人细小病毒B19检测方法研究进展

人类微小病毒B19（HPV B19）是细小病毒属中唯一对人类有致病性的病原体。感染后可引起传染性红斑、关节病、再生障碍性贫血危象、胎儿水肿及流产，对某些免疫力低下的病人，B19病毒感染甚至是致命的。B19病毒一般通过呼吸道传播，也可经输血和血液制品传播。建立简单实用的检测方法对B19病毒相关疾病的诊断和治疗非常重要。本文拟对B19病毒检测方法作一综述。     

人细小病毒B19及其研究进展

人细小病毒B19（HPV B19）是一类单链线状DNA病毒，可引起无症状性感染和症状性感染，是导致人类多种疾病发生的病因。本文就细小病毒B19的病毒学，流行病学研究及其临床表现和治疗作一综述。     

抗人细小病毒B19IgG的检测

用抗人细小病毒Ｂ１９的ＭｃＡｂ建立ＥＬＩＳＡ－抗γ捕捉法，对正常新生儿（３５例）脐血标本及１月龄～１３岁小儿（１３９例）血清标本计１７４份，进行了Ｂ１９病毒特异性ＩｇＧ检测，结果阳性率分别为２２．９％（８／３５）和５．８％（８／１３９）．总阳性率为９．０％，并且大多数阳性标本的特异性ＩｇＧ抗体水平较低，最高滴度约为１：４００。结果显示：本文建立的检测方法有高度特异性；我国小儿中有Ｂ１９病毒自然感染，并有较高数量的易感人群，应进一步深入研究Ｂ１９病毒对我国小儿的危害及其防护措施。     

先天性细小病毒B19感染与母婴传播研究进展

B19病毒感染广泛存在，人群感染率大约为50%，妊娠者感染率的范围为35%-53%，妊娠期急性B19感染的发生率为3.3%-3.7%，妊娠期急性B19感染与胎儿贫血、非免疫性胎儿水肿、胎儿死亡有关，现将B19感染的诊断、治疗及处置进行了综述。     

原位杂交检测微小病毒B19方法的建立及临床应用

目的 建立原位杂交（ＩＳＨ）方法检测人微小病毒Ｂ１９,并确定其在先天性心脏病９ＣＨＤ）心脏组织细胞的定位分布。方法 以Ｂ１９特异的衣壳蛋白ＶＰＩ ＤＮＡ内１１１２ｂｐ片段为模板,采用随机引物标记探针法,建立了ＩＳＨ检测Ｂ１９ ＤＮＡ浓度于０．１ｂｇ／μ１以上呈阳性。在６６例先天性心脏病心脏组织中,检测至Ｂ１９ ＤＮＡ阳性７例,并发现Ｂ１９ ＤＮＡ阳性信号主要定位于心肌细胞核内,３８例对照组健康心肌     

人细小病毒B19与疾病相关性的研究

人细小病毒Ｂ19(ｈｕｍａｎｐａｒｖｏｖｉｒｕｓＢ19,ＨＰＶＢ19)是近十余年来发现的一个重要病原体。为研究梧州市及周边地区Ｂ19感染的疾病谱 ,现将该地区健康自然人群及患者检测情况作一总结报告。1999年 11月 15日～ 2 0 0 1年 6月 2 0日在广西桂东人民医院门诊及住院患者中共检测 32 9例 ,年龄为出生后 4小时～ 82岁。男性 179例 ,女性 15 0例。病种 75种 ,血液系统疾病 4 2例 ,肿瘤患者 71例 ,结缔组织疾病 30例 ,呼吸道感染 5 7例 ,异常妊娠 2 8例 ,其他 10 1例。同期健康人组 14 1例 ,年龄为出生后 1天～ 6 0岁 ,男性 5 6例 ,女性 …     

乌鲁木齐地区孕妇人细小病毒B19与TORCH感染的比较

目的了解我区孕早期妇女TORCH及人细小病毒B19的感染情况.方法用ELISA法检测185例孕早期妇女血清中特异性 TORCH/HPVB19-IgM抗体.结果感染率分别为弓形体(TOX)2.16%,风疹病毒(RV)1.62%,巨细胞病毒(CMV)1.62%,单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-Ⅱ)1.08%,人细小病毒B19(HPVB19)8.11%,其HPVB19-IgM抗体阳性率与TORCH各项相比,差异有显著的统计学意义(P＜0.01).结论我区孕妇中人细小病毒B19新近感染率明显高于其它TORCH各项病原体的新近感染率,有必要把HPVB19列入TORCH监测项目中,以提高妊娠质量.     

恶性肿瘤与人细小病毒B19DNA的关系探讨

人细小病毒B19（human parvovirus B19, B19 ）是传染性红斑和急性再障危象的病因。为了解恶性肿瘤与B19病毒感染的关系，我们进行了如下研究。     

用巢式PCR检测育龄妇女人群人细小病毒B19感染的研究

目的 调查人类细小病毒B19在武汉地区普通人群,尤其是育龄妇女中的感染状况.方法 采集武汉地区2家医院的血液样本1 700份,分为两组.以血清中提取的DNA为模板,进行巢式PCR扩增.结果 第Ⅰ组(普通组,包括男性和女性)阳性检测率为4.50%,第Ⅱ组(妇女组)阳性检测率为8.33%.结论 武汉地区育龄妇女的B19感染率高于普通人群,很有必要对孕妇进行诊断从而预防新生儿感染B19病毒.另外,由于巢式PCR具有灵敏、特异、简便等优点,适合于用来检测血液样本中的人细小病毒B19.     

人细小病毒B19阳性再障患者一些细胞因子变化

为探讨人细小病毒Ｂ１９（ＨＰＶＢ１９） 所致再生障碍性贫血（ＡＡ） 的免疫学改变, 应用酶联免疫吸附试验检测ＡＡ 患儿血清白细胞介素８ 和６ （ＩＬ ８、ＩＬ ６）、肿瘤坏死因子α（ＴＮＦ α） 及干扰素α（ＩＦＮ α） 水平。结果： ＡＡ 患儿上述各免疫指标水平均显著高于正常对照组（Ｐ＜ ０－０１ 或Ｐ＜ ０－０５） 。其中ＨＰＶＢ１９ 阳性ＡＡ 组ＩＬ ８ 水平亦高于ＨＰＶＢ１９ 阴性组, 而ＩＬ ６、ＴＮＦ α及ＩＦＮ α两组间无差异。对ＨＰＶＢ１９ ＡＡ组作直线相关分析显示, ＩＬ ８ 与ＴＮＦ α和ＩＦＮ α呈正相关, ＴＮＦ α与ＩＬ ６ 呈正相关（ｒ 分别为０－５６５ 、０－６０３ 及０－８６０, Ｐ＜ ０－０１） 。提示： ＨＰＶＢ１９ 所致ＡＡ 患儿有明显的免疫功能紊乱, 多种细胞因子, 特别是ＩＬ ８ 可能在其免疫病理机制中起一定作用。     

套式聚合酶链反应检测自然流产组织中人细小病毒B19

目的进一步了解我国胎儿人细小病毒Ｂ１９的感染状况及其与自然流产之间的关系。方法用所建立的套式聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术对５０例新鲜的和６６例石腊包埋的自然流产组织及２５例同期健康孕妇人工流产组织进行人细小病毒Ｂ１９ＤＮＡ检测。结果显示病例组有３４例阳性，阳性率为２９．３％，而正常对照组有１例阳性，阳性率为４％。经统计学检验有显著性差异。结论可能人细小病毒Ｂ１９感染与自然流产有一定关联。人细小病毒Ｂ１９可能是致自然流产的重要因素之一     

建立人微小病毒B19的PCR检测方法

人微小病毒Ｂ１９是微小病毒科中唯一能感染人的病毒。能够提供Ｂ１９抗原的病毒体外培养系统尚未建成，因此限制了血清学实验的开发和普及。为此作者建立起Ｂ１９病毒的ＰＣＲ检测方法。设计引物在表达外壳蛋白ＶＰ１基因区，扩增长度为４００ｂｐ。     

人细小病毒B19在结直肠癌中表达增强

目的探讨人类细小病毒B19感染与结直肠癌的关系。方法运用巢式PCR检测50例结直肠癌患者的肿瘤组织和对应的癌周结直肠组织以及10例正常成人结肠组织中的B19DNA,免疫组化检测B19结构蛋白VP1/VP2。结果肿瘤组织B19DNA阳性率为96%,显著高于癌周(60%)及正常对照(60%)。免疫组化显示,腺癌组织82%VP1/VP2蛋白表达,显著高于癌周组织(30%)及正常对照(20%)。结论人细小病毒B19可能在结直肠癌的发生中起一定作用,为探讨结直肠癌的发病机制提供新思路。     

结直肠癌组织中人细小病毒B19的检测

目的探讨人细小病毒B19感染与结直肠癌发生的关系。方法运用原位杂交对50例石蜡包埋结直肠癌患者的肿瘤组织,癌周结直肠组织以及10例正常成人结肠组织中B19病毒进行检测。激光捕获显微切割肿瘤细胞及癌周正常肠上皮细胞,巢式PCR扩增B19DNA。结果50例结直肠癌标本中,原位杂交示B19阳性信号在肿瘤组织为78％（39／50）,癌周结直肠组织为40％（20／50）,正常结肠组织中5例（n=10）,经统计分析肿瘤与癌周组织B19感染差异有显著性（P〈0．01）,正常结肠组织与癌周组织间未见统计学差异（P=1．000）。显微切割进一步证实B19病毒DNA存在于肿瘤细胞内。结论结直肠组织中人细小病毒B19感染较常见,主要存在于结直肠癌上皮细胞内,该病毒可能在结直肠癌的发生过程中起一定作用。     

吉林省供血者人类细小病毒B19 IgG抗体的调查

目的 了解吉林省供血者人类细小病毒感染的流行病学情况,为评估我国B19病毒的感染状况提供基础数据.方法 用间接ELISA方法检测血清中的抗B19 IgG抗体.结果 在184份血清中,抗B19 IgG抗体总检出率为55.43%.女性抗体阳性率高于男性,差异有统计学意义（P＜0.05）,年龄段在35～45岁之间的献血人员抗体阳性率最高.结论 本研究数据提示吉林省地区献血人员B19病毒感染率较高,有必要进行进一步B19 DNA的调查研究,为输血安全和血液制品安全提供保障.     

人微小病毒B19感染的研究进展

人微小病毒Ｂ１９感染的研究进展王凝芳作者单位：１０００３９北京解放军３０２医院１９９７年３月１３日收稿５月１０修回１９７５年Ｃｏｓｓａｒｔ等从一名无症状者血清标本电镜检查中发现直径２０～２５ｎｍ球形病毒样颗粒，编定为Ｂ１９病毒（１）。经证实该病毒属于...     

TORCH与优生：V．PCR方法检测人类细小病毒B19

查点PCR方法可以用来检测人类细小病毒B19(B19)DNA。利用特异性引物扩增得到B19片段，对第一轮扩增产物进行DNA印迹及限制性内切酶盈谱分析．证明该产物是B19 DNA的特异顺序。本文同时还利甩地高辛标记寡核苷酸探针与PCR产物杂交，可以检测少至lfg的B19 DNA。甩此套式PCR方法对7例临床畸胎的组织标本检测，发现2例为B19 DNA阳性。作者以为，此方法适用于快速、灵敏、特异地临床检测B19 DNA。     

建立设有内对照的Real-time PCR方法检测人血清中细小病毒B19

目的 建立设有内对照的TaqMan探针Real-time PCR方法 ,用于检测人血清中细小病毒B19.方法 人工合成2段DNA序列,克隆到T载体,线性化后进行DNA定量,分别作为模板标准品和内对照;合成1对引物和不同荧光素标记的2条探针,2条探针分别能与阳性模板或内对照结合,建立设有内对照的B19 Real-time PCR检测方法 .对方法 的稳定性进行了评价,并应用于人血清B19病毒检测.结果 获得了B19检测标准DNA和内对照DNA,确定了内对照的添加量,建立了使用内对照的Real-time PCR检测方法 .对160份血清标本进行了检测,检出2份阳性标本,病毒DNA浓度分别为2.1 × 105Geq/ml和3.6×103Geq/ml.结论 成功建立了人细小病毒B19 Real-time PCR检测方法 ,可用于人血清B19检测;由于使用了内对照,该方法 有利于排除假阴性检测结果 .     

妊娠期细小病毒B19感染

细小病毒B19感染是人类常见一种传染性疾病。妊娠期感染细小病毒B19后可导致流产、胎儿水肿、胎儿畸形,甚至胎儿死亡等。有报道,胎儿传染率为33％,16－28周妊娠期的胎儿似乎对细小病毒感染表现的尤为敏感。细小病毒特异性IgM抗体存在,提示近期感染。目前可用DNA杂交技术或聚合酶链反应进行DNA实验以检测羊水或血液中的细小病毒抗原的存在。妊娠合并细小病毒感染无特效方法,目前报道表明宫腔输血可以减轻B19病毒毒性及治疗胎儿水肿,对病毒有效的疫苗正在研制之中,有望可以预防生育年龄妇女的细小病毒感染。