自发性高血压大鼠肥厚左心室的蛋白质组学研究

目的心肌肥厚是高血压患者心血管事件发生和死亡的主要危险因素,其机制仍未完全阐明。应用双向凝胶电泳/质谱的经典蛋白质组学方法,比较不同年龄自发性高血压大鼠(SHR)肥厚心肌的蛋白质表达谱的差异。方法取4周、20周龄雄性 SHR 和 WKY 大鼠,观察血压和心肌肥厚情况;抽提其左心室组织蛋白,经二维凝胶电泳(2-DE)分离蛋白,银染后计算机图象分析寻找蛋白表达差异点,并以基质辅助激光解吸电离-飞行时间-飞行时间质谱测量法(MALDI-TOF-TOF MS)分析鉴定蛋白。结果 SHR 在血压末升高时就已存在心肌肥厚。经二维胶图比较共找出27个差异蛋白点,质谱分析鉴定出20个差异蛋白,涉及能量代谢、线粒体氧化磷酸化和氧化应激反应等。其中13个蛋白的变化发生在4周龄 SHR 血压未升高时;另7个蛋白表达变化发生于20周龄血压持续升高状态下的 SHR 肥厚心肌中。结论 SHR 肥厚心肌中脂肪酸氧化和葡萄糖有氧氧化中的酶下调,而糖酵解的关键酶明显上调,且这些变化大多发生在血压升高前;线粒体氧化磷酸化的多种酶和一些参与抗氧化作用的蛋白均发生了变化,提示在 SHR 的心肌肥厚过程中物质能量代谢和氧化应激也具有重要作用。     

自发性高血压大鼠心肌fas基因表达与左室肥厚关系探讨

目的探讨自发性高血压大鼠(SHR)心肌fas表达及其与左室肥厚的关系. 方法自发性高血压大鼠(SHR)与正常血压大鼠各16只,尾套法测收缩压,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法测心肌fas mRNA表达.结果与WKY相比,SHR心肌fas表达、左室重量指数(LVMI)均显著升高,且二者呈正相关.结论自发性高血压大鼠早期心肌肥厚时心肌fas表达已经升高,可能参与后期心衰的发生.     

自发性高血压大鼠肥厚左室心肌组织微小RNA-1与缝隙连接蛋白43的改变

目的观察自发性高血压大鼠(SHR)肥厚左室心肌组织微小RNA-1(miRNA-1)、缝隙连接蛋白43(Cx43)表达的变化及其关系,以探讨高血压性心肌肥厚发生室性心律失常(VA)的分子机制。方法 10只17周龄雄性SHR大鼠做为左室肥厚组(LVH组),10只8周龄雄性SHR大鼠做为对照组,通过病理学、心肌细胞横径的测量、实时荧光定量聚合酶链反应、免疫组织化学法及western blotting检测等方法 ,比较两组大鼠左室心肌组织病理学改变、miRNA-1及Cx43蛋白表达。结果①与对照组比较,LVH组的收缩压、舒张压升高,左室质量指数及心肌细胞横径均明显增大(P均0.05);miRNA-1表达水平明显升高,以及Cx43蛋白表达水平降低(0.27±0.10vs0.60±0.13,P0.05);②LVH组大鼠左室心肌组织miRNA-1与Cx43蛋白的表达水平呈显著负相关(r=-0.661,P0.05)。结论 miRNA-1可能通过抑制Cx43表达而参与高血压LVH发生VA。     

Apelin-13在自发性高血压大鼠心肌组织的表达及其与心肌肥厚和心功能的关系

目的观察Apelin-13在自发性高血压大鼠(SHR)心肌组织的表达改变,探讨其与心肌肥厚和心功能的关系。方法选取清洁级4周龄和20周龄雄性自发性高血压大鼠和WKY(Wistar-Kyoto)大鼠,按周龄及种属分为4组,每组8只。分别测定无创尾动脉血压及心脏质量指数;超声心动图和血流动力学系统评估心室重构和心功能;HE染色评价心肌细胞及排列情况。Western blot法检测心肌组织Apelin-13、APJ的蛋白表达。结果 1Apelin-13、APJ在SHR心肌组织中呈低表达(P0.05),20周龄SHR较4周龄SHR更明显(P0.05)。2 SHR的收缩压(SBP)、左心室舒张期末压(LVEDP)、心脏质量指数(HW/BW)、心室质量指数(LVW/BW)、舒张期室间隔厚度(IVSD)和左心室舒张期末后壁厚度(LVWPd)明显升高(P0.05),左心室舒张期末内径(LVEDd)、左心室射血分数(EF)、左心室短轴缩短率(FS)和左心室压力最大下降速率(-dp/dtmax)明显降低(P0.05);心肌细胞明显肥大、排列紊乱。20周龄SHR与4周龄SHR相比,上述指标改变更加明显(P0.05)。3心肌组织Apelin-13与IVSD、HW/BW、LVW/BW以及LVEDd、LVEDP呈负相关(P0.05),与EF、FS和-dp/dtmax呈正相关(P0.05)。结论 Apelin-13在SHR心肌组织中呈低表达,其与心肌肥厚指标呈负相关,与心功能呈正相关,提示其可能影响高血压的左心室心肌肥厚和心功能。     

自发性高血压大鼠心肌增殖细胞核抗原(PCNA)的表达以及厄贝沙坦和咪哒普利的影响

目的探讨自发性高血压大鼠(SHR)左心室肌增殖细胞核抗原(PCNA)的表达以及咪哒普利、厄贝沙坦的影响. 方法选用13周龄的SHR30只,雌性9只,雄性21只,体重228.5±39 g,随机分为三组,使得每组雌性3只,雄性7只,分别设为SHR组,厄贝沙坦组,咪哒普利组;另选同源同系Wistar-Kyoto 大鼠(WKY大鼠)10只,雌性5只,雄性5只,体重206.1 g±49.1 g,作为正常对照组(WKY组).实验期14周.观察指标血压、左室重量/体重(LVW/BW)、左室厚度/体重、心肌PCNA蛋白水平.结果 SHR组血压、LVW/BW、左室厚度/体重均增高,心肌PCNA蛋白的表达明显增加; 咪哒普利组、厄贝沙坦组血压、LVW/BW、左室厚度/体重、心肌增殖核抗原(PCNA)蛋白的表达均比SHR组低.结论 26周龄SHR左心室肌PCNA蛋白的表达明显升高,咪哒普利、厄贝沙坦不仅可以良好地控制血压,而且可以抑制自发性高血压大鼠左心室重塑,并可以降低SHR左心室肌PCNA蛋白的表达,二者对SHR左室肥厚的抑制效应可能与降低PCNA蛋白的表达有关系.     

桑杞清眩颗粒干预自发性高血压大鼠心肌细胞凋亡的实验研究

目的观察桑杞清眩颗粒对高血压心肌重构的抑制作用及其可能机制。方法选8只4周龄雄性WKY大鼠和16只4周龄雄性自发性高血压(SHR)大鼠,WKY大鼠作为对照组(WKY),SHR大鼠随机分为模型组(SHR组)和给药组(SQ+SHR组),每组8只。每组在治疗16周后处死大鼠,尾套法测量SHR尾动脉收缩压、舒张压、平均压,计算心脏重量指数;用脱氧核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)染色来检测凋亡心肌细胞;用蛋白免疫印迹法检测大鼠心肌组织中B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、活化型半胱天冬酶-3(cleaved Caspase-3)。结果与WKY组相比,桑杞清眩颗粒显著抑制SHR大鼠收缩压的升高、心脏重量指数的增加、抑制高血压引起的大鼠心肌细胞凋亡、Bcl-2的降低及Bax和cleaved Caspase-3的增加。结论桑杞清眩颗粒可以抑制SHR大鼠血压升高,减轻心肌肥厚,其作用机制可能与抑制自发性高血压大鼠心肌细胞凋亡有关。     

厄贝沙坦和咪哒普利对自发性高血压大鼠左室肥厚和c-Jun表达的影响

目的探讨厄贝沙坦和咪哒普利对自发性高血压大鼠（SHR）左室肥厚和c-Jun表达的影响。方法选用13周龄的SHR 30只,雌性9只,雄性21只,体质量（229±39）g,随机分为3组:SHR组,厄贝沙坦组,咪哒普利组,每组雌性3只,雄性7只。另选同源同系、血压正常的Wistar-Kyoto大鼠（WKY）10只,雌性5只,雄性5只,体质量（206±49）g,作为正常对照组（WKY组）。实验期14周。观察指标:血压、左室质量/体质量（LVW/BW）、左室厚度/体质量、左心室肌c-Jun蛋白及mRNA水平。结果26周龄SHR组血压、LVW/BW与左室厚度/体质量均增高,左心室肌c-Jun蛋白和mRNA的表达明显增加;咪哒普利组、厄贝沙坦组血压、LVW/BW、左室厚度/体质量、左心室肌c-Jun蛋白和mRNA的表达均降低。结论自发性高血压可明显导致心肌肥厚,而咪哒普利、厄贝沙坦可明显降低血压、抑制心肌肥厚的发生。     

自发性高血压大鼠心肌fas基因表达与左室肥厚关系探讨

目的 探讨自发性高血压大鼠（SHR）心肌fas表达及其与左室肥厚的关系。方法 自发性高血压大鼠（SHR）与正常血压大鼠各16号，尾套法测收缩压，逆转录-聚合酶边反应（RT-PCR）法测心肌fas mRNA表达。结果 与WKY相比，SHR心肌fas表达、左室重量指数(LVMI)均显著升高，且二者呈正相关。结论 自发性高血压大鼠早期心肌肥厚时心肌fas表达已经升高，可能参与后期心衰的发生。     

清肝降压饮对自发性高血压大鼠心肌CaN表达的影响

目的 观察清肝降压饮抑制自发性高血压大鼠(SHR)心肌肥厚的作用,并探讨其作用机制.方法 将SHR随机分为模型对照组、清肝降压饮低剂量组、清肝降压饮高剂量组和西药组,并用Wistar大鼠做空白对照.灌胃4周后,通过RT-PCR、免疫组化方法检测大鼠心肌钙调神经磷酸酶(CaN)的表达.结果 清肝降压饮可明显降低SHR的血压和心室质量指数,降低心肌CaN的表达.结论 清肝降压饮可通过降低SHR心肌CaN的表达,降低SHR的血压和心室质量指数,产生防治心肌肥厚的效应.     

辛伐他汀对SHR心肌组织SOD、MDA、NOS、NO及心肌间质胶原含量的影响

目的观察辛伐他汀对自发性高血压大鼠(SHR)心肌纤维化的影响.方法 20只16周龄雄性SHR大鼠,随机分成2组(1)辛伐他汀组(n=10辛伐他汀2 mg/kg*d);(2)SHR空白对照组(n=10);(3)同龄雄性正常血压WKY大鼠对照组(n=10).给药12周后称量大鼠左室重量并计算大鼠左室重量指数;测定心肌组织丙二醛、超氧歧化酶、一氧化氮及一氧化氮合酶;用改良VG染色法使胶原特殊染色,计算机图像分析测量心肌间质及心肌小动脉周围胶原的胶原容积分数对心肌纤维化程度进行比较.结果辛伐他汀组与SHR组相比心肌超氧歧化酶无明显改变、丙二醛明显减少而心肌一氧化氮及结构型一氧化氮合酶(cNOS)活性明显升高;辛伐他汀组均未能有效降低SHR血压和左心室肥厚(P<0.05)但能使心室内、外膜及心肌小动脉周围的胶原减少.结论一氧化氮/活性氧平衡失调可能是导致高血压心肌纤维化的又一个重要因素;辛伐他汀抗纤维化作用可能与其抗氧化作用及改善心肌cNOS活性密切相关.