前列腺癌患者外周血中CD4+CD25high调节性T细胞及调节因子TGF-31和COX-2的表达

目的:通过检测前列腺癌患者以及健康志愿者外周血中CD4+ CD25high调节性T细胞、TGF-β1及COX-2的表达,初步探讨CD4+ CD25high调节性T细胞在前列腺癌发病机制中的作用及其与TGF-β1和COX-2的相关性.方法:应用流式细胞术检测30例前列腺癌患者治疗前后(其中前列腺癌局限组11例,非局限组19例)及20例健康志愿者外周血单个核细胞(PBMC)中CD4+ CD25high调节性T细胞占CD4+T细胞的比例;应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测其外周血清中TGF-β1和COX-2的表达.对前列腺癌患者上述指标进行术前术后对比分析,另对CD4+ CD25high调节性T细胞与TGF-β1及COX-2的相关性进行分析;并探讨上述指标在前列腺癌患者局限组和非局限组间是否存在差异性.结果:流式细胞术检测显示,前列腺癌患者治疗前PBMC中CD4+ CD25high调节性T细胞占CD4+T细胞的比例为(18.32±7.49)%,高于健康志愿者对照组(7.77±1.86)%(P＜0.05).前列腺癌患者治疗后其比值为(17.34±5.87)%,较治疗前稍减低,但两者相比无显著差异(P＞0.05).ELISA检测外周血清中TGF-β1和COX-2显示,前列腺癌组分别为(215.97±55.16) ng/ml和(6.88±5.14) ng/ml,对照组分别为(149.75±:47.11) ng/ml和(5.65±2.69) ng/ml;前列腺癌患者外周血清中TGF-β1的表达水平高于健康志愿者对照组(P＜0.05),COX-2的表达水平与对照组无显著差异(P＞0.05).通过多重线性回归分析表明,前列腺癌患者PBMC中C14+ CD25high调节性T细胞的表达与血清中TGF-β1和COX-2的表达无显著相关.前列腺癌局限组和非局限组外周血中CD4+ CD25 high调节性T细胞、TGF-β1及COX-2的表达均无显著性差异(P＞0.05).结论:前列腺癌患者PBMC中CD4+ CD25high调节性T细胞可能参与前列腺癌的发生,其增殖机制与血清中TGF-β1和COX-2的表达无关,可能与肿瘤本身及肿瘤局部微环境相关.     

前列腺癌患者外周血中CD4^＋CD25^high调节性T细胞及调节因子TGF-β1和COX-2的表达

目的：通过检测前列腺癌患者以及健康志愿者外周血中CD4＋CD25high调节性T细胞、TGF-β1及COX-2的表达,初步探讨CD4＋CD25high调节性T细胞在前列腺癌发病机制中的作用及其与TGF-β1和COX-2的相关性。方法：应用流式细胞术检测30例前列腺癌患者治疗前后（其中前列腺癌局限组11例,非局限组19例）及20例健康志愿者外周血单个核细胞（PBMC）中CD4＋CD25high调节性T细胞占CD4＋T细胞的比例;应用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测其外周血清中TGF-β1和COX-2的表达。对前列腺癌患者上述指标进行术前术后对比分析,另对CD4＋CD25high调节性T细胞与TGF-β1及COX-2的相关性进行分析;并探讨上述指标在前列腺癌患者局限组和非局限组间是否存在差异性。结果：流式细胞术检测显示,前列腺癌患者治疗前PBMC中CD4＋CD25high调节性T细胞占CD4＋T细胞的比例为（18.32±7.49）%,高于健康志愿者对照组（7.77±1.86）%（P〈0.05）。前列腺癌患者治疗后其比值为（17.34±5.87）%,较治疗前稍减低,但两者相比无显著差异（P〉0.05）。ELISA检测外周血清中TGF-β1和COX-2显示,前列腺癌组分别为（215.97±55.16）ng/ml和（6.88±5.14）ng/ml,对照组分别为（149.75±47.11）ng/ml和（5.65±2.69）ng/ml;前列腺癌患者外周血清中TGF-β1的表达水平高于健康志愿者对照组（P〈0.05）,COX-2的表达水平与对照组无显著差异（P〉0.05）。通过多重线性回归分析表明,前列腺癌患者PBMC中CD4＋CD25high调节性T细胞的表达与血清中TGF-β1和COX-2的表达无显著相关。前列腺癌局限组和非局限组外周血中CD4＋CD25high调节性T细胞、TGF-β1及COX-2的表达均无显著性差异（P〉0.05）。结论：前列腺癌患者PBMC中CD4＋CD25high调节性T细胞可能参与前列腺癌的发生,其增殖机制与血清中TGF-β1和COX-2的表达无关,可能与肿瘤本身及肿瘤局部微环境相关。     

肝癌患者外周血CD4~+CD25~+调节性T细胞的变化及其意义

目的 探讨应用流式细胞术检测肝癌患者外周血中CD4~+CD25~+调节性T细胞的变化及意义.方法 应用三色免疫荧光流式细胞仪测定37例肝癌患者及30例肝硬化患者外周血T细胞亚群CD4~+CD25~+/CD~+比值.采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测外周血中转化生长因子β1(TGF-B1)的表达水平.结果 肝癌患者外周血CD4~+CD25~+/CD4~+比值较肝硬化患者显著增高,两者比较差异有统计学意义(P<0.05);肝癌患者外周血中CD4~+CD25~+T细胞水平与肝癌原发肿瘤的大小、TGF-βl呈正相关(P<0.05).结论 肝癌患者外周血中CD4~+CD25~+调节性T细胞增多,对肝癌患者具有免疫抑制作用.     

不同分期前列腺癌患者外周血CD4~+ CD25~+ Foxp3~+调节性T细胞的变化及与胰岛素抵抗的相关性

目的 :观察不同分期前列腺癌患者外周血单个核细胞CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞的变化及与胰岛素抵抗的关系。方法:采用流式细胞术检测62例前列腺癌患者(患者组,临床TNM分期Ⅰ期5例、Ⅱ期16例、Ⅲ期21例、Ⅳ期20例)外周血单个核细胞(PBMC)中CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞数目,计算CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞占CD4+T淋巴细胞的百分率;并检测其空腹胰岛素及空腹血糖水平,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);采用ELISA法测定外周血胰岛素样生长因子1(IGF-1)水平,分析CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞与胰岛素抵抗的相关性,并与42例健康体检者进行对照。结果:与健康对照组相比,前列腺癌患者HOMAIR明显升高(6.68±1.66 vs 3.68±1.42),IGF-1水平明显下降[(96.39±21.21)ng/ml vs(164.56±30.58)ng/ml],PBMC CD4+CD25+Foxp3+Treg占CD4+T淋巴细胞的百分率[(13.88±0.96)%vs(5.33±0.65)%]及CD4+CD25+Foxp3+Treg绝对值[(3.55±0.29)×107vs(1.99±0.78)×107]明显升高(P0.05,P0.01)。患者PBMC CD4+CD25+Foxp3+Treg占CD4+T淋巴细胞的百分率及CD4+CD25+Foxp3+Treg绝对数﹑HOMA-IR均随TNM分期逐渐加重而增加,IGF-1逐渐下降;相关性分析表明:CD4+CD25+Foxp3+Treg/CD4+T及CD4+CD25+Foxp3+Treg绝对数均与HOMA-IR呈明显正相关(r分别为0.689、0.722,P0.01),与IGF-1呈明显负相关(r分别为-0.896、-0.747,P0.01)。结论:前列腺癌患者存在不同程度的胰岛素抵抗,且随着疾病程度的加重,外周血CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞数目和比例及胰岛素抵抗逐渐加重;CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞可能通过调节胰岛素抵抗参与其形成和发展。     

CD4+CD25+调节性T细胞、Foxp3 mRNA及可溶性白细胞介素2受体检测在肾移植中的意义

目的 观察肾移植患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞水平及其表面特异性标志物Foxp3和可溶性白细胞介素2受体（sIL-2R）的变化，探讨其在诊断移植肾急性排斥反应中的作用和价值。 方法 选取42例维持性血液透析接受同种异体肾移植治疗的患者及30例健康体检对照者。在患者移植前、移植后1、2、4、8周或发生排斥反应时，以流式细胞仪检测外周血中CD4+CD25+调节性T细胞水平；荧光定量PCR检测Foxp3 mRNA表达；双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISB）检测血浆中sIL-2R水平。 结果 (1)移植后第1、2、4、8周急性排斥反应组CD4+CD25+调节性T细胞、Foxp3 mRNA水平明显低于同期未发生排斥的肾功能稳定组，而sIL-2R水平却显著高于肾功能稳定组。(2)血液透析患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞[(9.22±3.53)%]、Foxp3 mRNA[（0.82±0.36）×10-3]及sIL-2R[（856.30±108.24） U/ml]水平与健康对照组[分别为(6.09±1.99)%、(0.50±0.28)×10-3、(247.35±11.24) U/ml]比较，差异均有统计学意义(P < 0.01)。(3)肾移植后随着肾功能的恢复，外周血CD4+CD25+调节性T细胞[(16.53±4.14)%]、Foxp3 mRNA[(4.97±1.94)×10-3]显著升高(P < 0.01)，而sIL-2R[（463.72±31.23）U/ml]水平明显降低(P < 0.01)。(4)当发生急性排斥反应时，CD4+CD25+调节性T细胞[(12.18±2.86)%]、Foxp3 mRNA[(3.15±1.22)×10-3]显著降低(P < 0.01)，而sIL-2R[(748.36±115.41) U/ml]水平明显升高(P < 0.01)，并且这些变化早于Scr的变化。(5)患者移植前后外周血CD4+CD25+调节性T细胞百分率与Foxp3 mRNA水平均呈正相关（分别为r ＝ 0.904、0.932，P < 0.01），但与sIL-2R水平无相关。 结论 外周血CD4+CD25+调节性T细胞、Foxp3 mRNA及sIL-2R水平的测定均可以作为肾移植患者移植后发生急性排斥反应的早期预测指标，并可判断预后。     

免疫磁珠两步法分离大鼠脾脏CD4+CD25+调节性T细胞

目的探索利用磁性细胞分离(MACS)系统高效、快速地分离大鼠脾脏CD4+CD25+调节性T细胞.方法采用免疫磁珠两步法分离大鼠脾脏内的CD4+CD25+调节性T细胞, 首先采用"鸡尾酒"抗体和抗IgG磁珠阴性分选CD4+ T细胞,再用抗CD25-PE抗体和抗PE磁珠阳性分选获得CD4+CD25+T 细胞.分离后的细胞经流式细胞仪检测分离纯度; 台盼蓝染色检测细胞存活率; 体外增殖实验检测其对CD4+CD25-T细胞的免疫抑制作用.结果阴性分选获得的CD4+T细胞纯度为(83.6±2.5)%(79%～87%), 阳性分选后获得的CD4+CD25+T细胞纯度为(90.2±1.8)%(86%～93%), 细胞存活率为(92.8±3.4)%(92%～95%), 体外增殖实验表明,CD4+CD25+T细胞能明显抑制CD4+CD25-T 细胞的增殖(P＜0.01). 结论采用MACS系统阴性加阳性分选可以高效、快速地获得理想纯度和有免疫抑制功能的大鼠CD4+CD25+调节性T细胞.     

胃癌患者CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞与TGF-β1检测的意义

目的:探讨胃癌患者外周血CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞(CD4+CD25+Foxp3+Tergs)以及血清TGF-β1水平的变化及意义。方法:检测并比较42例胃癌患者(胃癌组)与24例健康体检者(对照组)外周血CD4+CD25+Foxp3+Tergs与血清TGF-β1水平,分析两者水平与胃癌患者临床病理因素的关系。结果:胃癌组CD4+CD25+Foxp3+Tergs和TGF-β1水平均明显高于对照组(均P<0.05)。胃癌患者外周血CD4+CD25+Foxp3+Tergs水平与TNM分期、淋巴结转移有关(均P<0.05),而血清TGF-β1的表达水平与TNM分期、分化程度、淋巴结转移有关(均P<0.05);胃癌组患者外周血内CD4+CD25+Foxp3+Tergs的表达水平与血清内TGF-β1的表达水平呈明显正相关(r=0.801,P<0.05)。结论:胃癌患者外周血CD4+CD25+Foxp3+Tergs水平及血清TGF-β1水平升高,检测两者水平有助于患者病情与预后的判断。     

原发性肝癌患者体内的CD4+CD25+ T细胞变化及其意义

目的:探讨原发性肝细胞癌(HCC)患者体内CD4+CD25+T细胞变化的及其意义。 方法:实验分HCC组（n=20）与正常人对照组(n=10)，采用免疫荧光标记法，流式细胞仪分离出外周血CD4+CD25+T细胞，分析两组CD4+CD25+T细胞所占T细胞的比例。计算并比较癌组织与癌旁组织中CD4+CD25+T细胞所占T细胞的比例。结果:HCC组机体的CD4+CD25+T 细胞比例为(19.3±3.0) %，明显高于对照组(5.2±1.6) % (P<0.05)。癌组织中CD4+CD25+T 细胞比例为(6.5±2.9) %，癌旁组织中CD4+CD25+T 细胞比例为(5.8 ±2.1) %， (P>0.05)。结论:原发性肝细胞癌患者机体免疫功能降低的原因之一可能是外周血CD4+CD25+T 细胞数明显增加。     

转化生长因子-β1差异性诱导CD4+和CD8+T细胞表达转录因子FOXP3的研究

目的 研究CD4+T细胞和CD8+T细胞被转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导表达转录因子FOXP3的差异性.方法 给予CD4+T细胞和CD8+T细胞抗T细胞受体(TCR)刺激的同时,加入TGF-β1培养4d后,通过胞内细胞因子染色,分析二者被诱导表达FOXP3的情况.同时通过CFSE标记实验检测被TGF-β1诱导表达FOXP3的淋巴细胞的增殖情况;通过annexin V流式染色检测TGF-β1对于T淋巴细胞凋亡的影响.结果 相对于CD8+T淋巴细胞,TGF-β1主要诱导CD4+T淋巴细胞阳性表达FOXP3[外周血单个核细胞(PBMC):29.66±3.624比7.430±0.643;癌旁组织浸润淋巴细胞(NIL):31.74±2.612比8.637±1.146].被TGF-β1诱导表达FOXP3的淋巴细胞增殖活跃(94.39±1.179),受到活化刺激后依旧能够有效分泌干扰素-γ(IFN-γ)效应细胞因子(39.58±1.611).TGF-β1能够有效降低CD8+T淋巴细胞活化后的细胞凋亡率(25.39±2.158比9.320±0.3219).结论 与肝癌患者FOXP3表达阳性的淋巴细胞＞95％(97.15±0.3807,n=10)集中在CD4+T淋巴细胞的结果一致,TGF-β1优先选择性诱导CD4+T细胞表达FOXP3.与天然Treg(调节性T细胞)低增殖活性和低细胞因子分泌活性不同,被TGF β1阳性诱导表达FOXP3的T细胞依旧具有活跃的细胞增殖和分泌IFN γ效应细胞因子的功能.CD8+T淋巴细胞相对于CD4+T淋巴细胞,更易发生活化后细胞凋亡,而TGF-β1能够有效降低这种细胞凋亡率.     

反复自然流产患者外周血CD4~+CD25~+调节性T细胞的检测

目的:探讨CD4+CD25+调节性T细胞(Tr)在反复自然流产发病机制中的作用。方法:应用流式细胞术检测29例原因不明的反复自然流产妇女(URSA组)和20例正常妊娠妇女(正常对照组)外周血中CD4+CD25+Tr的比例。结果:URSA组外周血中CD4+CD25brightTr百分率[(1.98±0.96)%]显著低于正常对照组[(3.21±1.25)%,P<0.05],而2组间CD4+CD25+总百分率、CD4+CD25dim细胞百分率以及CD4+CD25bright/CD4+比值均无显著性差异(P均>0.05)。结论:URSA的发生可能与患者CD4+CD25brightTr比例下降有关,CD4+CD25brightTr在母胎免疫耐受中发挥重要作用。     

门静脉高压症脾亢患者外周血CD4+CD25+CD127low/-调节性T细胞含量与免疫功能研究

目的 研究门静脉高压症(PHT)脾亢患者外周血CD4+CD25+CD127low/-调节性T细胞(Treg)与CD3+、CD4+、CD8+T细胞的表达变化.探讨脾脏免疫功能改变及其可能的调节机制.方法 PHT脾亢患者20例(脾亢组),健康成人18例(对照组),采用流式细胞术检测外周血中CD4+CD25+CD127low/-Treg及CD3+、CD4+、CD8+T细胞的表达变化.结果 脾亢组外周血中CD4+CD25+CD127low/-Treg占CD4+T细胞的比例为(5.3±3.0)%,明显高于对照组的(2.5±0.9)%(P<0.01).脾亢组CD3+、CD4+、CD8+T细胞含量均低于对照组(P<0.05).CD4+CD25+CD127low/-Treg的含量与CD3+T细胞比例呈负相关(r=-0.630,P<0.01),与CD4+T细胞比例呈负相关(r=-0.561,P<0.05).结论 PHT脾功能亢进患者CD4+CD25+CD127low/-调节性T细胞表达量增多,可能对脾脏免疫功能的调节有重要作用.     

抗原特异性CD4+CD25+T细胞对同种异体胰岛移植影响及作用机制研究

目的:探讨抗原特异性CD4+CD25+Treg细胞免疫对同种异体胰岛急性移植排斥反应的影响和机制。方法:用MACS分选供体抗原特异性CD4+CD25+Treg细胞免疫糖尿病BALB/cByJ受体小鼠，以ICR小鼠胰岛为供体行同种异体胰岛移植。观察移植后小鼠的存活时间、移植前后外周血CD4+和CD8+T细胞亚群的变化和移植物中Th1/Th2细胞因子mRNA表达水平的变化。结果:抗原特异性Treg细胞联合胰岛移植组(C组)胰岛移植物平均生存期为(34.57±17.15)d，显著长于单纯胰岛移植组(B组)的(10.6±1.82) d (P<0.01)；移植后第3天，C组外周血CD4+/CD8+的值显著低于B组(P<0.01)；C组移植物中IL-10,TGF-β mRNA表达比B组显著增强。B组移植物中IL-1β，IL-2及IFN-γ mRNA表达明显强于C组。结论:抗原特异性CD4+CD25+ Treg细胞可通过调节Th2/Th1之间的反应平衡而延长同种异体胰岛移植物的存活时间。     

胰腺癌患者外周血CD4+CD25high T细胞比率变化特点及其临床意义

目的：探讨胰腺癌患者外周血中高表达CD25的CD4+调节性T细胞（CD4+CD25high T）的表达比率及其临床意义。 方法：选取50例确诊胰腺癌患者作为胰腺癌组、50例急性胰腺炎患者作为AP组、50例健康体检对象作为对照组,分别采用流式细胞技术检测三组研究对象的外周血的CD4+CD25high T细胞水平,采用ELISA检测胰腺癌患者外周血γ-干扰素（INF-γ）、白细胞介素4（IL-4）、白细胞介素10（IL-10）的水平。 结果：胰腺癌组患者的CD4+CD25high T细胞占CD4+T细胞的比率显著的高于AP组、对照组（P<0.05）,AP组的CD4+CD25high T细胞占CD4+T细胞的比率显著的高于对照组（P<0.05）; I~II期患者CD4+CD25high T细胞占CD4+T细胞的比率显著的高于III、IV期（P<0.05）;I~II期患者的INF-γ、IL-4、IL-10水平显著的高于III、IV期患者（P<0.05）;胰腺癌患者的CD4+CD25high T细胞水平与INF-γ、IL-4、IL-10水平均呈现显著的正相关（r=0.372、r=0.401、r=0.226,P<0.05）。 结论：胰腺癌患者的CD4+CD25high T细胞比率显著的提高,并且与患者的临床分期、免疫功能变化具有一定的关系。     

甲状腺癌患者手术前后CD8+CD28-调节性T细胞的变化与临床意义

【摘要】〓目的〓探讨甲状腺癌患者手术前后CD8+CD28-调节性T细胞的变化与临床意义。方法〓收集接受手术治疗的双侧甲状腺癌患者30例作为观察组(A),分别收集良性甲状腺瘤患者(B)及健康体检者(C)各30例作为对照组;采用流式细胞术检测三组外周血CD8+CD28-调节T细胞百分含量及其胞内细胞因子转化生长因子β1(TGF-β1)及白介素10(IL-10)的平均荧光强度;比较术后4周甲状腺癌患者上述指标的变化。结果〓与C组比较,A及B组CD8+CD28- T细胞及TGF-β1均升高,但B与C组无统计学差异,而A组两者均显著高于C组(P<0.05);与C组比较,A及B组IL-10均显著升高,且三组间两两比较均有统计学差异(P<0.05);手术后4周复查显示A组患者CD8+CD28-T细胞、TGF-β1及IL-10三者与手术前比较均有显著性差异(P<0.05),其中以CD8+CD28-T细胞的回落最为明显,TGF-β1次之。结论〓CD8+CD28-T细胞、TGF-β1及IL-10表达增加是甲状腺癌患者的一个重要免疫学特征;TGF-β1是相对特异的一个细胞因子,在评价术后疗效较IL-10敏感。     

CD4+CD25+调节性T细胞在维持小鼠肝脏移植自发性免疫耐受状态中的作用

目的 探讨CD4+CD25+调节性T细胞在维持小鼠肝脏移植免疫耐受状态中的作用.方法 进行小鼠原位肝脏移植,诱导出移植免疫耐受后,向受体注射抗CD25抗体(PC61)以去除CD4+CD25+T细胞,检测受体内CD4+CD25+T细胞数量及叉状头/翅膀状螺旋转录因子(Foxp3)的表达以确定CD4+CD25+T细胞完全被清除,同时观察受体生存时间.结果 与同种同系小鼠肝脏移植结果 相似,同种异系肝脏移植小鼠的生存时间亦均超过70 d.移植免疫耐受诱导后,PC61不同注射方案均能完全去除受体小鼠肝脏、脾脏及血液中的CD4+CD25+T细胞,且移植肝脏中Foxp3 mRNA的表达也明显降低,表明完全去除了CD4+CD25+调节性T细胞,但肝脏移植动物生存时间并未受到影响.结论 CD4+CD25+调节性T细胞对于小鼠肝脏移植自发性免疫耐受的维持并非必需.     

树突状细胞和CD4+CD25+调节性T细胞在免疫耐受中的作用及关系

诱导免疫耐受具有高效、低毒、经济等优点,在器官移植中有着极其重要的意义.在建立免疫耐受中,树突状细胞(DC)起到克隆清除、克隆无能、表达T细胞抑制因子、选择性激活辅助T细胞和诱导调节性T细胞尤其是CD4+CD25+调节性T细胞的产生等作用.而CD4+CD25+调节性T细胞主要以DC为作用靶点,影响其分化成熟,抑制DC向...     

系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞 CD40及CD40配体分子表达的研究

目的探讨CD40及CD40配体(CD40L)分子在活跃期SLE患者外周血单个核细胞(PBMC)上的表达及在SLE发病中的可能作用机制.方法采用流式细胞仪检测13例初发活跃期及13例复发活跃期SLE患者PBMC表面CD40及CD40L分子的表达.结果初发及复发活跃期SLE患者PBMC表达CD40分子(25.94±10.10)%及(27.34±12.94)%,均较正常对照组(13.99±5.26)%明显升高(P＜0.001);初发活跃期SLE患者PBMC表达CD40L分子(1.74±1.66)%较正常对照组(0.91±0.39)%亦明显升高(P＜0.05).初发与复发活跃期SLE患者之间比较PBMC表达CD40及CD40L分子无显著性差异.结论活跃期SLE患者外周血PBMC存在CD40及CD40L分子的异常表达,提示CD40及CD40L分子在SLF患者T、B细胞之间的信号传导及SLE发病机制中可能起着重要的作用.     

CD4+CD25+T细胞联合CD154单抗抑制大鼠肝移植急性排斥反应的研究

目的探讨CD4 CD25 T细胞联合应用CD154单抗在抑制大鼠肝移植急性排斥反应中的作用。方法分离Lewis大鼠脾脏CD4 _CD25 T细胞后与DA大鼠脾细胞单向混合淋巴细胞反应行体外激活。用"二袖套法"行DA到Lewis的原位肝移植48例。A组为对照组;B、C组单独术前回输体外激活的CD4 CD25 T细胞或术后腹腔注射抗CD154单抗;D组联合应用CD4 CD25 T细胞和CD154单抗。每组大鼠12对。术后7 d各组处死6只受体,检测移植肝内T细胞亚群和细胞因子水平。余大鼠观察生存情况,死亡大鼠观察移植肝病理变化。结果D组受体生存期(52.00±10.64)d明显长于B、C组(P<0.01);移植肝内CD4 CD25 T细胞比例(16.43±4.28)%明显高于B、C组(P<0.05、P<0.01),而淋巴细胞浸润数量[(3.47±1.21)%×106]和(CD8 T细胞百分比(14.19±3.02)%明显低于B、C组(P<0.05、P<0.01);移植肝内白细胞介素- 2(IL-2)水平(6.44±1.83)ng/L低于B、C组(P<0.05),IL-10(43.72±7.55)ng/L和转化生长因子-β1(TGF-β1)(270.06±46.91)ng/L明显高于B、C组(P<0.05、P<0.01)。结论联合应用CD154单抗能明显增强CD4 CD25 调节性T细胞对大鼠肝移植急性排斥反应的抑制作用。     

原发性肝癌患者微环境中CD8+CD28-调节性T细胞表达变化及意义

目的：探讨原发性肝癌患者微环境中CD8+CD28-调节性T细胞(CD8+CD28-Treg)的表达变化及其意义。 方法：采用流式细胞检测技术对60例原发性肝癌患者及其50例健康患者的外周血中CD8+CD28-Treg进行检测,对于顺利手术切除的46例患者的肝癌组织及癌旁组织进行CD8+CD28-Treg的检测,再选取30例肝癌石蜡标本,检测其肝癌组织和癌旁组织中的CD8+CD28-Treg的表达。 结果：通过对肝癌组与健康对照组检测结果比较发现：CD8+CD28-Treg在原发性肝癌患者的外周血中测定值明显高于健康对照组[（15.55±3.14）% vs.（10.12±3.16）%],肝癌组织的CD8+CD28-Treg表达较癌周组织中的CD8+CD28-Treg表达增高[（19.34±3.12）% vs.（13.59±2.47）%],石蜡标本中肝癌组织CD8+CD28-Treg表达高于癌旁组织中CD8+CD28-Treg的表达[（13.58±2.46）% vs. （9.47±3.04）%],差异均有统计学意义（均P<0.05）。 结论：CD8+CD28-调节性T细胞在原发性肝癌患者的微环境中表达明显增加,其可能在机体对原发性肝癌的免疫应答中有重要的意义。     

胃癌患者围手术期CD28及调节性T细胞的动态变化

目的:探讨胃癌患者手术前后外周血CD4+CD25+T细胞和CD8+CD28+的表达变化及其意义,探讨其在胃癌的发病机制中的作用.方法:用流式细胞仪检测89例胃癌患者手术前后外周血淋巴细胞表面的调节性T细胞和CD28的表达,并与健康对照组及胃良性肿瘤组作比较.结果:①术前胃癌组外周血中CD8+CD28+水平明显低于健康对照组和胃良性肿瘤组,CD4+CD25+水平显著增高;②胃癌组CD4+CD25+及CD8+CD28+表达水平随着临床分期的进展而有显著变化;③根治性及姑息性切除肿瘤后,CD8+CD28+表达显著升高;CD4+CD25+的表达明显降低.结论:胃癌患者外周血中CD8+CD28+表达水平低下,而具有免疫抑制活性的CD4+CD25+调节性T细胞的数量较健康人明显增高,提示胃癌患者机体免疫功能低下,施行手术切除肿瘤有助于改善患者的细胞免疫功能.