高血压对高脂饮食兔腹主动脉内膜巨噬细胞和平滑肌细胞数量的影响

目的观察高血压对高脂饮食兔腹主动脉内膜巨噬细胞和平滑肌细胞(SMCs)数量的影响。方法将同批兔随机分为高脂饲料组(15只)和普通饲料组(10只),喂养28周后对高脂组10只、普通组5只手术结扎腹主动脉造成管腔缩窄,余普通组5只和高脂组5只均给予假手术,术后分为高脂手术组,普通手术组,普通假手术组和高脂假手术组,继续喂养4周后对各组兔腹主动脉多处测量血压,取血管行免疫组化染色,观察随血压的变化,内膜巨噬细胞和SMCs的数量变化。结果高脂组兔腹主动脉近端血压高于远端血压,且高脂手术组血压差异更明显。普通假手术组血管内膜薄而光滑;普通手术组缩窄近端内膜比远端内膜稍有增厚;高脂饮食组血管内膜有大量泡沫细胞堆积,缩窄近端内膜厚于缩窄远端,且高脂手术组差异大于高脂对照组。高脂手术组缩窄近端内膜巨噬细胞和SMCs数量多于远端,且巨噬细胞多于SMCs;随着远端血压的降低,巨噬细胞与SMCs数量逐渐减少,巨噬细胞少于SMCs。结论高血压促进高脂饮食兔腹主动脉内膜进一步增厚,内膜巨噬细胞和SMCs数量增多,且巨噬细胞多于SMCs,推测斑块不稳定性增加;随着血压的降低,内膜逐渐变薄,内膜巨噬细胞和SMCs数量减少,且SMCs多于巨噬细胞,推测斑块稳定性增强。     

大鼠腹主动脉平滑肌细胞的培养与鉴定

目的 探讨一种简单、经济获取腹主动脉血管平滑肌细胞的方法,为相关研究提供实验材料.方法 应用改良组织贴块法进行原代培养,胰酶消化传代,运用自然纯化法进行细胞纯化,并使用相差显微镜和SP试剂盒对细胞进行形态学观察以及免疫组化鉴定.结果 90%的组织块接种存活,培养细胞呈典型的"谷峰状"生长,免疫荧光化学技术检测显示胞浆内α平滑肌肌动蛋白阳性表达.结论 本法简便可靠,短期内可获大量高纯度、功能良好的血管平滑肌细胞.     

兔低位腹主动脉阻断后血流动力学的变化

目的:观察兔低位腹主动脉阻断后血压、心律和血流动力学变化情况,为临床低位腹主动脉阻断术的应用提供参考。方法:将20只家兔按随机数字表法分为阻断1h组(A组),阻断1.5h组(B组)。检测阻断前后和撤钳前后心率、血压的变化,并观察术后1周的生存情况。结果:(1)A、B两组心率和血压在阻断前后3min及撤钳前后3min比较,差异均有统计学意义(P<0.05);而A、B两组之间上述各项观察指标比较,差异无统计学意义(P>0.05)。两组血流动力学变化结果均表明阻断后血压上升,心率减慢,撤钳后血压下降、心律增快;(2)兔麻醉死亡3只(A组2只,B组1只)。术后阻断1h组8只兔子均健康成活。阻断1.5h组术中死亡1只,3只在实验后1～2周内因食欲减少、腹泻、流涎等衰竭死亡,有5只兔子成活。结论:兔低位腹主动脉阻断时间以1h较为安全。     

超微血流成像技术对兔腹主动脉斑块易损性的研究

目的 探讨超微血流成像技术对不同病理分型斑块易损性评价的可行性.方法 使用超微血流成像技术检测60只新西兰大白兔腹主动脉斑块模型内的血流情况,按标准进行血流分级.计算各斑块内血流信号面积与斑块总面积之比,即彩色像素密度(MCD),根据MCD结果按评分标准评分,对斑块做病理分型并统计分析.绘制受试者工作特征(ROC)曲线...     

内皮剥脱及高胆固醇饮食诱导兔腹主动脉局部痉挛模型建立的研究

目的 建立兔腹主动脉局部痉挛模型,并探讨高脂血症与血管痉挛之间的联系。方法 选择新西兰白兔8只,于腹主动脉行球囊内皮剥脱,然后给予高脂饮食（含2%胆固醇及2%猪油）喂养,8周后行组织胺及麦角新碱激发试验,造影记录血管直径变化,并作血脂检查和和病理检验。结果 喂养8周后血清胆固醇浓度明显增高(P<0.001),组织胺在内皮剥脱和对照部位激发的血管收缩分别为(45.0%±2.1%)和(9.2%±3.6%) (P<0.01),麦角新碱激发的血管收缩则分别为(37.5%±4.6%)和(5.8%±0.7%) (P<0.01)。与对照部位相比,剥脱部位的内膜明显增厚(P<0.01)。增厚的内膜表现类似动脉粥样硬化的早期改变,而明显的血管痉挛只发生在内皮剥脱部位。结论 本实验成功建立了兔腹主动脉局部痉挛模型;高胆固醇血症及动脉粥样硬化的早期改变是在该模型中诱发痉挛的基础。     

HHcy兔腹主动脉血管超声及病理变化的实验研究

目的 观察高同型半胱氨酸血症(HHcy)兔腹主动脉血管超声及病理变化,探讨HHcy致动脉粥样硬化的机制.方法 采用高L-蛋氨酸饮食方法建立兔HHcy血症模型,以正常家兔为对照,分别于实验0w、4w、8w检测血清同型半胱氨酸(Hcy)、丙二醛(MDA)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)的含量及超氧化物岐化酶(SOD)活力,并通过血管超声和组织学观察腹主动脉血管病理变化.结果 Met组第4w、8w时血清Hcy、MDA、TG、TC含量显著高于同期NC组(P <0.01,P <0.05),而SOD活力则明显降低(P <0.01); 血管超声和光镜下发现,Met组与NC组比较,腹主动脉内膜明显增厚、血管平滑肌细胞增殖,并有大量的泡沫细胞产生和斑块形成.结论 HHcy可通过氧化应激增强,损伤血管内皮细胞等机制,诱发动脉粥样硬化的发生.     

改良球囊损伤联合高脂饮食建立兔腹主动脉粥样硬化模型

目的：评估改良球囊损伤联合高脂饮食建立兔腹主动脉粥样硬化模型方法的有效性,并检测早期斑块中免疫清除相关蛋白的表达。方法：采用20只新西兰大白兔,随机分为假手术组、经典手术组、改良手术组。假手术组予普通饮食,麻醉、切皮、分离股动脉加缝合,但不行球囊损伤。经典手术组和改良手术组予高脂饮食1周后,行腹主动脉球囊损伤术,其中经典手术组单向拉动球囊3次,改良手术组反复前后拉动球囊30～40次,术后继续高脂饮食4周。术后4周采用血管内超声检查腹主动脉内膜斑块情况,取腹主动脉损伤段行苏木素-伊红（hematoxylin-eosin,HE）染色和免疫组化检测。结果：术后4周,各组体重增加差异无统计学意义。血管内超声显示改良手术组斑块增生显著,管腔狭窄。HE染色显示经典手术组和改良手术组均有不同程度的内膜增生,造模成功率均为100%。与经典手术组相比,改良手术组最大内膜厚度[（174.69±53.76）μm vs.(481.50±81.94)μm,P <0.05]、平均内膜厚度[（77.49±18.02）μm vs.(262.63±53.04)μm,P <0.05]、内膜中膜面积比[0.39...     

ALOX15对血管平滑肌细胞铁死亡的影响

目的 探讨花生四烯酸15-脂氧合酶(ALOX15)对血管平滑肌细胞(VSMCs)铁死亡的影响.方法 培养VSMCs,分为对照组(未处理)、空载组(转染Empty Vector)和ALOX15组(转染质粒ALOX15),转染24 h后,应用Western blot方法检测各组VSMCs中ALOX15蛋白表达;培养VSMC...     

兔腹主动脉内支架植入术实验性内膜损伤模型制作方法的探讨

介入治疗是当今治疗冠心病的重要方法之一。预防介入后血管再狭窄是目前研究的热门课题,而实验性动物动脉内膜损伤模型的制作至关重要。国内外虽有用大动物制作动脉内膜损伤模型的报道,但用兔动脉内支架植入术制作内膜损伤模型的方法尚未见报道。为此,我们尝试用兔进行此模型的制作。因兔股动脉血管管径较小,植入动脉支架的实验操作难度较大,我们经过反复多次的探索,不断改进实验方法,解决技术关键点,终于获得了成功,并使模型制备的成功率达95%以上。现将我们制备兔动脉内支架植入模型的第一手资料、体会,简要介绍如下,以期为临床研究介入后…     

成人腹主动脉分支长度和外径的测量

目的掌握腹主动脉及其分支血管的位置、长度和管径,以指导外科临床各种插管操作。方法采用血管X线造影、剥离、血管铸型,分别对32具成人尸体的腹主动脉及其分支血管的位置、长度、外径进行观测和相关统计分析,提供腹主动脉及其部分分支血管的位置、管径及长度的具体数据。结果肝总动脉外径4.72±0.12 mm,胃左动脉外径3.11±0.09 mm,胃右动脉外径1.89±0.05 mm,脾动脉长度66.0±15.0 mm、外径9.74±3.0 mm,胰十二指肠下动脉长度12.9±8.20 mm、外径2.81±0.96 mm,中结肠动脉长度36.8±21.3 mm、外径3.50±1.70 mm,右结肠动脉长度39.7±18.0 mm、外径2.48±0.60 mm等。结论为临床上进行选择性动脉造影、微创术、动脉栓塞疗法和动脉插管化疗提供具体的参考数据。     

CD73对动脉粥样硬化中血管平滑肌细胞的作用

 目的  探讨CD73对血管平滑肌细胞单核细胞趋化蛋白-1(moncyte chemoattractant protein-1,MCP-1)、IL-8和基质金属蛋白酶-1(matrix metalloproteinase-1,MMP-1)表达及迁移能力的影响,并分析其与动脉粥样硬化发生发展的关系。方法  原代培养人脐带动脉平滑肌细胞 (human umbilical artery smooth muscle cells,HUASMC),利用RNA干扰技术抑制细胞中CD73的表达,以未转染组和阴性转染组为对照。实时荧光定量PCR和ELISA方法检测细胞表达及分泌MCP-1和IL-8 的水平。实时荧光定量PCR和Western blot方法检测细胞表达MMP-1的情况。利用划痕实验观察CD73干扰对细胞迁移能力的影响。结果  成功培养原代HUASMC,并且CD73 siRNA转染可显著降低细胞内CD73表达水平。干扰HUASMC的CD73表达后,细胞表达和分泌MCP-1及IL-8的能力升高,细胞内MMP-1的表达升高,而细胞的迁移能力下降。结论  干扰CD73表达可以使HUASMC的MCP-1、IL-8及MMP-1表达升高;干扰CD73表达可降低HUASMC的迁移,提示CD73在动脉粥样硬化的发生发展过程中发挥重要的生物学作用。     

白藜三醇抑制大鼠血管平滑肌细胞增殖的作用机制

目的 探讨植物雌激素白藜三醇（RV）对大鼠血管平滑肌细胞增殖的调控及可能机制.方法 用植块贴壁法体外培养大鼠血管平滑肌细胞,使用Western blotting检测各组雌激素受体α（ERα）、雌激素受体β（ERβ）、P38、P-P38、C-myc蛋白的表达水平.实验分为6组（每组n=6）：正常对照组（NC组）,含10% 胎牛血清（FBS）的DMEM; RV干预组（RV组）,50 μmol/L RV干预24 h; 血管紧张素Ⅱ组（AngⅡ组）,1 μmol/L AngⅡ干预12 h;RV＋ AngⅡ组,1 μmol/L AngⅡ干预12 h,然后加入50 μmol/L RV干预24 h;RV＋ICI182780组,1 μmol/L ICI182780干预2 h,然后加入50 μmol/L RV干预24 h;RV＋ICI182780＋AngⅡ组,1 μmol/L ICI182780干预2 h,然后加入1 μmol/L AngⅡ干预12 h,最后加入50 μmol/L RV干预24 h.结果 各组P38蛋白表达差异无统计学意义（P＞0.05）;ERα、ERβ蛋白的表达：RV组ERα、ERβ蛋白的表达水平较正常对照组增高（P＜0.01）,而RV＋ICI182780组与RV组比较表达降低（P＜0.01）;C-myc蛋白的表达：RV组与NC组比较表达降低（P＜0.01）,AngⅡ组与NC组比较表达增高（P＜0.01）,AngⅡ组与RV组比较表达增高（P＜0.01）,RV＋AngⅡ组与RV组比较表达增高（P＜0.01）,RV＋ICI182780＋AngⅡ组与RV＋AngⅡ组比较表达降低（P＜0.05）;P-P38蛋白的表达：RV组与NC组比较表达降低（P＜0.01）,AngⅡ组与NC组比较表达增高（P＜0.01）,AngⅡ组与RV组比较表达增高（P＜0.01）,RV＋AngⅡ组与RV组比较表达增高（P＜0.01）,RV＋ICI182780＋AngⅡ组与RV＋AngⅡ组比较表达降低（P＜0.01）.结论 白藜三醇可以抑制C-myc的表达,抑制P38的磷酸化,此作用可被ICI182780阻断,说明白藜三醇可能是通过ER进而抑制C-myc的表达和P38的磷酸化发挥抗平滑肌细胞增殖的作用.     

舒芬太尼对大鼠腹主动脉平滑肌细胞钙激活钾电流的影响

目的:观察舒芬太尼对大鼠腹主动脉平滑肌细胞(AASMCs)钙激活钾电流(IKCa)的影响,探讨其扩张血管的作用机制。方法:用酶消化法急性分离AASMCs,采用全细胞膜片钳技术记录IKCa,观察不同浓度(1×10-8、3×10-8、1×10-7mol/L)舒芬太尼对该电流的影响。结果:与不加药对照组相比舒芬太尼能显著增大IKCa幅度(P<0.05或P<0.01),这一作用具有可逆性,并具有浓度依赖性。结论:舒芬太尼能增强AASMCs钙激活钾通道的活动,这一作用可能与临床上观察到的舒芬太尼舒血管效应有关。     

血管平滑肌细胞的培养及鉴定

目的探讨以简便、高效的方法获取血管平滑肌细胞,为相关研究提供实验材料.方法采用改良组织贴块法进行原代培养,胰酶消化传代,综合运用自然纯化、机械刮除、差异贴壁法进行细胞纯化,并应用相差显微镜和SP试剂盒对细胞进行形态学和免疫组化鉴定.结果90%的组织块接种存活,5代的平滑肌细胞纯度达98%以上.镜下培养细胞呈典型的"谷峰状"生长,免疫组化染色显示胞浆内α平滑肌肌动蛋白阳性表达.结论本法简便、可靠,短期内可获大量高纯度、功能良好的血管平滑肌细胞.     

改良组织块贴壁法培养大鼠主动脉平滑肌细胞及鉴定

目的以简捷、高效的方法获取原代和传代的大鼠血管平滑肌细胞(VSMC),为进一步的科学研究提供实验材料。方法采用改良的组织块贴壁法培养原代大鼠VSMC,2.5 g.L-1胰蛋白酶消化传代,并用相差显微镜、电镜、荧光显微镜及激光共聚焦显微镜对细胞进行鉴定。结果95%的组织块接种成活,相差显微镜下细胞呈典型的"峰-谷"状生长,胞体长梭形;电镜下可见粗、细肌丝沿细胞长轴平行排列;荧光显微镜及激光共聚焦显微镜检测α-肌动蛋白可见细胞胞浆内呈阳性显色,细胞核不显色。结论本方法培养VSMC简便、易操作,获得的细胞纯度和成活率较高。     

urantide对大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响

目的:探讨在尾加压素Ⅱ(UⅡ)受体拮抗剂urantide干预下,UⅡ在大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)中的表达,阐明其可能的作用机制.方法:采用贴块法对大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞进行体外培养,实验分为正常对照组(C组)、UⅡ组(M组)、阳性药对照组(Flu组)及urantide干预组(浓度分别为1×10-10、1×10-...     

胰岛素对大鼠血管平滑肌细胞增殖及胶原蛋白合成的影响

目的 观察胰岛素对分离培养的大鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)增殖及胶原蛋白合成的影响.方法 采用大鼠的腹主动脉血管平滑肌细胞分离培养,应用3H-TdR和3H-脯氨酸掺人方法检测胰岛素对大鼠VSMCs干预后,VSMCs内DNA合成以及胶原蛋白合成.结果 胰岛素可促进处于静止状态的大鼠VSMCs DNA及胶原蛋白的合成,并呈现明显的浓度依赖关系,在40 nmol/L的浓度时DNA及胶原蛋白的合成达到高峰,DNA及胶原蛋白分别处于36 h和48 h时合成最为显著.结论 胰岛素可明显促进培养的VSMCs增殖及胶原蛋白的合成.     

The Effectof the Lyso PC-induced Endothelial Cell Conditioned Medi-um on Proliferating Cell Nuclear Antigen Expression of the Calf Tho-racic Aorta Smooth Muscle Cell

Proliferation of aorta smooth muscle cells(ASMCs) and move towards aortas intima layer isthe fundamental pathological change in atheroscle-rosis(AS) .Plasma low density lipoprotein(LDL)and especially the increased density of oxidized(Ox- LDL can speed up the formation of AS[1] . Inthe process of oxidation of LDL,phos-phatidylcholine (PC) is changed into Lysophos-phatidylcholine (Lyso PC) and constitutes the mainphosphatide ingredient of Ox- LDL[2 ] . Owing tothe real expression of a…     

阿托伐他汀对大鼠主动脉平滑肌细胞钙化的作用

目的:研究阿托伐他汀对体外大鼠主动脉平滑肌细胞钙化的作用.方法:采用组织块培养法体外培养大鼠主动脉平滑肌细胞.细胞分为正常组(常规细胞培养液)、钙化组(加入10 mmol/L β-磷酸甘油,0.1μmol/L胰岛素及50 μg/L维生素C钙化培养基)和阿托伐他汀组(按终浓度加入10μmol/L阿托伐他汀,作用24 h后,再加入钙化培养基诱导细胞钙化),连续培养14 d.茜素红S染色观察钙结节计数并测定细胞钙沉积含量.采用四唑盐比色法(MTF)测量细胞增殖.结果:阿托伐他汀组钙结节计数为(4.3±1.9)%,较钙化组(7.4±3.8)%明显减少,统计学差异显著(P＜0.01);同时阿托伐他汀组细胞钙沉积含量为(0.163±0.053)mmol/g,较钙化组(5.745±0.021)mmol/g明显减少,统计学差异显著(P＜0.01).MTT检测钙化组细胞增殖为0.136±0.048,较正常组0.045±0.020明显增加(P＜0.01);阿托伐他汀组细胞增殖为0.038±0.010,较钙化组明显减少(P＜0.01).结论:阿托伐他汀对大鼠主动脉平滑肌细胞体外钙化有抑制作用.