生。     

1089例地中海贫血孕妇的产前筛查及产前诊断

目的 探讨产前筛查和产前诊断对检出重型地中海贫血(简称地贫)胎儿的临床应用价值. 方法 2010年6月5日至2011年10月30日,共有1089例贵阳市户籍孕妇在贵州省人民医院产科进行地贫产前筛查.采用红细胞指数分析结合血红蛋白电泳检测筛查血液学表型阳性的孕妇,表型阳性者进一步做地贫基因诊断.应用跨越断裂位点聚合酶链反应技术检测α-珠蛋白基因缺失突变,应用反向点杂交技术检测α-珠蛋白基因点突变,及中国人8种常见和9种罕见的β-珠蛋白基因点突变.携带同型地贫基因的高危夫妇,于妊娠16～22周行羊膜腔穿刺进行产前诊断. 结果 1089例孕妇中筛查出地贫血液学表型阳性者60例,基因诊断确诊为地贫基因携带者53例(4.87％),其中α-地贫20例,β-地贫33例.6对夫妇为同型地贫基因携带者,均行产前诊断,其中1例胎儿确诊为重型β-地贫,经孕妇同意终止妊娠;4例胎儿为地贫携带者和1例正常胎儿,均继续妊娠至分娩,娩出后取新生儿脐带血进行基因检测,结果与产前诊断一致. 结论 产前筛查和产前诊断可有效检出重型地贫胎儿,对提高人口素质有重要意义.     

引物延伸预扩增在β-地中海贫血产前基因诊断中的应用研究

目的探讨孕妇外周血中单个胎儿有核红细胞(NRBC)经引物延伸预扩增(PEP)后在β-地中海贫血产前基因诊断中应用的可行性。方法以2004年7月至2005年6月在广西医科大学第一附属医院行产前诊断,夫妇均为轻型β-地中海贫血,孕龄9～34周的28例孕妇为研究对象。显微操作获取母血中NRBC,PEP对单个NRBC进行全基因组扩增,短串联重复序列(STR)鉴定所取细胞的来源。证实为胎儿细胞的PEP产物作为模板进行β-珠蛋白基因扩增,反向点杂交确定胎儿β-珠蛋白基因型。结果每例发现NRBC4～13个,约43.6%的NRBC来源于胎儿。单个NRBC经PEP后STR及β-珠蛋白基因扩增成功率分别为100.0%和90.8%。经反向点杂交可鉴定胎儿β-珠蛋白基因点突变类型,与传统的产前诊断结果相比较,符合率为85.7%,误诊率14.3%。结论母血中单个胎儿NRBC经PEP后可以进行产前基因诊断,不仅可以应用于β-地中海贫血,也可应用于其它遗传病,是一条可供尝试的无创性产前诊断途径。     

孕妇血浆中胎儿DNA检测在产前诊断中的应用

目的 探讨孕妇血浆中提取胎儿游离DNA,鉴别胎儿性别以诊断胎儿遗传性疾病的方法。方法 选择妊娠7-38周,B超确诊为单胎,经绒毛和羊水细胞染色体检测,确诊为妊娠男性胎儿的正常孕妇16例,妊娠女性胎儿的正常孕妇8例;X性连锁遗传病（假性肥大性肌营养不良,血友病,色盲,无汗性外胚层发育不良症）家族史行产前诊断者4例,用酚提取法,纯化孕妇血浆中胎儿DNA,然后用巢式聚合酶链反应（PCR）技术测定男性胎儿睾丸决定因子（SRY）。结果 16例妊娠男性胎儿孕妇血浆中,胎儿游离DNA第1次巢式PCR测定,检出SRY基因扩增片段10例,第1次检出率为62.5%;经第2次巢式PCR测定。另6例全部检出SRY基因扩增片段,累计检出率为100%,妊娠女性胎儿的8例孕妇血浆中,均未检出SRY基因扩增片段,4例X性连锁遗传病家族史者均检出SRY基因扩增片段。结论 从孕妇血浆中提取胎儿游离DNA行胎儿性别诊断是一种快速,简便,准确的产前诊断方法。     

脐静脉穿刺用于产前诊断230例分析

目的：探讨B超引导下游离脐带穿刺术成功率和安全性。方法：对230例因各种原因行产前诊断的孕妇进行B超引导下游离脐静脉穿刺术。结果：102例18－21周孕妇穿刺成功率为90．5％，72例22－28周孕妇成功率97．8％，56例28周以上的成功率为100．0％，总成功率96．1％；169例穿刺经过胎盘，胎盘渗血29．2％（49／168），脐带穿刺后渗血17．8％（41／230）。胎心过缓者占5．2％（12／230）。术后未出现早产、宫内感染等并发症。结论：B超引导下脐带穿刺术用于产前诊断是一项成功率高且安全的方法。     

应用平均红细胞体积测定法及红细胞脆性一管定量法筛查地？…

目的 探讨平均红细胞体积（ＭＣＶ）测定法（ＭＣＶ法）及红细胞脆性一管定量法（一管法）在筛查地中海贫血中的准确性及其应用价值。方法 用ＭＣＶ法和一管法检查９８９对夫妇,并随机抽取其中７９对进行聚合酶链反应（ＰＣＲ）法检测,同时检测孕妇血清铁蛋白以排除缺铁性贫血。结果 ＭＣＶ法的轻型地中海贫血检出率为９．０％、敏感度为９８．９％,一管法的轻型地中海贫血检出率为８．１％、敏感度为８８．６％,两者比较,差     

家系分析在产前筛查诊断中的价值

家系分析有助于临床医生了解疾病的传递方式、分析检测结果,进而为家系其他成员提供检测建议。目前遗传学检测技术不断进步并应用于临床,可能发现大量“阳性”结果,更需要重视家系分析在致病性判断中的价值。     

The detection of aneuploidy and maternal contamination by QF-PCR in samples undergoing prenatal diagnosis for thalassemia in Southern China

Objectives

To apply a simple and low-cost approach, which would easily and accurately detect both the common chromosomal abnormalities and maternal cell contamination (MCC) when invasive prenatal testing is performed for diagnosis of thalassemia.

Study design

Quantitative fluorescence-polymerase chain reaction (QF-PCR) was carried out by amplification of microsatellite markers using fluorescence-labelled primers, followed by quantitative analysis of the allele peaks on a genetic analyser. A multiplex of 11 primer pairs for loci on each of chromosomes 13, 18 and 21 was used.

Results

A total of 387 prenatal samples were tested. Five (1.3%) samples showed MCC, including two (0.7%, 2/289) amniotic fluid samples and three (3.1%; 3/98) chorionic villi samples. Of the 379 prenatal samples without MCC, QF-PCR assays detected two (0.5%) cases of trisomy 21, which were confirmed by traditional karyotyping, and missed one case of trisomy 2 mosaicism and one case of monosomy X. The case of trisomy 2 mosaicism was later found to be limited to the placenta, and the case of monosomy X was picked up by ultrasound. There was no clinically significant case that would have been missed if QF-PCR had been used as a stand-alone test instead of karyotyping when invasive prenatal testing was performed for diagnosis of thalassaemia.

Conclusions

The QF-PCR assay could allow simultaneous detection of aneuploidy and possible MCC in the fetal material. This is especially valuable when PCR-based techniques are used in the DNA analysis for thalassaemia. This strategy may be applied to prenatal diagnosis of other recessive disorders.     

染色体核型分析联合染色体微阵列分析在平衡易位/倒位携带者产前诊断中的应用价值

目的:探讨染色体核型分析与染色体微阵列分析（chromosomal microarray analysis,CMA）技术在染色体平衡易位/倒位携带者产前诊断中的应用价值。方法:本研究为回顾性研究。纳入既往因自然流产（≥2次）、死胎、胎儿多发畸形或染色体异常患儿生育史,夫妇双方行外周血染色体核型分析和荧光原位杂交检测确诊...     

115例胎儿心脏畸形的产前诊断分析

目的:探讨胎儿心脏畸形的特点及其与染色体异常的关系。方法:对我院产前超声诊断的115例胎儿心脏畸形进行侵入性产前诊断,分析心内外畸形及染色体异常的类型和比例。结果:115例胎儿中心脏单发畸形74例,多发畸形41例;未合并心外畸形54例,合并心外畸形61例。染色体异常31例,包括21三体15例和18三体11例,右室双出口、室缺、完全型心内膜垫缺损及三尖瓣反流合并染色体异常比例分别占63.6%、44.4%、35.7%及33.3%。心脏单发畸形中24.3%合并染色体异常,心脏多发畸形中31.7%合并染色体异常,两者比较差异无统计学意义(P0.05);未合并心外畸形中14.8%合并染色体异常,合并心外畸形中37.7%合并染色体异常,两者比较差异有统计学意义(P0.05)。结论:胎儿心脏畸形常合并心外畸形及染色体异常,染色体异常以非整倍体为主,其中右室双出口、室缺、完全型心内膜垫缺损及三尖瓣反流合并染色体异常较常见,合并心外畸形时,染色体异常的比例增加。     

孕妇血浆中胎儿DNA在产前诊断中的应用

目的依据孕妇血浆中存在游离胎儿DNA的理论,寻找一种无创性产前基因诊断的新方法。方法提取42例孕14~40周的产妇血浆中游离胎儿DNA,采用引物延伸预扩增(primerextensionpreamplification,PEP)后行PCR,特异性扩增其Y染色体重复序列(DYZ3)基因。同时采用9个短串联重复序列(shorttandemrepeat,STR)多态性位点的多重扩增方法以检出血浆中胎儿DNA。结果DYZ3-PCR中,32例妊娠男性胎儿孕妇中有28例血浆中出现基因扩增带,检出率为87.5%,10例妊娠女性胎儿孕妇血浆有2例假阳性结果。性别总符合率为85.7%,STR-PCR中,检测出孕妇血浆中父源性胎儿DNA的存在。结论应用孕妇血浆中胎儿DNA作产前诊断敏感性和特异性较高,是一种无创性产前基因诊断方法,具有广泛的临床应用前景。