糖尿病肾病大鼠肾组织周期素D1与周期素依赖性激酶4的表达及意义

目的探讨周期素D1(CyclinD1)与周期素依赖性激酶4(CDK4)在糖尿病肾病发生、进展中的作用。方法通过注射链尿佐菌素建立糖尿病肾病大鼠模型,采用免疫组织化学法检测CyclinD1、CDK4的表达。结果糖尿病肾病大鼠肾组织表现为系膜细胞等中、重度增生,CyclinD1、CDK4表达水平明显上调,二者呈正相关。结论CyclinD1、CDK4参与了糖尿病肾病中肾固有细胞的增殖,是糖尿病肾病发生和进展的关键机制。     

Rb/p16路径在非小细胞肺癌中的表达意义

目的:探讨Rb和p16基因在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其与临床病理因素的关系.方法:采用免疫组化SP法检测80例NSCLC组织中Rb和p16的表达.结果:在80例NSCLC组织中,分别有56例和47例显示Rb和p16表达缺失.两者之间有一定相关(P＜0.05).p16在鳞状细胞癌比腺癌中有较高的表达(P＜0.05),而Rb蛋白的表达异常与肿瘤分期有关(P＜0.05).结论:Rb/p16路径的中断在肺癌的发生发展中是常见事件.     

CyclinD1在大鼠肝细胞癌变过程中的异常表达及意义

目的 探讨肝细胞癌变过程中cyclin Dl的异常表达及其意义。方法 用0．05％的2-AAF诱导Wistar大鼠建立肝癌动物模型，应用免疫组化和原位杂交法检测大鼠肝脏在癌变过程中cyclin D1的蛋白和mRNA表达。结果 正常组8只中cyclin D1蛋白和mRNA表达均正常，肝硬化组16只中有12只cyclin D1蛋白和mRNA过表达，肝癌组ll例中有4只cyclin D1蛋白和mRNA过表达。结论 在3组中cydinD1蛋白和mRNA表达一致，无显差异。肝硬化组和肝癌组的cyclinD1异常表达均高于正常组，而且肝硬化组的cydinD1异常表达高于肝癌组。     

鼻咽癌细胞中外源性p16表达对CDK4,Cyclin D1及pRb的影响

目的：分析外源性ｐ１６表达对ＣＤＫ４,Ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１及ｐＲｂ的影响,探讨其抑制细胞生长的机制。方法：绘制生长曲线,比较细胞倍增时间,分析ＨＮＥ１,＃４－２及＃３－２克隆中细胞增殖状况;利用流式细胞仪分析上述细胞中细胞周期分布的改变;结合Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｂｌｏｔ方法,分析外源性ｐ１６表达对ＣＤＫ４,Ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１及ｐＲｂ的影响。结果：生长曲线示,ＨＮＥ－１倍增时间为２３．４ｈ,＃３－２和＃４     

CyclinD1、CDK4、P16在骨肉瘤中的表达及临床意义

目的探讨CyclinD1、CDK4和P16在骨肿瘤中的表达及临床意义。方法应用免疫组化和原位杂交方法检测105例骨肿瘤组织中的CyclinD1、CDK4和P16的表达,并对其中85例骨肉瘤主要临床资料、病理分级及临床相关参数进行比较,用χ2检验进行统计学处理。结果骨肉瘤中CyclinD1、CDK4蛋白及mRNA阳性表达明均显高于骨软骨瘤(P<0.01);骨肉瘤临床分期中Ⅱb期、Ⅲ期均高于Ⅰ期、Ⅱa期(P<0.01);随着病理分级恶性程度增高而显著增加(P<0.01);且在软组织浸润和转移组中明显高于非浸润和非转移组(P<0.01)。P16蛋白及mRNA阳性表达骨软骨瘤明显高于骨肉瘤(P<0.01);骨肉瘤的临床分期中Ⅱb期、Ⅲ期均低于Ⅰ期、Ⅱa期(P<0.01);随着病理分级恶性程度增高而显著降低(P<0.01);软组织浸润和转移明显低于非浸润和非转移组(P<0.01)。结论 CyclinD1、CDK4、P16的蛋白及mRNA在骨肉瘤中不同程度异常表达与肿瘤的临床分期、病理分级和浸润、转移有一定关系。提示CyclinD1、CDK4和P16蛋白及其mRNA高表达在骨肉瘤的发生、发展和浸润转移过程中发挥重要作用。     

胃黏膜癌变过程中细胞周期调控基因Rb、Cyclin D1 及CDK4的表达及其意义

目的研究胃黏膜癌变过程中细胞周期调控基因Rb、Cyclin D1及CDK4的表达及其意义.方法采用免疫组化方法对50例胃癌,18例癌旁肠化生,7例癌旁轻中度不典型增生及9例重度不典型增生组织中细胞周期调控基因Rb、Cyclin D1 及CDK4的表达情况进行检测和比较.结果 Rb基因的过度表达在不典型增生及胃癌中检测到,在胃癌组织中的表达强度明显大于重度不典型增生病变(P<0.05),Cyclin D1 及CDK4的表达仅发现在胃癌组织中,胃癌组织中Cyclin D1表达阳性的13例病例中有5例同时表达Rb,2例同时表达CDK4;Rb阳性的17例胃癌组织中有3例同时表达CDK4.结论 Rb,cyclin D1和CDK4的过度表达可能参与胃癌的发生,Rb的过度表达出现在胃黏膜癌变过程的较早期阶段,Cyclin D1和CDK4的过度表达属于胃癌变过程中的较晚期的基因事件.     

食管鳞癌组织中p16、cyclinD1、CDK4的表达

目的：探讨p16、cyclinD1、CDK4蛋白在食管鳞癌发生中的意义及其相互间的作用。方法：采用LSAB免疫组化染色法,对43例食管癌手术标本的p16、cyclinD1、CDK4蛋白进行标记。结果：在鳞癌组织中,3种抗体的阳性物质存在于细胞核中和／或胞浆中,且从正常鳞状上皮→癌旁不典型增生→鳞癌组织,p16的阳性率逐渐下降,而p16、cyclinD1、CDK4的阳性率却逐渐上升。正常皮皮与癌组织之间的阳性率差异均有显著性（P＜0．05）;随着癌分化程度下降,p16阳性率呈下降趋势,Ⅲ级与Ⅰ级鳞癌之间阳性率差异有显著性（P＜0．05）,但未检出cyclinD1、CDK4与癌分化程度的关系。结论：p16、cyclinD1、CDK4蛋白表达的变化是食管癌发生中的早期事件,三者构成的调节通路障碍可能参与了癌的发生。     

外源性p16基因对人原发性肝癌细胞生物学行为的影响及其机制

目的:探讨导入外源性p16cDNA真核表达载体对人原发性肝癌细胞系SMMC- 772 1生物学行为的影响及其分子机制。方法:构建外源性p16基因真核表达载体并转染SMMC- 772 1细胞,经G4 18抗性筛选和扩增,得到稳定的表达株,并经RT -PCR及免疫细胞化学鉴定。通过生长曲线,流式细胞术,免疫细胞化学及Western -Blot等实验方法,对转基因后肿瘤细胞生物学行为及细胞周期调控因子CDK4 ,CyclinD1及pRb进行观察。结果:转染外源性p16基因的SMMC- 772 1细胞有外源性p16基因的整合及表达,细胞生长速度明显减慢,倍增时间明显延长,G1期细胞明显多于转基因前(P <0 .0 5 ) ;免疫细胞化学显示外源性p16表达可下调CDK4及cylinD1的表达(P <0 .0 5 ) ,Western -Blot提示转染外源性p16基因后细胞中磷酸化pRb表达明显降低。结论:外源性p16基因导入人肝癌细胞株SMMC -772 1中可稳定表达并使细胞停滞在G1期,抑制细胞生长,其机制可能为下调CDK4、cyclinD1的表达和抑制pRb磷酸化有关。     

乳腺癌细胞中p53、C-erbB-2、p21^WAF1和CDK4的表达及临床意义

目的：探讨乳腺癌组织中p53、C—erbB-2、p21^WAF1和CDK4的表达及临床意义。方法：采用免疫组化SP法检测120例乳腺癌组织石腊切片上p53、C—erbB-2、p21^WAF1和CDK4的表达。结果：p53、C-erbB-2、p21^WAF1和CDK4阳性表达率分别为53．3％、63.3％、58．3％、41．6％；阳性产物主要位于细胞核中，p53、C-erbB-2的表达与肿瘤组织分级（P〈0．05）、淋巴结转移（P〈0．01）显著相关，p21^WAF1的表达与淋巴结转移（P〈0．01）显著相关，无淋巴结转移组明显高于有淋巴结转移组；与组织分级及PR、ER表达无显著相关。CDK4阳性表达与肿瘤组织分级（P〈0．05）、淋巴结转移（P〈0．01）显著相关．与PR、ER无相关。结论：p53、C—erbB-2、p21^WAF1和CDK4与乳腺癌的发生发展密切相关，可作为判断肿瘤浸润转移、指导治疗和估计预后的参考指标。特别是p53的表达水平及淋巴结转移可能是判断乳腺癌的术后生存的独立有效指标．而综合应用上述指标可能更有助于预后的判断。     

高氧致慢性肺疾病早产鼠的肺组织CDK4、p21动态变化及其意义

目的探讨CDK4及p21在高氧诱导早产鼠慢性肺疾病(CLD)形成中动态表达规律及对CLD肺纤维化的影响,完善CLD发生机制及研究新的防治策略。方法将80只新生早产SD大鼠随机分为实验组(FiO2为90%)和对照组(FiO2为21%)。分别采用免疫组化SABC方法检测特定时间点1,3,7,14,21d大鼠肺组织CDK4、p21蛋白表达并进行肺组织纤维化评分。结果实验组14,21d肺纤维化评分明显高于对照组;肺组织CDK4蛋白表达明显高于对照组,其与肺纤维化评分呈明显正相关;p21蛋白表达明显低于对照组,其与肺纤维化评分呈明显负相关。结论高氧可诱导早产鼠的肺组织CDK4表达增强及抑制p21表达,其异常表达可能是导致肺成纤维细胞过度增殖,最终发生肺间质纤维化的重要原因。     

卵巢浆液性肿瘤P16抑癌基因表达的原位杂交研究

目的：探讨ｐ１６抑癌基因与卵巢浆液性癌发生、发展及其生物学特征的关系。方法：应用非放射性原位杂交技术对４７例卵巢上皮性浆液性肿瘤组织（良性１０例、交界性４例、癌３３例）和８例正常卵巢组织中ｐ１６ｍＲ－ＮＡ进行检测。结果：ｐ１６ｍＲＮＡ表达主要位于胞浆内呈红色颗粒状,阳性表达细胞多呈灶状分布。ｐ１６ｍＲＮＡ在卵巢浆液性癌中检出率（４８．５％）,低于良性浆液性瘤（９０％）及正常卵巢组织（１００％）（Ｐ均＜０．０５）。结论：ｐ１６ｍＲ－ＮＡ低表达与卵巢浆液性癌的恶性程度高、肿瘤分化差、癌瘤播散及淋巴结转移有关（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１）。ｐ１６作为一种新型抑癌基因,其ｍＲＮＡ低表达可能与卵巢浆液性癌发生、发展密切相关。     

Cyclin D1在大鼠肝细胞癌变过程中的异常表达及意义

目的　探讨肝细胞癌变过程中cyclinD1 的异常表达及其意义。方法　用 0 .0 5 %的 2 AAF诱导Wistar大鼠建立肝癌动物模型 ,应用免疫组化和原位杂交法检测大鼠肝脏在癌变过程中cyclinD1 的蛋白和mRNA表达。结果　正常组 8只中cyclinD1 蛋白和mRNA表达均正常 ,肝硬化组 16只中有 12只cyclinD1 蛋白和mRNA过表达 ,肝癌组 11例中有 4只cyclinD1 蛋白和mRNA过表达。结论　在 3组中cyclinD1 蛋白和mRNA表达一致 ,无显著差异。肝硬化组和肝癌组的cyclinD1 异常表达均高于正常组 ,而且肝硬化组的cyclinD1 异常表达高于肝癌组。     

组蛋白去乙酰化酶1在人肺癌组织中的表达

目的探讨原发性肺癌组织中组蛋白去乙酰化酶1(HDAC1)的表达及临床意义.方法采用免疫组织化学法和原位杂交法,分别测定28例肺癌组织及其癌旁肺组织中HDAC1表达.结果在28例肺癌组织中HDAC1的蛋白质和mRNA的A值分别为0.21±0.02,0.18±0.03,而其癌旁肺组织中HDAC1的蛋白质和mRNA的A值分别为0.16±0.02,0.11±0.01,两者相比差异均有显著性意义,P＜0.05.结论HDAC1在肺癌组织中呈过表达.     

p16基因蛋白在宫颈癌中的表达

目的:观察细胞周期调节蛋白抑制因子p16在宫颈癌组织中的表达,并探讨其与宫颈癌的关系。方法:应用SP免疫组化法检测11例正常宫颈上皮,9例宫颈上皮内瘤样病变(CIN)和48例宫颈癌石蜡包埋组织切片中p16基因蛋白表达情况。统计处理用SSPS10.0软件分析系统。结果:在正常宫颈上皮、CIN和宫颈癌组织中,p16表达的阳性率分别为18.18％、66.67％、87.50％。从正常宫颈到CIN到宫颈癌组织中p16表达呈现逐渐升高的趋势。宫颈癌组织p16表达明显高于正常宫颈组织,具有极显著性差异(P<0.001),CIN和正常宫颈上皮比较,p16表达无显著性差异(P>0.05)。p16表达与宫颈癌的临床分期、组织类型、分化程度以及淋巴结转移均无显著相关性(P>0.05)。结论:细胞周期调节蛋白抑制因子p16基因蛋白高表达参与宫颈癌的癌变过程。     

原发性肝细胞癌中P16/CDKN2基因表达的研究

应用原位杂交技术检测了２８ 例原发性肝细胞癌（ＨＣＣ）中Ｐ１６／ＣＤＫＮ２ 基因ｍ ＲＮＡ的表达, 并用免疫组织化学法检测了Ｐ１６ 蛋白及细胞周期蛋白依赖性激酶４ （ｃｙｃｌｉｎ－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔｋｉｎａｓｅ ４, ＣＤＫ４） 蛋白的表达。结果显示： ７例ＨＣＣ的Ｐ１６基因ｍ ＲＮＡ为阴性, １３ 例为异质性减弱, ８ 例为保留表达。ｍ ＲＮＡ阳性的ＨＣＣ中, 均可见到Ｐ１６ 蛋白表达。Ｐ１６／ＣＤＫＮ２ 基因表达与ＨＣＣ的分级、分化及转移无关。２８ 例ＨＣＣ中共有６ 例出现ＣＤＫ４ 蛋白阳性,这６ 例ＨＣＣ均有不同程度的Ｐ１６ 蛋白表达, 提示ＣＤＫ４ 蛋白表达可能是灭活Ｐ１６ 蛋白的又一途径。     

X射线对小鼠脾细胞内P16、cyclin D1和CDK4表达的影响

目的:探讨X射线对小鼠脾细胞内P16、cyclin D1和CDK4表达的影响.方法:采用细胞间接荧光标记法、FACScan流式细胞仪检测不同剂量X射线全身照射后小鼠脾细胞内P16、cyclin D1和CDK4三种蛋白表达的时程变化和量效关系.结果:2.0 Gy X射线照后24 h小鼠脾细胞P16表达明显高于假照组;CDK4表达水平在照后8 h明显降低,持续至照后72 h仍低于正常水平.周期蛋白cyclin D1表达轻度下调.不同剂量照射后P16蛋白表达呈剂量依赖性增加,1.0～4.0 Gy组与假照射组相比显著增多(P＜0.05,P＜0.01);cyclin D1蛋白表达随剂量升高有降低趋势;CDK4亦呈剂量依赖性降低,0.5～6.0 Gy组与假照组比较差异具有显著性(P＜0.05,P＜0.01).结论:P16/cyclin D1/CDK4/pRb通路在电离辐射诱导脾细胞G1期阻滞中可能起十分重要作用.     

中药复方冬菊对鼠舌白斑癌变的阻断作用

目的观察中药复方冬菊对4-硝基喹啉-1-氧化物(4NQO)诱导的大鼠舌白斑癌变的阻断作用。方法W istar大鼠85只,随机分为癌变模型组(n=35)、中药干预组(n=35)、正常对照组(n=5)和中药对照组(n=10)。以4NQO饮水喂养诱导大鼠舌白斑癌变,中药复方冬菊水溶液灌胃干预癌变过程,取9、13、20、24、32周舌背黏膜标本进行组织病理学观察,免疫组化SP法检测细胞周期蛋白D1(cyc lin D1)的表达。结果中药干预组舌背黏膜异常增生发生率和cyc lin D1的阳性表达率明显低于癌变模型组(P<0.01或P<0.05)。结论中药复方冬菊有确切的抗白斑癌变功效,对细胞周期的阻滞是其抗癌机制基础之一。     

非小细胞肺癌组织中p16基因表达的意义

目的探讨p16基因蛋白在人非小细胞肺癌组织中的表达情况。方法应用免疫组化SP法检测45例非小细胞肺癌组织、21例肺良性疾病组织中p16基因蛋白的表达情况。结果肺良性疾病中p16蛋白阳性率85．7％,高于肺癌组织的51．1％,差异有统计学意义（P=0．004）;p16蛋白表达阳性率肺癌Ⅰ、Ⅱ期高于Ⅲ、Ⅳ期,无淋巴结转移者高于有淋巴结转移者（P〈0．05）。结论p16基因蛋白的表达情况与非小细胞肺癌的发生、发展有关。