大肠癌组织中survivin基因表达谱的改变

目的 研究大肠癌组织中凋亡抑制因子survivin表达水平的变化,探讨survivin在大肠癌发生中的作用.方法 收集60例临床大肠癌和20例正常大肠组织标本,用半定量RT-PCR和westem blot方法检测大肠癌及正常大肠组织中survivin的表达浓度,比较表达差异.结果 大肠癌组织中survivin基因mRNA表达总阳性率为58.3%(35/60),显著高于正常大肠组织0%(0/25),P<0.01;Westem blot验证结果表明大肠癌标本组织中survivin蛋白检测表达为阳性,其中正常大肠组织5例中仅有1例survivin微弱表达,进一步证实了survivin蛋白在大肠癌中表达增高.结论 Survivin的过表达同大肠癌的发生相关.     

探讨survivin蛋白在宫颈癌组织中化疗前后的表达、细胞凋亡及临床意义

目的:探讨survivin蛋白在宫颈癌组织中化疗前后的表达、细胞凋亡及临床意义。方法:收集无锡市第四医院2005年1月至2007年3月行动脉灌注化疗(A组)静脉化疗(B组)+手术治疗且临床分期为Ⅰb～Ⅱa期宫颈癌40例患者的完整病历资料。检测治疗前后各组survivin蛋白表达率和表达量。结果:(1)宫颈癌的总有效率A、B两组分别为70.00%和55.00%,A组与B组对宫颈癌的总有效率差异有统计学意义(P<0.05);(2)A、B两组治疗后宫颈癌组织survivin蛋白的阳性表达率及表达量均明显下降,差异有统计学意义(A组P<0.01,B组P<0.05);A组与B组的survivin阳性表达量下降量差异有统计学意义(P<0.05)。(3)治疗后宫颈癌组织细胞凋亡指数(AI)增高,差异有统计学意义(A组P<0.01,B组P<0.05);A组与B组的AI增高值有统计学差异(P<0.05)。结论:A、B两种治疗法均可降低宫颈癌survivin蛋白的表达率和表达量、提高AI,但A组治疗效果明显优于B组。     

宫颈癌组织中TSLC1基因表达的意义

0引言TSLC1(tumor suppressor in lung cancer-1)基因的沉默和宫颈癌的发生发展有关[1].我们采用实时荧光RT-PCR方法检测了不同宫颈组织中TSLC1的表达.1材料和方法1.1材料2004-10/2005-03宫颈组织标本48例,宫颈上皮内瘤样变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)17例(CINⅠ8例,CINⅡ-Ⅲ9例),宫颈癌31例,0期11例,Ⅱ期15例,Ⅲ期5例.鳞状细胞癌18例(中分化15例,低分化3例,淋巴结转移1例),腺癌2例(均为中分化腺癌,淋巴结转移1例).腺鳞癌1例,正常宫颈组织15例为对照.1.2方法mRNA的提取用Trizol(gibco公司),按试剂盒说明书进行操作…     

儿童急性白血病survivin基因表达及临床意义

目的探讨儿童急性白血病（AL）survivin基因的表达及其临床意义。方法用逆转录多聚酶链式反应技术（RT—PCR），对42例AL患儿和13例完全缓解AL（AL—CR）患儿及15例非恶性疾病患儿骨髓进行survivin基因表达的检测。结果Survivin基因的表达在AL组明显高于对照组和完全缓解组（P〈0．01），复发组高于初发组（P〈0.01）；survivin基因在AL的高危组和标危组中的表达有显著性差异（P〈0．01）；化疗后达完全缓解的患者survivin表达水平与治疗前及治疗后均明显低于未能缓解者（P均〈0．05）。结论儿童AL的发生发展可能与survivin基因的过度表达密切相关，可作为化疗疗效的观察指标；survivin高表达者易复发，可作为估计预后的指标之一。     

宫颈癌组织中PTEN基因表达及其临床意义

目的研究抑癌基因PTEN在宫颈癌组织中的表达，探讨PTEN与宫颈癌临床及病理特征的关系。方法应用免疫组织化学方法（SP法）检测PTEN基因在46例宫颈癌组织中的表达。结果46例宫颈癌组织中，PTEN阳性表达率为36．9％，其中在高、中、低分化宫颈癌中的阳性表达率分别为55．6％、41．7％和25．0％，PTEN阳性表达率与宫颈癌病理学类型和患者年龄无相关性（P〉0．05）；临床分期I期和Ⅱ期及以上者阳性表达率分别为58．8％和24．1％（P〈0．05）；有、无淋巴结转移者的阳性表达率分别为23．1％和42．4％（P〈0．01）；在直径〈4cm或≥4cm的宫颈癌组织中的阳性表达率分别为23．1％和55．0％（P〈0．05）；结论PTEN异常表达可能与宫颈癌发生、发展及预后有关。     

宫颈癌及癌前病变组织中COX-2mRNA的表达及临床意义

目的为寻找宫颈癌早期的基因诊断指标及基因治疗方法提供依据。方法应用半定量RT—PCR方法检测宫颈癌及宫颈癌前病变组织中的COX-2mRNA的表达水平。结果COX-2mRNA在宫颈癌中的表达率和相对含量高于宫颈CINⅢ及原位癌和慢性宫颈炎组织。其在宫颈CINⅢ及原位癌和慢性宫颈炎组织中的表达率及相对含量比较均无明显差异（P〉0．05）。结论宫颈癌组织、宫颈CINⅢ及原位癌组织中存在COX-2的表达,COX-2mRNA的表达与癌早期的形成、分期、分化无明显关系（P〉0．05）,与淋巴结转移有显著性差异（P〈0．05）。     

RNA干扰survivin基因对宫颈癌细胞中survivin蛋白表达及caspase-3酶活性的影响

目的观察RNA干扰survivin基因对宫颈癌细胞中survivin蛋白表达及caspase－3酶活性的影响。方法针对survivinmRNA序列设计合成3对编码小干扰RNA（siRNA）的DNA模板,构建shRNA重组质粒,转染Hela细胞,筛选获得转染效率最高的阳性克隆,阴性对照为阳性克隆随机打乱序列。Westernblot方法检测survivin蛋白表达,分光光度法检测caspase－3酶活性。结果干扰48h时,siRNA－168载体干预组干预效果最好,siRNA阳性质粒干扰组（实验组）survivin蛋白表达量为阴性对照组中survivin蛋白表达量的13％,是空白组survivin蛋白表达量的16％。干扰后caspase－3活性表达升高,实验组与阴性对照组、实验组与空白组相比差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论siRNA可有效抑制Hela细胞survivin蛋白表达。升高caspase－3酶活性。     

凋亡抑制基因survivin在乳腺癌中的表达及其意义

目的：探讨凋亡抑制基因survivin在乳腺癌中的表达及其意义。方法：收集47例经病理证实的乳腺癌组织和26例正常乳腺组织,采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测了47例乳腺癌组织和26例正常乳腺组织中survivinmRNA的表达。结果：Survivin基因在正常乳腺组织中不表达,47例乳腺癌组织中,29例survivin表达阳性,占61.7%。Survivin基因表达随乳腺癌的病理分级和临床分期的升高而升高,在不同病理分级乳腺癌中survivin基因表达阳性率分别为：Ⅰ级36.4%,Ⅱ级65.0%,Ⅲ级75.0%;Ⅰ级与Ⅱ级、Ⅲ级之间存在显著性差异（P〈0.05）,在不同临床分期中survivin基因表达阳性率分别为：非浸润型33.3%,浸润型71.4%,两者之间存在显著性差异（P〈0.05）。结论：Survivin基因的异常表达引起细胞凋亡抑制,对乳腺癌的发生和发展起重要作用,异常表达提示乳腺癌预后不良。     

宫颈癌组织中TSLC1基因表达的意义

0引言 TSLC1（tumor suppressor in lung cancer-1）基因的沉默和宫颈癌的发生发展有关．我们采用实时荧光RT—PCR方法检测了不同宫颈组织中TSLC1的表达．     

宫颈癌中Survivin基因表达及临床意义

应用免疫组织化学SP法检测Survivin蛋白在43例宫颈癌组织标本、20例宫颈原位癌、20例正常宫颈组织标本中的表达情况。结果Survivin蛋白阳性表达率宫颈癌组织显著高于正常宫颈组织(P<0.01),高于宫颈原位癌组织(P<0.05);有淋巴结转移者显著高于无淋巴转移者(P<0.05);病理分期为Ⅰ期者显著低于Ⅱ期者(P<0.05);随临床分期增加及淋巴结转移Survivin蛋白阳性表达率逐渐升高。提示Survivin在宫颈癌中的高表达与淋巴结转移及临床病理分期密切相关;Survivin可能是影响宫颈癌预后的重要指标。     

survivin基因与子宫颈癌发生及预后的关系

目的 探讨凋亡抑制基因survivin与子宫颈癌发生及预后的关系.研究survivin与子宫颈癌患者临床病理特点之间的关系.方法 选取本院1993～2002年间收治的83例子宫颈鳞癌及1994～2004年间随机抽取的子宫颈CIN-Ⅰ25例、CIN-Ⅱ32例、CIN-Ⅲ48例,正常子宫颈30例作为对照.用免疫组化的方法对其survivin基因表达进行检测.比较survivin在正常子宫颈、宫颈CIN及子宫颈癌中表达的差异,分析survivin与子宫颈癌患者临床病理特点的关系;用Cox回归分析方法判定子宫颈癌的预后影响因素,分析survivin与子宫颈癌患者预后的关系.结果 正常子宫颈survivin基因表达均为阴性.survivin基因表达随子宫颈病变的发展逐渐升高,差异有统计学意义(P＜0.05).与子宫颈癌患者的淋巴转移显著相关(P＜0.05).与子宫颈癌患者的年龄、分期、病理分级无显著关系.结论 survivin基因在从宫颈癌前病变向子宫颈癌演变的过程中有重要作用;与子宫颈癌患者的淋巴转移显著相关;而子宫颈癌的分期及survivin基因表达为独立预后影响因素之一.     

survivin在膀胱癌中的表达及其临床意义

目的：探讨检测尿液中survivin对筛查膀胱癌的作用及组织中survivin表达与临床分期及病理分级的关系。方法：对10例膀胱癌患者（试验一组）晨尿和41例膀胱癌患者（试验二组）术后病理组织，分别以10例非肿瘤疾病患者（对照一组）和7例膀胱良性病变患者（对照二组）作为对照，ELISA法检测尿液中survivin，免疫组化法检测病理组织中survivin，比较试验一组和对照一组尿survivin浓度，分析两试验组尿survivin和膀胱癌组织中survivin相关性。结果：试验一组患者尿survivin浓度与对照一组的差异有显著性意义（P〈0．01）；两试验组患者尿survivin浓度和病理组织survivin免疫标记强度呈正相关（r=0．97，P〈0．01）；试验二组膀胱癌病理标本survivin标记强度与对照二组差异有显著性意义（P〈0．01）；不同分期、不同分级和不同复发时间的膀胱癌患者癌组织survivin标记强度不同（P〈0．05）；膀胱肿瘤临床床特征与组织survivin表达分析提示，肿瘤分期、分级和癌组织survivin表达量是预测患者复发的指标（P〈0．05）。结论：①检测尿survivin很可能是一种敏感性高、特异性强、无创、简便的膀胱癌群体筛查方法和术后随访检查方法。②组织中survivin表达量与膀胱癌分期、分级和复发相关，是预测膀胱癌复发的良好指标。     

P16INK4A 和生存素在宫颈鳞状细胞瘤样变和宫颈鳞癌中表达的临床意义

[目的]探讨检测P16INK4A和生存素预测宫颈上皮内瘤样变（CIN）和宫颈鳞癌（SCC）可行性。[方法]免疫组织化学方法检测P16INK4A和生存素在129例CIN与72例SCC的表达。[结果]在CIN1、CIN2、CIN3与SCC,P16INK4A表达率分别为25.0%、42.9%、85.8%与97.2%;P16INK4A表达和CIN病变分级呈正相关;生存素表达率分别为56.7%、33.3%、67.5%与97.2%,在CIN3和SCC表达中差异有显著性意义（P〈0.05）。[结论]检测P16INK4A和生存素有助于诊断CIN病变分期和SCC。     

宫颈癌前病变和宫颈癌组织中凋亡相关基因survivin的表达及其与人乳头状瘤病毒感染的关系

目的探讨凋亡相关基因survivin在宫颈癌前病变和宫颈癌组织中的表达及其与人乳头状瘤病毒（HPV）感染的相关性.方法选取76例宫颈癌前病变或宫颈癌患者,另取10例正常宫颈组织作为对照.应用免疫组织化学SP法检测各组宫颈组织中凋亡相关基因survivin的表达;设计高危型HPV（HPV16,18,31,33,58等）通用引物,以touch-down PCR法检测各组宫颈组织中高危型HPV的感染率.结果（1）从正常宫颈→癌前病变→宫颈癌,survivin表达逐渐增强（P＜0.05）;（2）survivin表达与宫颈癌组织学分级有关（P＜0.05）,而与年龄、临床分期及组织学分型无关（P＞0.05）;（3）从正常宫颈→癌前病变→宫颈癌,高危型HPV阳性率逐渐升高（P＜0.05）;（4）高危型HPV感染率在不同年龄、临床分期、组织学分级及组织学分型中,均无统计学差异（P＞0.05）;（5）survivin与高危型HPV在宫颈癌组织中的表达呈正相关（P＜0.05）.结论survivin表达及高危型HPV感染可能与宫颈癌的发生、发展密切相关,两者在宫颈癌的发病机制中可能起着协同作用.     

survivin短发夹状RNA真核表达载体的构建及其对宫颈癌细胞survivin表达的影响

目的:构建survivin基因短发夹状RNA(shRNA)真核表达载体,并观察其对宫颈癌细胞survivin 表达的抑制作用.方法:设计、合成2对survivin特异性微小片段RNA引物(s1、s2),退火连接后利用DNA重组技术,将其分别克隆入真核表达载体pSilencer 2.1-U6 neo,酶切、鉴定测序后,经脂质体转染宫颈癌HeLa细胞,G418筛选阳性克隆,半定量RT-PCR检测survivin mRNA表达,Western blot检测survivin蛋白表达.结果:成功构建了survivin shRNA真核表达载体pSilencer2.1-s1和pSilencer2.1-s2,G418筛选24 d后出现阳性克隆,转染pSilencer2.1-s1和pSilencer2.1-s2的HeLa细胞中,survivin表达呈现不同程度下调,pSilencer2.1-s2的干涉效果较好.结论:成功构建并筛选出干涉效果较好的survivin shRNA真核表达载体,为进一步研究其对宫颈癌细胞生物学行为的影响奠定了实验基础.     

Survivin反义寡核苷酸对人卵巢癌细胞株中survivin和SMAC/DIABLO基因表达的影响

目的 观察survivin反义寡核苷酸(ASODN)对人卵巢癌细胞株SKOV3中survivin、Smac/DIABLO表达的影响,探讨survivin、Smac/DIABLO在ASODN诱导卵巢癌细胞凋亡和细胞周期改变中的作用和分子机制.方法 用脂质体(LipofectamineTM 2000)介导survivin ASODN转染人卵巢癌细胞株SKOV3,用MTT比色法检测细胞生长活性,流式细胞学技术检测细胞凋亡指数、细胞周期分布及survivin、Smac蛋白表达改变,逆转录酶链反应检测survivin、Smac/DIABLO基因表达改变.结果 同对照组比较,不同浓度ASODN作用后细胞生长明显减慢,转染后48 h IC50在600 nmol/1左右.用600 nmol/LASODN转染48h后,细胞凋亡指数(AI)明显增加,(t=6.3671,P＜0.05);更多的细胞停留在G0/G1期(t=10.3832,P＜0.01).Survivin mRNA和蛋白表达明显下调(t=3.5031,P＜0.05,t=7.8146,P＜0.01),SmacmRNA和蛋白表达上调(t=2.8011,P＜0.05,t=11.3917,P＜0.01).结论 ASODN诱导细胞凋亡,使更多的细胞停留在G0/G1期,减少进入有丝分裂细胞数的作用,是通过下调survivin基因,上调Smac基因表达来共同完成的,survivin、Smac/DIABLO基因在调节SKOV3细胞周期、凋亡的功能上密切相关,二者的相互作用是卵巢癌发生、发展的重要分子机制之一.     

P16蛋白在宫颈癌和宫颈上皮内瘤变中的表达及临床意义

目的 研究P16蛋白在宫颈癌、癌前病变和宫颈炎中的表达,以寻求预测宫颈癌及宫颈癌前病变早期诊断的生物学标记.方法 应用免疫组化技术检测23例宫颈癌、63例宫颈上皮内瘤变(CIN)和20例宫颈炎P16蛋白的表达,并进行分析比较.结果 (1)P16蛋白在宫颈癌与CIN Ⅰ级、CINⅢ级与CIN Ⅰ级中的表达差异具有统计学意义(P<0.05);在宫颈癌与宫颈炎、CIN与宫颈炎中的表达差异也具有统计学意义(P<0.05);(2)随着宫颈病变程度加重,P16蛋白的表达强度和阳性表达率不断升高(P<0.001).结论 P16蛋白的表达与宫颈癌及CIN病变程度及其进展有关,P16蛋白有可能作为宫颈癌及其癌前病变早期诊断的生物学标记.     

宫颈癌组织中增殖细胞核抗原表达及意义

目的:探讨宫颈癌组织中增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)表达的意义。方法:应用免疫组织化学方法检测PCNA在64例宫颈癌组织,17例宫颈上皮内瘤变(Cervical intraepithelial neoplasia,CIN)及14例正常宫颈组织中的表达,分析其与临床病理特征的相关性。结果:PCNA蛋白在宫颈癌中的表达显著高于CIN及正常宫颈上皮(P<0.05);且与宫颈癌的病理分级有关。结论:PCNA在宫颈癌中组织表达异常增高,与癌细胞增殖关系密切。     

bFGF在宫颈癌中表达的临床意义

目的探讨碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor,bFGF）在宫颈癌中的表达及与宫颈癌的关系。方法采用免疫组化SABC法检测bFGF在宫颈癌、宫颈上皮内瘤变（CIN）及正常宫颈组织中的表达。结果 bFGF在宫颈癌中的表达明显高于CIN及正常宫颈组织（P〈0.05）。bFGF的表达与临床分期、组织学分级、淋巴结转移及宫旁浸润有关。结论 bFGF可作为判断宫颈癌生物学行为的客观指标。