中性粒细胞白明胶酶转运蛋白与子痫前期关系的探讨

目的:探讨子痫前期(PE)患者的血清中性粒细胞白明胶酶转运蛋白水平(NGAL)与PE严重程度的关系。方法:选取2011年9月至2013年4月在我院产科住院并分娩的单胎正常妊娠孕妇61例、轻度PE患者33例及重度PE患者24例。比较3组患者的孕前BMI、及新生儿出生体重,测定患者的24h尿蛋白和肌酐水平,应用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清NGAL水平,分析PE患者血清NGAL水平与24h尿蛋白和肌酐的相关性。结果:重度、轻度PE患者的血清NGAL水平显著高于正常妊娠孕妇[(83.8±14.9)ng/ml、(52.8±20.4)ng/ml vs(16.4±8.8)ng/ml,P0.001],重度PE患者显著高于轻度PE患者(P0.001)。PE患者的血清NGAL水平与24h尿蛋白(r=0.457,P0.001)、肌酐(r=0.497,P0.001)呈正相关性。结论:血清NGAL水平在PE患者中升高,且NGAL可能和疾病的严重程度有关。     

血清内脏脂肪素浓度与妊娠期糖尿病的关系

目的 观察不同程度糖代谢异常孕妇血清内脏脂肪素(visfatin,VF)浓度的变化并探讨其与胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)、代谢参数及新生儿出生体重(birth weight,BW)的关系. 方法 根据50g糖筛查(glucose challenge test,GCT)及75g口服葡萄糖耐量试验(oral glucose tolerance teat,OGTT)结果将120名孕妇(妊娠36～40周)分为三组:妊娠期糖尿病葡萄组(n=45)、50g GET(+)组(n=20)、正常糖耐量(normal goucose tolerance,NGT)组(n=55),检测血清VF浓度、空腹血糖,空腹胰岛索、总胆固醇、甘油三酯水平及记录新生儿出生体重. 结果 GDM组血清VF浓度明显高于NGT组[(374.9±23.1)ng/ml和(308.9±16.8)ng/ml,P＜0.05],但GCT(+)组血清VF浓度[346.5±23.1)ng/ml]与GDM组及NGT组差异无统计学意义.血清VF浓度与空腹血糖、胰岛素、总胆固醇、甘油三酯水平、IR及新生儿出牛体重无关(P均＞0.05). 结论 GDM孕妇血VF水平是升高的,与GDM有密切联系,但其与IR、代谢参数及新生儿出生体重无关.     

血清PODXL监测子痫前期早期肾脏损伤的初步研究

目的:探讨血清足细胞标志蛋白足糖萼蛋白(PODXL)在子痫前期早期肾脏损伤和修复中的意义。方法:收集2018年3月至2019年9月于西安交通大学第一附属医院门诊就诊的子痫前期患者54例为病例组(尿蛋白阴性12例,阳性42例;应用硫酸镁9例,未用45例),同期无并发症正常分娩的孕妇39例为对照组。分别于分娩前、产后2天、产后5天和7天测PODXL,比较两组产前及产后血清中PODXL的变化,分析血清中PODXL与尿蛋白的关系以及应用硫酸镁对其浓度的影响。结果:病例组产前PODXL浓度[(11.15±3.38) ng/ml]明显低于对照组[(16.22±4.87) ng/ml](P=0.000);产后PODXL浓度逐渐升高,至产后7天恢复正常。与对照组相比,尿蛋白阴性组产前PODXL[(13.78±1.89) ng/ml]显著降低(P=0.014);尿蛋白阳性组PODXL[(10.40±3.35) ng/ml]显著低于尿蛋白阴性组(P=0.000)。硫酸镁组产后2天血清PODXL[(14.35±1.60) ng/ml]明显高于未用硫酸镁组(P=0. 001),且与对照组无统计学差异(P=0. 345)。结论:血清PODXL可早于尿蛋白反映子痫前期早期肾脏损伤,产前应用硫酸镁可能利于肾脏足细胞功能的修复。     

妊娠期糖尿病合并慢性高血压孕妇胰岛素抵抗水平及其对妊娠结局的影响

目的探讨妊娠期糖尿病(gestational diabetes mellitus,GDM)合并慢性高血压(chronic hypertension,CHT)孕妇的胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)水平及其对妊娠结局的影响。方法本研究为回顾性病例对照研究。纳入2014年1月1日至2016年12月31日在北京大学第一医院规律产前检查并参加GDM一日门诊的单胎妊娠GDM孕妇2457例。回顾临床资料,采用稳态模型评估IR水平(homeostasis model assessment insulin resistance,HOMA-IR)。根据GDM孕妇是否合并CHT分为GDM合并CHT组(n=47)和GDM未合并CHT组(n=2410),并进一步根据孕前体重指数(body mass index,BMI)分为孕前BMI正常组(n=1590)及孕前超重和肥胖组(n=863)进行分层分析。采用两独立样本t检验、χ2检验分析组间孕妇年龄、HOMA-IR、孕前BMI、孕期增重、血糖等临床特征的差异。采用logistic回归模型分析HOMR-IR水平对妊娠结局的影响。结果合并CHT的GDM孕妇HOMA-IR(3.5±1.8与2.6±1.5,t=-3.290)、空腹血浆葡萄糖[(5.4±0.5)与(5.2±0.5)mmol/L,t=-3.005]、孕前BMI[(26.7±4.7)与(23.3±3.4)kg/m2,t=-4.842]以及发生子痫前期的比例[14.9%(7/47)与2.5%(61/2410),χ2=21.790]高于未合并CHT的GDM孕妇,但孕期增重少于未合并CHT者[(9.6±5.8)与(12.2±4.7)kg,t=3.790](P值均<0.01)。根据孕前BMI分层后,超重和肥胖孕妇中,GDM合并CHT组子痫前期的比例高于GDM未合并CHT组[15.2%(5/33)与4.2%(35/830),χ2=6.290,P=0.012],但HOMA-IR差异无统计学意义(P>0.05);而对于孕前BMI正常的孕妇,GDM合并CHT组HOMA-IR(3.0±1.5与2.3±1.2,t=-2.217)、空腹血浆葡萄糖[(5.4±0.5)与(5.1±0.5)mmol/L,t=-2.299]和子痫前期的比例[2/14与1.6%(26/1576),χ2=6.545]均高于未合并CHT组(P值均<0.05)。对于GDM合并CHT孕妇,HOMA-IR水平不会增加剖宫产、早产、大于胎龄儿、小于胎龄儿和巨大儿的发生风险(P值均>0.05)。控制年龄、空腹血浆葡萄糖、孕前BMI、孕期增重后,对于未合并CHT的GDM孕妇,HOMA-IR水平的增加会使早产的发生风险增加(OR=1.223,95%CI:1.093~1.369,P<0.001)。结论GDM合并CHT孕妇胰岛素抵抗程度更重,子痫前期的发病率更高,但其他不良妊娠结局的发生风险未见增加。     

中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白在妊娠期糖尿病患者中的表达及意义

目的:探讨中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)在妊娠期糖尿病(GDM)患者血清、脐血及胎盘组织中的表达及其与新生儿体重的相关性。方法:选取2017年6月至2017年11月于河北省人民医院产科行剖宫产术的GDM患者49例、正常妊娠(NGT组)孕妇39例。ELISA法测定母血、脐血血清NGAL水平,RT-PCR及Western blot法测定胎盘组织中NGAL mRNA及其蛋白表达。结果:GDM组母血、脐血血清NGAL水平均高于NGT组,胎盘组织中NGAL mRNA和蛋白表达量高于NGT组,两组比较差异有统计学意义(P0.01)。NGT组和GDM组孕妇血清NGAL水平与脐血均呈正相关(r=0.399,P=0.012;r=0.349,P=0.014);GDM组孕妇血清NGAL水平与胎盘组织NGAL mRNA(r=0.848,P=0.008)、蛋白(r=0.636,P=0.011)及新生儿体重(r=0.363,P=0.014)、胰岛素抵抗指数(r=0.312,P=0.044)均呈正相关。结论:GDM患者外周血NGAL水平的增加主要可能源于胎盘组织NGAL因子的过分泌,并通过增加胰岛素抵抗(IR)参与了GDM的发生。NGAL能通过胎盘转运至胎儿并进一步影响胎儿的宫内生长发育。     

晚发型重度子痫前期患者胎盘中微小RNA-152及血清中可溶性人类白细胞抗原G蛋白的表达及其关系

目的 探讨胎盘中微小RNA(micro-ribonucleic acid,miRNA)-152及血清中可溶性人类白细胞抗原G(soluble human leukocyte antigen-G,sHLA-G)蛋白在重度子痫前期发病中的作用.方法 选择2010年7月至2012年3月在镇江市妇幼保健院妇产科产前检查并剖宫产分娩的20例妊娠36～40周的晚发型重度子痫前期患者,选择孕周匹配的20例剖宫产产妇作为正常对照组.采用实时荧光定量聚合酶链反应技术检测胎盘组织miRNA-152的表达:采用酶联免疫吸附试验检测血清sHLA-G蛋白含量.2组miRNA-152与sHLA-G差异比较采用两独立样本t检验,相关性采用Pearson相关分析. 结果 miRNA-152在重度子痫前期组胎盘中的表达为512.6±52.3,明显高于对照组(175.6±18.4),差异有统计学意义(t=7.06,P＜0.01).重度子痫前期组血清中sHLA-G的含量为(19.7±5.2) U/ml,明显低于正常对照组[(34.3±10.2) U/ml],差异有统计学意义(t=5.01,P＜0.05).重度子痫前期组和对照组胎盘组织miRNA-152与血清中sHLA-G表达均呈负相关(r=-0.52和-0.57,P＜0.05). 结论 miR-152在晚发型重度子痫前期患者胎盘组织中表达升高,使HLA-G mRNA的稳定性降低,产生基因沉默影响转录,导致血清sHLA-G表达减少,可能与晚发型重度子痫前期的发病有一定相关性.     

孕妇血清及其新生儿脐血、胎盘组织中脂肪型脂肪酸结合蛋白表达变化与子痫前期发病的关系

目的 探讨孕妇血清及其新生儿脐血中脂肪型脂肪酸结合蛋白(FABP4)水平、胎盘组织中FABP4 mRNA的表达变化在子痫前期发病中的作用.方法 选择2008年12月-2009年10月在福建省妇幼保健院产科住院分娩的60例重度子痫前期孕妇,按发病时孕周不同分为早发型子痫前期组(发病时孕周≤34周)和晚发型子痫前期组(发病时孕周>34周)各30例;另选同期正常晚期孕妇60例,根据孕周不同分为早发型对照组(孕周≤34周)和晚发型对照组(孕周>34周)各30例.采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测孕妇血清FABP4、空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)及新生儿脐血FABP4水平;采用稳态模型评估法计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);采用逆转录(RT)PCR技术检测胎盘组织中FABP4 mRNA的表达;记录临床相关指标,包括孕妇入院时体质指数(BMI)、收缩压(SP)、舒张压(DP)及平均动脉压(MAP)、血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)、肌酐(Cr)、尿酸(UA)、肾小球滤过率(GFR)、24 h尿蛋白定量和新生儿出生体质量.结果 (1)早发型及晚发型子痫前期组孕妇血清中FABP4水平分别为(176±9)及(170±9)ng/L,早发型及晚发型对照组分别为(81±13)及(94±15)ng/L,分别比较,差异均有统计学意义(P<0.05).(2)早发型及晚发型子痫前期组孕妇血清FINS、HOMA-IR水平分别为(21.9±4.3)mU/L、5.1±1.7及(22.6±4.0)mU/L、4.9±1.5,分别比较,差异均有统计学意义(P<0.05).(3)早发型及晚发型子痫前期组孕妇胎盘组织中FABP4 mRNA的表达水平分别为3.17±0.89及2.97±0.72,均高于晚发型对照组的1.00±0.28,分别比较,差异均有统计学意义(P<0.05);但早发型子痫前期组与晚发型子痫前期组比较,差异无统计学意义(P>0.05).(4)早发型及晚发型子痫前期组新生儿脐血中FABP4水平分别为(92±10)及(100±8)ng/L,均低于晚发型对照组的(141±18)ng/L,分别比较,差异均有统计学意义(P<0.05).早发型子痫前期组、晚发型子痫前期组及晚发型对照组新生儿出生体质量两两比较,差异均有统计学意义(P<0.05).相关性分析结果显示,脐血FABP4水平与孕妇血清FABP4及胎盘组织中FABP4 mRNA表达水平均呈明显负相关(r分别为-0.882、-0.678,P<0.05),与新生儿出生体质量呈明显正相关(r=0.728,P<0.05).(5)早发型及晚发型子痫前期组孕妇血清中FABP4水平与胎盘组织中FABP4 mRNA表达水平均呈明显正相关(r分别为0.609、0.403,P<0.05),与血TG(r分别为0.702、0.562),FINS(r分别为0.528、0.423),HOMA-IR(r分别为0.566、0.519),Cr(r分别为0.443、0.523),UA(r分别为0.438、0.413)均呈明显正相关(P<0.05),而与血HDL(r分别为-0.539、-0.498),GFR(r分别为-0.717、-0.778)均呈明显负相关(P<0.05).结论 子痫前期孕妇血清FABP4水平及胎盘组织中FABP4 mRNA表达水平均明显升高,且两者呈明显正相关.提示FABP4水平升高可能是子痫的期发病的重要因素之一,而胎盘组织中FABP4 mRNA表达水平升高可能是导致子痫的期孕妇血清FABP4水平升高的主要原因.     

妊娠中期孕妇血清中可溶性endoglin水平对重度子痫前期预测的探讨

目的探讨妊娠中期14～20周孕妇血清中可溶性endoglin（sEng）水平是否对重度子痫前期有预测价值。方法前瞻性留取2008年11月至2009年10月妊娠14～20周孕妇行唐氏筛查时的血清,追踪孕妇的妊娠结局,获取早发型重度子痫前期组14例,晚发型重度子痫前期组25例,正常对照组25例和早产组13例,用ELISA方法测定各组孕妇妊娠中期血清中sEng的浓度,数据表示为中位数（四分位数间距）形式。结果早发型重度子痫前期组、晚发型重度子痫前期组、正常对照组和早产组孕妇妊娠中期血清中的sEng浓度分别为0.440ng/ml（0.526ng/ml）、0.594ng/ml（0.457ng/ml）、0.483ng/ml（0.194ng/ml）、0.460ng/ml（0.204ng/ml）。各组孕妇血清中sEng浓度间差异无统计学意义（Chi-Square值=1.371,P=0.712）。结论妊娠中期14～20周孕妇血清中的sEng水平对重度子痫前期尚未显示出明显的预测价值。     

子痫前期孕妇血清中氧化应激产物H_2O_2对sHLA-G表达的影响

目的:探讨子痫前期患者血清中氧化应激产物H2O2对可溶性人类白细胞抗原G(sHLA-G)表达的影响,分析早发型及晚发型子痫前期的病因。方法:选择早发型和晚发型子痫前期孕妇各15例为研究组,以同期正常孕妇15例为对照组。采用比色法及ELISA法分别检测3组研究对象血清中H2O2含量和sHLA-G表达,并进行相关性分析。结果:(1)早发型及晚发型子痫前期组孕妇血清中H2O2呈高水平表达[(58.43±3.56)μmol/L,(29.84±7.67μmol/L)],与正常妊娠组相比[(21.61±4.25)μmol/L],差异均有统计学意义(P均<0.05);早发型子痫前期组孕妇血清中H2O2含量显著高于晚发型子痫前期组(P<0.05)。(2)早发型及晚发型子痫前期组孕妇血清中sHLA-G呈低水平表达[(28.65±9.16)U/ml,(51.84±8.67)U/ml],与正常妊娠组[(98.13±13.26)U/ml]相比,差异有统计学意义(P均<0.05);早发型子痫前期组孕妇血清中sHLA-G表达量显著低于晚发型子痫前期组(P<0.05)。(3)正常妊娠、子痫前期孕妇血清中的H2O2水平与sHLA-G表达呈负相关(r=-0.835,P<0.05)。结论:早发型子痫前期发病早,受氧化应激损伤更严重,血清中sHLA-G表达量更低;氧化应激产物H2O2可能潜在下调sHLA-G表达,与子痫前期发病及病情轻重程度相关。     

脂联素在子痫前期患者胎盘组织中的表达与其发病的关系

目的 探讨脂联素在子痫前期患者胎盘组织中的表达与其发病的关系.方法 采用免疫组化链霉菌抗生物蛋白-过氧化物连接(SP)法及RT-PCR技术,检测20例正常足月妊娠孕妇(正常妊娠组)、12例轻度子痫前期(轻度子痫前期组)及22例重度子痫前期(重度子痫前期组)患者胎盘组织中脂联素蛋白及其mRNA的表达,并分析其与子痫前期发病的关系.结果 (1)3组孕妇胎盘绒毛合体滋养细胞及细胞滋养细胞胞质内脂联素蛋白均呈阳性表达,且各组内胎盘母面及子面脂联素蛋白的表达水平相互比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).(2)重度子痫前期组胎盘组织中脂联素蛋白的表达水平(30 984±14 604)低于轻度子痫前期组(58 360±8910)及正常妊娠组(53 246±17 554),差异均有统计学意义(P＜0.01).重度子痫前期组中妊娠足月者胎盘组织中脂联素蛋白的表达水平(38 890±20 386)与未足月者(29 319±8997)比较,差异无统计学意义(P＞0.05);但与正常妊娠组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).(3)3组孕妇胎盘组织中均有脂联素mRNA的表达.其中重度子痫前期组胎盘组织中脂联素mRNA表达水平(1.0±0.2)低于轻度子痫前期组(2.9±0.8)及正常妊娠组(3.3±1.1),差异有统计学意义(P＜0.05).结论 重度子痫前期患者胎盘组织中脂联素mRNA表达水平下降导致其蛋白表达水平也下降,提示脂联素的异常表达参与了子痫前期的发病.     

LC3和VMP1在子宫内膜异位症在位内膜中表达的研究

目的：探讨子宫内膜异位症（EMs）患者在位内膜组织与正常子宫内膜组织中微管相关轻链蛋白3（LC3）和空泡膜蛋白1（VMP1）的表达及两者的相关性。方法：选择2010年1月-2016年6月于中国医科大学附属盛京医院手术治疗的患者子宫内膜组织,应用免疫组织化学方法检测LC3和VMP1在54例EMs患者的在位内膜组织和40例正常子宫内膜组织中的表达,并分析其相关性。结果：①EMs患者在位内膜组织中LC3（22/54,40.74%）和VMP1（26/54,48.15%）的阳性表达率均低于正常子宫内膜组织（36/40,90.00%;32/40,80.00%）,差异有统计学意义（P＜0.05）;②Ⅲ～Ⅳ期EMs患者组中LC3（8/34,23.53%）和VMP1（10/34,29.41%）的阳性表达率均低于Ⅰ～Ⅱ期患者组（14/20, 70.00%;16/20,80.00%）,差异有统计学意义（P＜0.05）;③LC3和VMP1在EMs患者在位内膜中的表达不存在相关性（P＞0.05）。结论：LC3和VMP1在EMs患者在位内膜中的表达降低,可能与EMs患者在位内膜自噬下调有关。     

子痫前期孕妇胎盘组织中生长阻滞和DNA损伤45α基因的表达变化及其临床意义

目的 通过检测子痫前期孕妇胎盘组织中生长阻滞和DNA损伤45α(Gadd45α)基因的定位及表达变化,探讨其与子痫前期发病的关系.方法 选择2009年9月至2010年3月在重庆医科大学附属第一医院住院分娩的36例子痫前期孕妇为研究对象,按病情分为子痫前期轻度组(20例),子痫前期重度组(16例),另以同期择期行足月剖宫产术的18例健康孕妇为对照组.3组孕妇分娩后取胎盘组织标本,采用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连接(SP)法检测各组孕妇胎盘组织中Gadd45α蛋白的定位及分布,采用逆转录(RT)-PCR技术检测各组孕妇胎盘组织中Gadd45α mRNA表达水平,采用蛋白印迹(western blot)技术检测各组孕妇胎盘组织中Gadd45α蛋白的表达水平.结果 (1)子痫前期轻度组及重度组胎盘组织中均有Gadd45α蛋白表达,主要定位于胎盘滋养层细胞的胞质及胞核中,血管内皮细胞及少量间质细胞胞核也可见阳性染色;对照组胎盘组织中阳性染色较弱,且仅见于胎盘滋养层细胞中,血管内皮细胞中未见阳性染色.(2)子痫前期重度组及轻度组胎盘组织中Gadd45αmRNA表达水平分别为0.75±0.07及0.44±0.13,明显高于对照组的0.18±0.04,分别比较,差异均有统计学意义(P＜0.05);子痫前期重度组Gadd45α mRNA表达水平与子痫前期轻度组比较,差异也有统计学意义(P＜0.05).(3)子痫前期重度组及轻度组胎盘组织中Gadd45α蛋白表达水平分别为1.34±0.17及0.65±0.15,两组比较,差异有统计学意义(P＜0.05);两组也明显高于对照组的0.22±0.11,分别比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 子痫前期患者胎盘组织中Gadd45α mRNA和蛋白表达水平均明显高于健康孕妇,并且随子痫前期患者病情加重其表达上调;Gadd45α定位在与子痫前期发生密切相关的胎盘滋养层细胞中,Gadd45α基因可能参与了子痫前期的发生与发展.     

细胞凋亡调控蛋白bcl-2和bax在多囊卵巢综合征患者子宫内膜中的表达

目的探讨多囊卵巢综合征（PCOS）患者子宫内膜中细胞凋亡调控蛋白bcl-2和bax的表达及其在PCOS患者子宫内膜病变中的意义。方法应用免疫组织化学SP方法,测定18例PCOS患者子宫内膜和27例月经周期正常、因输卵管不通或男性不育就诊的对照者子宫内膜（10例增殖期、17例分泌期）bcl-2和bax蛋白的表达。结果PCOS患者子宫内膜bcl-2表达较对照者增殖期和分泌期高（P＜0．05和P＜0．01）,但bax表达相似（p＞0．05）。结论PCOS患者子宫内膜bcl-2蛋白表达增高,与bax形成更多的异源二聚体,从而抑制PCOS子宫内膜凋亡,对其子宫内膜的异常增生改变起一定作用。     

正常妊娠妇女内源性类洋地黄物质来源的研究

目的研究正常妊娠妇女外周血中增高的内源性类洋地黄物质（ＥＤＬＳ）的来源。方法采用放射免疫分析法测定早孕绒毛,晚孕胎儿附属物组织,正常非孕妇女,早、中、晚孕期,产后２４～４８小时,产时孕妇外周血及脐血中ＥＤＬＳ含量。结果早孕绒毛、胎盘、胎膜及脐带胶质中ＥＤＬＳ含量分别为孕妇外周血的３７、３３、２９和２４倍;胎儿附属物组织间ＥＤＬＳ含量呈显著正相关。早、中孕期血浆ＥＤＬＳ含量与正常非孕妇女比较无明显差异,孕晚期则明显升高,产后２４～４８小时明显下降。孕晚期外周血ＥＤＬＳ含量与平均动脉压（ＭＡＰ）和孕周呈正相关。脐静脉和脐动脉血ＥＤＬＳ含量为外周血的３．１和２．９倍,且脐血和外周血ＥＤＬＳ与胎盘和胎儿的重量之和呈正相关。结论胎儿－胎盘单位是正常妊娠妇女外周血中增高的ＥＤＬＳ的来源     

原发性子宫颈恶性黑色素瘤四例临床分析

目的 探讨原发性宫颈恶性黑色素瘤(恶黑)患的临床病理特征、治疗及预后。方法对北京协和医院和江西省妇幼保健院1996年9月至2002年8月收治的4例原发性宫颈恶黑患的临床病理资料进行回顾性分析,全部病例进行随访。所有病理标本进行免疫组化S-100及抗黑色素瘤特异性抗体(HMB45)测定。结果免疫组化检测：4例患HMB45及S-100均呈阳性。治疗：4例患均接受了手术治疗;其中3例接受了联合化疗,3例中1例同时接受了干扰素和抗雌激素受体治疗。预后：1例仅接受手术治疗的患于术后6个月死亡;其他3例均存活3年以上,其中1例于术后41个月死亡,另2例目前仍无瘤生存,分别存活3、6年以上。1例存活6年以上的患在化疗的同时接受了免疫治疗。结论S-100及HMB-45检测对于确诊恶黑具有重要意义。对于早期患,手术应作为首选治疗手段,而辅助性化疗及免疫治疗有可能改善其预后。     

重度子痫前期患者胎盘组织中缺氧适应相关基因的表达及其临床意义

目的 探讨胎盘组织中缺氧诱导因子脯氨酸羟化酶1(HPH1)和因子抑制缺氧诱导因子1(FIH-1)在重度子痫前期发病和疾病进展中的作用.方法 选择2006年7月至2007年7月在中国医科大学附属盛京医院妇产科住院选择剖宫产终止妊娠的重度子痫前期孕妇34例(重度子痫前期组)及正常晚期妊娠孕妇24例(对照组),采用RT-PCR和蛋白印迹法检测两组孕妇胎盘组织中的HPH1和FIH-1 mRNA及蛋白的表达,并与临床指标进行相关性分析.结果 (1)重度子痫前期组孕妇胎盘组织巾HPH1 mRNA及蛋白表达水平分别为0.40±0.04和59.5 ±3.4,显著低于对照组的0.84±0.12和71.6±1.7(P均<0.01);重度子痫前期组孕妇FIH-1 mRNA及蛋白表达水平分别为0.31±0.05和45.6±2.4,也显著低于对照组的0.43±0.04和54.9±2.1(P均<0.01).(2)重度子痫前期组孕妇胎盘组织中HPH1和FIH-1 mRNA及其蛋白表达水平与平均动脉压(MAP)均呈显著负相关关系,r均为-0.854(P均<0.01);与24 h尿蛋白定量均呈显著负相关关系,r均为-0.936(P均<0.01);与有无眼底动脉痉挛均呈显著负相关关系,r均为-0.854(P均<0.01).(3)两组58例孕妇胎盘组织中的HPH1 mRNA表达水平高于FIH-1 mRNA的表达,分别为0.58±0.27和0.39 ±0.10,两者呈正相关关系,,为0.686(P<0.01);HPH1蛋白表达水平高于FIH-1蛋白的表达水平,分别为64.5±6.7和49.4±5.2,两者也呈正相关关系,r为0.947(P<0.01).结论 HPHl和FIH-1的表达变化可能与蕈度子痫前期的发病及疾病进展相关.     

人乳头状瘤病毒16型E7基因重组腺相关病毒载体的构建及E7 mRNA和蛋白在真核细胞中的表达

目的构建含人乳头状瘤病毒16型E7(HPV16E7)基因的重组腺相关病毒(rAAV)载体,并验证HPV16E7mRNA和蛋白在真核细胞中的表达。方法将含腺相关病毒(AAV)末端反向重复序列及HPV16E7基因的重组质粒pAAVMCSE7、含rep/cap基因的质粒pAAVRC及辅助质粒pAAVhelper共同转染胚胎肾细胞系HEK293细胞,回收、纯化病毒颗粒并鉴定,斑点杂交法测定病毒滴度,RTPCR技术、蛋白印迹法验证HPV16E7mRNA和蛋白在真核细胞中的表达。结果电镜鉴定结果显示真核细胞中有病毒颗粒存在,斑点杂交法测定病毒滴度为1×1011/ml。含HPV16E7基因的rAAV载体转染真核细胞后,在细胞内可检测到HPV16E7mRNA和蛋白的表达。结论本实验成功构建了含HPV16E7基因的rAAV载体,经验证HPV16E7mRNA和蛋白在真核细胞内有表达。     

低氧诱导因子1α对子宫颈癌细胞生物学行为的影响

目的探讨低氧诱导因子1α（HIF-1α）对宫颈癌细胞的生物学行为的影响以及其中可能存在的分子机制。方法通过CoCl2化学诱导宫颈癌HeLa细胞缺氧;构建靶向HIF-1α的反义真核表达载体、经脂质体介导转染HeLa细胞的方法沉默HIF-1α的表达。将实验细胞分为常氧未转染对照（NN）组、常氧空质粒转染对照（NI）组、常氧转染pcDNA3．0／HIF-1α质粒（NT）组、缺氧未转染对照（HN）组、缺氧空质粒转染对照（HI）组、缺氧转染pcDNA3．0／HIF-1α质粒（HT）组。用四甲基偶氮唑蓝法、Transwell侵袭小室方法观察各组细胞的增殖、侵袭能力的改变,用流式细胞仪检测各组细胞的凋亡率,用RT-PCR技术检测各组细胞目的基因HIF-1α及其靶基因血管内皮生长因子（VEGF）、葡萄糖转运体1（GLUT1）、多药耐药基因1（MDR1）的表达变化。结果NT组细胞在培养12、24、48、72h时的活细胞数分别为0．053±O．003、0．074±0．004、0．148±0．015、0．192±0．038,而HT组分别为0．069±0．003、0．155±0．022、0．224±0．022、0．308±0．069;NT和HT组的细胞增殖受到抑制,NT组与NN及NI组、HT组与HN及HI组间的活细胞数分别比较,差异均有统计学意义（P〈0．01）。各组细胞的凋亡率分别是,NN组（29．27±0．18）％、NI组（31．13±0．08）％、NT组（51．11±0．14）％、HN组（11．46±0．28）％、HI组（15．77±0．49）％、HT组（40．05±0．97）％;HT组与HN及HI组、NT组与NN及NI组间分别比较,差异均有统计学意义（P〈0．01）。各组细胞的侵袭能力由高到低依次为HI、HN、NI、NN、HT、NT组,分别为（40±9）％、（37±12）％、（28±5）％、（26±7）％、（19±7）％、（10±5）％;NT组与NN及NI组、HT组与HN及HI组间分别比较,差异均有统计学意义（P〈0．05）。NT组细胞HIF-1α、VEGF、GLUT1、MDR1 mRNA的相对表达量分别为0．05±0．12、0．09±0．11、0．08±0．15、0．05±0．15,而HT组分别为0．04±0．16、0．16±0．16、0．12±0．20、0．20±0．21;NT组与NN及NI组、HT组与HN及HI组间分别比较,HIF-1α、VEGF、GLUT1、MDR1 mRNA的相对表达量均有降低,差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论HIF-1α可能主要通过其下游的靶基因对宫颈癌细胞的恶性生物学行为产生影响,包括抗凋亡、促增殖、增加血液供应和能量供应、耐药等,且体外抑制HIF-1α的表达对宫颈癌细胞有抑制作用。     

妊娠早期孕妇血清解整合素-金属蛋白酶12水平变化与妊娠结局

值为0.29,明显低于正常单胎孕妇,差异有统计学意义(P<0.05).结论 早孕期孕妇血清中ADAM 12-S水平随孕周增加而上升,可用于非整倍体常染色体异常的筛查,同时还可预测胎停育、异位妊娠等早期妊娠丢失;ADAM 12-S可作为产前筛查指标,建议在孕9～12周时进行.     

Dynamic regulation of HIF1Α stability by SUMO2/3 and SENP3 in the human placenta

IntroductionHypoxia-inducible factor 1A (HIF1A) stability is tightly regulated by hydroxylation and ubiquitination. Emerging evidence indicates that HIF1A is also controlled by the interplay between SUMO-specific ligases, which execute protein SUMOylation, and Sentrin/SUMO-specific proteases that de-SUMOylate target proteins. Given the significance of HIF1A in the human placenta, we investigated whether placental HIF1A is subject to SUMOylation in physiological and pathological conditions.MethodsPlacentae were obtained from normal and pregnancies complicated by preeclampsia. Human choriocarcinoma JEG3 cells were maintained at either 21% or 3% oxygen or exposed to sodium nitroprusside (SNP). Cells were transfected with SUMO2/3 constructs with and without Mg132, a proteasome inhibitor. Expression, distribution and associations of SUMO/SENPs and HIF1A were evaluated by Western blotting, immunohistochemistry and co-immunoprecipitation.ResultsHIF1A-SUMO2/3 associations peaked at 9–10 weeks, while its deSUMOylation by SENP3 was greatest at 10–12 weeks. In E-PE, HIF1A deSUMOylation by SENP3 was significantly elevated, while HIF1A-SUMO2/3 associations remained constant. In vitro, overexpression of SUMO2/3 de-stabilized HIF1A in hypoxia, and abrogated HIF1A expression following Mg132 treatment in normoxia. Hypoxia and SNP treatments promoted SENP3 nuclear redistribution from nucleoli to the nucleoplasm where it associates with HIF1A.ConclusionDuring early placental development, SUMOylation events control HIF1A stability in an oxygen-dependent manner. In E-PE, enhanced deSUMOylation of HIF1A by SENP3 may in part contribute to increased HIF1A activity and stability found in this pathology.