产前应用地塞米松和沐舒坦对胎鼠及仔鼠肺组织Toll样受体4表达影响的比较

目的 比较产前单次应用小剂量地塞米松与联合应用地塞米松加盐酸氨溴索(沐舒坦)对胎鼠及仔鼠肺Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)基因及蛋白表达的影响. 方法 54只SD孕鼠随机分为3组:地塞米松组(干预组1)、地塞米松加沐舒坦组(干预组2)和生理盐水对照组.妊娠17 d,腹腔注射给药,干预组1予地塞米松0.2 mg/kg,干预组2予地塞米松0.2 mg/kg加沐舒坦100 mg/kg,对照组予等体积生理盐水.分别在妊娠19d及生后3、7d取胎(仔)鼠肺组织,通过逆转录聚合酶链反应、免疫组织化学和蛋白质免疫印迹技术检测各组胎(仔)肺组织中TLR4基因转录水平及蛋白表达差异.统计学方法 采用方差分析和独立样本t检验. 结果 (1)孕19 d,2个干预组分别与对照组相比,TLR4 mRNA在胎鼠肺组织中的表达均明显增加(对照组:0.26±0.18,干预组1:0.39±0.21,t=5.866,P＜0.05;对照组:0.27±0.22,干预组2:0.46±0.13,t=9.572,P＜0.01).生后3d和7d干预组2与对照组相比,TLR4 mRNA在仔鼠肺组织中的表达均明显增加(生后3 d:0.59±0.23与0.47±0.24,t=2.295,P＜0.05;生后7 d:0.52±0.12与0.35±0.17,t=4.219,P＜0.05),但干预组1与对照组比较,差异无统计学意义(生后3 d:0.45±0.22与0.44±0.14,t=0.128,P＞0.05;生后7 d:0.40±0.16与0.36±0.12,t=1.365,P＞0.05).(2)免疫组织化学:孕19 d,2个干预组分别与对照组相比,TLR4蛋白表达量在胎鼠肺组织中的表达均明显增加(对照组:0.20±0.29,干预组1:0.35±0.32,t=7.179,P＜0.05;对照组:0.20±0.29,干预组2:0.39±0.25,t=10.764,P＜0.01).生后3d和7d干预组2与对照组相比,TLR4蛋白表达量在仔鼠肺组织中的表达均明显增加(生后3 d:0.55±0.32与0.37±0.18,t=7.121,P＜0.05;生后7d:0.41±0.29与0.25±0.24,t=6.355,P＜0.05),但干预组1与对照组比较,差异无统计学意义(生后3 d:0.40±0.21与0.37±0.18,t=0.683,P＞0.05;生后7 d:0.28±0.31与0.25±0.24,t=0.462,P＞0.05).免疫印迹法:孕19 d,2个干预组分别与对照组相比,TLR4蛋白表达量在胎鼠肺组织中的表达均明显增加(对照组:0.15±0.12,干预组1:0.27±0.20,t=7.835,P＜0.05;对照组:0.16±0.18,干预组2:0.34±0.16,t=10.470,P＜0.01).生后3d和7d干预组2与对照组相比,TLR4蛋白表达量在仔鼠肺组织中的表达均明显增加(生后3 d:0.37±0.20与0.25±0.22,t=6.379,P＜0.05;生后7 d:0.35±0.15与0.24±0.13,t=5.152,P＜0.05),但干预组1与对照组比较,差异无统计学意义(生后3 d:0.32±0.26与0.25±0.16,t=1.167,P＞0.05;生后7 d:0.29±0.19与0.24±0.10,t=1.248,P＞0.05). 结论 小剂量地塞米松可能参与调控大鼠胎肺中TLR4表达的上调,这可能是糖皮质激素促胎肺成熟的重要机制之一;小剂量地塞米松联合沐舒坦产前应用可能不仅参与调控大鼠胎肺组织中TLR4表达的上调,也上调生后大鼠肺中TLR4的表达.     

妊娠肝内胆汁淤积症孕鼠肝细胞中水通道蛋白8的表达

目的 探讨孕鼠妊娠肝内胆汁淤积症(ICP)时其肝细胞中水通道蛋白8(AQP8)蛋白及mRNA的表达情况.方法 将20只孕鼠(孕15 d)分成ICP组和对照组,每组10只.ICP组孕鼠皮下注射17-α-乙炔雌二醇2.5 mg·kg-1·d-1,连续5 d,建立ICP模型,对照组孕鼠皮下注射1,2-丙二醇2.5 ml·kg-1·d-1,连续5 d.采用免疫组化法检测两组孕鼠肝细胞AQP8的蛋白相对表达量和定位;RT-PCR技术检测肝细胞AQP8的mRNA相对表达量.结果 孕鼠ICP模型成功建立.两组孕鼠肝细胞均有AQP8蛋白和mRNA的表达.ICP组孕鼠肝细胞AQP8的蛋白相对表达量为10.8±2.4,对照组为17.1±2.2,两组比较,差异有统计学意义(P＜0.05);ICP组孕鼠肝细胞AQP8的mRNA相对表达量为1.07±0.11,对照组为0.80±0.11,两组比较,差异也有统计学意义(P＜0.05).结论 ICP孕鼠肝细胞中AQP8的蛋白表达下调,mRNA表达上调,可能与ICP发病有关.     

过氧化物酶增殖体激活受体α、氧固醇7α羟化酶及雌激素受体间调控关系及其与孕鼠肝内胆汁淤积发生的相关性

目的 探讨过氧化物酶增殖体激活受体α(PPARα)、氧固醇7α羟化酶(CYP7B1)、雌激素受体(ER)α及ERβ之间的调控关系与孕鼠肝内胆汁淤积发生的相关性.方法 选择清洁级SD孕鼠80只,随机分为4组,每组20只,自孕第13天起:对照组孕鼠皮下注射精制植物油2.0ml·kg-1·d-1;低剂量组孕鼠皮下注射17-α-乙炔雌二醇(1.0 mg·kg-1·d-1);中剂量组孕鼠皮下注射17-α-乙炔雌二醇(1.25 mg·lg-1·d-1);高剂量组孕鼠皮下注射17-α-乙炔雌二醇(1.5 mg·kg-1·d-1).4组孕鼠于妊娠第21天处死后提取肝脏组织.应用酶联免疫吸附试验检测各组孕鼠血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、门冬氨酸转氨酶(AST)、总胆酸(TBA)及胆红素(BIL)水平;应用实时定量PCR技术检测各组孕鼠肝脏组织中PPARα mRNA、CYP7B1 mRNA、ERα mRNA及ERβ mRNA的表达水平.结果 (1)生化指标:对照组孕鼠ALT、AST、TBA及BIL水平分别为(41.1±2.8)U/L、(44.4±3.6)U/L、(26.4±5.6)μmol/L、(2.8±0.2)U/L,低剂量组孕鼠分别为(48.2±3.4)U/L、(47.9±3.7)U/L、(36.4±4.2)μmol/L、(4.2±0.2)U/L,中剂量组孕鼠分别为(70.4±5.3)U/L、(68.4±5.6)U/L、(64.3±3.8)μmol/L、(6.2±1.2)U/L,高剂量组孕鼠分别为(72.4±7.6)U/L、(70.2±3.8)U/L、(72.4±7.8)μmol/L、(8.2±2.2)U/L.低剂量组、中剂量组、高剂量组孕鼠ALT、AST、TBA、BIL水平明显高于对照组(P<0.05);中剂量组、高剂量组孕鼠各生化指标水平明显高于低剂量组(P<0.05).(2)ERαmRNA及ERβmRNA表达水平:ERαmRNA的表达水平在低剂量组(0.76±0.02)、中剂量组(0.99±0.04)和高剂量组(1.21±0.01)孕鼠肝脏组织中呈逐渐升高趋势(P<0.05),并明显高于对照组(0.65±0.01),分别与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);ERβ表达水平在4组孕鼠间分别比较,差异均无统计学意义(P>0.05).(3)CYP7B1 mRNA及PPARα mRNA表达水平:CYP7B1 mRNA的表达水平在低剂量组(0.93±0.01)、中剂量组(0.99±0.06)和高剂量组(1.22±0.04)孕鼠肝脏组织中呈逐渐升高趋势(P<0.05),并明显高于对照组(0.75±0.02),分别与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);PPARα mRNA表达水平在低剂量组(0.83±0.05)、中剂量组(0.71±0.02)和高剂量组(0.64±0.03)孕鼠肝脏组织中呈逐渐降低趋势(P<0.05),并明显低于对照组(1.35±0.05),分别与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 随着雌激素剂量的增加,PPARα表达水平降低,对CYP7B1表达的抑制作用解除,而导致CYP7B1表达水平升高;而CYP7B1有促进ERα高表达的作用,最终由ERα介导了雌激素诱导的肝内胆汁淤积的发生.提示PPARα、CYP7B1及ER的异常表达,是调控雌激素诱导孕鼠肝内胆汁淤积的发生机制之一.     

邻苯二甲酸(2-乙基己基)酯对妊娠大鼠的影响及锌保护作用的研究

目的 探讨邻苯二甲酸(2-乙基己基)酯(DEHP)对大鼠妊娠结局的影响及锌对其影响的保护作用.方法 将50只雌鼠随机分为DEHP组(50mg·kg-1 ·d-1)、DEHP+锌组(含1.2 mg锌的葡萄糖酸锌+ 50 mg·kg-·d-1 DEHP)、空白组(灌注1ml生理盐水)、玉米油组(灌注1ml玉米油)、锌组(含1.2 mg锌的葡萄糖酸锌1ml)5组,每组10只,孕前7d开始每日给予相应药物灌胃,直至孕19 d处死孕鼠,取出胎鼠.测量孕鼠体质量、各脏器质量、活胎鼠数、活胎鼠体质量及胎盘质量.结果 孕鼠体质量及肾、脾、脑、心脏等脏器质量指数各组间两两比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).孕鼠肝、子宫及卵巢质量指数,空白组分别为(4.4±0.7)％、(1.26±0.09)％、(0.083±0.009)％,玉米油组分别为(4.5±0.6)％、(1.29±0.10)％、(0.084±0.008)％,锌组分别为(4.4±0.4)％、(1.26±0.08)％、(0.084±0.009)％,DEHP组分别为(5.4±1.0)％、(1.11±0.08)％、(0.074±0.012)％,DEHP+锌组分别为(4.4±1.0)％、(1.28±0.10)％、(0.082±0.007)％,DEHP组与其他4组两两比较,差异均有统计学意义(P＜0.05),其他4组间两两比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).活胎鼠数、活胎鼠体质量及胎盘质量,空白组分别为(12.8±2.7)只、(6.03±0.16)g、(1.00±0.03)g,玉米油组分别为(13.6±3.1)只、(6.07±0.20)g、(1.00±0.04)g,锌组分别为(13.3±3.1)只、(6.16 ±0.18)g、(1.00±0.05)g,DEHP组分别为(9.2±4.1)只、(4.03±0.09)g、(0.95±0.03)g,DEHP+锌组分别为(12.1±2.9)只、(6.09±0.17)g、(0.99±0.03)g,DEHP组与其他4组两两比较,差异均有统计学意义(P＜0.05),其他4组间两两比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 妊娠期DEHP的暴露可对孕鼠及胎鼠造成损伤,预先给予锌干预可减轻DEHP暴露对妊娠的影响,保护妊娠过程.     

肝脏组织磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B信号通路参与降低胎儿生长受限大鼠的胰岛素敏感性

目的 探讨肝脏组织磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(phosphatidylinosital 3-kinase/protein kinase B,PI3-K/AKT)信号通路在胎儿生长受限(fetal growth restriction,FGR)大鼠胰岛素敏感性降低中的作用. 方法 母鼠受孕后第1天始随机分为对照组和低蛋白组,各10只.低蛋白组孕鼠采用低蛋白饮食法(粗蛋白含量为8.00％)建立FGR仔鼠模型.测定对照组和低蛋白组FGR仔鼠生后3、7、14、30、60及90 d(每组每个时间点取雄性仔鼠8只)空腹血浆葡萄糖和血清胰岛素,计算胰岛素抵抗指数及胰岛素敏感指数.实时荧光定量聚合酶链反应技术检测雄性仔鼠生后7、14、30、60及90 d肝脏组织胰岛素受体底物1、2和葡萄糖转运蛋白4 mRNA表达水平,采用Western印迹技术测定胰岛素受体底物1、PI3-K(p110β亚基)、AKT、磷酸化AKT蛋白表达水平.采用简单相关及多重线性回归分析肝脏组织中PI3-K/AKT信号通路关键分子表达改变与胰岛素敏感性变化间的关系. 结果 (1)低蛋白组新生仔鼠平均出生体重为(4.92±0.36)g,低于对照组的(6.43±0.59)g,差异有统计学意义(t=14.73,P＜0.05).低蛋白组仔鼠中FGR发生率为88.2％(97/110),其中雄性仔鼠FGR发生率为94.1％ (48/51).(2)生后60 d时FGR仔鼠空腹血浆葡萄糖开始高于对照组,直至90 d.FGR仔鼠空腹血清胰岛素和胰岛素抵抗指数30 d时显著高于对照组,持续至90 d.FGR仔鼠胰岛素敏感指数自30 d始即显著低于对照组,直至90 d,差异均有统计学意义(P均＜0.05).(3)与对照组相比,FGR仔鼠7d时胰岛素受体底物1、2 mRNA表达均显著降低(0.45±0.02与0.68±0.03,t=16.633,P＜0.05;0.34±0.10与0.70±0.19,t=4.864,P＜0.05),并持续至生后90 d(0.48±0.03与0.59±0.05,t=5.237,P＜0.05;0.49±0.20与0.70±0.11,t=2.253,P＜0.05);胰岛素受体底物1、PI3-K及磷酸化AKT蛋白表达自14d时出现降低(0.22±0.05与0.52±0.11,t=7.024,P＜0.05;0.46±0.03与0.97±0.08,t=17.508,P＜0.05;0.62±0.10与0.89±0.08,t=6.100,P＜0.05),持续至生后90 d(1.11±0.08与1.32±0.14,t=3.714,P＜0.05;0.63±0.07与1.00±0.19,t=5.206,P＜0.05;0.28±0.03与0.45±0.10,t=4.880,P＜0.05).(4)FGR仔鼠磷酸化AKT蛋白表达量与胰岛素敏感指数呈正相关(r=0.704,P＜0.05);磷酸化AKT蛋白表达量分别与空腹血浆葡萄糖、空腹血清胰岛素和胰岛素抵抗指数变化呈负相关(r分别为-0.609、-0.561和-0.577,P均＜0.05). 结论 FGR仔鼠肝脏组织中PI3-K/AKT信号通路中某些关键分子表达发生变化,可能参与了胰岛素抵抗的发生.     

妊娠期营养不良对大鼠糖、脂代谢及子代出生体重的影响

目的 研究妊娠期营养不良(营养过剩及营养不足)对大鼠糖、脂代谢及子代出生体重的影响.方法 Wistar大鼠从确定妊娠第1天起按摄入食物的不同,分别分为高脂高热量组、正常饮食组及低热量饮食组,每组10只.比较孕鼠妊娠期体重变化以及妊娠晚期血清甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、空腹血糖、胰岛素的水平、口服葡萄糖耐量试验和胰岛素释放试验结果的差异,观察各组子代出生体重及仔鼠巨大儿和低体重的发生率.采用单因素方差分析、LSD或DunnettT3检验、卡方检验进行统计学分析.结果 高脂高热量饮食组大鼠妊娠期体重明显增加,妊娠晚期血清甘油三酯及低密度脂蛋白分别为(1.68±0.13) mmol/L及(0.57±0.04) mmol/L,均高于正常饮食组[(0.78±0.08) mmol/L及(0.35±0.07) mmol/L),P均＜0.01],而高密度脂蛋白低于正常饮食组[(0.56±0.06) mmol/L与(1.09±0.08) mmol/L,P＜0.05];低热量饮食组甘油三酯、低密度脂蛋白及高密度脂蛋白分别为[(0.47±0.06) mmol/L、(0.21±0.06) mmol/L及(0.42±0.05) mmol/L],均低于正常饮食组(P均＜0.05).营养不良组(高脂高热量饮食组和低热量饮食组)孕鼠均出现了糖耐量受损,口服葡萄糖耐量试验和胰岛素释放试验异常;高脂高热量饮食组鼠妊娠晚期空腹血糖高于正常饮食组[(6.63±0.53) mmol/L与(4.90±0.26) mmol/L,P＜0.05],低热量饮食组空腹血糖为(4.18±0.26) mmol/L,与正常饮食组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).3组孕鼠妊娠晚期空腹血清胰岛素水平比较,差异均无统计学意义.高脂高热量饮食组子代平均出生体重高于正常饮食组[(6.14±0.31)g与(5.73±0.26)g,P＜0.05],仔鼠巨大儿发生率高于正常饮食组[19.20％(19/99)与7.84％(8/102),P＜0.05];低热量饮食组子代平均出生体重为(4.54±0.23)g,低于正常饮食组(P＜0.05),仔鼠巨大儿发生率为13.40％(11/76),高于正常饮食组(P＜0.05);低体重儿发生率高于正常饮食组[15.90％(13/76)与3.92％(4/102),P＜0.05];仔鼠总数量少于正常饮食组(76只与102只)(P＜0.05),高脂高热量饮食组仔鼠总数量为99只,少于正常饮食组,但差异无统计学意义(P＞0.05).结论 妊娠期营养不良可引起大鼠妊娠期脂质代谢异常、糖耐量受损和胰岛素抵抗,同时也对子代出生体重,包括仔鼠巨大儿及低体重儿的发生率产生不良影响.     

地塞米松与倍他米松对大鼠胎肺形态发育影响的对比

目的 比较产前小剂量应用地塞米松、倍他米松对大鼠胎肺形态发育的影响.方法 15只孕鼠随机分成对照组、地塞米松治疗1 d组、3 d组和倍他米松治疗1 d组及3 d组,每组3只.地塞米松及倍他米松3 d组分别于妊娠第16、17、18天连续腹腔注射地塞米松或倍他米松,剂量为0.2 mg/(kg·d);地塞米松及倍他米松1 d组于妊娠第16、17天腹腔注射4 m1生理盐水,妊娠第18天给予相应剂量药物.对照组大鼠于妊娠第16、17、18天连续注射4 ml生理盐水.光镜及电镜观察各组孕鼠的胎仔肺组织形态发育变化. 结果 (1)与对照组相比,倍他米松3 d、1 d组及地塞米松3 d组肺泡结构发育较为成熟.(2)倍他米松3 d组的肺泡间隔为(23.38±7.77)μm,地塞米松3 d组为(30.82±5.32)μm,倍他米松1 d组为(33.37±9.30)μm,均小于对照组[(71.15±48.72)μm](P＜0.01);倍他米松1 d组的呼吸膜周径为(43.24±18.20)μm、肺泡表面积为(412.71±298.45)μm2,倍他米松3 d组分别为(61.22±23.58)μm和(780.23±428.34)μm2,地塞米松3 d组分别为(40.31±15.20)μm和(471.08±324.63)μm2,均大于对照组[分别为(32.06±11.40)μm和(285.70土175.77)μm2](P＜0.01);倍他米松1 d组与地塞米松1 d组相比肺泡间隔薄,呼吸膜周径及肺泡表面积增大(P＜0.01).倍他米松3 d组与地塞米松3 d组相比肺泡间隔薄(P＜0.01),呼吸膜周径及肺泡表面积增大(P＜0.01).(3)透射电镜观察发现,倍他米松1 d、3 d及地塞米松3 d组肺泡Ⅱ型上皮细胞内可见板层小体,以倍他米松和地塞米松3 d组改变最为明显,而对照组未见板层小体.结论 小剂量地塞米松、倍他米松均能促进胎肺发育,但倍他米松效果更好.     

宫内脂多糖暴露后新生大鼠脑髓鞘基质蛋白、胶质纤维酸性蛋白、白细胞介素-1β、肿瘤坏死因子-α的表达变化

目的 探讨宫内脂多糖(lipopolysaeeharide,LPS)暴露后新生大鼠脑中炎症因子的表达与脑白质损伤的关系. 方法 向孕19 d SD大鼠宫内注射LPS(0.4μg/孕囊间)构建宫内感染大鼠模型作为LPS组(n=14),对照组给予同体积的无菌生理盐水(n=10).取1、3、7、11日龄新生大鼠脑标本(每组每时间点6只),通过免疫组织化学方法 检测髓鞘基质蛋白与胶质纤维酸性蛋白在新生大鼠脑组织中的表达;采用逆转录-聚合酶链反应技术检测脑组织白细胞介素-1β、肿瘤坏死因子-α mRNA的水平.组间差异比较采用t检验. 结果 (1)LPS组孕鼠胎盘组织HE染色可见显著炎性细胞浸润、间质明显增生、毛细血管腔变窄.(2)LPS组11日龄新生大鼠小脑、间脑髓鞘基质蛋白表达分别为1.29±0.76和1.71±0.49,均较对照组(分别为2.43±0.79和2.50±0.76)明显减少(P均<0.05);而LPS组11日龄新生大鼠海马、胼胝体、间脑和小脑中胶质纤维酸性蛋白的表达分别为2.71±0.49、2.40±0.55、1.50±0.55和2.80±0.45,均较对照组(分别为1.75±0.50、1.50±0.58、1.00±0.00和1.60±0.55)增强(P均<0.05).(3)LPS组与对照组1、3、7、11日龄新生大鼠脑组织中白细胞介素-1β与肿瘤坏死因子-α mRNA的表达差异无统计学意义(P均>0.05). 结论 宫内LPS暴露导致宫内炎性改变、影响胎盘血供,并致新生大鼠低出生体重,可能引起新生大鼠出现以低髓鞘化及反应性星形胶质化为特征的脑白质损伤.     

地塞米松对早产胎鼠生长发育的影响及与IGF-I的相关性

目的:探讨产前应用地塞米松在促进早产胎鼠肺成熟的同时对早产胎鼠生长发育的影响以及早产胎鼠生长发育与IGF-Ⅰ的相关性。方法:随机将W istar孕大鼠18只分为3组,地塞米松单剂量组(SD-DXM)、多剂量组(MD-DXM),对照组(CT)。单剂量组在孕鼠14天9时颈部皮下注射0.1mg地塞米松,多剂量组在孕鼠14、15天9时和21时颈部皮下注射0.1mg地塞米松,对照组在孕鼠14天9时颈部皮下注射等量的生理盐水。孕鼠怀孕至16.5天行剖宫产终止妊娠,比较用药组与对照组胎鼠肺脏成熟和生长发育情况。用放射免疫法测定孕鼠血清、胎鼠羊水中IGF-Ⅰ含量,进行同组间的相关性分析。结果:(1)应用地塞米松后胎鼠出生体重、呼吸评分和心脏重量/体重提高;肺脏重量/体重、肝脏重量/体重、全脑重量/体重降低;(2)孕鼠血清IGF-Ⅰ的变化:SD-DXM组高于CT组,差异有统计学意义(P<0.05)。MD-DXM组低于CT组,差异有统计学意义(P<0.01);(3)羊水IGF-Ⅰ的变化:SD-DXM组与CT组比较无统计学意义(P>0.05)。MD-DXM组低于CT组,差异有统计学意义(P<0.01);(4)孕鼠血清中IGF-Ⅰ含量远高于胎鼠羊水中IGF-Ⅰ含量,两者无相关性。结论:(1)地塞米松可以促进早产胎鼠肺脏成熟,地塞米松的不同剂量对胎鼠肺脏、肝脏、心脏、脑等重要脏器的发育有影响,单剂量应用地塞米松对胎鼠生长发育的不良影响小于多剂量组。(2)孕鼠血清中IGF-Ⅰ水平不能作为评价胎鼠生长发育的指标。     

产前应用地塞米松对早产仔鼠脑发育的影响

目的 探讨产前孕鼠使用地塞米松不同次数对早产仔鼠脑发育的影响. 方法 孕SD大鼠分为产前地塞米松3剂组(3只):于妊娠第16、17、18天给予地塞米松0.8 mg/(kg·d)生理盐水稀释至4 ml腹腔注射;地塞米松1剂组(3只):于妊娠第16,17天腹腔注射4 ml生理盐水,第18天腹腔注射等体积的地塞米松0.8 mg/(kg·d);对照组(3只):于妊娠第16、17、18天各腹腔注射生理盐水4 ml.孕19 d处死大鼠,取仔鼠称体重及脑重,免疫组织化学法检测脑组织特异性烯醇化酶(NSE)表达,电镜观察脑超微结构.组间差异比较采用ANOVA. 结果 (1)地塞米松3剂组体重、脑重、脑重/体重分别为(1.543±0.052)g、(88.80±7.12)mg和(5.75±0.38)0A,1剂组分别为(1.584±0.035)g、(98.21±3.71)mg和(6.20±0.26)%,均低于对照组[(1.696±0.076)g、(111.53±6.29)mg和(6.59±0.48)%](P<0.01或P<0.05);且地塞米松3剂组低于1剂组(P<0.01或P<0.05).(2)地塞米松3剂组脑皮质及海马区NSE表达强度分别为0.223±0.054和0.192±0.054,1剂组分别为0.381±0.041和0.359±0.046,均低于对照组(0.590±0.064和0.529±0.068)(P均<0.01).(3)地塞米松组早产仔鼠脑超微结构可见神经元核膜断裂、线粒体空泡变性、核仁消失、神经纤维丝断裂. 结论 产前使用地塞米松可损伤早产仔鼠脑发育,且多次使用比单次使用对脑组织的损伤更大.     

维拉帕米、阿托品、哇巴因、乙酰唑胺对兔输卵管液分泌的影响

本文在急性实验条件下采取输卵管液,用ICP 直读光谱仪测定元素浓度。结果表明:钙拮抗剂:维拉帕米(Ver),抗胆碱药:阿托品(Atr),碳酸酐酶抑制剂:乙酰唑胺(Ace)可使动情兔输卵管液分泌量减少。Ver 和Atr 可使输卵管液中钙的浓度下降,而对输卵管液中铜、锌、铁、镁、钾、钠、磷等七种元素的浓度没有影响。Ace 可使输卵管液中铜和钾的浓度增加。而对钙、锌、铁、镁、钠、磷等六种元素的浓度没有影响。Na-K-ATP 酶阻断剂:哇巴因(Oua)对输卵管液的分泌量和元素的浓度均无显著影响。     

CA_(125)、CA_(19.9)、CEA在卵巢上皮性交界性肿瘤中的临床价值

目的 :探讨测定血清CA12 5、CA19.9、CEA在诊断卵巢上皮性交界性肿瘤中的临床价值。方法 :回顾分析卵巢交界性肿瘤 5 0例血清CA12 5、CA19.9、CEA水平与临床资料。结果 :浆液性及粘液性肿瘤中CA12 5的阳性率分别为 5 3.85 %和 60 % ,差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ,临床分期晚者CA12 5阳性率有增高趋势 ;粘液性肿瘤中CA19.9的阳性率为 4 3.75 % ;CEA阳性率为 12 % ,仅见于粘液性或以粘液性为主的肿瘤中 ;与术前相比 ,术后CA12 5、CA19.9水平及阳性率均显著下降 (P <0 .0 5 )。结论 :CA12 5、CA19.9对卵巢上皮性交界性肿瘤的术前诊断及疗效监测有一定价值 ,CEA则在鉴别组织学类型中有一定价值。     

Expression of cyclooxygenase-2 (COX-2), receptors for estrogen (ER), and progesterone (PR), p53, ki67, and neu protein in endometrial cancer

OBJECTIVE: We aimed at investigating by immunohistochemistry the relationship between cyclooxygenase-2 (COX-2) and estrogen (ER), and progesterone (PR) receptors in a single institution series of 90 primary untreated endometrial cancer patients. The simultaneous assessment of p53 protein, ki67, and neu protein has been carried out. METHODS: Immunohistochemistry was performed on paraffin-embedded sections by using rabbit polyclonal antiserum against human COX-2, anti-ER (clone 1D5), and anti-PR (clone 1A6) monoclonal antibodies, anti ki67 (clone MIB-1) and p53 (clone DO-7), and polyclonal antibody anti human c-erbB2/neu. RESULTS: There was no difference in the distribution of COX-2, p53, and neu positive cases according to ER or PR positivity, while the percentage of ki67 positive endometrial tumors was significantly higher in ER negative versus ER positive tumors (54.5% versus 31.6%, P value = 0.044). ER and PR positive tumors showed a statistically significant association with clinicopathological parameters of better clinical outcome. There was no clear association between COX-2 positivity and any of the clinicopathological features. The percentage of ki67, p53, and neu positive tumors was found to be strictly related to more aggressive features. Only advanced stage of disease was found to be a predictor of poor prognosis (P value = 0.034). None of the biological parameters examined was shown to be associated with patient outcome. CONCLUSIONS: We showed that COX-2 expression is not correlated with ER, PR, p53, and neu, thus suggesting that COX-2-mediated activities may follow independent pathways. Our findings provide the rationale to design trials based on the combination of antihormones with inhibitors of COX-2 and neu in recurrent/metastatic endometrial cancer.     

Pretreatment Plasma Levels of Fibrinopeptide-A (FPA), D-Dimer (DD), and von Willebrand Factor (vWF) in Patients with Ovarian Carcinoma

The preoperative plasma levels of fibrinopeptide-A (FPA), D-dimer (DD), and von Willebrand Factor (vWF) were measured in 125 patients with ovarian masses undergoing laparotomy and in 88 healthy nonpregnant women as controls. FPA, DD, and vWF levels were significantly higher in the 58 patients with ovarian carcinoma than in the 67 patients with benign ovarian disease or controls. FPA and DD values were significantly higher in advanced (FIGO stage III-IV) than in early ovarian carcinoma. Among patients with advanced disease, FPA and DD levels correlated with none of the common clinicopathological prognostic variables; conversely, vWF values were related to FIGO stage (IV versus III, P < 0.02) and size of residual disease after initial surgery (>2 cm versus 2 cm, P < 0.05). In conclusion, increased fibrin production and degradation occur in patients with ovarian carcinoma.     

Vitamin D (soltriol), light, and reproduction

Evidence from autoradiographic studies with 1,25(OH)2-vitamin D3 (vitamin D, soltriol) labeled with tritium and from the literature indicates that the steroid hormone soltriol regulates and modulates reproductive processes in the female, as it does in the male. Nuclear receptors for soltriol have been discovered in the uterus, oviduct, ovary, mammary gland, placenta, and fetal membranes, as well as in the pituitary and hypothalamus. Soltriol is recognized as a transducer and hormonal messenger of sunlight, acting as a somatotropic activator and modulator of vital processes for the seasonal and estival adaptation of growth, development, and procreation. Its influence on calcium equilibrium is just one of its many functions to serve this goal. This article reviews experimental, clinical, and epidemiologic evidence that suggests the involvement of soltriol in the control of reproductive processes, noting its importance for the onset of puberty, fertility, pregnancy, lactation, and probably sexual behavior. Cooperative actions between soltriol and other steroid hormones, especially estradiol, are pointed out.     

Cyclooxygenase-2 (COX-2), epidermal growth factor receptor (EGFR), and Her-2/neu expression in ovarian cancer

OBJECTIVES: Cyclooxygenase-2 (COX-2) seems to be involved in critical steps of cancer onset and progression. Abnormalities of epidermal growth factor receptor (EGFR) and Her-2/neu have been actively investigated in ovarian cancer and associated with unfavorable clinical outcome. The involvement of COX-2 in ErbB family pathways has been proposed. We investigated by immunohistochemistry the expression of COX-2, EGFR, and Her-2/neu in a series of advanced primary ovarian cancers. METHODS: The study included 76 consecutive stage IIIC-IV ovarian cancer patients with measurable disease after first surgery. Immunohistochemistry was performed on paraffin-embedded sections with rabbit antiserum against COX-2, murine monoclonal antibody (MoAb) 300G9 against Her-2/neu, and monoclonal antibody 108 against EGFR. RESULTS: No association among COX-2, EGFR, and HER-2/neu was found. COX-2 positivity was found in a statistically significant higher percentage of unresponsive cases (80.0%) than in patients responding to chemotherapy (35.7%) (P = 0.0008). The association between COX-2 positivity and poor chance of response to treatment was retained in multivariate analysis. In the subgroup of patients who underwent explorative laparotomy COX-2-positive cases showed a shorter overall survival (P = 0.049). CONCLUSIONS: COX-2 could represent a possible new marker of sensitivity to platin-based chemotherapy in ovarian cancer. The lack of association of COX-2 with EGFR or Her-2/neu suggests that the ability of COX-2 to predict tumor sensitivity to chemotherapy is not dependent on EGFR or Her-2/neu status and could be independently associated with prognosis. In this context, the availability of agents able to specifically interfere with COX-2, Her-2/neu, or EGFR tyrosine kinase is of potential interest.