抗Trastuzumab单克隆抗体制备及其双抗体夹心ELISA检测方法的建立

本研究利用曲妥珠单抗（Trastuzumab）4次腹腔免疫 6-8 周龄BALB/c 雌性小鼠.通过淋巴细胞杂交瘤技术、间接ELISA 筛选技术及腹水制备等技术制备并获得抗Trastuzumab单克隆抗体.试验结果表明,通过细胞融合获得了一株能稳定分泌抗Trastuzumab的杂交瘤细胞株A6E8,其制备的腹水单克隆抗体纯化后效价为256000,该抗体属于IgG1亚类,链的类型为k链.利用制备的单克隆抗体（McAb）建立Trastuzumab双抗体夹心ELISA检测方法,试验结果显示,该检测方法特异性良好,不与其他抗体及蛋白发生交叉反应,所建立的Trastuzumab双抗体夹心ELISA 方法最低检测限为1ng/mL.     

抗Trastuzumab单克隆抗体制备及其双抗体夹心ELISA检测方法的建立

本研究利用曲妥珠单抗(Trastuzumab)4次腹腔免疫 6-8 周龄BALB/c 雌性小鼠.通过淋巴细胞杂交瘤技术、间接ELISA 筛选技术及腹水制备等技术制备并获得抗Trastuzumab单克隆抗体.试验结果表明,通过细胞融合获得了一株能稳定分泌抗Trastuzumab的杂交瘤细胞株A6E8,其制备的腹水单克隆抗体纯化后效价为256000,该抗体属于IgG1亚类,链的类型为k链.利用制备的单克隆抗体(McAb)建立Trastuzumab双抗体夹心ELISA检测方法,试验结果显示,该检测方法特异性良好,不与其他抗体及蛋白发生交叉反应,所建立的Trastuzumab双抗体夹心ELISA 方法最低检测限为1ng/mL.     

半夏凝集素蛋白单克隆抗体的制备及双抗夹心ELISA的建立北大核心CSCD

为测定半夏及其炮制品中内源性毒性物质半夏凝集素蛋白(Pinellia ternata lectin, PTL)的含量,该文采用杂交瘤细胞技术制备PTL特异性单克隆抗体,并建立了PTL抗原定量双抗夹心ELISA检测方法,检测条件为:捕获抗体工作浓度为2.5μg·mL-1,检测抗体稀释倍数为1∶450,包被条件为4℃过夜,封闭时间、抗原及检测抗体孵育时间均为90 min,辣根过氧化物酶标记链霉亲和素(streptavidin-horseradish peroxidase, SA-HRP)孵育时间为15 min。该方法对PTL抗原的定量限为0.375 ng·mL-1;线性范围为75.000~4 800.000 pg·mL-1,R~2=0.997 1;加样回收率在90.0%~110.0%;试验内和试验间精密性变异系数分别在2.0%~3.0%、2.0%~8.5%。采用该方法测定3批半夏及其炮制品中PTL含量,测得半夏中PTL质量分数均值为35.42 mg·g^(-1),其炮制品清半夏、法半夏、姜半夏中PTL质量分数均值分别为1.15 mg·g^(-1)、16.53μg·g^(-1)和122.63 ng·g^(-1),表明炮制后PTL含量显著下降。该文建立的PTL抗原定量双抗夹心ELISA检测方法线性较好,反应灵敏,准确度高,为半夏炮制过程中PTL含量检测提供一种简便有效的监测方法。     

苯巴比妥单克隆抗体的研制及竞争ELISA血药浓度监测方法的建立

 目的研制苯巴比妥单克隆抗体(PBmAb),建立PB血药浓度竞争ELISA监测方法。方法将PB改造成对氨基苯巴比妥(pAPB),用重氮化法合成免疫原BSA-pAPB并免疫Balb/c小鼠;细胞融合技术筛选PB mAb杂交瘤细胞株,体内诱生腹水法制备PB mAb;应用PB mAb研制PB血药浓度监测竞争ELISA试剂盒(PB-Kit),并测定其性能。结果BSA-pAPB偶联成功;筛选出4株杂交瘤细胞,应用其中最好的4E6株制备的PB mAb间接ELISA效价为1∶6.4×10⁵,亲和常数(K_a)为2.08×10¹⁰L·moL^-1,50%抑制浓度(IC₅₀)为9.84μg·L^-1,与巴比妥的交叉反应率(CR)为7.9%,与其他化合物无CR;PB-Kit的检测范围为1.0～128μg·L^-1,灵敏度为0.89μg·L^-1,检测限为1μg·L^-1,血清样添加回收率为94.7%,批内和批间变异系数均<10%;PB-Kit与差示分光光度法(DS)的符合率为100%。结论成功研制出高价、敏感、特异的PB mAb,建立了PB血药浓度竞争ELISA监测方法。     

甘草酸多克隆抗体的制备及ELISA方法建立

目的 制备甘草酸多克隆抗体及建立甘草酸酶联免疫吸附测定(ELISA)方法.方法 通过碳化二亚胺法活化甘草酸与载体蛋白BSA联结制备免疫抗原,并免疫Balb/c小鼠,获得了甘草酸多克隆抗体并建立了甘草酸ELISA检测方法.用所建立的甘草酸ELISA检测方法对4个甘草样品进行了检测并用HPLC法加以验证.结果 抗体效价＞3.2×106,与甘草次酸的交叉反应率为24.2％.ELISA检测范围为3～ 120 ng/ml,IC5o为20 ng/ml.添加实验的回收率为103.5％～108％.结论 ELISA方法测定的数据与HPLC方法测定的数据有很好的相关性(R2 =0.9901).     

ELISA、RPR、Trust三种方法检测梅毒螺旋体抗体的观察

目的：观察探讨ELISA、RPR、Trust三种方法检测梅毒螺旋体抗体的效果。方法：分析1711例梅毒检测标本资料,其中阳性标本例数30例,阳性率为1．8％。结果：ELISA两种方法检测梅毒螺旋体抗体阳性率明显高于RPR、TRUST两种方法检测的阳性率,差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论：ELISA对疑似梅毒患者有确证作用,但是其最终确诊应结合临床综合判断,TRUST试验则可作为梅毒患者疗效观察及复发监测试验进行临床应用。     

ELISA法检测梅毒螺旋体抗体前带现象1例分析

目前,国内检测梅毒螺旋体抗体绝大多数采用ELISA方法中的双抗原夹心一步法,而应用此种方法检测梅毒螺旋体抗体时,若样本血清中抗体浓度过高,易造成前带现象(钩状效应)引起假阴性.倘若在临床血液检测中出现此种现象,一旦漏检后果严重.2010年2月本院免疫室检出1例TRUST和TPPA试验均阳性、ELISA 试验阴性的梅毒血清标本.在分析原因时考虑到ELISA双抗原夹心一步法可能存在的前带现象,故进一步对该血清标本进行实验室检测.现将有关分析结果报道如下.     

ELISA法检测抗HCV的室内质控初探

为了提高酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测丙型肝炎抗体（抗－HCV）检测质量，用卫生部临床检验中心发放的临界值血清，作质控图，计算出最佳条件的变异(OCV）和常规条件的变异（RCV）。结果OVC的X＝5．05，S＝0．302，CV＝5．8％，RCV的X＝5．05，S＝0．419，CV＝8．3％。该RCV的CV值接近OCV的CV值。从而作为试剂盒中的阳性对照，阴性对照品以外的第三个对照品，它可以灵敏地反映出试剂盒的检出水平，确保弱阳性反应样本的不漏检。     

抗中性粒细胞胞浆抗体检测的探讨

目的探讨抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)检测的荧光模式及其临床意义。方法采用间接免疫荧光法(IIF)和ELISA检测了453例患者血清中ANCA及其靶抗原。结果 453例患者血清中,IIF检测出ANCA阳性59例:胞质型(cANCA)21例,核周型(pANCA)38例;用ELISA检出ANCA阳性48例。结论同时用IIF和ELISA检测ANCA,可以提高ANCA检出的阳性率,不同的ANCA荧光模式与疾病的种类及病情密切相关,同时对不典型ANCA(aANCA)和pANCA伴ANA等荧光模式的鉴别有所提高,有助于临床对血管炎和其他自身免疫性疾病的诊断。     

针灸联合丁苯酞治疗大面积脑梗死术后早期疗效研究

目的:探讨针灸联合丁苯酞软胶囊对大面积脑梗死术后早期干预的临床疗效.方法:将98例大面积脑梗死术后患者分为观察组和对照组,每组49例,对照组采用常规治疗,观察组在对照组基础上给予针灸联合丁苯酞软胶囊治疗.比较两组临床疗效、神经功能、生活质量及颅内血流动力学.结果:观察组治疗总有效率为87.76％,高于对照组的71.43...     

早期康复护理干预对脑梗塞患者生存质量的影响

目的：探讨护理人员对脑梗塞患者实施早期康复护理干预的成效,为今后脑梗塞患者的护理干预提供指导和依据.方法：对2011年1月-2011年12月在我院神经内科和康复科住院的52例脑梗塞患者分为实验组和对照组,二组患者均给予常规神经内科治疗及护理,观察组实施早期康复护理干预包括康复评估、早期功能康复训练、康复护理教育和指导、饮食指导、出院持续健康教育和随访.分别在住院第2天和干预后3个月进行复查,对患者日常生活能力（ADL）和生理心理健康测评.结果：实验组的ADL水平的改善及生理健康和心理健康都高于对照组.结论：实施早期康复护理干预,降低脑梗塞患者致残率,降低住院成本;还能更有效地提高脑梗塞患者的ADL和生存质量.     

针药结合治疗脑梗死后吞咽障碍临床观察

目的:观察针药结合治疗脑梗死后吞咽障碍的临床疗效。方法:将170例脑梗死后吞咽障碍患者随机分为对照组和观察组各85例,对照组给予系统功能康复锻炼,观察组在对照组治疗基础上加用针灸和中药结合治疗,2个疗程后对比分析两组临床疗效及吸入性肺炎发生率。结果:观察组总有效率97.65%优于对照组总有效率85.88%,差异有显著性统计学意义(P0.01);观察组吸入性肺炎发生率2.35%少于对照组的12.94%,差异有显著性统计学意义(P0.01)。结论:针药结合治疗脑梗死后吞咽障碍以中医理论为基础,全面调节人体机能,局部增强舌咽功能,在明显提高临床疗效的同时减少并发症的发生,值得临床继续探讨及推广应用。     

早期康复对急性脑梗死患者功能恢复的影响

目的：探讨早期康复对急性脑梗死患者动运功能、日常生活活动（ADL）能力恢复的影响。方法：选择脑梗死患者80例,随机分为康复组和对照组,各40例,两组患者采用相同的药物治疗,对照组患者进行普通康复健康教育训练,康复组在患者生命体征稳定48小时后进行康复治疗,采用Bobath和Rood技术训练,采用简式Fugl—Meyer（FMA）运动评分、改良的巴式指数（MBI）进行康复评价,比较两组临床效果。结果：FMA、MBI在治疗前两组患者差异无显著性（P〉0．05）,治疗后较治疗前改善明显（P〈O．01）,但康复组优于对照组（P〈0．05）。结论：早期康复治疗可明显促进运动功能、ADL能力恢复。     

早期康复治疗在老年脑出血患者中的应用效果探讨

目的：探讨早期康复治疗在老年脑出血患者中应用效果。方法：应用随机数字表法将2009年12月～2011年12月在我院神经内科住院治疗的218例精神科长期住院老年病人并发脑出血患者分为观察组和对照组,对照组患者给予神经内科脑出血常规治疗,而观察组患者则在上述治疗的基础上给予早期康复治疗,对对照组和观察组患者进行为期2周的观察,比较其临床疗效和不良反应。结果：经过为期2周的治疗,观察组患者FMA评分及MBI评分明显高于对照组的（P〈O．05）,且所有患者未出现骨折等不良反应。结论：早期康复治疗能够明显改善老年脑出血患者的神经功能缺损程度,减轻其残疾程度,提高患者的生活自理能力。     

不同康复介入治疗时间对中青年脑梗死患者疗效的影响

目的探讨不同康复介入时间对中青年脑梗死患者预后的影响。方法将病情稳定的中青年脑梗死患者90例按康复介入治疗时间不同分为A组（12h内）、B组（72h内）及C组（7d内）;出院时比较3组患者住院时问及肢体运动功能评分（FMA）、日常生活活动能力（ADL）、认知功能成套测定评定（LOTCA）。结果出院时,3组患者FMA均明显降低,ADL和LOTCA均明显升高;A、B2组FMA、ADL、LOTCA明显优于C组（P均〈0．05）,A组FMA、ADL、LOTCA明显优于B组（P〈0．05）。结论中青年脑梗死患者入院后12h内给予介入康复治疗,可明显缩短住院时间,改善运动及认知功能。     

Clinical observation of early acupuncture in treating acute cerebral infarction

目的：观察针刺急性期介入治疗脑梗死的疗效。方法：治疗组49例针刺急性期介入加恢复期康复，对照组28例，只将针刺应用于恢复期。结果：治疗组总有效率95．9％，对照组总有效率78．6％，治疗组疗效明显优于对照组。结论：针刺早期介入治疗急性脑梗死安全可靠，疗效确定，值得推广应用。     

腹腔镜结直肠癌根治术的现状与展望

目的：探讨护理干预在脑卒中吞咽障碍患者康复中的效果。方法：将60例急性脑卒中患者随机分为对照组30例,康复组30例。两组均给予神经内科常规治疗和留置胃管的护理,康复组在此基础上给予患者及照顾者健康教育宣教、基础康复训练和进食功能训练等护理干预。结果：两组患者之间吞咽康复效果差异显著（p〈0．01）。30例康复组患者中28例有效,总有效率为93．32％。对照组中14例有效,总有效率为46．66％。结论：护理干预能明显改善患者吞咽功能,有效防止误咽,减少并发症,从而提高了生活质量。     

血栓通注射液治疗脑梗死56例临床观察

目的 观察血栓通注射液治疗脑梗死的临床疗效。方法 114例脑梗死患者随机分为2组。治疗组56例应用血栓通注射液治疗,对照组58例应用维脑路通注射液治疗。2组均20日为1个疗程。结果 治疗组总有效率91．1％,对照组总有效率75．9％,2组比较有显著性差异（P〈0．05）。与治疗前相比,治疗组治疗后血小板聚集率、纤维蛋白原、全血黏度各指标明显降低（P〈0．05）;与对照组相比,治疗组治疗后纤维蛋白原、全血黏度、血浆黏度各指标有统计学差异（P〈0．05）。结论 血栓通注射液治疗脑梗死疗效显著,使用方便,无明显不良反应。     

中医综合康复疗法对脑梗塞患者的疗效观察

目的：观察中医综合康复疗法对脑梗塞患者的疗效。方法：选取我院从2011年2月～2012年12月所收治的60例脑梗塞患者作为临床研究对象,并将所有患者分为实验组和对照组两组,两组患者均采用现代康复医学疗法进行肢体康复训练,实验组在此基础上采用中医综合康复疗法。观察两组患者治疗前和治疗后的神经功能缺损评分和ADL评分,以确定两组患者的疗效。结果：两组患者通过治疗后其神经功能缺损评分和ADL评分均较治疗前有显著改善,且改善情况实验组显著优于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）。结论：中医综合康复疗法可令脑梗塞患者生活能力提高,减少并发症和康复所需时间等,值得在今后治疗当中推广应用。