EGCG对鼻咽癌CNE-2细胞增殖、凋亡的影响及机制

目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）治疗鼻咽癌的作用机制。方法体外培养鼻咽癌CNE-2细胞并以不同质量浓度EGCG处理,采用MTr法检测细胞增殖抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡率,RT-PCR检测细胞中锰超氧化物歧化酶（MnSOD）表达变化。结果EGCG处理后,CNE-2细胞增殖明显受到抑制,且呈时间和剂量依赖性;CNE-2细胞凋亡率显著升高,且呈量效关系;MnSOD表达明显上调。且随EGCG作用时间延长有升高趋势。结论EGCG能抑制CNE-2细胞增殖、促进其凋亡,可能机制为上调MnSOD表达;此为EGCG在鼻咽癌防治中的应用提供了理论依据。     

EGCG对鼻咽癌细胞株CNE-1生长及其survivin表达的影响

目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）对鼻咽癌细胞株CNE-1的生长抑制作用及其机制。方法不同浓度EGCG作用于鼻咽癌CNE-1细胞,用MTT法检测不同时间点的细胞生长抑制率,同时用RT-PCR法检测其survivin mRNA。结果EGCG作用后CNE-1细胞的生长抑制率升高,同时伴survivin mRNA表达下调,呈浓度和时间依赖性。结论EGCG可明显抑制鼻咽癌细胞株CNE-1的生长,其机制是下调该细胞survivin mRNA的表达。     

EGCG在肿瘤防治中的作用

表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)是绿茶的主要组成成分,国内外多年的研究表明其对多种肿瘤均有防治作用.本文将从EGCG在肿瘤的发生发展、肿瘤的转移浸润、肿瘤的血管生成及肿瘤的耐药等方面来阐述EGCG的肿瘤防治作用.     

EGCG对乙酸诱导大鼠结肠炎的治疗作用及抗氧化机制

目的:在大鼠结肠炎的模型中,研究表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin-3-gallate,EGCG)的治疗作用及其抗氧化损伤作用的机制.方法:SD大鼠60只,随机分为正常对照组(n=10)、模型安慰剂组(n=20)、EGCG治疗组(n=15)、柳氮磺吡啶(SASP)治疗组(n=15).正常组常规饲养,模型安慰剂组、EGCG组、SASP组80 g/L乙酸造模后分别予以生理盐水2 mL/d、EGCG 50 mg/(kg·d)、SASP0.25 g/(kg·d)灌胃治疗7 d,观察大鼠活动状态,进食量,体质量,大便性状,大便出血情况,计算疾病活动指数(DAI),判断疗效.第8天处死大鼠并进行结肠黏膜损伤指数(CMDI)评分,组织学评级,测定组织一氧化氮自由基(NO)、脂质过氧化产物丙二醛(MDA)以及超氧化物歧化酶(SOD)含量.结果:与模型安慰剂组相比,EGCG显著改善DAI(1.1±0.9 vs 3.9±0.4,P＜0.01)、CMDI(1.5±0.9 vs 3.3±0.6,P＜0.05)和组织学评级(4.6±3.1 vs 9.3±2.8,P＜0.01).与SASP组相比,EGCG显著改善DAI(1.1±0.9 vs 3.0±1.2,P＜0.01)、CMDI(1.5±0.9 vs 2.3±0.9,P＜0.05)和组织学评级(4.6±3.1 vs 7.9±4.0,P＜0.05).与模型安慰剂组相比,EGCG组NO含量显著下降(9.1±5.6 μmol/g vs 15.4±5.0μmol/g,P＜0.05),MDA含量也显著下降(0.9±0.6 μmol/gvs 1.5±0.6 μmol/g,P＜0.05),SOD含量显著提高(3090.6±568.4 nkat/mg vs 1373.6±410.1 nkat/mg,P＜0.05).与SASP组相比,EGCG组SOD含量显著提高(3090.6±568.4 nkat/mg vs 1268.6±431.8 nkat/mg,P＜0.05).结论:EGCG可通过抑制氧化损伤减轻结肠炎症反应,且疗效优于传统药物SASP.     

EGCG联合不同剂量放疗对人肝癌细胞系HepG2中hTERT表达的影响

目的:研究相同剂量表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)联合不同剂量放疗对HepG2中hTERT基因表达的影响, 探讨EGCG成为放疗增敏剂的作用.方法:用MTT比色法检测EGCG对HepG2细胞增殖的影响, 用荧光显微镜检测EGCG诱导HepG2的细胞凋亡, 从而找到合适的EGCG(25μmol/L)剂量用于观察其放射效果的实验; 采用实时荧光定量PCR检测不同剂量放疗(0、2、4、6 Gy)联合EGCG和不联合EGCG治疗后, HepG2中hTERT基因的表达. 放疗用直线加速器6MVX线.结果:EGCG具有抑制HepG2细胞增殖并诱导HepG2细胞凋亡的作用. 同时, 不同剂量放疗联合EGCG和不联合EGCG治疗后HepG2中hTERT基因的表达比较, 空白组无显著差异; 2Gy组、4 Gy组、6 Gy组均有显著差异(hTERT基因表达的扩增倍数: 0.477±0.025 vs 0.973±0.024; 1.110±0.083 vs 1.382±0.051; 1.174±0.128 vs 1.452±0.109, P <0.01或0.05), 并以2 Gy组最为显著.结论:EGCG具有抑制HepG2细胞增殖并诱导其凋亡的作用; EGCG联合不同剂量放疗可能下调HepG2中hTERT基因水平, 从而抑制端粒酶活性, 以放射剂量为2 Gy时显著, 因此,EGCG有可能成为放疗增敏剂.     

EGCG对2型糖尿病大鼠肾脏功能的影响

目的观察表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对2型糖尿病(T2DM)大鼠肾脏功能的影响。方法复制T2DM大鼠模型。实验动物分成4组:对照组、模型组、EGCG1组和EGCG2组[分别为50、150 mg/(kg·d)灌胃]。给药12 w后,测定大鼠空腹血糖(FBG)、血清胰岛素(FINS)水平并计算胰岛素敏感指数(ISI)、三酰甘油(TG)、血肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)、肾组织的超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量、肾脏肥大指数(KW/BW)、肾皮质钠泵活性。结果与对照组比较,模型组FBG、FINS水平、KW/BW、MDA含量、Scr、BUN显著升高,ISI、SOD活性显著下降,肾皮质钠泵活性显著降低(P0.05)。与模型组比较,EGCG1组和EGCG2组各指标均显著改善(P0.05),具有一定剂量依赖性。结论 EGCG对T2DM大鼠肾脏功能具有保护作用,其机制可能与EGCG可降低T2DM大鼠血糖血脂,降低肾脏氧化应激水平,稳定T2DM大鼠肾皮质钠泵活性有关。     

EGCG对氟尿嘧啶抑制肝癌细胞生长的增强作用

目的:研究表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)是否具有增强5-氟尿嘧啶(5-FU)抑制肝癌BEL-7402细胞生长的作用,并探讨其中的机制.方法:应用MTT法观察肝癌细胞的生存率;Western blot进行蛋白分析:应用小RNA干扰(siRNA)法来沉默BEL-7402细胞中COX-2蛋白的表达;ELISA定量测定细...     

EGCG对人胃癌细胞株MKN 45中Bcl-2家族相关基因表达的影响

目的:探讨EGCG干预人胃癌细胞株MKN45后Bcl-2家族相关基因表达的变化情况．方法:运用半定量RT-PCR法和蛋白免疫印迹法分别检测EGCG干预人胃癌细胞株MKN 45后不同时间点上(0,12,24,36 h)抗凋亡相关基因Bcl-xl和Bcl-2及促凋亡相关基因Bax、Bid和Bad的mRNA和蛋白表达水平,并比较不同时间点的Bcl-2与Bax的比值．结果:促凋亡相关基因Bax、Bid和Bad的mRNA与蛋白表达水平随着EGCG作用于人胃癌细胞株MKN45的时间延长(0,12, 24,36 h)逐渐升高(Bax蛋白:0．6292±0．08, 0．6454±0．04,0．8069±0．09,0．8992±0．07, P<0．05;Bid蛋白:1．1214±0．08,1．3697±0．07, 1．610±0．09,2．0623±0．12,P<0．05;Bad蛋白: 0．4327±0．02,0．7531±0．01,1．2827±0．02, 1．6388±0．09,P<0．05),而抗凋亡相关基因Bcl- xl及Bcl-2的mRNA和蛋白表达水平却逐渐降低(Bcl-xl蛋白:0．6444±0．01,0．6060±0．02, 0．5647±0．04,0．5487±0．11,P<0．05;Bcl-2蛋白:0．8112±0．04,0．6716±0．08,0．4664±0．03, 0．3146±0．01,P<0．05)．Bcl-2／Bax比值也随着EGCG作用时间的延长逐渐变小(P<0．05)．结论:EGCG可改变Bcl-2家族不同成员的mRNA与蛋白表达水平,尤其是Bcl-2／Bax比值,这可能与EGCG来调控胃癌细胞凋亡有关．     

茶对风湿病及其共病的补充治疗作用

茶及其提取物具有抗癌、抗氧化、抗炎、抗感染、抗胶原酶、抗纤维化、促进骨生成等作用。茶能降低普通人群功能性残疾及全因死亡率,对系统性红斑狼疮、类风湿关节炎、骨关节炎等风湿病有补充治疗作用,对风湿病的共病包括血液系统肿瘤、实体瘤、心脑血管不良事件、代谢综合征、血糖、血脂、焦虑、抑郁、认知障碍及感染或有降低发病风险、改善疾病本身或预后的作用。在戒烟、禁酒、避免饮用温度过高茶的前提下,适度增加每日茶的摄入对风湿病及其共病不无裨益。     

EGCG对LoVo和SW480结肠癌细胞株的作用及对Notch1与Notch2基因表达的影响

目的:探讨绿茶提取物表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对结肠癌细胞株LoVo细胞和SW480细胞增殖的抑制作用,研究其对Notch1与Notch2的基因表达的影响,方法:体外培养LoVo细胞和SW480细胞,采用不同浓度的EGCG(10、20、35 mg/L)对其进行干预,MTT法检测EGCG对LoVo细胞和SW48...     

阿帕替尼联合放疗对CNE-2鼻咽癌裸鼠的实验研究

目的探讨阿帕替尼联合放疗对CNE-2鼻咽癌裸鼠移植瘤的作用及可能机制。方法建立CNE-2裸鼠移植瘤模型并随机分为四组:空白对照组、单阿帕替尼组、单放疗组和阿帕替尼联合放疗组,每组8只,观察各组肿瘤体积变化,并计算抑瘤率和联合效应Q值,PET/CT扫描检测T/M值,免疫组化检测CD31的表达。结果阿帕替尼联合放疗组抑瘤率明显高于其他组,差异有统计学意义(P0.05);联合效应Q值为1.156,提示阿帕替尼与放疗有协同效应;阿帕替尼联合放疗组T/M值、CD31表达最低,差异均有统计学意义(P0.05)。结论阿帕替尼联合放疗对鼻咽癌裸鼠移植瘤具有协同抗肿瘤效应。     

Effects and mechanisms of silibinin on human hepatocellular carcinoma xenografts in nude mice

AIM： To investigate the in vivo effects and mechanisms of silibinin on the growth of hepatocellular carcinoma （HCC） xenografts in nude mice. METHODS： Nude mice bearing HuH7 xenografts were used to assess the anti-HCC effects and mechanisms of silibinin. RESULTS： Silibinin resulted in a potent dosedependent reduction of HuH7 xenografts in association with a significant decrease in Ki-67 and α-fetoprotein production, nuclear NF-κB content, polo-like kinase 1, Rb phosphorylation, and E2F1/DP1 complex, but increased p27/CDK4 complex and checkpoint kinase 1 expression, suggesting that the in vivo effects of silibinin are mediated by inhibiting G1-S transition of the cell cycle. Silibinin-induced apoptosis of HuH7 xenografts was associated with inhibited survivin phosphorylation. Silibinin-reduced growth of HuH7 xenografts was associated with decreased p-ERK, increased PTEN expression and the activity of silibinin was correlated with decreased p-Akt production, indicating involvement of PTEN/PI3K/Akt and ERK pathways in its in vivo anti-HCC effects. Silibinin-reduced growth of HuH7 xenografts was also associated with a significant increase in AC-H3 and AC-H4 expression and the production of superoxide dismutase （SOD）-1.CONCLUSION： Silibinin reduces HCC xenograft growth through the inhibition of cell proliferation, cell cycle progression and PTEN/P-Akt and ERK signaling, inducing cell apoptosis, and increasing histone acetylation and SOD-1 expression.     

Anti-tumor activities and apoptosis-regulated mechanisms of bufalin on the orthotopic transplantation tumor model of human hepatocellular carcinoma in nude mice

AIM： To investigate anti-tumor activities and apoptosisregulated mechanisms of bufalin in the orthotopic transplantation tumor model of human hepatocellular carcinoma in nude mice.
METHODS： BEL-7402 cells of human hepatocellular carcinoma were inoculated to form subcutaneous tumors, and were implanted into the liver to establish orthotopic transplantation tumor models of human hepatocellular carcinoma in nude mice. Seventy-five animals were randomized divided into five groups （n = 15）. Bufalin was injected intraperitoneally into three groups at doses of 1.5 mg/kg （BF1）, 1 mg/kg （BF2） and 0.5 mg/kg （BF3） for d 15-24, respectively. The NS group was injected an equal volume of saline as above and adriamycin was injected intraperitoneally into the ADM group at a dose of 8.0 mg/kg for d 15. Ten mice in each group were killed at d 25 and the survival time in each group was calculated. We also observed the morphologic alterations in the myocardium, brain, liver, kidney and tumor tissues by pathology and electron microscopy, measured the apoptotic rate by TUNEL staining method, and detected the expression of apoptosis-regulated genes bcl-2 and bax by immunohistochemical staining and RT-PCR in tumor tissues.
RESULTS： The tumor volumes in each group of bufalin were reduced significantly （35.21±12.51 vs 170.39 ± 25.29; 49.83 ± 11.46 vs 170.39 ± 25.29; 83.99 ± 24.63 vs 170.39 ± 25.29, P 〈 0.01, respectively）, and the survival times were prolonged in group BF1-2 （31.8 ± 4.2 vs 23.4 ± 2.1 and 29.4 ± 3.4 vs 23.4 ± 2.1, P 〈 0.05, respectively）, and necrosis was mainly in severe or moderate degree in group BF1-2. No morphological changes were detected in the myocardium, brain, liver and kidney tissues. Apoptotic characteristics could be seen in group BF1-2. The positive rates of bcl-2 and bax protein expression of each group by immunohistochemical staining were 10.0%, 10.0%, 20.0%, 10.0% and 20.0%; 90.0%, 80.0%, 80.0%, 40.0% and 30.0%, respectively. Loss of expression of bcl-2 mRNA     

血管生成抑制剂对胃癌生长抑制作用的实验研究

目的研究新的血管生成抑制剂2(8羟基6甲氧基1氧1氢2苯并吡喃3烃基)丙酸(NM3)对胃癌生长的抑制作用,并探讨其对胃癌细胞凋亡的影响。方法建立人胃腺癌裸鼠皮下异体移植模型。移植1周后开始腹腔注射NM3,隔天1次,剂量为10、20、40mg/kg,分别3d1次联合卡铂5mg/kg,并与生理盐水对照组、NM3或卡铂单独治疗组比较(NM3用5周,卡铂4周)。种植后第7周处死动物,测量肿瘤大小,计算抑瘤率,流式细胞术(FCM)法分析肿瘤细胞凋亡指数(AI)。结果单用NM3剂量分别为10、20及40mg/kg时,肿瘤的平均重量分别为(1351.0±116.9)、(1041.1±143.5)及(767.5±140.1)mg,明显小于生理盐水对照组[(1754.0±144.2)mg,P<0.05]。单用卡铂组的抑瘤率为5.6%,对胃癌无明显抑制作用。单用NM3剂量为10、20及40mg/kg时,抑瘤率分别为23.0%、40.6%及56.2%。三组剂量分别联合卡铂治疗时抑瘤率为42.9%、47.6%及63.2%,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。NM3三种剂量组联合卡铂治疗的AI分别是(6.96±0.65)%、(10.65±1.43)%及(21.66±2.96)%,对照组为(1.37±0.19)%,卡铂组为(1.85±0.22)%。结论NM3能诱导胃癌细胞凋亡,对体内胃癌的生长有抑制作用,能加强卡铂对胃癌的化疗疗效。     

TNF-α抑制剂对重症急性胰腺炎细胞凋亡及Caspase-3表达的影响

目的:研究重症急性胰腺炎(SAP)大鼠细胞凋亡、Caspase-3表达及其与疾病严重程度的关系.方法:40只SD大鼠随机分成对照组(SAP组,胆管逆行性注射牛磺胆酸钠制备SAP模型,n=20),实验组(干预组,SAP模型制作成功后,注射重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白,n=20).测定两组血清淀粉酶和TNF-α亮含量,采用免疫组化法分析Caspase-3的表达,运用TUNEL技术检测胰腺细胞的凋亡,并对胰腺组织进行病理学评分.结果:与SAP组比较,干预组的血清淀粉酶、TNF-α、胰腺组织病理学评分较低(6868.80+595.50 U/L vs 5434.20±481.52 U/L.258.46±38.57 ng/L vs 182.00±19.67 ng/L.15.54±2.30vs 11.06±1.09,均P＜0.05),Caspase-3阳性率和和胰腺细胞的凋亡指数显著升高(20.06±2.17vs 28.52±3.74,10.42±1.27 vs 16.23±2.43,均P＜0.05).结论:SAP时胰腺细胞发生凋亡时伴随Caspase-3的高表达,而炎症反应和胰腺组织病理学评分得到改善.     

COX-2抑制剂联合放疗对人乳腺癌裸鼠移植瘤作用的研究

目的观察环氧化酶-2（COX-2）抑制剂塞来昔布联合放疗对人乳腺癌MDA-MB-231细胞裸鼠移植瘤生长的影响。方法建立人乳腺癌裸鼠移植瘤模型,观察塞来昔布联合放疗治疗后裸鼠移植瘤的生长情况,测定移植瘤中COX-2、血管内皮生长因子（VEGF）的表达情况。结果塞来昔布联合放疗治疗后移植瘤的体积和重量减小（P〈0.01）,COX-2、VEGF表达下降（P〈0.05）。结论塞来昔布联合放疗能抑制人乳腺癌裸鼠移植瘤的生长。     

组织蛋白酶B抑制剂对小鼠急性肝功能衰竭的保护作用及机制

目的 探讨组织蛋白酶B抑制剂对小鼠急性肝功能衰竭的保护作用及机制.方法 将雄性昆明种小鼠45只分为对照组、模型组和保护组,每组各15只.模型组和保护组一次性腹腔注射脂多糖/D-氨基半乳糖(LPS/D-GalN),保护组于造模前30 min予组织蛋白酶B抑制剂(CA-074me)腹腔注射,而模型组、对照组分别注射同等体积的0.5％氯化钠溶液作为对照,给药后6h分别取血清、肝组织标本.检测肝功能变化及凝血酶原时间(PT),观察肝脏病理改变,末端转移酶标记技术(TUNEL)检测肝细胞凋亡,免疫组织化学分析细胞色素c表达,RT-PCR检测肝组织中天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)的表达.另取75只小鼠按上述方法分组处理,每组25只,比较各组小鼠24 h存活率.统计学处理采用f检验和x2检验.结果 保护组小鼠24 h存活率明显高于模型组分别为76％(19/25)和36％ (9/25)(x2=8.12,P＜0.05);保护组小鼠血清ALT[(568.50±45.68)U/L比(1394.55±78.58) U/L]、AST[(755.16±51.14) U/L比(1 488.72±64.62) U/L]、TBil[ (22.82±2.04)μmol/L比(52.08±4.10) μmol/L]和PT[(14.26±0.32)s比(17.40±0.30)s]水平均明显低于模型组(均P＜0.05);与模型组比较,保护组小鼠肝组织炎性细胞浸润明显减少,肝细胞坏死程度明显减轻,凋亡指数明显下降[(18.4±2.6)％比(30.4±2.8)％,P＜0.05];保护组小鼠肝组织中细胞色素c[(0.19±0.02)比(0.33±0.05)]和Caspase-3 [(0.18±0.03)比(0.34±0.05)]表达水平明显低于模型组(均P＜0.05).结论 CA-074me对小鼠急性肝功能衰竭具有保护作用,可减轻肝细胞炎性反应、坏死和凋亡,降低急性肝功能衰竭的病死率,其机制可能与CA-074me下调细胞色素c和Caspase-3的表达有关.     

Egr-内皮抑素基因联合放射治疗裸鼠膀胱癌模型的实验研究

目的 探讨Egr-内皮抑素（Egr-Endostatin，Egr-Endo）基因联合放射治疗抑制裸鼠膀胱癌移植瘤生长的效应及作用机理。方法 裸鼠皮下注射入膀胱癌T24细胞建立移植瘤模型，特肿瘤长径生长到约4mm后随机分为4组（对照组、Egr-Endo组、5 Gy辐照组、Egr-Endo＋Gy辐照组），每组6只；，定期观察各组裸鼠移植瘤体积变化；瘤细胞移植45d后（辐照后15d）处死各组荷瘤鼠，测量瘤重、检测NK细胞毒活性和腹腔巨噬细跑TNF-α分泌活性，免疫组化法检测肿瘤组织微血管密度（MVD）。结果 瘤细胞移植45d后（辐照后15d）Egr-Endo＋5Gy辐照组移植瘤体积、重量明显低于对照组、Egr-Endo组、5Gy辐照组，差异有显著性；辐照后15d Egr-Endo＋5Gr辐照组NK细胞毒活性、腹腔巨噬细胞TNF-α分泌活性及肿瘸组织MVD均明显高于对照组，差异有显著性。结论Egr-Endo基因联合放射治疗对膀胱癌生长及血管生成有协同抑制作用。