SDS－PAGE鉴定霍乱弧菌不同菌株外膜蛋白成分

霍乱弧菌５６９Ｂ等菌株用ＥＤＴＡ－溶菌酶法提取其外膜蛋白，以高速离心法纯化并以聚丙烯酰胺凝胶电泳分离其主要蛋白区带。经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ及免疫电泳等方法鉴定，表明不同菌株的外膜蛋白均显示一主要区带，其分子量为２５ＫＤａ，免疫双扩试验表明不同霍乱弧菌菌株的外膜上都有一个共同的蛋白抗原。     

BCG 65KD热休克蛋白的纯化

目的：研究卡介苗（ＢＣＧ）６５ＫＤ热休克蛋白的提纯方法。方法：ＢＣＧ经３７℃恒温振荡培养两周，４２℃热休克处理２ｈ，培养液经离心、抽滤、盐析沉淀、ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分离、电泳洗脱等步骤纯化。结果：提纯产物经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析，其电泳区带在６５ＫＤ位置，经抑制试验表明具有较高抗原活性。结论：流程方法简单、实用，有助于对ＩＤＤＭ的诊断及其深入研究。     

霍乱弧菌O139菌毛的提取及鉴定

为给霍乱弧菌亚单位菌苗的研制提供基础,作者对霍乱弧菌Ｏ１３９菌毛的提取和鉴定方法进行了探讨。结果发现,菌毛的最佳表达条件为ＡＫＩ或ＣＦＡ培养基中３０℃静止培养２４～３６小时。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳证实了ＴｃｐＡ蛋白的存在,分子量为２０．５ｋｄ。用鼠抗毒素共调菌毛（ＴＣＰ）的单克隆抗体和羊抗鼠ＩｇＧ－ＨＲＰ作斑点酶免疫试验,结果为阳性。用ＴＣＰ免疫大白兔所获得的免疫血清与Ｏ１３９型和ＥｌＴｏｒ型霍乱弧菌菌株作常规凝集试验,可见ＴＣＰ与Ｅ１Ｔｏｒ型菌株发生交叉反应。由此表明ＴＣＰ可作为一种有效的保护抗原,用于霍乱菌苗的研制     

双胸蚓纤溶酶Ⅲ的分离纯化及其性质研究

用硫酸铵分段盐析，ＤＥＡＥ－纤维素，ＤＥＡＥ－ＳｅｐｈａｄｅｘＡ－２５和ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－７５柱层析的方法，从双胸蚓组织中分离纯化出一种纤溶酶，经聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＰＡＧＥ）显示一条区带，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测定其分子量为２２．１ＫＤ     

奇异变形杆菌潜生体与繁殖体的耐药性差异及其机制探讨

目的：观察奇异变形杆菌潜生体与繁殖体的耐药性差异并探讨其发生机制。方法：采用一株自已构建的标准产酶菌株和一株临床分离菌株、经波动培养法诱导产生潜生体及繁殖体,检测二者的耐药性差异,并通过β－内酰胺酶活性分析、外膜通透率测定及外膜蛋白ＳＤＳ－ＰＡＧＥ检测来探讨其发生机制。结果：潜生体的耐药程度普遍高于繁殖体,二者的β－内酰胺酶活性差异不显著（Ｐ〉０．０５）,潜生体外膜通透率降低且有多种外膜蛋白减少或     

单克隆抗体SZ—39识别的人脑胶质瘤细胞SHG—44膜蛋白的提取

目的：提取ＭｃＡｂ ＳＺ－３９识别的人脑胶质瘤细胞ＳＨＧ－４４膜抗原蛋白,为其进一步研究作准备。方法：分别以两组去污剂（１）２％Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ－１１４;（２）１％ＳＤＳ、１％去氧胆酸钠、１％ＮＰ－４０、１ｍｍｏｌ／Ｌ ＥＤＴＡ裂解ＳＨＧ－４４细胞,提取细胞蛋白,再以ＳＤＳ－ＰＡＧＥ法分离蛋白,并以Ｗｅｓｔｅｒｎ－Ｂｌｏｔ法分析鉴定。结果：ＭｃＡｂ ＳＺ－３９识别的蛋白呈一条区带,分子量为６０ｋＤ     

E1 Tor霍乱弧菌SM_6和江苏1d菌株

ＳＭ６是我国检测Ｅ１Ｔｏｒ霍乱弧菌是否带有溶源性噬菌体的指示菌株。江苏的６株Ｅ１Ｔｏｒ霍乱弧菌和ＳＭ６都属于噬菌体－生物分型的１ｄ型，而在噬菌体分型中ＳＭ６为１／２型，江苏的６株菌株则为１／２／３型；霍乱毒素（ＣＴ）基因测定也表明两者的不同，ＳＭ６不含ＣＴ基因，江苏的６株都含有ＣＴ基因，显示噬菌体分型可将噬菌体－生物分型的型别进一步划分，ＳＭ６的特性也为霍乱的进一步研究提供了资料。     

富含组氨酸糖蛋白的纯化及促凝活性的初步研究

采用硫酸铵分段盐析，肝素－葡聚糖亲和层析和ＤＥＡＥ－交联葡聚糖Ａ－５０离子交换层析等方法从人血浆中分离纯化出富含组氨酸糖蛋白，经双向免疫扩散和ＳＤＳ－ＰＡＧＥ鉴定，表明待鉴定样品为单一区带，分子量６６Ｋｄ的富含组氨酸糖蛋白纯品，富含组氨酸糖蛋白通过同ＡＴ－Ⅲ竞争肝素结合而具有较强的促凝活性，其同肝素间的相互作用依赖于Ｃａ＾２＋的存在，ＥＤＴＡ，枸椽酸盐对此具有浓度依赖性的抑制作用     

富含组氨酸糖蛋白的纯化及促凝活性的初步研究

采用硫酸铵分段盐析，肝素－葡聚糖亲和层析和ＤＥＡＥ－交联葡聚糖Ａ－５０离子交换层析等方法从人血浆中分离纯化出富含组氨醚糖蛋白，经双向免疫扩散和ＳＤＳ－ＰＡＧＥ鉴定，表明待鉴定样品为单一区带、分子量６６Ｋｄ的富含组氨醚糖蛋白纯品。富含组氨醚糖蛋白通过同ＡＴ－Ⅲ竞争肝素结合而具有较强的促凝活性，其同肝素间的相互作用依赖于Ｃａ２＋的存在，ＥＤＴＡ，枸椽酸盐对此具有浓度依赖性的抑制作用。     

日本血吸虫肝门型童虫蛋白质SDS—聚丙烯酰胺凝电泳的分析

本文采用十二烷基硫酸钠－聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）对日本血吸虫肝门型童虫蛋白组分进行了分析，结果显示，１４ｄ肝门型雌雄童虫出现３３条蛋白区带，主带８条，２１ｄ肝门型雌雄童虫出现３４例蛋白区带，主带８条，２１ｄ雄性童虫出现３１条蛋白区带，主带７条，各组童虫与成虫比较，有２７～２８条共同蛋白区带，提示日本血吸虫不同时期的肝门型童虫与成虫的蛋白组分在质与量方面虽然存在着某些差异，但总体上两者     

霍乱弧菌外膜抗原免疫性的研究

人体感染霍乱弧菌后,可获得有效的保护性免疫。但是究竟霍乱弧菌表面的哪种成份在保护性免疫中起主要作用,至今尚未完全清楚。因此深入研究此问题对霍乱免疫机制的探讨以及制造高效霍乱疫苗都是十分重要的。为此我们提取了霍乱弧菌外膜成份,并对其免疫化学性,抗原性和免疫保护作用进行了研究。本文用4M尿素提取霍乱弧菌外膜,SDS—PAGE图谱显示11条蛋白区带,主要外膜蛋白分子量在40k～45k之间;     

5株类杆菌外膜蛋白的研究

本文用实验方法１（用ＥＤＴＡ处理等过程）和方法２（用Ｔｒｉｔｏｎ处理等过程）制备脆弱类杆菌处膜蛋白，结果表明方法２优于方法１。多形类杆菌是脆弱类杆菌的亚种，其外膜蛋白的ＳＤＳ－ＰＡ－ＧＥ图型极为相似，而与不同的菌种产黑色素类杆菌，不同的菌属具核梭杆菌的外膜蛋白电泳图型不同，但牙龈类杆菌与脆弱类杆菌属于不同的菌种，其外膜蛋白电泳图型却极为相似，原因尚不能解释。     

绿肝杆菌外膜蛋白D2（OprD2）与耐药关系的研究

该文采用外膜蛋白ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、凝胶分光光度扫描分析方法，研究该室临床分离的绿脓杆菌ＯｐｒＤ２与耐药的关系。结果表明绿脓杆菌泰能耐药株均有不同程度ＯｐｒＤ２的减少，药组ＯｐｒＤ２的相对含量明显低于敏感组，提示ＯｐｒＤ２的减少甚至失是脓杆菌对碳表霉烯抗生素耐药的主要原因。     

日本血吸虫肝门型童虫蛋白质SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳的分析

本文采用十二烷基硫酸钠－聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）对日本血吸虫肝门型童虫蛋白组分进行了分析，结果显示：１４ｄ肝门型雌雄童虫出现３３条蛋白区带，主带８条；２１ｄ肝门型雌雄童虫出现３４条蛋白区带，主带８条；２１ｄ雄性童虫出现３１条蛋白区带，主带７条。各组童虫与成虫比较，有２７～２８茶共同蛋白区带，提示日本血吸虫不同时期的肝门型童虫与成虫的蛋白组分在质与量方面虽然存在着某些差异，但总体上两者的蛋白组分有很大的相似性。     

免疫印迹法检测SLE病人血清抗Sm抗体阳性判断及检出率探讨

抗史密斯抗体是ＳＬＥ的标记抗是性用于诊断ＳＬＥ。免疫印迹法（ＩＢＴ）抗Ｓｍ的抗体，根据ＮＣ膜上三个印迹区带（２９ＫＤ／Ｂ、２８．５ＫＤ／Ｂ、１３．５ＫＤ／Ｄ） 以与否判断抗Ｓｍ抗体最性或生。对１２３例临床仍ＳＬＥ病人表同时测定ＡＮＡ－ＩＦ、抗ＥＮＡ－ＩＢＴ（包括抗Ｓｍ），结果ＡＮＡ阳性率９５．１２％，抗Ｓｍ＝ＣＩＥ阳性率４２．３％，抗Ｓｍ－ＩＢＴ以三区带同时显色判断阳性率３５．７７％，以一区带任一     

赖型017株钩体疏水外膜蛋白及其免疫特征的研究

采用低浓度非离子型去污剂ＴｒｉｔｏｎＸ－１１４（ＴＸ－１１４）抽提和分离问号状钩端螺旋体（钩体）黄疸出血群赖型０１７株（０１７），选择性地将钩体外膜蛋白分离为ＴＸ－１１４疏水相和亲水相两个部分。疏水相外膜蛋白含５条主要蛋白区带，其分子量分别为６６ｋｄ、３９ｋｄ、３５ｋｄ、２７ｋｄ和１６ｋｄ，其中仅３９ｋｄ外膜蛋白区带可特异地分别被抗全０１７血清、抗０１７外膜血清和抗０１７保护性单克隆抗体Ｅ４Ｂ７Ｇ５所识别。本研究结果表明经ＴＸ－１１４抽提分离的３９ｋｄ疏水外膜蛋白为０１７钩体稳定的免疫原，在研究钩体保护性抗原和构建基因工程疫苗中有十分重要的研究价值。     

猪精浆中,二肽基肽酶Ⅱ的提取,纯化和N—末端氨基酸序列分析

本文采用ＤＥＡＥ－Ｓｅｐｈａｃｅｌ、Ｓｅｐｈａｃｏｙｌｓ－３００ＨＲ、ＭｔｒｅｓＧｅｌＲｅｄＡ、Ｑ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ、Ｚｉｎｅ－ＣｈｅｌａｔｅＣｅｌｌｕｌｆｉｎｅ，Ｐｈｅｎｙｌ－ＳｕＰｅｒｏｓｉｉｎｔｈｅＦＰＬＣ柱层析的方法，从猪精浆中将二肽基肽酶Ⅱ提纯到１６００倍。经聚丙烯酸胺凝胺电泳分离鉴定后，得到了单一的一条区带。采用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ时，在用β－ＭＥ存在条件下，其分子量为６１ＫＤ，而不存在     

空肠弯曲菌鞭毛蛋白的提取与鉴定

用制备性ＳＤＳ丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）分离空肠弯曲菌Ｓ１３１株的菌体蛋白。在ＫＣｌ“染色背景下，切下６５．４７Ｋｕ蛋白带，经电泳洗脱和浓缩获得的蛋白液，免疫印迹证实为均一鞭毛蛋白．另用亚硝基胍诱导使空肠弯曲菌Ｓ１３１有动力株突变为无动力株，电镜下突变株鞭毛消失，但ＳＤＳ－ＰＡＧＥ谱上仍有６５．４７Ｋｕ鞭毛蛋白区带。提示，这种鞭毛突变可能发生在蛋白质装配阶段。     

空肠弯曲菌鞭毛蛋白的提取与鉴定

用制备ＳＤＳ聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）分离空肠弯曲菌Ｓ１３１株的菌体蛋白。在ＫＣｌ“染色”背景下，切下６５．４７Ｋｕ蛋白带，经电泳洗脱和浓缩获得的蛋白液，免疫印迹证实为均一鞭毛蛋白。另用亚硝基胍诱导使空肠弯曲菌Ｓ１３１有动力株突变为无动力株，电镜下突变株鞭毛消失，但ＳＤＳ－ＰＡＧＥ谱上仍有６５．４７Ｋｕ鞭毛蛋白区带。提示，这种鞭毛突变可能发生在蛋白质装配阶段。     

日本血吸虫多坐分子疫苗的制备及其抗原性的研究

为了制备足量、高纯度的供血吸虫保护性免疫力研究的多价分子疫苗。通过制备型ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和电渗方法从日本血吸虫成虫分离纯化出２８ＫＤ，３１／３２ＫＤ及９７ＫＤ蛋白。经ＢＣＡ法检测蛋白含量，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ检测蛋白纯度和分子量，Ｗｅｓｔｒｎ－ｂｌｏｔ及ＥＬＩＳＡ检测其抗原活性。结果日本血吸虫成虫２８ＫＤ，３１／３２ＫＤ及９７ＫＤ三种纯化蛋白经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ检测均为单一条带并与所分离的蛋白分子量相符